目的:探讨肌肽对小鼠卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响。方法:获取小鼠卵丘-卵母细胞复合体（cumulus-oocyte complexes，COC），分别用含10 μmol/L、30 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L肌肽的体外成熟培养液培养18 h，不含肌肽的培养液设为对照组。根据卵母细胞成熟率、卵裂率和囊胚形成率确定作用的最优浓度。通过检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平、总谷胱甘肽（total glutathione，T-GSH）含量、皮质颗粒分布、线粒体分布和线粒体拷贝数进一步验证肌肽的作用。结果:肌肽浓度为100 μmol/L时，卵母细胞成熟率［69.23%（135/195）］、卵裂率［66.06%（72/109）］和囊胚形成率［48.61%（35/72）］最高，与对照组［44.44%（84/189）、38.67%（29/75）、20.69%（6/29）］相比，差异具有统计学意义（ P<0.001、 P<0.001 、P=0.010），故选定100 μmol/L作为肌肽作用的最优浓度。对照组卵母细胞中的ROS和T-GSH水平为100 μmol/L肌肽组的2.04倍和0.64倍，差异具有统计学意义（均 P<0.001）。100 μmol/L肌肽组的皮质颗粒Ⅲ级的比例显著高于对照组（ P<0.001）。对照组卵母细胞的线粒体均匀分布在胞质中，100 μmol/L肌肽组的线粒体聚集在胞质中央区域，且荧光强度高于对照组（ P=0.040）。100 μmol/L肌肽组的线粒体拷贝数是对照组的1.72倍，差异具有统计学意义（ P<0.001）。 结论:肌肽能够有效改善未成熟卵母细胞的氧化应激，促进小鼠卵母细胞的体外成熟和胚胎发育。

体外受精-胚胎移植（ in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）是将精子和卵子在体外受精结合，并在体外进行胚胎培养发育至卵裂期或囊胚期胚胎，再移植到子宫内的过程。通常把受精卵到着床前囊胚期的发育过程称之为“胚胎着床前发育”。一般认为，人的胚胎着床前发育是靠卵母细胞蓄积的蛋白和mRNA发育至8-细胞期，然后开始激活胚胎自体基因进一步发育到囊胚期。由此可见，IVF技术治疗不孕不育的重要环节之一是着床前胚胎体外培养。体外培养液的成分会直接影响着床前胚胎发育和临床治疗结局。其中，乳酸可能在受精卵早期分裂发育过程中起了相对重要作用。本文对受精卵到囊胚期胚胎着床前体外培养液的发展过程和培养液中的乳酸成分对胚胎着床前发育的影响进行概述。同时，对培养液中乳酸成分来源的乳酸盐原料进行简单的介绍。

目的:探讨培养液提前1 d低氧环境（5%氧气浓度）和高氧环境（20%氧气浓度）平衡对体外受精（ in vitro fertilization，IVF）或卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）胚胎发育潜能及妊娠结局的影响。 方法:回顾性队列研究分析了邢台不孕不育专科医院生殖医学中心2018年8月至2019年9月期间行IVF和ICSI患者的881个周期的临床资料。培养液提前1 d配制置于培养箱中平衡，根据培养箱氧气浓度分成低氧平衡组（5%氧气浓度）和高氧平衡组（20%氧气浓度）。比较两种授精方式下不同培养液平衡环境对胚胎发育和妊娠结局的影响。结果:不同授精方式下低氧平衡组和高氧平衡组间的获卵数、受精率、双原核（two pronucleus，2PN）卵裂率及可用胚胎率等差异均无统计学意义（均 P>0.05）。第3日可用胚胎率行IVF患者中组间差异无统计学意义。行ICSI患者中低氧平衡组显著高于高氧平衡组［68.52%（664/969）比64.42%（795/1234）， P=0.043］；不同授精方式下低氧平衡组的囊胚形成率均显著高于高氧平衡组［IVF：44.99%（808/1796）比41.45%（841/2029）， P=0.027；ICSI：42.00%（307/731）比34.95%（317/907）， P=0.004］。低氧平衡组的移植胚胎数目均显著低于高氧平衡组［IVF：（1.87±0.34）枚比（1.96±0.21）枚， P=0.001；ICSI：（1.79±0.41）枚比（1.94±0.23）枚， P=0.002］。种植率、临床妊娠率及活产率组间差异均无统计学意义（均 P>0.05）。logistic回归分析结果显示液体平衡环境与活产率显著相关（ OR=0.238，95% CI=0.139~0.409， P<0.001）。 结论:培养液提前1 d低氧平衡（5%氧气浓度）能够提高IVF和ICSI受精胚胎的发育潜能，显著提高活产率，ICSI效果较IVF明显，但确切结果仍需大样本的随机对照研究进一步证实。

利用滋养外胚层（TE）细胞活检对植入前胚胎进行遗传学筛查已经有20多年的历史，但其在选择整倍体胚胎方面的优势仍然存在争议。近年来，胚胎废弃培养液中游离脱氧核糖核酸（cfDNA）的发现，为获得胚胎的细胞遗传学信息提供了一种潜在的无创替代方法。有研究报道胚胎cfDNA分析与TE、内细胞团（ICM）和整个囊胚（WB）的活检结果高度一致。然而，在cfDNA成为可靠的胚胎基因组信息来源应用于临床之前，仍然面临很多挑战。本文综述了基于培养液中的cfDNA的无创胚胎植入前遗传学检测（niPGT）的产生和现状，并对其局限性和未来前景进行了探讨，为niPGT应用于临床提供参考。

目的:探讨“短时取样法”在非侵入性胚胎植入前遗传学检测（non-invasive preimplantation genetic testing，ni-PGT）中的检测效能。方法:采用前瞻性研究分析方法，对2021年3月至2022年6月期间就诊于湘潭市中心医院生殖中心行胚胎植入前非整倍体遗传学检测（preimplantation genetic testing for aneuploidy，PGT-A）患者的囊胚进行外滋养层细胞（trophectoderm，TE）活检，同时收集囊胚培养液（spent culture medium，SCM）。根据SCM收集方法的不同，分为直接收集法与“短时取样法”，分析比较两种取样方法ni-PGT的检测结果与PGT-A结果的符合率。结果:本研究收集36对夫妇的108个囊胚，均行TE活检及收集SCM，其中直接收集法59例、“短时取样法”49例。直接收集法诊断胚胎倍性的曲线下面积（area under curve，AUC，0.628）小于“短时取样法”（0.785）。结论:“短时取样法”诊断胚胎倍性的效能相较于直接收集法更优。

胚胎植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing，PGT）技术广泛应用于辅助生殖技术（assisted reproductive technology，ART）。PGT可以检测胚胎的单基因遗传病、染色体结构和数目变异，同时能改善胚胎植入效果、临床妊娠结局和活产率。但该技术涉及到的活检过程对胚胎具有一定的侵袭性，同时对设备和人员的要求颇高。而随着从囊胚液和胚胎培养液中发现了可以用于基因分析的游离DNA，无创PGT（noninvasive PGT，NiPGT）成为一种有潜力的检测方式，在辅助生殖领域有广阔的应用前景。现就目前NiPGT技术的应用及研究的有效性和局限性进行阐述，为临床应用提供依据。

胚胎染色体异常是导致妊娠失败的主要原因之一，行胚胎植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing，PGT），选择整倍体胚胎移植，可显著提高胚胎种植率和持续妊娠率。但由于PGT技术对胚胎的侵入性和技术的复杂性，限制了其在临床的广泛应用，开发一种安全、快速、经济的胚胎基因组检测方法将是生殖领域的一大进步。近年来，随着游离基因组DNA在胚胎培养液和囊胚腔液中的发现，许多学者开始探讨胚胎游离DNA在PGT中的适用性，然而目前的研究结果缺乏一致性结论。本文总结了胚胎培养液和囊胚腔液中基因组DNA在PGT领域的研究进展，并讨论其当前的局限性以及应用前景。

目的:研究基于囊胚培养液及囊腔液的无创胚胎染色体筛查技术(NICS)在不同年龄段胚胎植入前遗传学检测(PGT)中的有效性。方法:回顾性分析2019年1月至2021年6月于北京大学深圳医院行胚胎植入前遗传学检测助孕的62对夫妇，共310枚囊胚，行囊胚活检同时收集D3-6囊胚培养液及囊胚腔液行NICS，根据患者年龄分为3组：<35岁组，35~<40岁组，≥40岁组。分别在每组中将NICS结果与胚胎滋养细胞(TE)活检结果进行比较，计算一致性、灵敏度、特异度及阳性预测值、阴性预测值。然后将三个年龄段间NICS与TE的一致性、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别进行统计学分析。结果:三个年龄段间NICS与TE的一致率差异无统计学意义( P>0.05)，但高龄组(35~<40岁、≥40岁组)有上升趋势，特异度、灵敏度、阳性预测值差异均无统计学意义( P>0.05)，≥40岁组阴性预测值与另2组差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:NICS在不同年龄段的检测有效性差异无统计学意义，但在≥35岁的人群中检测有效性有上升趋势。

目的:评估体外成熟(in vitro maturation,IVM)培养液中添加腐胺是否可改善高龄小鼠卵母细胞质量,及腐胺对高龄小鼠卵母细胞中线粒体相关内质网膜(mitochondria-associated endoplasmic reticulum membrane,MAM)的影响.方法:取生发泡期(germinal vesicle,GV)小鼠卵母细胞进行体外成熟培养至减数分裂(meiosis,M)Ⅱ期,分别使用8周龄小鼠卵母细胞作为年轻对照组,40周龄小鼠卵母细胞作为老龄对照组,IVM液中添加0.5 mmol/L腐胺的40周龄小鼠卵母细胞作为老龄实验组.通过检测M Ⅱ期卵母细胞的第一极体排出率、二细胞率、囊胚率、皮质颗粒分布、纺锤体异常率和染色体异常率评估卵母细胞的质量.使用透射电镜观察MⅡ期卵母细胞的MAM,qPCR检测MAM间Ca2+传递的关键分子含量,Ca2+探针测定线粒体、内质网和胞质的Ca2+水平,并通过检测线粒体膜电位、ATP含量和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平评估线粒体功能.结果:腐胺提高了高龄小鼠卵母细胞的第一极体排出率(P＜0.05)和囊胚率(P＜0.05),并显著降低皮质颗粒分布异常率(P＜0.01)、纺锤体异常率(P＜0.01)和染色体异常率(P＜0.05).腐胺可阻止高龄小鼠卵母细胞的MAM间距缩短变化(P＜0.001),降低其间Ca2+传递的关键分子含量(P＜0.05),缓解由MAM间Ca2+快速传递引起的线粒体钙超载(P＜0.001),从而改善线粒体功能(P＜0.05),降低细胞内ROS水平(P＜0.001).结论:体外成熟培养液中添加腐胺可显著改善高龄小鼠卵母细胞质量,且腐胺可通过影响MAM间Ca2+传递缓解线粒体钙超载,改善线粒体功能.

胚胎植入前遗传学检测(PGT)是辅助生殖与遗传学检测技术相结合的一种胚胎诊断检测技术,在移植前筛查胚胎染色体以排除染色体异常的胚胎.但是由于目前该技术复杂昂贵,且有创操作可能存在安全风险,所以该技术在临床的应用受到一定限制.因此,人们开始探索利用囊胚腔液和胚胎培养液中发现的游离DNA进行无创PGT.作为更加安全和便捷的基因检测技术,目前无创PGT已经在胚胎染色体检测等方面取得了一定进展,但现有的研究结果之间差异较大,临床应用的有效性仍存在争议.本文就游离DNA的来源及产生机制、无创PGT的临床研究现状进行综述,为无创PGT应用于临床实践提供参考.