目的 基于指纹图谱和多指标定量测定对鲜地黄中地黄汁、地黄片、地黄渣的化学成分进行分析与比较,阐明鲜地黄药材不同加工方法指标性成分的分布规律.方法 采用HPLC法建立10批地黄汁、地黄片和地黄渣指纹图谱,相似度分析结合化学模式识别法进行分析.采用HPLC法,HPLC-蒸发光散射检测(ELSD)法分别测定地黄样品中苷类、糖类成分含量.结果 建立的HPLC指纹图谱共标定14个共有峰,聚类分析将样品分为3类;经主成分分析,主成分1～3是影响鲜地黄样品质量的主要因子;采用正交偏最小二乘-判别法标记了鲜地黄样品中8个差异性成分.苷类、糖类成分总含量测定均表明地黄汁＞地黄片＞地黄渣,苷类成分中除地黄苷A外,地黄汁中梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷D、益母草苷含量都高于地黄片和地黄渣,质量分数为7.43％～7.78％、0.10％～0.11％、0.59％～0.66％、0.69％～0.72％;糖类成分除棉子糖外,地黄汁中果糖、葡萄糖、蔗糖、水苏糖的含量都高于地黄片和地黄渣,质量分数为2.40％～2.55％、1.84％～2.02％、12.33％～12.77％、33.03％～33.45％.结论 通过指纹图谱和含量测定方法,明确了鲜地黄不同加工方式化学成分变化,为临床上地黄汁、地黄片的使用提供参考,并为地黄渣的回收利用提供科学依据.

百合地黄汤出自《金匮要略》,是医圣仲景诊治百合病的常用方剂.何庆勇教授临床运用百合地黄汤的关键有四:一是经方百合的入药品种应为食用百合,而不用卷丹;二是要重视百合地黄汤的主证,口干或口苦,小便黄赤,脉数;三是要注重古方原剂量,通过实测,原文"百合七枚"约(724.9±22.3)g鲜百合,"生地黄汁一升"约(418.8±11.3)g鲜地黄,故临床需重剂百合、地黄,何庆勇教授临证常用百合30～80 g、地黄30～80 g;四是应注重煎服法,煎药前须先浸泡百合,并去白沫.并举百合地黄汤医案一则,以资佐证.

目的 基于网络药理学整合体内实验对比四物汤中4种单味药(川芎Chuanxiong Rhizoma、白芍Paeoniae Radix Alba、当归 Angelicae Sinensis Radix、熟地黄 Rehmanniae Radix Praeparata)治疗胆汁淤积性肝损伤(cholestatic liver injury,CLI)的药效差异,并探讨各单味药的作用机制.方法 利用TCMSP数据库获取川芎、白芍、当归、熟地黄的主要活性成分及作用靶点,通过GeneCards数据库获取CLI靶点,使用Cyctoscape 3.10.1软件分析并构建"单味药-活性成分-作用靶点"网络,借助在线网站获取各单味药与CLI之间的交集靶点,并绘制韦恩图.将靶点基因导入DAVID数据库进行基因富集分析.构建胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)动物模型,给予各单味药水提物后,检测血清肝功能相关生化指标,并对肝组织进行病理染色对比药效作用.同时结合qRT-PCR检测CLI相关靶点的基因表达.结果 网络药理学结果显示,四物汤中川芎、白芍、当归、熟地黄与CLI之间均存在3个交集靶点[核受体亚家族3C组成员2(nuclear receptor subfamily 3 group C member 2,Nr3c2)、类视黄醇 X 受体(retinoid X receptor alpha,Rxra)、前列腺素内过氧化物合成酶 2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,Ptgs2)].通过体内验证实验表明白芍、川芎、当归、熟地黄水提物均可显著改善CLI以及相关的肝纤维化情况,且均能下调上述3个共同靶点表达(P＜0.05、0.01、0.001).此外,白芍、川芎的体内抗CLI疗效优于当归、熟地黄提取物.结果 还显示白芍与CLI有18个、川芎与CLI有4个与其他单味药不同的独立交集靶点,而当归、熟地黄与CLI之间不存在独立的交集靶点.进一步生信分析发现,白芍作用靶点基因富集于血管生成、肿瘤坏死因子(tumornecrosis factor,TNF)信号通路;川芎作用靶点富集于血管内皮、血管生成、血管生成因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路.进一步验证结果显示白芍通过下调肝脏中血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule 1,Vcaml)、Tnf、有丝分裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase8,Mapk8)、AKT丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT serine/threonine kinase 1,Aktl)表达改善CLI,川芎通过下调肝脏激酶插入结构域受体(kinase insert domain receptor,Kdr)、Mapk14表达改善CLI.结论 四物汤中川芎、白芍、当归、熟地黄均能不同程度地改善胆汁淤积引起的肝损伤及纤维化,它们通过靶向Nr3c2、Rxra、Ptgs2共同改善CLI.白芍、川芎改善CLI疗效优于当归、熟地黄,前者可基于TNF信号通路而后者则是通过调控VEGF信号通路分别特异性改善CLI.

目的 测定仲景古方百合地黄汤水煎液成分,并对鲜百合和鲜地黄的水煎液所含成分进行对比,为优化百合地黄汤提取工艺提供初步依据.方法 以液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术为基础,定性分析百合地黄汤水煎液所含化学成分并进行归属及聚类分析,同时对百合水煎液、地黄汁所含化学成分进行比对.结果 百合水煎液、鲜地黄汁中分别检测到35种、36种化学成分;古法煎煮后,在百合地黄汤水煎液中发现69种化学成分,其中有机酸类16种、糖类及苷类共6种、氨基酸及多肽类共8种、生物碱类3种;其中有8种物质为原百合水煎液与地黄汁共有,较两种原煎液新产生36种物质,且抗抑郁有效成分毛蕊花糖苷仅存在于共煎液中.结论 古法百合地黄汤共煎液中抗抑郁有效成分比单煎液丰富,有助于抗抑郁有效成分的提取,LC-MS技术适用于复方提取液的含量测定,通过此研究,构建了基于质谱技术的中药复方化学物质组成表征的指纹图谱.

目的:探索百合地黄汤(Baihe Dihuang decoction,BDD)物质基准制备工艺,建立BDD物质基准指纹图谱并进行质量评价,阐明BDD主要成分在药材-煎煮液-物质基准的量值传递规律.方法:优化百合物质基准制备工艺,从而确立BDD物质基准制备方法;采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法建立BDD物质基准指纹图谱;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统标定并指认共有峰和色谱峰;基于多元统计分析(聚类分析、偏最小二乘法判别分析)方法寻找引起不同批次BDD物质基准质量差异的主要化学成分,并进行含量测定;根据主要化学成分转移率研究BDD物质基准的量值传递规律.结果:(1)BDD物质基准制备方法为新鲜百合280 g浸泡10h后去除浮沫,加水400 mL,全程不加盖文武火(武火煎煮至沸腾转文火保持微沸)煎至200 mL,后加200 mL鲜地黄汁煎至300 mL,过100 目滤网得BDD煎煮液,浓缩(60℃水浴加热)后冷冻干燥.(2)建立了15 批BDD物质基准HPLC指纹图谱(S1～S15),相似度均大于0.9,共标定21 个共有峰,指认出4 个色谱峰(8 号峰梓醇、13 号峰地黄苷D、17 号峰王百合苷A、20 号峰王百合苷B).(3)多元统计分析结果显示,S1、S2、S3、S7、S8、S9、S10、S14 和S15 聚为一类,其他批次聚为一类,且8 号峰梓醇、17 号峰王百合苷A对聚类判别的影响较大.(4)15 批BDD物质基准中,梓醇、地黄苷 D、王百合苷 A的含量范围分别为(21.77～46.41)mg·g-1、(1.8～3.66)mg·g-1、(0.34～1.09)mg·g-1.(5)15 批BDD物质基准中,梓醇、地黄苷D、王百合苷A的煎煮液-物质基准转移率范围分别为66.23%～97.64%、41.19%～89.06%、71.91%～94.01%.结论:本研究优化了BDD物质基准制备工艺,建立BDD物质基准HPLC指纹图谱,找到造成不同批次差异的主要化学成分,发现BDD物质基准的主要化学成分可在药材-煎煮液-物质基准中稳定传递,为研发BDD新型制剂奠定了坚实基础.

目的 研究百合地黄汤处方剂量.方法 检索上海中医药大学图书馆馆藏资料、读秀期刊、《中华医典》、CNKI、维普、万方数据库中关于百合地黄汤的文献,按照一定的纳入、排除规则进行筛选,统计分析药材基原、用法、剂量范围、配伍比例等信息.测定鲜百合质量、鲜地黄出汁率、药材含水量等参数,通过地黄出汁率折算出其剂量,并以配伍比例和药材含水量来推算百合剂量.将所得结果与考证出的剂量范围进行比较.结果 古代文献中以"百合七枚,生地黄汁一升"为主流,百合、地黄大多以鲜品入药;现代文献中百合、地黄大多以干品投料,两者配伍比例为 1 ∶ 1,"生地黄汁一升"即为 400 g鲜地黄榨汁 200 mL,"百合七枚"折合鲜百合剂量为 240 g.在工业化生产过程中,建议以 100 g百合(干品)代替.结论 本研究将文献考证结论与药材实测数据相结合来对百合地黄汤处方剂量进行探索,符合文献分析结果及药材实测范围.

目的 探究六味地黄方调节肠道菌群和胆汁酸代谢改善小鼠绝经后胆固醇代谢异常及可能的作用机制.方法 利用双侧卵巢摘除的APOE--小鼠给予高脂饮食,复制绝经后胆固醇代谢异常模型,并给予0.13 mg·kg-1 的雌二醇和9.0 g·kg-1的六味地黄方进行治疗.90 d治疗结束后,生化法检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)和肝脏、粪便中TC水平;ELISA法检测小鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素 6(IL-6)、白介素 1β(IL-1β)水平;肝脏HE和油红O染色观察小鼠肝脏脂质损伤;生化法检测小鼠肝脏、血清、胆囊和粪便中总胆汁酸(TBA)含量;液相质谱联用技术(UPLC-MS)对小鼠肝脏和粪便胆汁酸组分定量分析;16S rRNA测序分析小鼠结肠菌群,并分析粪便胆汁酸组分和肠道菌群之间的相关性.结果 六味地黄方可以降低模型小鼠血清 TC、TG、LDL-c以及TNF-α、IL-1β、IL-6 水平(P＜0.01),提高HDL-c水平(P＜0.01);并减少肝脏脂质堆积,减轻肝脏损伤;还可降低血清、胆囊和肝脏TBA水平(P＜0.01),增加粪便中TBA排出(P＜0.01);减少粪便TαMCA、TβMCA、TCA、TCDCA、TDCA和CA结合型胆汁酸的含量(P＜0.05,P＜0.01),增加次级胆汁酸LCA的含量(P＜0.01).六味地黄方恢复了模型小鼠结肠菌群的平衡,上调粪异杆菌属(Allobaculum)的相对丰度(P＜0.01),并下调颤螺菌属(Oscillospira)和普氏菌(Prevotella)的相对丰度(P＜0.05).结论 六味地黄方通过重塑结肠菌群的结构恢复菌群的平衡,增加粪便中次级胆汁酸的排出以降低血清和肝脏中胆固醇沉积,从而改善模型小鼠胆固醇代谢异常.

三痹汤来源于《妇人大全良方》卷之三,其基本组成:续断、杜仲(去皮,切,姜汁炒)、防风、桂心、细辛、人参、茯苓、当归、白芍、甘草各一两,秦艽、生地黄、川芎、独活各半两,黄芪、牛膝各一两.用法:右(咬)咀为末,每服五钱,水二盏,姜三片,枣一枚,煎至一盏,去滓热服,无时候,但腹稍空服.主治:血气凝滞,手足拘挛,风痹、气痹等疾.夫人风痹者,由风、寒、湿三气合而为痹.风多者为风痹,其状肌肤尽痛.诸阳之经起于手足而循行于身体,风寒之气客于肌肤,始为痹.复伤阳经,随其虚处而停滞,与血气相搏,血气则行迟缓,使机关驰纵,故风痹而复手足不遂也.

笔者在临床上常以温阳补气法治疗沉疴痼疾,每每收到良好疗效,结果报道如下.1 窦性心动过缓刘某,男,36岁,因心悸胸闷半年于2016年7月10日初诊.诊见:心悸胸闷常于活动后加重,伴头昏、乏力、时有耳鸣,面色不华,口唇淡青,舌质淡、苔薄白,脉沉迟细缓无力.血压(BP)100/65 mmHg,心率54次/分,心电图示:窦性心动过缓.中医诊断:心悸,证属:心肾气虚,胸阳不振.治法:温阳补气,振奋心阳,养心安神.处方:鹿角霜黄芪五参桂枝汤.附子(先煨2 h)、太子参、甘松、威灵仙各30 g,黄芪45 g,鹿角霜、五参(党参、明党参、红参、南沙参、玉竹)、桂枝、菟丝子、丹参各20g,肉桂10g,当归、熟地黄、制首乌、香附、白芍各12g,巴戟天、女贞子、淫羊藿、茯神、酸枣仁各15 g.4剂,文火缓煎,煮开后继续熬20 min,倒出全部药汁.

目的:探讨砂仁制地黄的最佳炮制工艺.方法:采用肾阴虚兼湿困脾胃模型来评价砂仁制地黄的滋阴(增效)和祛腻作用,大鼠随机分成空白组,模型组,阳性组,地黄组,1％砂仁制地黄组,2％砂仁制地黄组,5％砂仁制地黄组和10％砂仁制地黄组,给药体积均为10 mL·kg-1,筛选砂仁制地黄的最佳配比;以毛蕊花糖苷、单糖(D-果糖和D-无水葡萄糖)质量分数为评价指标,结合色黑如漆和中央发空的感官评价指标,通过单因素试验考察黄酒类型、黄酒用量、蒸制温度、蒸制时间、砂仁粉粒度和砂仁粉加入方式对砂仁制地黄炮制工艺的影响.结果:砂仁制地黄组与模型组相比,大鼠血清皮质醇、雌二醇、甲状腺素、三碘甲腺原氨酸、肌酐、甘油三酯、总胆固醇和胃动素降低,睾酮、免疫球蛋白G和胃泌素升高,且2％砂仁制地黄组效果最佳.砂仁制地黄的最佳炮制工艺为每100 kg生地黄用黄酒30 ～ 50 kg,砂仁粉蒸制前后各用1 kg,黄酒、砂仁粉拌匀,润透,110 ～120℃蒸约4h,至内外色黑如漆为度,取出,低温干燥至约八成千时,切片,干燥,用砂仁粉拌匀,即可.结论:优选的炮制工艺稳定可行,为阐释砂仁制地黄的增效祛腻机制提供实验依据.