目的 基于铁死亡通路探究大叶茜草素抑制肝细胞癌的作用机制.方法 体外培养肝癌HepG2细胞,根据IC50分为对照组、大叶茜草素低剂量组(10 μmol/L)、大叶茜草素中剂量组(20 μmol/L)和大叶茜草素高剂量组(40 μmol/L),CCK-8法检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞毒性,克隆形成实验观察细胞克隆能力,检测细胞谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、超氧化物、脂质过氧化物含量及线粒体膜电位(MMP),Western blot检测细胞铁死亡抑制蛋白1(FSP1)、GTP环化水解酶1(GCH1)、二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)4蛋白表达,RT-qPCR检测FSP1、DHODH、GCH1、GPX4 mRNA表达.在过表达和沉默GPX4条件下观察大叶茜草素对HepG2细胞活力和GSH、MDA含量的影响.结果 中、高剂量大叶茜草素可减少HepG2细胞克隆形成数目,降低细胞GSH含量和SOD活性,升高MDA、超氧化物、脂质过氧化物和ROS含量,降低MMP(P<0.001).大叶茜草素干预对HepG2细胞FSP1、GCH1、DHODH蛋白和mRNA表达无显著影响,可降低GPX4蛋白和mRNA表达(P<0.001),过表达和沉默实验验证GPX4是大叶茜草素调控铁死亡的核心靶点.结论 大叶茜草素主要通过调节GPX4介导的铁死亡发挥抗肝细胞癌作用.

目的:研究桃金娘Rhodomyrtus tomentosa(Ait.)Hassk.根的化学成分.方法:利用硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶和高效液相制备等色谱技术进行分离纯化,根据波谱数据分析鉴定化合物结构.结果:从桃金娘根中分离得到 16 个化合物,分别鉴定为:大叶茜草素(1)、2-甲基-1-羟基-9,10-蒽醌(2)、正十七烷(3)、β-谷甾醇(4)、正十六烷酸(5)、齐墩果酸(6)、1,3-二羟基-9,10-蒽醌(7)、3,3′,4′-三甲基鞣花酸(8)、脱氢山楂酸(9)、2-甲基-1,3,6-三羟基-9,10-蒽醌(10)、3,4′-二甲基鞣花酸(11)、2α,3β,23-三羟基齐墩果烷-11,13(18)-二烯-28-酸(12)、阿江榄仁酸(13)、3′-O-methyl-3,4-O,O-metheneellagic acid-4′-O-β-D-glucopyranoside(14)、3,3′,4′-三甲基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、terminolic acid(16).结论:其中,化合物 1～3、7、9～11、14、15 为首次从该植物中分离得到.

目的 建立茜草多指标成分定量联合化学计量学评价不同产地茜草的质量.方法 采用高效液相色谱法测定 8 省区 18 批茜草中新橙皮苷、山柰酚、茜草素、异茜草素、羟基茜草素、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌、大叶茜草素、去氢-α-拉杷醌、β-谷甾醇和异落叶松脂素,并采用主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析、灰色关联度分析对测定结果进行评价.结果 相同产区的茜草,质量较接近;共找到 4 个差异性标志成分,其影响显著性排序为大叶茜草素＞茜草素＞1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌＞羟基茜草素;陕西、河南和安徽所产的茜草整体质量较好.结论 方法便捷、准确,易于推广,可以更全面、更系统地评价茜草的质量.

目的:观察大叶茜草素(mollugin)对大鼠肝星状细胞系CFSC-2G活化和胶原合成的影响并探讨其分子机制.方法:小剂量(10μmol/L)过氧化氢(H2O2)诱导CFSC-2G细胞30 min后,再加入不同浓度(0、20、40、60和120μmol/L)的mollugin处理.MTT法检测细胞活力,real-time PCR和Western blot法分别检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、核因子κB(NF-κB)p65、Bcl-2、Bcl-xL、Bax以及肝星状细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白表达,并用Western blot法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的磷酸化水平.结果:低剂量H2 O2可以诱导CFSC-2G细胞活化,mollugin明显促进p38 MAPK磷酸化,上调Nrf2和HO-1的mRNA和蛋白表达,下调NF-κB p65、Bcl-2和Bcl-xL的mRNA和蛋白表达,抑制H2 O2诱导活化的CFSC-2G细胞活力和胶原合成(P<0.05).结论:Mollugin可能通过上调Nrf2和HO-1并下调NF-κB p65和Bcl-2表达,抑制CFSC-2G细胞活化和胶原合成.

目的 研究茜草素对自发性高血压大鼠(SHR)肾叶间动脉平滑肌细胞BKCa通道功能和表达的变化.方法 应用尾动脉测压仪、压力机动图技术、膜片钳技术和Western Blot技术分别观察茜草素干预前后SHR收缩压,肾叶间动脉血管直径,BKCa通道电流和beta亚基表达的变化.结果 (1)茜草素干预后,SHR收缩压较干预前降低(P＜ 0.01);(2) ibTX抑制茜草素对SHR肾叶间动脉血管段的舒张作用(P＜0.01);(3)茜草素增强SHR肾叶间动脉平滑肌细胞BKCa通道介导的电流(P＜0.05);(4)茜草素干预第21天,BKCa通道beta亚基表达上调(P＜0.01).结论 茜草素通过调节BKCa通道beta亚基功能,引起平滑肌细胞超极化,肾叶间动脉舒张和SHR收缩压降低.

目的 研究倒吊笔根的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备高效液相色谱及重结晶等方法进行分离纯化,通过波谱数据和理化性质进行结构解析、鉴定.MTT法检测化合物体外抗肿瘤活性.结果 从倒吊笔根75%乙醇提取物乙酸乙酯部位中分离鉴定了12个化合物,分别鉴定为:东莨菪亭(1)、香豆素(2)、黄花菜木质素B (3)、大叶茜草素(4)、对羟基苯甲酸(5)、香草酸(6)、香草醛(7)、4-羟甲基-5-羟基-2H-吡喃-2-酮(8)、β-谷甾醇(9)、β-胡萝卜苷(10)、熊果酸(11)和麦迪奥脂素(12).化合物4对人肝癌细胞株HepG2的生长有一定抑制作用,IC50值为8.0 mg/L.化合物11对人乳癌细胞株MCF-7、人肝癌细胞株HepG2的增殖有一定抑制作用,IC50值分别为14.7和18.2 mg/L.结论 化合物1~5、8和12均为首次从该属植物中分离得到,化合物6和10为首次从该植物中分离得到.化合物4和11具有体外抑制肿瘤细胞增殖活性.

目的:基于Box-Behnken响应面法优化茜草中大叶茜草素的提取工艺.方法:以大叶茜草素的含量为响应值,以提取时间、乙醇体积分数、料液比、提取次数为考察因素,进行茜草中大叶茜草素的提取工艺优化试验.结果:经响应面分析,得最佳提取工艺为乙醇体积分数82％,提取时间97 min,料液比1∶10,提取2次,在此条件下提取大叶茜草素含量可达2.39％,接近预测值2.41％.结论:该优化工艺简便稳定,重复性好,可用于茜草中大叶茜草素的提取.

综合采用多种色谱分离技术对钩毛茜草Rubia oncotricha根及根茎的甲醇提取物进行化学成分研究,结合NMR、MS等波谱技术,共分离鉴定了14个化合物,分别为rubiprasin D(1)、rubiprasin B (2)、rubiprasin C (3)、齐墩果酸(oleanolic acid,4)、methyl-5-hydroxy-dinaphtho[1,2-2'3']furan-7,12-dione-6-carboxylate (5)、rubioncolin C(6)、大叶茜草素(mollugin,7)、呋喃大叶茜草素(furomollugin,8)、3-氨基-2-甲氧羰基-1,4-萘醌(3-amino-2-methoxycarbonyl-1,4-naphthoquinone,9)、1-羟基-2-甲基蒽醌(1-hydroxy-2-methyl-9,10-anthraquinone,10)、2-羟基-6-甲基蒽醌(2-hydroxy-6-methyl-9,10-anthraquinone,11)、1,4-二羟基-2-羟甲基蒽醌(1,4-dihydroxy-2-hydroxymethyl-9,10-anthraquinone,12)、2-羟基-1-甲氧基蒽醌(2-hydroxy-1-methoxy-9,10-anthraqui-none,13)、1-羟基-2-甲氧基-6-甲基蒽醌(1-hydroxy-2-methoxy-6-methyl-9,10-anthraquinone,14).化合物类型涉及萜类和醌类,其中化合物1为新的齐墩果烷型三萜类化合物,化合物2～5,9,11～13为首次从该植物中分离得到.对所有化合物进行细胞毒和杀线虫活性筛选,结果显示化合物4,6,11,12对人非小细胞肺癌细胞(A549),人胃癌细胞株(SGC-7901)和人宫颈癌细胞(HeLa)具有一定的生长抑制作用,以6活性最强,其IC50分别为19.42,2.74,8.07 μmol· L-1.

茜草科Rubiaceae钩藤属Uncaria植物全世界有34种, 我国11种、1变型, 《中国药典》收载钩藤U. rhynchophylla、大叶钩藤U. macrophylla、毛钩藤U. hirsuta、华钩藤U. sinensis和无柄果钩藤U. sessilifructus作为中药钩藤的基原植物.钩藤属植物特征性成分为吲哚生物碱, 此外还含有三萜、木脂素、黄酮等.为了进一步明确中药钩藤的活性物质基础以及不同部位化学成分差异, 该文对以上5种钩藤基原植物中的吲哚生物碱研究进展进行综述.

目的:研究和比较茜草根、茎、叶、花及果的抗氧化、抗炎、抗肿瘤活性,明确茜草发挥特定药效的部位,为茜草资源合理应用提供科学依据.方法:采用HPLC法建立茜草根、茎、叶、花、果的指纹图谱;采用二苯代苦味酰基自由基(DPPH)、2,2-连氮(3-乙基苯并噻唑啉-6磺酸)二氨盐自由基(ABTS)法,以半数清除浓度(EC50)评价茜草各部位醇提物抗氧化活性;采用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞建立炎症模型,以NO、IL-6炎性因子评价茜草各部位抗炎活性;采用噻唑蓝法(MTT),以抑制率评价茜草各部位醇提物对人肝癌HepG2细胞增殖的影响.结果:茜草各部位HPLC指纹图谱在色谱峰数量及相对峰面积方面存在较大差异,通过化学对照品比对出12种化学成分;茜草根醇提物对肝肿瘤细胞的抑制作用最显著,抗炎效果最好,茜草花醇提物抗氧化活性最高.结论:茜草不同部位化学成分群存在差异,差异的化学成分群是茜草不同部位抗氧化、抗炎、抗肿瘤药效显著差异的重要因素,本实验为茜草各药用部位的进一步深入研究及临床合理应用提供参考.