目的 观察中等强度有氧运动结合重复经颅磁刺激治疗阿尔茨海默病的疗效,并探讨其对患者认知功能及miR-129-5p的影响.方法 采用回顾性队列研究方法收集2021年1月至2023年12月在漯河市中心医院康复医学科及漯河医学高等专科学校第三附属医院康复治疗区就诊治疗的104例阿尔茨海默病患者的临床资料,依据不同治疗方案分为观察组和对照组各52例.观察组患者予以中等强度有氧运动联合重复经颅磁刺激治疗,对照组患者予以中等强度有氧运动结合重复经颅伪刺激治疗,两组患者均连续治疗3个月.采用简易精神状态检查量表(MMSE)评估疗效;采用阿尔茨海默病评定量表-认知分量表(ADAS-cog)和MMSE评估认知功能;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清炎症因子水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-129-5p表达水平;采用生活质量综合评定问卷(GQoL-74)和阿尔茨海默病生活质量量表(QoL-AD)评估生活质量;采用神经精神科问卷(NPI)评估精神状态.结果 治疗3个月后,观察组患者的总有效率为94.23%,明显高于对照组的80.77%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗3个月后,观察组患者的ADAS-cog及NPI评分分别为(22.40±2.20)分、(110.33±12.64)分,明显低于对照组的(26.77±2.59)分、(121.15±11.55)分,MMSE、GQoL-74及QoL-AD评分分别为(19.71±3.53)分、(72.33±9.08)分、(41.27±3.75)分,明显高于对照组的(18.15±2.40)分、(68.42±8.30)分、(38.13±4.12)分,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗3个月后,观察组患者的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)及白细胞介素-10(IL-10)水平分别为(10.66±1.19)ng/L、(9.05±1.07)mg/L、(8.49±1.17)ng/L,明显低于对照组的(13.30±1.38)ng/L、(11.12±1.20)mg/L、(10.35±1.31)ng/L,miR-129-5p为1.50±0.23,明显高于对照组的1.40±0.20,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 中等强度有氧运动结合重复经颅磁刺激治疗可有效改善阿尔茨海默病患者认知功能,减少炎症反应及提高miR-129-5p水平,有助于改善患者精神状况并提高生活质量,临床应用效果好.

目的 探讨子宫腺肌病(AM)患者手术前后miR-143-5p、miR-145-5p和双特异性磷酸酶 6(dualspecificity phosphatases 6,DUSP6)蛋白的表达水平变化,并分析各指标之间的相关性.方法 收集锦州医科大学附属第三医院因AM切除全子宫+双侧输卵管切除(或双附件切除)患者手术前后及同期年龄、性别匹配的体检健康者(健康人对照组)全血标本各 45 例,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组miR-143-5p、miR-145-5p的表达水平,并采用ROC曲线评估各指标单独及联合检测筛查AM的临床效能.经miRTarBase、TargetScan、TargetMiner及miRDB在线软件预测miR-143-5p、miR-145-5p靶基因,采用ELISA法检测靶蛋白DUSP6 的表达水平,并采用Pearson分析法对miR-143-5p、miR-145-5p与DUSP6 之间的相关性进行分析.结果 术前组miR-143-5p和miR-145-5p的表达水平均显著低于健康人对照组,差异有统计学意义(P<0.01);术后组miR-143-5p与miR-145-5p的表达水平均显著高于术前组(P<0.01),且术后组miR-143-5p的表达水平显著低于健康人对照组(P<0.01).术后组DUSP6 蛋白的表达水平显著低于术前组(P<0.01).术前和术后组miR-145-5p和miR-143-5p与DUSP6 蛋白的表达水平均呈负相关(术前miR-145-5pr=-0.784,P=0.004;术后miR-145-5pr=-0.689,P=0.024,术前miR-143-5pr=-0.632,P=0.003 2;术后miR-143-5p r=-0.601,P=0.022).miR-143-5p、miR-145-5p、DUSP6 三者联合检测筛查AM的AUCROC为 0.936,敏感性为 0.863,特异性为0.978,均显著高于三者单项指标检测.miR-145-5p 和 miR-143-5p 靶基因分别为 DUSP6 和 MAPK13.结论 miR-143-5p、miR-145-5p可通过直接和间接作用于靶基因DUSP6,参与AM的进展,miR-143-5p、miR-145-5p与DUSP6 三者联合可作为筛查AM的潜在分子标志物.

目的 探讨基于高通量测序的表达差异microRNA(miRNA)在左心室心肌肥厚(left ventricular hypertrophy,LVH)患者中的表达水平及临床意义,并揭示可能的调控作用机制.方法 分别在 4 例 LVH患者和 4 例健康志愿者血浆样本中进行miRNA测序,并在 25 例健康志愿者和 35 例LVH患者血浆样本中进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证.通过预测差异性miRNA的靶基因、基因本体富集分析、京都基因与基因组百科全书信号通路分析、构建蛋白质-蛋白质相互作用网络等生物信息学分别进行分析,并通过ROC曲线下面积(AUCROC)评估miRNA对LVH的诊断价值.结果 共鉴定出 945 个差异表达的miRNA,其中 1 个显著上调,9 个显著下调.经 qRT-PCR 验证,hsa-miR-942-5p 和 hsa-miR-184 的表达水平显著下调;hsa-miR-942-5p的AUCROC为0.694 6,hsa-miR-184 的AUCROC为0.880 4.生物信息学分析显示,靶基因主要富集在细胞衰老、鞘脂代谢、TGF-β信号通路、p53、糖尿病代谢相关通路.结论 LVH患者血浆样本中hsa-miR-942-5p和hsa-miR-184 的表达水平显著降低,提示其具有良好的诊断潜力.

目的:本研究通过分析circMFSD12在结直肠癌中的表达及对肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭，以及对5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的影响，从而分析其作为潜在治疗靶点的可行性，以期为结直肠癌治疗提供新思路。方法:检索公开数据库中有关结直肠癌组织、正常结肠组织和正常肠组织的人源RNA数据集（GSE172229，GSE166973，GSE147597），并筛选在结直肠癌中表达下调的circRNA，从而通过实时定量PCR（qRT-PCR）分析circMFSD12在结直肠癌细胞株中的表达水平。基于构建过表达circMFSD12的质粒并转染结直肠癌细胞株LoVo和SW620，通过EdU染色、划痕实验和Transwell实验评估其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。同时，通过CCK8实验和流式细胞术实验检测其对5-FU敏感性的影响，从而进一步通过生物信息学分析和miRNA pull down实验研究其潜在的分子机制。结果:circMFSD12在结直肠癌组织（筛选标准：logFC<-0.5）和细胞（circMFSD12表达量在人正常结肠上皮细胞NCM460为1.00±0.14，在结直肠癌细胞中分别为HCT116：0.72±0.08、LoVo：0.42±0.10、SW480：0.72±0.04和SW620：0.48±0.07）中均表达下调（P<0.05）。体外实验结果显示，过表达circMFSD12显著抑制结直肠癌细胞的增殖（LoVo：52%±5.3% vs. 22%±3.7%，P<0.001；SW620：56%±10% vs. 26%±4.0%，P<0.001）、迁移（LoVo：75%±5.5% vs. 34%±5.7%，P<0.001；SW620：54%±7.5% vs. 22%±5.6%，P<0.001）和侵袭（LoVo：104±18.6 vs. 41.7±10.2，P<0.01；SW620：86.7±16.5 vs. 34.7±4.9，P<0.01），并增强了细胞（LoVo：Control：2.5±0.7 vs. 7.4±1.0，P<0.01，5-FU：11.8±1.9 vs.28.6±1.9，P<0.001；SW620：Control：2.2±0.4 vs. 8.1±1.3，P<0.01，5-FU：10.2±1.4 vs. 23.4±2.3，P<0.001）对5-FU的敏感性。生物信息学分析及实验验证表明，通过调节靶向miR-887-3p和PPP1R12B表达，circMFSD12对结直肠癌细胞的生物行为有抑制作用。结论:circMFSD12调控miR-887-3p/PPP1R12B，从而显著影响结直肠癌细胞的生物行为，表明其作为新型分子标志物和潜在治疗靶点有良好的研究前景。

目的 探讨3型β微管蛋白(TUBB3)、含TCP-1的伴侣蛋白8(CCT8)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及与上皮间质转化(EMT)和预后的相关性.方法 回顾性选取2018年1月—2020年1月新疆医科大学附属中医医院肛肠科诊治CRC患者112例.采用实时荧光定量PCR检测癌组织和癌旁组织TUBB3、CCT8 mRNA及EMT相关指标N-钙黏素(N-cad)、E-钙黏素(E-cad)、转录因子TWIST mRNA的表达;免疫组织化学法检测TUBB3、CCT8蛋白水平;比较不同临床病理特征CRC中TUBB3、CCT8蛋白差异;Kaplan-Meier曲线及Cox回归分析TUBB3、CCT8蛋白对CRC患者预后的影响.结果 CRC癌组织TUBB3、CCT8、N-cad、TWIST mRNA表达高于癌旁组织,而E-cad mRNA低于癌旁组织(t=35.030、38.353、32.172、32.405、18.928,P 均＜0.001);CRC 癌组织中 TUBB3、CCT8 蛋白阳性率为91.07％(102/112)、94.64％(106/112),高于癌旁组织 7.14％(8/112)、6.25％(7/112)(x2=157.836、175.032,P 均＜0.001);CRC 中 TUBB3 mRNA 与 CCT8 mRNA 表达呈正相关(r=0.647,P＜0.001),CRC 中 TUBB3、CCT8 mRNA 表达与 N-cad、TWIST mRNA 表达呈正相关(r=0.667、0.621、0.703、0.686,P 均＜0.001),与 E-cad mRNA 表达呈负相关(r=-0.641、-0.587,P均＜0.001);低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移的CRC中TUBB3、CCT8 mRNA表达高于高中分化、Ⅰ～Ⅱ 期、无淋巴结转移(t=20.327、20.455、21.101,15.121、14.985、15.759,P 均＜0.001);CRC 患者 3 年OS TUBB3 mRNA 高表达组为 43.33％(26/60),低于低表达组的 70.97％(44/62)(Log-rankx2=8.792,P=0.003),CCT8 mRNA 高表达组患者 3 年 OS 为42.86％(27/63),低于低表达组的 72.88％(43/59)(Log-rankx2=10.970,P＜0.001);TUBB3、CCT8 mRNA升高及TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、低分化是CRC预后的独立危险因素[HR(95％CI)=1.334(1.103～1.613),1.322(1.108～1.577),1.435(1.161～1.773),1.368(1.115～1.677),1.315(1.054～1.641)].结论 CRC中TUBB3、CCT8表达上调,两者可通过促进EMT,促进CRC的恶性进展,是新的CRC预后评估标志物.

目的:研究花椒提取物羟基-α-山椒素对异丙肾上腺素所致心肌缺血大鼠和过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)氧化损伤的保护作用及可能机制.方法:36只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、盐酸地尔硫卓20 mg/kg、羟基-α-山椒素5、10和20 mg/kg组.各组大鼠连续给药14 d,在13、14 d腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)40 mg/kg造成心肌缺血模型,超声心动图检查评估各组大鼠心功能;试剂盒检测血清丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和IL-6含量;实时荧光定量qRT-PCR法检测心肌组织Tnfa、Il1和Il6 mRNA表达;苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察心肌组织病理改变.体外培养H9c2细胞,用H2O2600 μmol/L处理H9c2细胞6 h构建氧化损伤体外细胞模型,随机分为正常对照组、模型对照组、羟基-α-山椒素2.5、5、10 μg/mL组.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法筛选羟基-α-山椒素最佳给药浓度;采用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观测细胞凋亡情况;流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)浓度;ELISA法检测MDA、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和SOD含量或活力;蛋白质印迹法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(BAX)、血红素氧合酶1(HO-1)、切割胱天蛋白酶3(Cleaved-caspase3)和B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)蛋白表达水平.结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和射血分数(LVEF)显著降低(P＜0.01),血清MDA、cTnl、LDH、CK-MB含量或活力显著升高(P＜0.01),GSH、SOD活力显著降低(P＜0.01),心肌组织中Il1b、Il6及Tnfa mRNA表达明显上调(P＜0.05);与模型对照组相比,羟基-α-山椒素各剂量组LVFS和LVEF明显升高(P＜0.05),羟基-α-山椒素20 mg/kg组MDA、cTnl、LDH、CK-MB含量或活力明显降低(P＜0.05),GSH、SOD活力明显升高(P＜0.05或P＜0.01),心肌组织中Il1b、Il6及Tnfa mRNA表达明显下调(P＜0.05),羟基-α-山椒素各剂量组心肌组织损伤减轻,心肌细胞胶原沉积减少.与正常对照组比较,H2O2模型对照组H9c2细胞活力、线粒体膜电位降低,细胞凋亡率、ROS水平、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6含量升高,GSH-Px、SOD活力降低(P＜0.01),经羟基-α-山椒素预处理后,H9c2细胞活力显著升高、线粒体膜电位升高,羟基-α-山椒素5、10 μg/mL组细胞凋亡率、ROS浓度、MDA、IL-1β、IL-6含量降低,GSH-Px、SOD活力显著升高(P＜0.01),羟基-α-山椒素10 μg/mL组细胞TNF-α含量显著降低(P＜0.01),羟基-α-山椒素处理H9c2细胞后Nrf2(核内)、HO-1、BCL-2蛋白表达上调,Nrf2(核外)、BAX、Cleaved-caspase3蛋白表达下调(P＜0.01).结论:羟基-α-山椒素可改善ISO所致心肌缺血大鼠的心功能、心肌损伤及纤维化程度,保护H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤,改善H9c2细胞凋亡,其作用机制可能与抑制氧化应激反应和炎症因子释放,激活Nrf2/HO-1信号通路有关.

目的 研究胰腺癌中主动脉羧肽酶类样蛋白(ACLP)、Ⅺ型胶原α1(COL11A1)表达及临床预后价值.方法 回顾性选择2019年1月—2021年1月陕西省肿瘤医院中西医科和陕西中医药大学附属医院肿瘤科手术治疗的胰腺癌患者88例为研究对象.采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学检测癌组织及癌旁组织中ACLP、COL11A1 mRNA表达和蛋白水平;Pearson相关分析ACLP mRNA与COL11A1 mRNA的相关性;Kaplan-Meier法分析ACLP、COL11 A1表达对胰腺癌患者生存预后的影响;Cox回归分析胰腺癌预后的影响因素.结果 胰腺癌患者癌组织ACLP、COL11A1 mRNA的相对表达量高于癌旁组织(t/P=31.058/＜0.001,27.642/＜0.001);胰腺癌患者癌组织中 ACLP、COL11A1 阳性率分别为 69.32％(61/88)、70.45％(62/88),高于癌旁组织的 9.09％(8/88)、6.82％(6/88),差异有统计学意义(x2=66.963、75.155,P均＜0.001);胰腺癌组织中ACLP mRNA与COL11A1 mRNA表达呈正相关(r=0.642,P＜0.001);TNM分期ⅡB～Ⅲ期、有淋巴结转移的胰腺癌组织中ACLP、COL11A1蛋白阳性率高于TNM分期 Ⅰ～ⅡA 期、无淋巴结转移(ACLP:x2/P=19.704/＜0.001、12.908/＜0.001;COL11A1:x2/P=22.440/＜0.001、14.569/＜0.001).ACLP阳性组3年总生存率为22.95％(14/61),低于阴性组44.44％(12/27),差异有统计学意义(Log rank x2=5.433,P=0.020);COL11A1 阳性组3 年总生存率为 20.97％(13/62),低于阴性组50.00％(13/26),差异有统计学意义(Log rank x2=7.281,P=0.007).TNM分期ⅡB～Ⅲ期、淋巴结转移、ACLP阳性、COL11A1阳性是影响胰腺癌患者预后的独立危险因素[HR(95％CI)=1.781(1.199～2.646),1.962(1.172～3.285),1.505(1.066～2.125),1.568(1.117～2.201)].结论 胰腺癌组织中ACLP、COL11A1 mRNA表达和蛋白水平均明显上调,二者在胰腺癌的发生和进展中发挥促进作用,是新的临床上评估胰腺癌患者预后的标志物.

目的 应用二维斑点追踪技术(2D-STI)联合实时三维超声心动图(RT-3DE)评估心房颤动(AF)合并中、重度功能性三尖瓣反流(FTR)患者右房结构和功能,探讨其临床应用价值.方法 选取于我院就诊的阵发性AF患者134例,其中AF合并轻度FTR者99例(A组),AF合并中、重度FTR者35例(B组),另选取同期健康体检者41例为对照组.比较各组常规超声心动图参数[左房前后径(LAD)、左室射血分数(LVEF)、右房左右径(RAD1)、右房上下径(RAD2)、三尖瓣瓣环直径(TVD)、三尖瓣瓣叶闭合高度(TVH)及肺动脉收缩压(PAH)]、2D-STI参数[右房储存期应变(RASr)、管道期应变(RAScd)及辅泵期应变(RASct)]和RT-3DE参数[右房最大容积指数(RAVImax)、最小容积指数(RAVImin)、收缩前容积指数(RAVIpre)、被动排空分数(pasEF)及主动排空分数(actEF)]的差异.采用Logistic回归分析筛选AF合并中、重度FTR的独立影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析各参数预测AF合并中、重度FTR的诊断效能.结果 各组LAD、LVEF、RAD1、RAD2、TVD、TVH及PAH比较差异均有统计学意义(均P＜0.001).与对照组比较,A、B组LAD、RAD1、RAD2及TVD均增高,TVH均降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05);与A组比较,B组LAD、RAD1、RAD2、TVD及PAH均增高,LVEF及TVH均降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).各组RASr、RAScd、RASct、RAVImax、RAVImin、RAVIpre、pasEF及actEF比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).与对照组比较,A、B组RAVImax、RAVImin及RAVIpre均增高,RASr、RAScd、RASct、pasEF及actEF均降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05);与A组比较,B组RAVImax、RAVImin及RAVIpre均增高,RASr、RAScd、RASct、pasEF及actEF均降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).Logistic回归分析显示,TVD、RASr及RAVImin均为AF合并中、重度FTR的独立影响因素(OR=1.169、0.798、1.423,均P＜0.05).ROC曲线分析显示,TVD、RASr、RAVImin及RASr联合RAVImin预测AF合并中、重度FTR的曲线下面积分别为0.774、0.880、0.900、0.943.结论 AF合并FTR患者会发生右房结构及功能重塑,2D-STI联合RT-3DE可用于评估AF合并中、重度FTR患者右房结构和功能,具有良好的临床应用价值.

目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)Lnc-H2AFV-1通过调控SEC11同源物A(SEC11A)表达对头颈鳞癌(HNSCC)细胞的增殖、迁移、侵袭及顺铂耐药性的影响.方法 CAL-27细胞分为NC组(转染si-NC)、si-H2AFV-1组(敲低 Lnc-H2AFV-1)、共转染组(敲低 Lnc-H2AFV-1+过表达 SEC11A).用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞中SEC11A mRNA相对表达水平,用蛋白质印迹法检测各组SEC11A蛋白相对表达水平,用5-乙炔基-2'脱氧尿苷实验法检测各组细胞增殖率,用Transwell实验法评估各组细胞的侵袭能力,用细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力,用细胞计数试剂盒8实验法检测各个细胞分组对顺铂耐药性.结果 NC组和si-H2AFV-1组的SEC11A mRNA相对表达水平分别为1.00±0.10和0.43±0.06,SEC11A蛋白相对表达水平分别为1.00±0.13和0.36±0.04,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).NC组、si-H2AFV-1组和共转染组的细胞增殖率分别为(43.73±3.68)％、(10.82±1.75)％和(51.66±4.91)％,细胞迁移率分别为(43.51±4.63)％、(13.76±2.39)％和(54.29±5.91)％,穿过小室细胞数分别为(189.65±18.27)、(65.42±5.48)和(196.44±19.86)个,半抑制浓度(IC50)分别为12.61、5.37和14.76 μg·mL-1,si-H2AFV-1组的上述指标与NC组和共转染组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 Lnc-H2AFV-1可以通过调控SEC11A表达来促进HNSCC细胞的增殖、迁移、侵袭及顺铂耐药性.

目的 通过机器学习算法鉴定与骨肉瘤(osteosarcima,OS)双硫死亡相关的特征基因,构建诊断预测模型,为进一步探索OS早期诊断的潜在生物学标志物和分子机制提供理论支持.方法 差异表达分析用于鉴定OS双硫死亡差异表达基因(differential expression disulfidptosis-related gene,DE-DRG),通过最小绝对收缩选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)、支持向量机(support vector machines,SVM)和随机森林(random forest,RF)算法进一步鉴定具有诊断价值的OS双硫死亡特征基因,通过绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估其诊断价值;同时构建评估疾病风险的列线图,并通过校准曲线和临床决策曲线评估列线图的有效性能.实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative poly-merase chain reaction,RT-qPCR)检测特征基因在OS组织的表达量.结果 共鉴定出2个具有较高诊断价值的OS双硫死亡特征基因(NDUFA11、RPN1),所构建的列线图对预测疾病风险具有较高的可靠性.RT-qPCR检测结果显示,在OS组织中,NDU-FA11表达显著降低,而RPN1表达则显著升高(P＜0.01).结论 本研究构建的OS双硫死亡基因诊断模型具有一定的诊断价值.