目的:探讨芳香族L-氨基酸脱羧酶缺乏症（AADCD）的临床特征、实验室特点及基因诊断，提高对该病的认识。方法:收集2016年8月至2020年6月首都医科大学附属北京儿童医院神经内科确诊的4例AADCD患儿，对其临床表现、实验室及影像学资料、基因检测结果进行回顾性分析。结果:4例患儿均在婴儿早期起病，首发症状为喂养困难，分别于2~4月龄余出现伴眼动危象的阵发性运动障碍，并出现运动倒退，肌张力低下，发育迟缓，睡眠障碍和自主神经症状如上睑下垂、出汗过多、鼻塞等。4例患儿为来自2个家庭的兄妹，他们的父母均身体健康。例1、例2的二羟基苯丙氨酸脱羧酶（ DDC）基因突变分别来自母亲的错义突变c.1040G>A（p.Arg347Gln）和来自父亲的11和12号外显子的全部缺失。例3的 DDC基因突变分别来自母亲的突变c.419G>A（p.G140E）和来自父亲的突变c.1375C>T（p.H459Y）；例4未进行基因检测。对3例患儿进行血氨基酸和酰基肉碱谱、尿有机酸分析，均未见特异性异常；对例3用血干滤纸片筛查3-O-甲基多巴，结果明显增高；脑脊液神经递质检测结果示3-甲氧基4-羟基苯二醇、高香草酸和5-羟基吲哚乙酸浓度明显降低，5-羟色氨酸和3-O-甲基多巴水平升高；血芳香族L-氨基酸脱羧酶（AADC）活性明显降低。对例1、例3、例4进行头颅磁共振成像（MRI）和脑电图检查，其中例1头颅MRI正常，例3、例4头颅MRI提示髓鞘化稍落后，3例患儿脑电图检查均正常。例1、例2在1岁10个月时因肺炎、呼吸衰竭死亡。例3在4月龄确诊后口服氯硝西泮、盐酸苯海索片、维生素B6片，后加用盐酸司来吉兰片、盐酸普拉克索片治疗，1岁6月龄随访时眼动危象、运动障碍的发作频率减少，睡眠改善，自主神经症状减轻，但发育迟缓无改善。例4诊断脑瘫和癫痫，多种抗癫痫药物和康复训练治疗无效，于10岁时因心脏衰竭、肾脏衰竭夭折。 结论:AADCD临床表现复杂，误诊率高。对早发性肌张力低下、发育落后、眼动危象、运动障碍的婴儿应尽早进行干滤纸片筛查3-O-甲基多巴水平，对可疑病例进行脑脊液神经递质检测、血浆AADC活性测定和基因检查以明确诊断。早期确诊AADCD患儿及基因变异携带者，可指导治疗及提供遗传咨询，降低后代的发病率。

目的:探讨先天性甲状腺功能减退症(CH)患儿确诊时间的影响因素。方法:选取2016年1月1日至2021年12月31日在成都市所有助产机构出生的促甲状腺激素(TSH)初筛结果为CH阳性或可疑阳性，并且成功召回复查的11 689例活产新生儿为研究对象。将其中679例确诊为CH患儿，根据确诊时间，分别纳入早诊CH组(n＝467，生后≤30 d确诊者)与晚诊CH组(n＝212，生后>30 d确诊者)。采用χ2检验与Wilcoxon秩和检验，比较2组患儿性别、是否为足月儿、出生季节，出生医院所在区域、性质与级别，是否在出生医院采集第2次足跟血进行复查，以及滤纸片干血斑标本(DBS)检测前周转时间、DBS检测报告周转时间、CH初筛可疑阳性患儿被召回时间。对这11 689例受试儿，绘制血清TSH水平初筛值预测其发生CH的受试者工作特征(ROC)曲线，并计算曲线下面积(AUC)与约登指数，分析血清TSH水平初筛值对患儿发生CH的预测价值。本研究遵循的程序符合电子科技大学医学院附属妇女儿童医院·成都市妇女儿童中心医院伦理委员会制定的伦理学标准，并得到该伦理委员会批准[审批文号：科研伦审2021(41)号)]。结果:①早诊CH组和晚诊CH组患儿性别、是否为足月儿、出生季节、出生医院性质及级别构成比等分别比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患儿出生医院所在区域及是否在出生医院采集第2次足跟血进行复查比较，差异均有统计学意义(χ2＝26.39、125.80，P<0.001)。②早诊CH组患儿DBS检测前周转时间、DBS检测报告周转时间、CH初筛可疑阳性患儿被召回时间分别为11 d(9 d，14 d)，6 d(5 d，7 d)，3 d(1 d，7 d)，均显著短于晚诊CH组的14 d(11 d，18 d)，7 d(6 d，7 d)，11 d(8 d，15 d)，并且差异均有统计学意义(Z＝－8.02、P<0.001，Z＝－2.61、P＝0.009，Z＝－15.35、P<0.001)。③对11 689例受试儿绘制血清TSH水平初筛值预测其发生CH的ROC曲线结果显示，其AUC为0.871(95%CI：0.825～0.886，P<0.001)，根据约登指数最大原则，血清TSH水平初筛值预测患儿发生CH的最佳临界值为14.7 μIU/mL，此时其预测患儿发生CH的敏感度为69.1%，特异度为93.4%，约登指数为62.5%。结论:CH新生儿出生医院位于郊区、CH初筛可疑阳性患儿被召回时间及DBS检测前周转时间长，可能造成CH确诊时间延误。成都市卫生行政部门应针对上述因素采取相应措施，缩短CH患儿确诊时间。建议将血清TSH水平初筛值14.7 μIU/mL作为CH筛查阳性临界值，可能更有利于缩短CH患儿确诊时间。

目的 探讨贵阳市新生儿遗传代谢病筛查中心新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)的筛查数据,了解本地新生儿CAH的发病情况,总结筛查经验,讨论整改措施.方法 对来自贵阳市65家助产机构出生于2019-2020年的118 670例新生儿干血斑标本,应用时间分辨免疫荧光法分析干血滤纸片上的17-羟孕酮(17-hydroxyprogesterone,17-OHP)水平.结果 在中心检测的118 670名新生儿中,有6名被诊断患有CAH(男性3名,女性3名),CAH在本市的发生率为1∶19 778.不同性别、出生体重、早产和足月儿组间17-OHP指标浓度值差异有统计学意义(P＜0.05).结论 新生儿肾上腺皮质增生症筛查有利于对新生儿进行早期诊断及治疗.本病在贵阳地区的发病率为1∶19 778.

目的 建立液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatographytandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测干血滤纸片(dried blood spots,DBS)中类固醇激素谱的方法.方法 取含不同浓度类固醇激素(包括雄烯二酮、睾酮、17-羟孕酮、孕酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、皮质醇)的2个DBS(直径3 mm),用含已知类固醇激素内标的1∶1甲醇/乙腈萃取,孵育震荡后氮气吹干,复溶后LC-MS/MS检测.评价方法的线性、精确度、准确度.收集7例21-羟化酶缺乏症患儿及23例正常婴幼儿DBS样本,LC-MS/MS测定样本中类固醇激素浓度.结果 7种类固醇激素批内和批间精确度为3.3％～10.9％,准确度为100.4％～116.5％,最低检测限为0.03～0.25μg/L,最低定量限为0.125～1.000μg/L;不同浓度的类固醇激素实测浓度与加入浓度之间的相关系数为0.997 ～ 0.999.21-羟化酶缺乏症患儿DBS样本中雄烯二酮、17-羟孕酮、孕酮、21-脱氧皮质醇、皮质醇浓度均显著高于正常男性婴幼儿,具有统计学意义(P＜0.05).结论 本研究建立了LC-MS/MS测定DBS中类固醇激素谱的方法,具有较好的精确度、准确度及浓度线性关系,可用于临床类固醇激素检测,有助于先天性肾上腺皮质增生症的临床诊断及治疗效果评价,并有望用于此病的新生儿筛查.

目的 探讨用于类固醇激素液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测,室内质控干血滤纸片(DBS)类固醇激素质控品的制备方法.方法 收集全血,分离血细胞和血浆,生理盐水洗涤血细胞,活性炭过夜吸附血浆,添加标准品,制成低、中、高三个浓度的DBS类固醇激素质控品,LC-MS/MS检测并分析其精确度、准确度、稳定性及不同血斑间的差异.结果 DBS类固醇激素质控品批内精确度和准确度分别为2.4 %~7.0 %,102.0 %~111.0 %;批间精确度和准确度分别为5.1%~9.8%,99.0%~114.8%;-20℃保存5个月,月间差异无统计学意义(P>0.05);不同血斑间变异系数为3.3%~8.2%,变异系数较小.结论 配制的DBS类固醇激素质控品具有良好的精确度、准确度及稳定性,血斑间差异小,符合室内质控品要求,可用于LC-MS/MS检测类固醇激素的室内质控.

目的 比较串联质谱(MS/MS),包括非衍生标准曲线定量法(简称"标曲法")和衍生法、非衍生法及荧光法在苯丙酮尿症(PKU)随访患者血苯丙氨酸(Phe)浓度测定中的应用.方法 收集上海新华医院随访的204例PKU患者干血滤纸片(DBS)样本;MS/MS标曲法、衍生法、非衍生法及荧光法测定Phe浓度,分为低、中、高,即<360、360~600和>600 μmol/L 3组,对Phe检测值进行一致性检验及非参数检验.结果 MS/MS标曲法批内和批间精密度为4.0%~7.2%,回收率为93.2%~97.3%.一致性检验显示各组Phe检测值在95%一致性界限外的值不超过8.1%.低、中浓度组,荧光法、MS/MS标曲法和衍生法Phe检测值四分位数分别为176(118,251)μmol/L、174(94, 273)μmol/L、153(94,242)μmol/L,和540(478,578)μmol/L、485(414,529)μmol/L、466(402,513) μmol/L;荧光法较MS/MS标曲法高4.8%~9.0%,(Z=-3.787~-2.674,P<0.01);MS/MS非衍生法较标曲法低3.9%~5.2%,(Z=-7.474~-5.747,P<0.01);高浓度组,MS/MS标曲法、衍生法、非衍生法和荧光法检测值为807(695,924)μmol/L,700(575,785)μmol/L,680(623,771)μmol/L和711(674,794)μmol/L,MS/MS标曲法较其他方法高10.9%~16.2%,(Z=-4.458~-4.356,P<0.01).结论 MS/MS标曲法测定DBS中Phe浓度特异性和准确度较好,4种方法测定血Phe浓度一致性较好,虽检测值存在差异,但均可用于多数PKU患者的Phe浓度监测.

目的 分析婴儿型糖原累积病Ⅱ型(GSDⅡ)的临床特征及基因分型.方法 分析6例婴儿型GSDⅡ患儿的临床特征.采用干血滤纸片法收集患儿外周血并检测白细胞酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)活性,PCR扩增GAA基因编码区,并直接测序分析GAA基因突变.结果 6例患儿均有心室肥厚和呼吸困难等症状,外周血GAA酶活性低于正常值.基因测序发现,6例患儿均存在GAA基因突变,共检测出8个点突变、1个缺失突变、1个错义突变和2个无义突变,其中c.2662G＞T(E888X)、c.796C＞T(P266S)、c.2214G＞A(W738X)、c.796C＞T(P266Ser)、NM_000152.3:c.2185delC、NM_000152.3:c.1822C＞T和c.2662G＞T (G888Ter)为已经报道的突变,c.1562A＞T(E521V)和c.1562A＞T为尚未报道的新突变类型.结论 GSDⅡ的临床表现存在差异.婴儿型GSDⅡ临床特征表现为心肌肥厚和呼吸困难等,GAA酶替代治疗可以有效改善病情.

目的:建立西安地区0～12岁健康儿童血氨基酸、酰基肉碱的参考范围,为评价氨基酸、酰基肉碱营养状态和诊断氨基酸、脂肪酸β氧化代谢缺陷病提供依据.方法:选取2013年1月至2014年12月在西安市儿童医院就诊及健康体检的695例0～12岁健康儿童作为研究对象,按年龄分为7组:0～28 d组、1～3个月组、＞3～6个月组、＞6～12个月组、＞1～3岁组、＞3～6岁组、＞6～12岁组,采集干血滤纸片,利用串联质谱技术测定氨基酸、酰基肉碱浓度.结果:0～28 d组儿童的氨基酸Ala、Glu、Met、Asp、Leu、Trp、Gly、Orn、His、Ser、Pro浓度均明显高于1～3个月组、＞3～6个月组、＞6～12个月组、＞1～3岁组、＞3～6岁组、＞6～12岁组(均P＜0.05);0～28 d组儿童的酰基肉碱C2、C3、C4 、C5、C14、C16浓度均明显低于1～3个月组、＞3～6个月组、＞6～12个月组(均P＜0.05),与＞1～3岁、＞3～6岁组、＞6～12岁组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:血氨基酸、酰基肉碱浓度的串联质谱检测结果,可为氨基酸、脂肪酸代谢障碍性疾病的早诊断、早治疗提供帮助.

目的 了解怀化市新生儿短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(SCADD)的发病率.方法 选择出生72h后经充分哺乳的新生儿,采足跟血,制成干血滤纸片,应用串联质谱技术检测血片酰基肉碱水平,初筛阳性者立即召回复查,复查阳性者应用气相色谱-质谱进行尿有机酸分析及高精准度二代测序技术(NGS)以明确诊断.结果 怀化市2015年3月-2017年12月共筛查新生儿79 205例,其中男性42 592例,女性36 61 3例,确诊SCADD患儿5例,SCADD发病率为1/15 841.结论 怀化市SCADD发病率为1/15841,明显高于我国其他地区.SCADD患儿早期确诊,有效地为后续的临床治疗和遗传咨询提供依据.

目的 探讨串联质谱技术在怀化市新生儿高苯丙氨酸血症 (HPA) 筛查中的应用价值, 了解怀化市新生儿高苯丙氨酸血症的检出率.方法 选择出生72h后经充分哺乳的新生儿, 采集足跟血, 制成干血滤纸片, 应用串联质谱技术 (MS/MS) 测定血苯丙氨酸 (Phe) 、酪氨酸 (Tyr) 浓度及其比值 (Phe/Tyr) 进行HPA筛查, 筛查原标本血Phe浓度>120μmo L/L, 或同时伴有Phe/Tyr>2.0为阳性, 初筛阳性者立即召回复查, 复查阳性者应用气相色谱-质谱进行尿有机酸分析及下一代测序技术 (NGS) 检测阳性患儿的突变基因.结果 怀化市2015年3月-2017年12月共筛查新生儿79 205例, 其中男性42 592例, 女性36 613例, 确诊HPA患儿6例, HPA检出率为1/13 201.结论 应用串联质谱技术进行新生儿HPA筛查的检出率为1/13 201, 明显高于之前报道的应用茚三酮荧光法进行新生儿HPA筛查的检出率1/40 758.应用串联质谱技术进行新生儿HPA筛查是一种准确、可靠的方法.