目的:探究刺平面细胞极性蛋白1（prickle planar cell polarity protein 1，PRICKLE1）基因变异参与骨性Ⅲ类错 畸形发生的分子机制。 方法:收集2021年10月于南京医科大学附属口腔医院正畸科就诊的骨性Ⅲ类错 畸形伴上颌骨发育不足家系1个，提取该家系成员基因组DNA进行全外显子组测序，筛选致病基因及突变位点，Sanger测序验证突变序列。收集2021年10月至2022年12月于南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科就诊的正颌患者手术过程中切除的颌骨组织，提取并培养人颌骨骨髓间充质干细胞，转染过表达慢病毒（过表达目的基因的慢病毒为野生组，过表达突变位点的慢病毒为突变组）和敲降慢病毒（分为敲降1组和2组，以干扰阴性慢病毒为对照组），开展实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）实验、蛋白质印迹法实验、增殖实验、Transwell实验、碱性磷酸酶和茜素红染色。构建斑马鱼模型，注射吗啉代寡聚核苷酸（morpholino oligonucleotide，MO），在斑马鱼体内敲低prickle1a和prickle1b的表达（共敲组），对照组注射标准化MO作为参照。对2组斑马鱼颅面部组织进行转录组测序、富集分析和共表达分析。 结果:该家系2例患者均携带PRICKLE1 c.113C>T突变。转染实验显示，相比野生组（PRICKLE1相对表达量为21.97±0.60），突变组人颌骨骨髓间充质干细胞PRICKLE1相对表达量（5.05±0.05）显著降低（ P<0.05），细胞增殖能力和迁移能力显著增强（ P<0.05），成骨分化能力显著减弱（ P<0.05）；相比对照组，2个敲降组细胞的增殖能力和迁移能力均显著增强（ P<0.05），成骨分化能力均显著减弱（ P<0.05）。斑马鱼模型实验显示，与对照组（338.80±24.92）相比，共敲组斑马鱼筛板宽度显著减小（282.50±61.77）（ t=5.29， P<0.001）。转录组测序富集分析结果显示，共敲组和对照组的差异基因在丝裂原活化蛋白激酶信号通路上富集明显。 结论:PRICKLE1 c.113C>T突变下调丝裂原活化蛋白激酶信号通路，抑制颌骨骨髓间充质干细胞的成骨分化能力，进而参与骨性Ⅲ类错 畸形的发生发展。

神经管畸形是一种常见的神经发育疾病,其分为开放型和闭合型两大类,以无脑畸形、脑膨出和颅脊柱裂为主要症状.Wnt信号通路与神经系统疾病发生的关系是近年来较热门的研究领域.Wnt信号通路包括Wnt/β-catenin通路、平面细胞极性通路、Wnt/Ca2+通路,其在神经管发育过程中发挥着重要的作用.本文综述了Wnt信号通路的研究现状,阐述了Wnt信号通路在神经管闭合过程中发挥的作用,为开发防治神经管畸形相关药物提供思路.

卵巢癌是病死率最高的女性生殖系统恶性肿瘤,其发生发展过程涉及多种信号通路的异常调控.Wnt信号通路是一种高度保守的分子信号通路,在胚胎发育、组织稳态以及肿瘤发生发展等生理及病理过程中发挥重要作用.Wnt信号通路包括经典的Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路以及不依赖β-catenin转录活性的非经典Wnt通路,后者主要包括Wnt/平面细胞极性(Wnt/planar cell polarity,Wnt/PCP)通路和Wnt/Ca2+通路.以往研究主要集中于经典Wnt通路与肿瘤进展的关系,但近年来非经典Wnt通路逐渐受到重视,相关研究丰富了其在组织发育及肿瘤发生等生理及病理过程中的认知.现有研究提示,非经典Wnt通路在卵巢癌中受到异常调控,并与卵巢癌的分期及预后密切相关.非经典Wnt通路在卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭等多种生物学过程发挥重要作用,且该通路的变化与卵巢癌化学治疗(化疗)耐药也具有一定相关性.该文从上述多个角度对非经典Wnt通路在卵巢癌中的作用进行综述,并讨论基于非经典Wnt通路的卵巢癌靶向治疗研究进展,为开发新型靶向药物提供新的思路.

目的 探究经典Wnt/β-catenin信号通路的核心蛋白β-catenin敲除对小鼠内耳发育和极性的影响.方法 在胚胎小鼠内耳感觉上皮的前体细胞(Sox2阳性细胞)条件敲除β-catenin,观察内耳大体结构改变情况.对基底膜和椭圆囊斑、球囊斑行免疫荧光染色,观察毛细胞数量、排列和极性的变化情况.结果 与对照组比较,-catenin条件敲除后,听泡体积变小,耳蜗和前庭器变小,前庭感觉上皮毛细胞减少(P＜0.01).耳蜗静纤毛方向紊乱,动纤毛在位置和数量上发生变化,前庭毛细胞方向也产生散在性紊乱.结论 β-catenin调控小鼠内耳发育和毛细胞极性,经典Wnt/β-catenin信号通路可能与非经典Wnt/PCP通路共同调控耳蜗伸展和内耳平面细胞极性.

神经管缺陷(neural tube defects,NTDs)是一种常见的神经发育疾病,发病率约为千分之一.该疾病的发病机制较为复杂,是由遗传因素和环境因素共同决定的.研究发现适量补充叶酸能够降低新生儿NTDs的发病率,但尚没有有效的治疗方法.平面细胞极性(planar cell polarity,PCP)信号通路和汇聚延伸(convergent extension,CE)在神经管闭合过程中具有重要作用,一系列遗传因素调控神经管发育,其中SHROOM3、VANGL2和WNT5A这3个基因在PCP信号通路中不可或缺.本文通过综述SHROOM3、VANGL2和WNT5A的研究现状,阐述PCP信号通路在神经管闭合过程中发挥的作用,也对遗传性NTDs动物模型的研究进行了回顾.

目的:探讨平面细胞极性(Wnt/PCP)信号通路中Ras homolog gene family member A (RhoA) mRNA与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)中医证型的相关性,尝试为AECOPD中医证型诊断提供客观标准.方法:收集AECOPD患者100例,分为痰浊壅肺证、痰热郁肺证、痰蒙神窍证、肺肾气虚证、阳虚水泛证5个组别,每组20例.正常组15例.所有人选患者空腹抽取静脉血,血液总RNA的提取采用试剂盒,按说明书进行操作,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测RhoA基因在AECOPD中医证型患者血液中mRNA的表达量,并探讨其相关性.结果:痰热郁肺组和痰蒙神窍组比较无差异;与正常组比较,痰浊壅肺组、痰热郁肺组、痰蒙神窍组、肺肾气虚组和阳虚水泛组中RhoA mRNA表达量明显增高(P＜0.01);5组证型间RhoA mRNA表达量,痰浊壅肺组＜痰热郁肺组/痰蒙神窍组＜肺肾气虚组＜阳虚水泛组.RhoA mRNA相对表达量与AECOPD 5组中医证型之间存在直线线性相关关系,且呈正性相关.结论:Wnt/PCP信号通路中RhoA mRNA的相对表达量在5组中医证型中存在显著差异,可能给AECOPD中医证型诊断提供一定的客观标准,并揭示其疾病严重程度.

[目的]观察非经典Wnt信号通路相关基因、平面细胞极性(PCP)相关基因在不同程度脊髓损伤(SCI)后的表达变化.[方法]采用LISA脊髓撞击器构建小鼠脊髓损伤模型,实验分为SCI 0.65组(损伤深度为0.65 mm)、SCI 0.45组(损伤深度为0.45 mm)和Sham组(假手术);通过BMS评分和CatWalk 9.0步态分析系统测试小鼠术后运动功能;应用Von Frey纤毛和冷热板检测小鼠术后神经病理性疼痛;利用Real-time PCR法检测小鼠脊髓损伤节段和腰4腰5(L4-5)节段非经典Wnt信号通路相关基因和PCP相关基因的表达变化.[结果]①在损伤后第7、10、25、42天,SCI 0.65组BMS评分明显低于SCI 0.45组(P<0.05);CatWalk9.0步态分析结果表明SCI后损伤组小鼠四肢协调率低于Sham组(P<0.01).②脊髓损伤后第28天损伤组小鼠均出现机械性痛觉超敏并且持续至42 d,且损伤程度越重,机械性痛阈值越低(P<0.001);脊髓损伤后小鼠冷热痛异常,但是与损伤程度无关.③脊髓损伤造模后42 d,SCI 0.45组和Sham组小鼠脊髓组织中Wnt4与Wnt7a表达无显著变化,SCI 0.65组Wnt4表达上调、Wnt7a表达下调(P<0.05).[结论]①小鼠SCI后产生神经病理性疼痛.不同程度的脊髓损伤对机械痛表现出不同的敏感性.②Wnt4和Wnt7a的表达变化提示它们可能在脊髓损伤后运动神经回路的可塑性中起重要作用.

目的 探讨细胞分裂周期蛋白6(CDC6)基因在肺腺癌组织中的拷贝数变异(CNV)对肺腺癌预后的影响.方法 从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中获取肺腺癌患者的转录谱(mRNA)数据、CNV数据及临床资料,使用基因表达谱动态分析(GEPIA)数据库对CDC6基因在肺腺癌组织中的表达情况,及其与CDC6基因CNV和肺腺癌患者预后的关系进行分析.筛选CDC6基因的共表达基因,并进行基因组百科全书(KEGG)通路分析及基因本体(GO)功能富集分析.结果 肺腺癌患者肿瘤组织中CDC6基因CNV与CDC6 mRNA的表达量呈正相关(P﹤0.01).CDC6低表达组肺腺癌患者的生存结局明显优于CDC6高表达组患者(P﹤0.01).KEGG通路分析结果显示:CDC6基因的共表达基因富集在DNA复制、错配修复、核苷酸切除修复等修复相关通路.GO功能富集分析结果显示:在生物学过程层面,CDC6基因的共表达基因主要参与了DNA链的延伸、核酸切除修复、蛋白质去甲酰化、转录偶联切除修复、WNT信号通路、平面细胞极性通路、核因子-κB诱导激酶(NIK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路;在细胞构成层面,CDC6基因的共表达基因参与了T复合物、透明带受体复合物、驱动蛋白复合体、DNA复制因子C复合物的形成;在分子功能层面,CDC6基因的共表达基因参与四链体DNA结合.结论CDC6基因CNV可以对肺腺癌组织中CDC6基因的表达进行调控,CDC6基因及其共表达基因可对肺腺癌的DNA复制、修复过程和肿瘤相关信号通路进行调控并可能以此为基础影响肺腺癌的发展进程.CDC6基因高表达肺腺癌患者的预后不良,其可能成为预测肺腺癌临床预后的有效生物标志物.

晶状体发育是一个复杂的生物学过程,受多种信号分子及其构成的通路网络调控.近年研究发现,平面细胞极性(PCP)信号通路在晶状体发育过程中起重要作用,是形成晶状体正常透明度和形态的基础.PCP的深入研究为临床治疗先天性白内障提供了指导意义,同时更是有望成为完善再生晶状体的新干预靶点.本文结合目前该领域研究进展就PCP在晶状体的发育过程中的作用进行详细综述.

Hippo通路由一系列激酶构成,在细胞增殖和凋亡过程中起重要作用.上皮细胞顶端-基底极性、平面细胞极性、机械张力和G蛋白偶联受体均可以调控该通路活性.越来越多的研究发现Hippo通路参与了动脉粥样硬化相关病理的发生发展,在这个过程中,内皮细胞、巨噬细胞和平滑肌细胞中的Hippo通路发挥着重要作用.本文主要针对Hippo通路的调控及其在As中的潜在作用作一综述,以期为As提供新的治疗靶点和途径.