目的:掌握黄渤海海域主要经济类海产品异尖线虫幼虫感染状况，为异尖线虫系统监测和相关疾病防治提供基线数据。方法:2016年4月至2020年9月，对山东省烟台市和威海市沿海所属黄渤海海域9个捕捞点周边海域（渤海湾、黄渤海交界中部、黄渤海交界南部、黄海北部、黄海南部）现场捕捞的海产品样本进行解剖和虫体检测，比较不同类别样本和样本体内各脏器异尖线虫幼虫感染和分布情况，以及各捕捞点周边海域间、国内不同采样点间海鱼类异尖线虫幼虫感染水平差异；同时，对各捕捞点附近居民开展异尖线虫病健康知识知晓情况调查。结果:在黄渤海海域共检测5类海产品708例，其中海鱼类581例、软体类22例、棘皮类20例、甲壳类75例、贝类10例。仅海鱼类检出异尖线虫幼虫感染（191例），检出异尖线虫幼虫4 723条，感染率为32.87%（191/581），感染强度为24.73（4 723/191）条/例；主要分布在肠系膜及肠壁（38.96%，1 840/4 723）、体腔（22.04%，1 041/4 723）和胃壁（17.95%，848/4 723）。各捕捞点周边海域间海鱼类异尖线虫幼虫感染水平比较，黄海南部感染率最高，且感染强度明显高于黄渤海交界中部和黄渤海交界南部（均 P < 0.05）。国内不同采样点间海鱼类异尖线虫幼虫感染水平比较，舟山口岸以及锦州、烟台、汕头市售感染率均明显高于黄渤海海域（均 P < 0.05），丹东、青岛市售感染率均明显低于黄渤海海域（均 P < 0.05）。共对1 805例黄渤海海域附近居民开展异尖线虫病健康知识知晓情况调查，其中，20.78%（375/1 805）的居民听说过异尖线虫病，15.73%（284/1 805）的居民知道异尖线虫病是怎么得的，12.30%（222/1 805）的居民知道异尖线虫病对人体的危害，16.68%（301/1 805）的居民知道怎么做才能预防异尖线虫病。 结论:黄渤海海域海鱼类存在异尖线虫幼虫感染，且感染水平较高，今后应加强异尖线虫病防治知识普及力度。

目的 了解渤海海峡、渤海湾市售海鱼异尖线虫感染情况,并对检出的异尖线虫进行形态学分析及属间鉴定,为防控措施制定提供参考.方法 2023年春季和冬季采购渤海海峡、渤海湾沿海市售海鱼,检测海鱼异尖线虫感染情况,分析不同鱼群的感染差异及异尖线虫寄生部位等,并对异尖线虫进行形态学鉴定.结果 调查共检测渤海湾海鱼7种91尾,未检出异尖线虫;渤海海峡海鱼21种210尾,其中11种48尾海鱼检测出异尖线虫,总检出率为22.86%,共检出异尖线虫1 370条,平均感染强度为28.54条/尾.检出率前三的鱼种分别为鮟鱇(100.00%,14/14)、带鱼(100.00%,10/10)和辫子鱼(80.00%,8/10);感染强度前三的鱼种为鮟鱇(69.00条/尾)、带鱼(24.70条/尾)和海鲫鱼(19.00条/尾).异尖线虫在鱼体的主要寄生部位为肠道、肠系膜、腹腔等,泄殖腔中未发现感染.相关性分析表明,鮟鱇和带鱼的体质量与异尖线虫感染强度均呈正相关(r=0.77、0.67,P均<0.01).检获完整虫体1 226条,经形态学鉴定,其中异尖属767条,宫脂属459条.结论 渤海湾海鱼未检出异尖线虫,渤海海峡海鱼异尖线虫感染较重,且主要为具有致病性的异尖属和宫脂属线虫,建议加强当地异尖线虫病健康教育,以降低人群感染风险.

为了解青藏高原高寒森林土壤线虫对海拔及林隙的响应,选取藏东南色季拉山急尖长苞冷杉林为研究区,采用高通量测序技术分析森林内不同海拔和林隙下土壤线虫群落差异.结果表明:在研究区的急尖长苞冷杉林中,土壤线虫多样性随海拔降低而增加;林隙的线虫多样性略高于林内,但差异不显著;海拔变化显著改变土壤线虫群落结构,但林隙与林内线虫群落结构较为相似;刺嘴纲(Enoplea)和三矛目(Triplonchi-da)在该森林的中海拔(4292 m)占比最高;土壤含水量、磷含量(包括全磷和有效磷)和镍含量是影响土壤线虫多样性的主要因子,林隙导致的土壤重金属及养分变化则是影响土壤线虫群落结构的关键因子.

目的 调查福建省5地区海鱼感染Ⅲ期异尖线虫(Anisakis spp.)幼虫的情况.方法 2021年10月至2022年5月期间,采购各海鲜市场不同品种海鱼,直接剖检海鱼或人工消化内脏和肌肉查找、分离Ⅲ期异尖线虫幼虫,经光学显微镜镜检虫种.统计分析福建省5地区和不同鱼种中异尖线虫幼虫的感染情况.结果 共剖检18种133尾海鱼,其中12种68尾海鱼感染异尖线虫幼虫,检获虫体2 214条,海鱼异尖线虫幼虫品种检出率、总感染率、感染度分别为66.7％(12/18)、51.1％(68/133)、32.6条/尾(2 214/68),海鱼品种中单尾带鱼的感染情况最严重,为416条/尾;未检出异尖线虫幼虫的海鱼品种有黄翅鱼、黄瓜鱼、东星斑、墨鱼、白鲑、鳊鲈.从地区分布看,长乐地区感染率最高(66.7％),各地区不同品种海鱼检出率芗城最高(71.4％).结论 福建省5地区海鱼体Ⅲ期异尖线虫幼虫感染严重,海鱼中异尖线虫幼虫的分布密度高,各地区异尖线虫幼虫检出率较高,福建省5地区居民具有高度感染异尖线虫的风险.

为了解上海市市售海鱼异尖线虫幼虫感染情况,2022年在上海市农贸市场、超市和海鲜市场中采集自东海海域捕捞的新鲜海鱼,解剖后分别在内脏和鱼肉中查找疑似异尖线虫的虫体,分别置于光学显微镜和扫描电子显微镜下进行观察,分析海鱼的异尖线虫感染情况.共采集海鱼16种338尾,从6种116尾体内检出异尖线虫1 065条,总感染率为34.3％(116/338),平均感染度为9.2条/尾.其中鮟鱇鱼的感染率最高(11/12),小黄鱼的感染度最高(13.0条/尾).海鱼异尖线虫感染率从春季到冬季逐渐升高,冬季的感染率和感染度最高,分别为51.1％(46/90)和12.3条/尾.异尖线虫寄生的主要部位是海鱼的肠道和腹腔,分别占检出异尖线虫总数的54.6％(582/1 065)和40.7％(433/1 065).本研究结果提示,上海市市售海鱼存在异尖线虫幼虫感染,感染率较高的鱼种有鮟鱇鱼、小黄鱼等常见食用海鱼.

异尖线虫(Anisakis)是一类人兽共感染寄生虫,广泛分布于全球各大海域,成虫主要寄生于海豚、海豹、鲸类等海洋哺乳动物中,幼虫主要寄生于鱼类、头足类等小型海洋动物体内.异尖线虫幼虫被人误食可引起人异尖线虫病,危害健康.传统的形态学分类方法无法对异尖线虫进行准确的鉴定,阻碍了异尖属线虫种群的深入研究.近年来随着分子生物技术的发展和应用,异尖线虫的研究取得了许多重要的进展.本文主要从分类学的角度,综述异尖线虫生活史、宿主偏好、成虫和幼虫形态学分类、分子生物学分类、全球分布情况等方面的研究进展.

目的 开发基于PCR结合簇状规则间隔短回文重复序列及相关蛋白Cas12a(CRISPR/Cas12a)快速检测华支睾吸虫囊蚴的方法.方法 使用内转录间隔区(ITS)引物以华支睾吸虫基因组DNA为模板进行PCR扩增,取PCR扩增产物、Cas12a蛋白、crRNA、单链DNA(ssDNA)报告分子和焦碳酸二乙酯水,选择其中1～5个试剂,分别制备5个CRISPR反应体系,在紫外光下观察反应结果,验证PCR-CRISPR/Cas12a检测系统的可行性.设计5个浓度梯度(100、200、300、400、500 nmol/L)优化ssDNA报告分子浓度;保持 crRNA 浓度为 50 nmol/L,设计 5 个比例梯度(1.0∶1、1.5∶1、2.0∶1、2.5∶1、3.0∶1)优化 Cas12a/crRNA比例,荧光定量PCR仪检测荧光信号.将重组质粒梯度稀释为10个不同浓度(10-2～107拷贝/μl),PCR扩增、CRISPR反应后检测荧光信号,评价检测系统的灵敏度.提取华支睾吸虫囊蚴、东方次睾吸虫囊蚴、猬迭宫绦虫裂头蚴、派氏异尖线虫和亚洲带绦虫节片基因组DNA,PCR扩增、CRISPR反应后检测荧光信号,评价检测系统的特异性.压片镜检华支睾吸虫病流行区捕获的小型淡水鱼鱼肉,分别挑选出华支睾吸虫囊蚴、东方次睾吸虫囊蚴和其他囊蚴(未鉴定出虫种)等3种囊蚴混合感染,华支睾吸虫和东方次睾吸虫囊蚴的混合感染,华支睾吸虫和其他囊蚴的混合感染,东方次睾吸虫和其他囊蚴的混合感染,单华支睾吸虫囊蚴感染,单东方次睾吸虫囊蚴感染,单其他囊蚴感染和无囊蚴感染等8种鱼肉样品组织,提取DNA后进行PCR-CRISPR/Cas12a检测,在紫外光下观察反应结果.使用GraphPad prism 9.0软件对数据进行单因素方差分析,两两比较采用图基多重检验.结果 完整的PCR-CRISPR/Cas12a检测系统能够在紫外光下产生荧光信号.ssDNA报告分子浓度为400nmol/L时,反应体系的荧光值为(40 786±1 758)AU,高于300nmol/L的(32 029±2 651)AU(P＜0.05),与 500 nmol/L 的(42 698±4 260)AU 差异无统计学意义(P＞0.05),选取ssDNA报告分子浓度为400 nmol/L.Cas12a/crRNA比例为2.0∶1时,反应体系的荧光值为(48 950± 3 723)AU,高于 1.5:1的(37 700±3 887)AU(P＜0.05),与 2.5∶1 的(55 630±3 110)AU 差异无统计学意义(P＞0.05),选取Cas12a/crRNA比例为2.0∶1.灵敏度检测结果显示,重组质粒的浓度为10-1拷贝/μl时,反应体系的荧光值为(39 336±7 231)AU,与阴性对照的(2 216±743)AU差异有统计学意义(P＜0.05);当浓度降至10-2拷贝/μl时,荧光值为(5 451±1 957)AU,与阴性对照的差异无统计学意义(P＞0.05).特异性检测结果显示,ITS引物能同时PCR扩增华支睾吸虫、东方次睾吸虫、猬迭宫绦虫、派氏异尖线虫和亚洲带绦虫等5种基因组DNA;相同扩增产物的CRISPR检测结果显示,仅以华支睾吸虫基因组DNA为模板的反应体系在紫外光下产生了荧光信号.PCR-CRISPR/Cas12a效果评价检测结果显示,8种不同囊蚴感染的鱼肉样品反应体系中,含有华支睾吸虫囊蚴的4管出现荧光信号.结论 本研究建立了华支睾吸虫囊蚴的PCR-CRISPR/Cas12a检测方法,该方法灵敏度高、特异性好、高度模块化,具有较好的现场应用潜力.

目的 了解上海市黄浦区市售食品中食源性寄生虫感染状况,为制订食品安全策略提供依据.方法 2015～2017年对上海市黄浦区部分农贸市场和超市的淡水类水产品、海水类水产品、肉类、贝类、牛蛙等食品,分别采用消化法、压片法、剖检法和PCR方法检测寄生虫囊蚴、幼虫和DNA.结果 共检测各类淡水类产品14种271尾(份),华支睾吸虫囊蚴、东方次睾吸虫囊蚴、棘颚口线虫、并殖吸虫囊蚴感染率均为0,腌制黄泥螺棘口吸虫囊蚴感染率为90.91％;检测海鱼27种684尾,有11种海鱼感染异尖线虫,其中小黄鱼、白姑鱼、带鱼、鲐鱼感染较高,感染率分别为80.72％、64.71％、50.00％、40.00％;检测猪肉样品33份,牛肉样品25份,未检出刚地弓形虫、旋毛虫、猪带绦虫和牛带绦虫;检测螺56份,未检出广州管圆线虫;检测牛蛙29只,未检出曼氏迭宫绦虫裂头蚴.结论 上海市黄浦区部分食品受到寄生虫感染,主要是海鱼感染异尖线虫,今后必须继续开展食品卫生宣教工作,提高群众的自我防护意识.

目的 了解烟台市售鲜活海鱼异尖线虫的感染程度,分析品种感染特征,为制定防控措施提供依据.方法 采用随机采样方法,于2016年9月-2017年6月对烟台市4区7市的餐饮环节、流通环节20类140份样本随机采样.参照《2016年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》中异尖线虫检验标准操作程序规定,运用直接解剖法检测异尖线虫.结果 烟台市售鲜活海鱼中异尖线虫的品种感染率为30.00％,阳性检出率20.00％,鱼数感染率为15.82％,平均感染强度为17.62条/尾.小黄花鱼、带鱼、比目鱼、海鳗、大黄花鱼、多宝鱼5类鱼存在异尖线虫感染,其感染强度由大到小为:带鱼＞海鳗＞比目鱼＞小黄花鱼＞多宝鱼＞大黄花鱼,平均强度分别为:27.67、25.00、16.38、14.68、5.00、2.67条/尾.鲅鱼、鲳鱼、鲭鱼、鲱鱼、海鲫鱼、马步鱼、半滑舌鳎、鳙鱼辫子鱼、沙逛鱼、海鲇鱼、木棉鱼、黄尾鲴、海鲋均未检出异尖线虫.结论 烟台市售鲜活海鱼中异尖线虫Ⅲ期幼虫感染较为普遍,感染强度较高,但未体现出鱼品种优先感染趋势,却呈现种的多样化的感染特征.建议海鱼熟食为主,不食生食(半生食)产品,以预防控制异尖线虫病发生.

目的 了解食品微生物及其致病因子在沧州市食品中的检出情况,为食源性疾病防控工作提供数据.方法 依据《河北省食品微生物及其致病因子监测技术指南(2017)》,在沧州市各县区的超市、农贸市场、餐馆及河北省内经营的网店等场所进行随机抽样,然后对所采集的样品进行沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、弯曲菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌、溶藻弧菌、致泻性大肠埃希菌、诺如病毒、甲肝病毒和异尖线虫检测.结果 2017年共采集6类食品570份样本,总检出率为24.04％(137份),其中沙门菌7份、单核细胞增生李斯特菌3份、致病性大肠埃希菌2份、副溶血弧菌45份、创伤弧菌3份、霍乱弧菌1份、溶藻弧菌5份和异尖线虫71份.在水产品及其制品、生食蔬菜和鲜活海鱼中食品微生物及其致病因子的检出率分别是55.67％、11.43％和28.86％.结论 沧州市食品存在不同程度上的污染.水产品及其制品、生食蔬菜和鲜活海鱼检出率较高,主要污染源为副溶血性弧菌、沙门菌、溶藻弧菌和异尖线虫等.为了防止食品中毒的发生给人们带来身体上和物质上的损失,食品行业的相关部门需加强监管,保证食品安全.