目的 探讨血清微小核糖核酸(miR)-223、miR-155、趋化因子配体17(CCL17)对小儿肺炎支原体(MP)感染的诊断价值及其与疾病严重程度的关系.方法 选取乐清市人民医院2020年4月-2023年4月收治的71例小儿MP感染(研究组)与72名同期健康体检儿童(对照组),根据病情程度将研究组患儿分为轻症组(46例)、重症组(25例);比较研究组与对照组血清miR-223、miR-155、CCL17水平,比较轻症组与重症组患儿血清miR-223、miR-155、CCL17水平,分析血清miR-223、miR-155、CCL17与疾病严重程度相关性,分析miR-223、miR-155、CCL17对小儿MP感染的诊断价值.结果 研究组血清miR-223、miR-155、CCL17水平较对照组高,且重症组较轻症组高(P＜0.05);血清miR-223、miR-155、CCL17水平与疾病严重程度呈正相关,三者联合检测对小儿MP感染的诊断曲线下面积(AUC)值高于单独检测(P＜0.05),且联合检测的敏感度为88.73％,特异度为88.89％.结论 小儿MP感染后,血清miR-223、miR-155、CCL17水平升高,小儿MP感染重症患儿趋势变化更为明显,血清miR-223、miR-155、CCL17水平与病情严重程度密切相关,三者联合检测对小儿MP感染具有较高的诊断价值.

目的 探讨血清微小核糖核酸-223(miR-223)、白细胞介素-6(IL-6)与复杂型热性惊厥(CFS)患儿脑损伤的关系.方法 选取124例CFS患儿(CFS组),根据是否发生脑损伤将CFS患儿分为脑损伤组39例和无脑损伤组85例,另选取46名同期健康儿童(对照组)为对照.采用实时荧光定量聚合酶链式反应与酶联免疫吸附法检测血清miR-223与IL-6水平.Spearman相关性法分析血清miR-223、IL-6在CFS患者血清中的相关性,多因素Logistic回归分析影响CFS患儿脑损伤的因素,受试者工作特征曲线分析血清miR-223、IL-6水平对CFS患儿脑损伤的预测价值.结果 与对照组比较,CFS组血清miR-223水平降低,IL-6水平升高(P均<0.05).CFS患儿血清miR-223与IL-6水平呈负相关(r=-0.800,P<0.05).124例CFS患儿脑损伤发生率为31.45%(39/124).全身抽搐、惊厥发作次数≥2次、惊厥发作持续时间≥5 min、IL-6升高为CFS患儿脑损伤的独立危险因素,miR-223升高为独立保护因素(P均<0.05).血清miR-223、IL-6水平联合预测CFS患儿脑损伤的曲线下面积为0.899,大于血清miR-223、IL-6水平单独预测的0.803、0.780(P均<0.05).结论 血清miR-223水平降低和IL-6水平升高与CFS患儿脑损伤密切相关,血清miR-223、IL-6水平联合预测CFS患儿脑损伤的价值较高.

目的 筛选类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)活动期患者和健康体检者血浆外泌体(exosomes)中差异表达的微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs),并进行生物信息学分析,以探讨血浆外泌体miRNAs在RA致病中的作用及其潜在临床应用价值.方法 选取 2023 年 01～04 月就诊于苏州大学附属第二医院风湿免疫科的 39 例RA患者作为研究对象,同时选取 39 例健康体检者作为正常对照.利用Illumina高通量测序技术检测血浆外泌体中miRNAs的表达水平,以log2(Fold Change)绝对值>1 和P值<0.05 为条件获得差异表达的miRNAs.按照P值从小到大的顺序挑选6条miRNAs进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time fluorescence PCR,qRT-PCR)验证.结果 与对照组相比,RA患者血浆外泌体中存在22条异常表达的miRNAs,4条上调,18条下调.其中,miR-30b-5p,miR-144-3p,miR-20a-5p,miR-223-5p,miR-425-3p和miR-589-5p的水平变化显著.GO和KEGG富集分析结果显示,差异表达的miRNAs可能通过调节转化生长因子-β(TGF-β)和PI3K/AKT信号通路参与疾病进展,涉及Th17 细胞分化、细胞间相互作用和蛋白磷酸化等生物学过程.qRT-PCR验证结果显示,与对照组相比,RA患者血浆外泌体miR-144-3p和miR-425-3p的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(t=3.617,3.595,均P<0.001),而miR-30b-5p,miR-223-5p,miR-589-5p和miR-20a-5p的表达差异均无统计学意义(t=1.956,1.331,1.662,1.861,均P>0.05).结论 RA患者血浆外泌体的miRNAs表达谱发生改变,可能通过TGF-β等信号通路参与疾病进展,外泌体miR-144-3p和miR-425-3p是RA疾病诊断的潜在血清学标志物.

目的 探讨微小核糖核酸-223(miR-223)在宫颈癌患者中的表达及其临床意义.方法 选取45例宫颈癌患者的宫颈癌组织为宫颈癌组,癌旁组织为对照组.采用实时荧光定量PCR技术检测miR-223的表达水平,用SPSS 22.0软件对结果进行统计学分析.结果 宫颈癌组miR-223的表达量(1.848±0.630)显著高于对照组(1.027±0.359),差异有统计学意义(t=-7.591,P＜0.05).miR-223在Ⅲ～Ⅳ期患者的表达水平(2.370±0.341)显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者的表达水平(1.301± 0.311),低分化患者的表达水平(2.346±0.444)显著高于中分化和高分化患者的表达水平(1.598±0.560),有淋巴结转移患者的表达水平(2.125±0.567)显著高于无淋巴结转移组的表达水平(1.530±0.554),差异均有统计学意义(t=10.971、-4.508、3.558,均P＜0.05).iniR-223对宫颈癌诊断的曲线下面积为0.825,具有较高的诊断效能.Kaplan-Meier生存曲线表明,与高表达组相比,miR-223低表达组患者的生存率明显提高(P＜0.05).结论 miR-223在宫颈癌患者中表达升高,可作为宫颈癌诊断的分子生物学标志物.

目的 观察2型糖尿病(T2DM)合并急性脑梗死(ACI)患者血清微小核糖核酸(miR)-223-3p、miR-134-5p水平变化,并分析其与氧化应激损伤及预后的关系.方法 选择T2DM合并ACI患者123例纳入研究组,选择同期T2DM患者和体检健康者各50例分别纳入T2DM对照组、健康对照组.检测三组血清miR-223-3p、miR-134-5p及氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)],分析研究组血清miR-223-3p、miR-134-5p水平与氧化应激指标的相关性.研究组患者接受治疗后随访3个月,采用改良Rankin量表将患者分为预后良好亚组与预后不良亚组,采用多因素Logistic回归模型分析T2DM合并ACI患者预后不良的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-223-3p、miR-134-5p对T2DM合并ACI患者预后不良的预测价值.结果 健康对照组、T2DM对照组、研究组血清miR-223-3p、SOD、GSH-Px水平依次下降,血清miR-134-5p、MDA水平依次上升(P均<0.05).研究组患者血清miR-223-3p与SOD、GSH-Px呈正相关,与MDA呈负相关(P均<0.05);血清miR-134-5p与MDA呈正相关,与SOD、GSH-Px呈负相关(P均<0.05).多因素Logistic回归分析显示,入院时NIHSS评分偏高、miR-134-5p偏高、MDA偏高是T2DM合并ACI患者预后不良的危险因素(P均<0.05),miR-223-3p偏高、SOD偏高、GSH-Px偏高为保护因素(P均<0.05).血清miR-223-3p、miR-134-5p联合预测T2DM合并ACI患者预后不良的ROC曲线下面积为0.862,高于单独指标预测.结论 T2DM合并ACI患者血清miR-223-3p水平降低、miR-134-5p水平增高,血清miR-223-3p、miR-134-5p水平与氧化应激损伤指标及预后关系密切,miR-223-3p、miR-134-5p联合检测有助于预测T2DM合并ACI患者的短期预后.

目的 阐明微小核糖核酸(Micro RNA,miR)-223-3p在蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemor-rhage,SAH)后影响早期脑损伤(Early brain injury,EBI)中的作用及其潜在机制.方法 建立SAH大鼠模型,评估神经行为学功能、血脑屏障通透性、脑含水量、神经元凋亡和炎症因子水平;氧合血红蛋白诱导SAH细胞模型;测定细胞凋亡率、乳酸脱氢酶、活性氧水平;检测miR-452-3p在SAH大鼠模型和氧血红蛋白诱导SAH细胞模型中的表达水平;检测核因子κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)/细胞间黏附分子-1(Intercellu-lar cell adhesion molecule-1,ICAM-1)信号通路相关蛋白的表达水平.结果 SAH大鼠中miR-223-3p表达水平上调,降低神经功能评分,增加血脑屏障通透性、脑含水量和神经元凋亡,促炎因子表达水平升高,并降低抗炎因子水平,NF-κB/ICAM-1信号通路被激活;SAH增加了氧血红蛋白处理的神经元凋亡率、乳酸脱氢酶释放和活性氧水平;miR-223-3p的抑制逆转了上述趋势.结论 抑制miR-223-3p表达可能通过NF-κB/ICAM-1信号通路来改善SAH中EBI和炎症反应.

目的 探讨下肢开放性骨折术后感染患者外周血微小核糖核酸-223(miR-223)、果蝇同源信号蛋白(Smad)表达及其诊断价值.方法 选取2018年12月-2021年12月建德市第一人民医院骨科收治的因下肢开放性骨折行内固定术患者350例为研究对象,根据术后感染情况分为感染组32例和未感染组318例.无菌采集伤口周围分泌物,进行病原菌分离鉴定.术后2 d采集空腹静脉血,检测炎症因子C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)水平和miR-223、Smad通路蛋白及其上下游因子转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果 下肢开放性骨折患者术后感染率为9.14％,分离病原菌以革兰阳性菌(63.16％)为主;两组年龄、合并糖尿病、术中出血量、术后引流量和卧床时间比较有统计学差异(P＜0.05);感染组术后 IL-6、TNF-α、CRP 和 PCT 水平均高于未感染组(P＜0.05),miR-223、Smad1、Smad2、Smad3和TGF-β、VEGF水平均高于未感染组(P＜0.05),且预测下肢开放性骨折术后感染的曲线下面积(AUC)均＞0.7,预测效能较高.结论 下肢开放性骨折患者术后感染可引起外周血miR-223、Smad通路蛋白异常表达,并且对术后感染具有较好的预测价值.

目的 探讨解毒复正汤(JieduFuzhengdecoction,JDFZ)通过影响微小核糖核酸-223-3p(Mircro ribonucleic acid-223-3p,miR-223-3p)靶向调控转化生长因子β受体3(Transforming growth factorβ Receptor 3,TGFBR3)的表达及其对肺癌细胞迁移的影响.方法 利用RT-qPCR技术检测肺腺癌患者癌组织及癌旁组织、肺腺癌患者及健康人外周血清中miR-223-3p表达水平的差异;并检测不同种类的NSCLC细胞系肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)以及人肺上皮细胞BEAS-2B中miR-223-3p的本底表达量,从组织、血浆及细胞3个维度验证miR-223-3p的差异性.利用生物信息学网站重叠分析,初步预测到miR-223-3p与TGFBR33'UTR具有潜在的结合位点序列.接着运用双荧光素酶报告基因实验验证miR-223-3p与TGFBR3的靶向关系.体外培养肺癌A549细胞,采用脂质体法分别将miR-223-3p-过表达序列(miR-223-3p-mimics)及携带TGFBR3全基因的重组载体(Over-expression-TGFBR3,OE-TGFBR3)分别转染至肺癌细胞,以转入无关序列的模拟剂(Negative control-mimics,NC)作为对照组,收集各组稳转细胞,Transwell小室检测转染处理后及JDFZ作用后的细胞迁移能力;收集各组细胞蛋白,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测细胞中EMT相关蛋白的表达.结果 肺癌组织中miR-223-3p的表达量显著低于癌旁组织;肺癌患者血浆miR-223-3p表达水平明显低于健康正常人.不同种类的NSCLC细胞系肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)中的miR-223-3p表达量亦低于正常人肺上皮细胞BEAS-2B.利用生物信息学网站及荧光素酶报告基因实验证实了miR-223-3p与TGFBR3的靶向调控关系.与miR-223-3p NC组对比,miR-223-3p mimics组和miR-223-3p mimics+OE-TGFBR3组的细胞迁移能力均下降(P<0.05),上调TGFBR3和加入解毒复正汤均能有效增强miR-223-3p对A549细胞迁移的负向调节作用;Westenblot结果 发现,与miR-223-3p NC组对比,miR-223-3p mimics组和miR-223-3p mimics+OE-TGFBR3组E-Cadherin的表达水平上调,N-Cadherin及Vimentin的表达水平下升(P<0.05),两组均在不同程度上抑制EMT的发生;上调TGFBR3和加入解毒复正汤作用能有效增加miR-223-3p对细胞迁移相关蛋白的负向调节作用(P<0.05).结论 解毒复正汤对肺癌A549细胞的侵袭迁移有抑制作用,其机制可能是通过调节miR-223-3p并靶向调控TGFBR3及其下游EMT相关指标的表达来实现的.

目的 分析外周血微小核糖核酸(miR)-451与miR-223在脓毒症患者中的变化及其对预后的评估价值.方法 回顾性收集我院2020年1月至2022年12月收入的137例脓毒症患者临床资料,设为观察组,根据其28 d内死亡、存活情况将其分为死亡组(30例)、存活组(107例),另选同时间段来院体检健康者46例为对照组.所有受试者均于入院当日测外周血miR-451、miR-223水平(对照组于体检当日).比较不同受试者miR-451、miR-223水平差异,采用二元logistics回归分析影响脓毒症患者预后的因素,建立受试者工作特征(ROC)曲线,评估miR-451、miR-223水平预测脓毒症患者预后的价值.结果 与对照组相比,观察组患者外周血miR-451与miR-223水平明显更高(P＜0.05).两组患者年龄、尿素氮、血肌酐、C-反应蛋白、APACHEⅡ评分、miR-451、miR-223有显著差异(P＜0.05),与存活组相比,死亡组年龄更高、尿素氮、血肌酐、C-反应蛋白、APACHEⅡ评分、外周血miR-451与miR-223水平明显更高(P＜0.05)o Logistic回归分析结果显示,血肌酐、APACHE Ⅱ评分、miR-451、miR-223是影响脓毒症患者预后不良的因素(P＜0.05).相关性分析结果显示,脓毒症患者APACHEⅡ评分与miR-451呈负相关性,与miR-223水平呈正相关性(r=-0.978、0.635,P＜0.05),APACHEⅡ 评分与 miR-451、miR-223 关系紧密,APACHEⅡ 评分与 miR-451、miR-223关系紧密.ROC曲线结果显示,miR-451、miR-223单独、联合预测预后曲线下面积分别为0.829、0.755、0.947,特异度为0.813、0.888、0.925,敏感度为0.733、0.807、0.657,预测价值较好.结论 脓毒症患者miR-451、miR-223 水平存在异常表达,miR-451、miR-223是影响患者预后的因素,对预测脓毒症患者预后情况有一定参考价值.

目的 探讨miR-326及miR-223在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)及血浆中的表达水平及其临床意义.方法 招募2015年1月-2017年6月湘雅医院及儋州市人民医院152例RA患者、65例骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者和65例健康体检者.采用RT-PCR检测研究对象PBMC及血浆miR-326及miR-223表达水平.应用ROC曲线评价PBMC及血浆中miR-326、miR-223、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)对RA的诊断价值,Pearson相关性检验分析RA患者PBMC及血浆中miR-326、miR-223与RF、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)的相关性.结果 RA组PBMC及血浆中miR-326及miR-223表达水平均明显高于OA组和对照组[PBMC/血浆miR-326(2-△△Ct):0.12±0.05 vs 0.05±0.03和0.04±0.03,3.56±1.04 vs 1.24±0.36和1.13±0.32;PBMC/血浆miR-223(2-△△Ct):0.42±0.13 vs 0.21±0.08和0.18±0.06,6.95±2.16 vs 5.13±1.42和4.86±1.25,P均＜0.05].高活动组PBMC及血浆中miR-326及miR-223表达水平均明显高于低活动组[PBMC/血浆miR-326(2-△△Ct):0.18±0.09 ys 0.05±0.04,5.62±1.58 vs 1.43±0.52;PBMC/血浆miR-223(2-△△Ct):0.67±0.24 vs 0.23±0.12,8.28±2.63 vs 5.47±1.48,P均＜0.01].PBMC中miR-326、miR-223、RF及三项联合诊断RA的AUC(95％ CI)分别为0.805(0.745～ 0.867)、0.824(0.761～0.893)、0.762(0.697 ～ 0.828)、0.893(0.825 ～ 0.961),血浆中四项指标诊断RA的AUC分别为0.882(0.817 ～ 0.953)、0.837(0.775 ～ 0.906)、0.852(0.786 ～ 0.918)、0.936(0.868～0.996).相关分析显示,RA组PBMC、血浆中miR-326及miR-223与RF、CRP均呈正相关(P＜0.05),血浆中miR-326及miR-223与ESR呈正相关(P＜0.05),血浆与PBMC中miR-326及miR-223均呈正相关(P＜0.01).结论 miR-326及miR-223在RA患者PBMC、血浆中异常高表达,且与RA活动度相关,可作为RA诊断的生物学标记物.