目的:分析微小RNA-203(microRNA-203，miR-203)和成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factors-2，FGF-2)在儿童血管瘤(hemangioma of infancy，HOI)中的表达水平并探讨其临床意义。方法:选取2016年3月至2017年8月收治的55例HOI患者为HOI组，并将其分为增殖期(31例)与消退期(24例)，另以术后正常组织标本为对照组(34例)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组miR-203与FGF-2 mRNA表达水平，免疫组织化学法检测FGF-2蛋白表达情况。观察的临床指标包括血管生长素(angiogenin，ANG)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、糖皮质激素受体α(glucocorticoid receptor α，GRα)、糖皮质激素受体β(glucocorticoid receptor β，GRβ)。Pearson法比较分析HOI组患儿各指标间的相关性；Logistic多因素回归法分析HOI发生的相关影响因素。结果:与对照组(1.01±0.15)相比，HOI组miR-203(0.73±0.24)表达水平显著降低( P<0.05)，且增殖期(0.72±0.21)显著高于消退期(0.59±0.19)( P<0.05)；HOI组FGF-2 mRNA(2.38±0.74)表达水平显著高于对照组(1.02±0.14)( P<0.05)，且消退期(2.37±0.79)显著高于增殖期(2.03±0.68)( P<0.05)；Pearson分析显示miR-203与FGF-2、ANG、VEGF、bFGF呈显著负相关( P<0.05)，而FGF-2与之呈显著正相关( P<0.05)；Logistic分析显示miR-203与FGF-2表达水平是HOI发生的影响因素。 结论:miR-203在HOI中低表达，而FGF-2呈高表达，两者在HOI分期中表达变化比较差异显著，对临床诊断HOI及治疗具有重要意义。

目的:探讨血清微小核糖核酸(miR)-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平与股骨颈骨折患者术后骨折延迟愈合的关系及对术后骨折延迟愈合的预测价值.方法:选择2020年1月～2022年10月在徐州医科大学附属医院行内固定治疗的292例新鲜股骨颈骨折患者为研究对象.于术后4周复查时,检测患者血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平;并根据其骨折愈合情况分为延迟组(n=36)和愈合组(n=256).采用多因素Logistic回归分析股骨颈骨折患者术后骨折延迟愈合的影响因素.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p对股骨颈骨折患者术后骨折延迟愈合的预测价值.结果:术后4个月复查时,骨折延迟愈合发生率为12.33％.两组年龄、吸烟史、合并糖尿病组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).愈合组血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平均高于延迟组(P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁、合并糖尿病、血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p水平降低是股骨颈骨折患者术后骨折延迟愈合的独立危险因素(P＜0.05).ROC曲线结果显示,三者联合检测的曲线下面积(AUC)(0.95CI)为0.841(0.738～0.936),高于各指标单独应用时的AUC,三者联合检测的灵敏度和特异度亦高于单一指标检测.结论:血清miR-203a、miR-31-5p、miR-19b-1-5p在股骨颈骨折术后骨折延迟愈合患者中呈低表达,是骨折延迟愈合的独立危险因素,三者联合检测对股骨颈骨折患者骨折延迟愈合具有较高的预测价值.

目的 观察微小RNA(miR)-203a-3p对食管癌细胞侵袭、迁移能力的影响并分析其与Survivin的靶向调控关系.方法 收集对数生长期的食管癌细胞TE-1及正常食管黏膜上皮细胞HEEC,RT-qPCR法检测细胞miR-203a-3p、Survivin mRNA.双荧光素酶报告基因检测法分析miR-203a-3p与Survivin的靶向调控关系.将TE-1细胞分为对照组、miR-203a-3p模拟组、miR-203a-3p抑制组及阴性对照组.miR-203a-3p模拟组转染miR-203a-3p mimic,miR-203a-3p抑制组转染miR-203a-3p inhibitor,阴性对照组转染miR-203a-3p NC,对照组不进行转染,RT-qPCR法验证转染效率.采用MTT法检测转染后2、12、24、36、48 h的细胞活力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力.结果 食管癌细胞中miR-203a-3p mRNA表达低于正常食管黏膜上皮细胞,Survivin mRNA表达高于正常食管黏膜上皮细胞(P均<0.05).TargetScan数据库分析显示,Survivin基因在3′UTR端存在7个连续的可以与miR-203a-3p互补的核苷酸序列;双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染Survivin-WT和miR-203a-3p mimic质粒的TE-1细胞荧光素酶活性低于其他细胞(P<0.05).培养12、24、36、48 h时细胞活力miR-203a-3p抑制组>对照组、阴性对照组>miR-203a-3p模拟组(P均<0.05);细胞迁移距离及侵袭细胞数miR-203a-3p抑制组>对照组、阴性对照组>miR-203a-3p模拟组(P均<0.05).结论 miR-203a-3p高表达可抑制食管癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与靶向负调控Survivin有关.

目的 分析微小核糖核酸-203(miRNA-203)联合肿瘤生长因子(TSGF)、癌胚抗原(CEA)检测在胃癌诊断中的应用.方法 选择2015年7月至2016年7月来该院就诊的40例胃癌患者为观察组,选择同期30例健康志愿者为对照组,分析研究对象的外周血清CEA、miRNA-203、TSGF 水平.结果 观察组患者miRNA-203相对表达量为(0.26 ± 0.16)U/mL,明显低于对照组的(0.84 ± 0.09)U/mL(P<0.05);观察组TSGF、CEA表达水平及阳性率明显高于对照组(P<0.05).miRNA-203相对表达量随分期递增而减少(F=5.60,P=0.0075).TSGF、CEA表达水平随分期递增而增加(P<0.05);不同分期CEA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),而不同分期TSGF阳性率差异无统计学意义(P>0.05).miRNA-203联合 TSGF、CEA检测的敏感度为95.00%,明显高于单项检测或者2项指标联合检测结果,差异有统计学意义(P< 0.05).miRNA-203联合TSGF、CEA检测的诊断符合率为97.50%,特异度为90.00%,优于单项或者两项联合结果(P<0.05).结论 采用miRNA-203联合TSGF、CEA检测,可以及时准确诊断胃癌,具有较高的特异度与诊断符合率,在临床上有较高的诊断价值.

目的:探讨胃癌组织中微小核糖核酸(miR)-203、miR-4317的表达情况及其临床意义.方法:选择2014年1月至2016年12月我院收治的胃癌患者92例,应用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测患者胃癌组织及其相应癌旁组织中miR-203、miR-4317的表达情况,分析miR-203、miR-4317表达与胃癌患者临床病理参数的关系,所有患者随访3年,根据miR-203、miR-4317在胃癌组织中的中位表达量将患者分为miR-203高表达组(49例)、miR-203低表达组(43例)、miR-4317高表达组(51例)、miR-4317低表达组(41例).分析miR-203、miR-4317与预后的关系及预后的影响因素.结果:胃癌组织中miR-203、miR-4317相对表达量显著低于癌旁组织(P＜0.05).不同性别、年龄、肿瘤大小胃癌患者胃癌组织中miR-203、miR-4317相对表达量比较无统计学差异(P＞0.05),中低分化、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移胃癌患者胃癌组织中miR-203、miR-4317相对表达量显著低于高分化、TNM分期为Ⅰ?Ⅱ期、无淋巴结转移胃癌患者(P＜0.05).miR-203高表达组3年生存率显著高于miR-203低表达组(P＜0.05),miR-4317高表达组3年生存率显著高于miR-4317低表达组(P＜0.05).COX多因素分析显示,中低分化、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、miR-203低表达、miR-4317低表达是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P＜0.05).结论:胃癌组织中miR-203、miR-4317异常低表达,其水平与胃癌预后密切相关,且胃癌患者预后与分化程度、临床分期、淋巴结转移等相关.

目的 探讨miR-203、miR-494及尿微量清蛋白(mAlb)/肌酐(Cr)对儿童急性肾损伤(AKI)的预测价值.方法 选择2017年1月-2020年3月该院PICU收治的137例脓毒症患儿作为研究对象,根据是否发生AKI将患儿分为AKI组和非AKI组,观察两组患儿miR-203、miR-494、尿mAlb/Cr、炎性指标及肝肾功能等水平,采用受试者工作曲线(ROC)计算miR-203、miR-494、尿mAlb/Cr及CysC对AKI的预测价值.结果 AKI组miR-203、miR-494及尿mAlb/Cr均高于AKI组患者,差异均有统计学意义(均P＜0.05).AKI患儿入院AST、BUN及Scr水平高于非AKI患儿,但差异无统计学意义(P＞0.05),AKI组CysC水平均高于非AKI组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).miR-203、miR-494、CysC及尿mAlb/Cr预测AKI的AUC分别为0.802、0.845、0.762及0.857.miR-203、miR-494、CysC及尿mAlb/Cr不同联合方式预测AKI价值为:4种指标之一阳性作为标准诊断的特异性为灵敏度为100％,四者均阳性作为标准预测AKI的特异度为98.73％,均高于单一预测的相关值.结论 miR-203、miR-494及尿mAlb/Cr预测脓毒症患儿AKI具有一定临床价值,和CysC通过不同组合方式有助于早期确定或排除AKI,对指导脓毒症患儿的早期干预方式具有重要意义.

研究表明[1],90％以上的卵巢恶性肿瘤为上皮性卵巢癌(EOC),若EOC患者在疾病早期即可得到诊断,可通过手术切除及放化疗显著提升患者远期生存率,90％患者可得到治愈.临床上常用的卵巢癌肿瘤标志物为糖类抗原 125 (CA125),但CA125在晚期卵巢癌患者中明显升高,在部分早期患者中无明显升高,且在子宫肌瘤、子宫内膜异位症、盆腔炎症性疾病及卵巢良性肿瘤等疾病中也存在假阳性的情况.近年来,微小核糖核酸(miRNA)在各类肿瘤的发生、发展中的作用引起广泛重视,miR-203为一种特异性上皮miRNA,研究表明[2],在不同类型肿瘤患者中,miR-203发挥着抑癌或促癌截然不同的作用.本研究对卵巢癌患者血清miR-203水平变化及其通过靶向SOCS3调节卵巢癌细胞的增殖和凋亡进行了探究,以期探究卵巢癌细胞增殖分化机制,为卵巢癌患者的临床诊断和治疗提供有效依据,具体如下.

目的 探究微小核糖核酸(microRNAs,miRNA,miR)-203a-3p对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其潜在分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测HCC细胞、人正常肝细胞以及临床HCC组织中miR-203a-3p相对表达;采用细胞增殖实验、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测miR-203a-3p对HCC细胞增殖、迁移、侵袭的影响;生物信息学网站预测miR-203a-3p的潜在靶基因(GLS1),双荧光素酶实验进行验证;探究HCC细胞对谷氨酰胺的依赖性及抑制谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)对HCC细胞增殖、迁移、侵袭的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin,p-GSK-3β和c-Myc表达.结果 HCC癌组织中miR-203a-3p(0.32±0.07)表达明显低于癌旁正常组织(1.02±0.03),差异有统计学意义(t=41.105,P<0.001);HCC细胞HepG2(0.34±0.05),HCCLM3(0.58±0.06),Huh7(0.43±0.05),Hep3B(0.29±0.04)中miR-203a-3p相对表达水平明显低于人正常肝细胞LO2(1.01±0.02)中miR-203a-3p表达,差异有统计学意义(F=119.080,P<0.001).与Blank组相比,miR-203a-3p过表达组HCC细胞增殖(0.61±0.05 vs 1.24±0.06),迁移率(21.43％±2.01％vs 60.22％±3.14％)及侵袭能力(76.54±13.56 vs 221.06±16.54)均明显降低,差异有统计学意义(t=14.849,13.900,10.562,均P<0.001).GLS1是miR-203a-3p的靶基因,miR-203a-3p靶向负调控GLS1表达.HCC细胞中GLS1高表达呈现高酶活性,HCC细胞对谷氨酰胺存在明显依赖性.GLS1抑制组α-KG,谷氨酸水平均较Blank组和siRNA-NC组明显降低,差异有统计学意义(F=64.754,35.627,均P<0.001).GLS1抑制组细胞增殖(0.59±0.04)、迁移率(30.15％±1.02％)和侵袭能力(69.59±15.74)较Blank组明显降低(1.29±0.07,59.67％±1.45％,202.14±13.52),差异均有统计学意义(t=16.499,16.278,11.215,均P<0.001).miR-203a-3p过表达和GLS1表达抑制明显抑制了Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin,p-GSK-3β和c-Myc的表达,差异均有统计学意义(t=11.129～28.213,均P<0.001).转染GLS1可逆转miR-203a-3p对HCC细胞生物学行为及Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白表达的抑制作用.结论 HCC中miR-203a-3p显著低表达,其过表达能够抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭,可能与GLS1调控谷氨酰胺代谢及miR-203a-3p靶向GLS1调控Wnt/β-catenin信号通路活性有关.

目的 探讨微小核糖核酸(miRNA)-125b联合miRNA-133a对脓毒症患者急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的早期诊断及预后评估的临床价值.方法 回顾性分析2019年1月至2021年12月在榆林市第一医院接受治疗的203例脓毒症患者的临床资料,将82例合并ARDS的患者作为观察组,121例未合并ARDS的脓毒症患者作为脓毒症对照组,另选择同期健康体检者90例作为健康对照组.收集各组基本临床资料并测定血清miRNA-125b和miRNA-133a水平;分析两指标对脓毒症患者ARDS的早期诊断价值及脓毒症患者合并ARDS的影响因素.结果 (1)miRNA-125b和miRNA-133a的相对表达量均呈观察组＞脓毒症对照组＞健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)ROC曲线分析显示,miRNA-125b、miRNA-133a以及二者联合对脓毒症合并ARDS的诊断效能参数分别如下:最佳临界值为2.622(miR-125b)、2.317(miR-133a),敏感度为84.15％、65.85％、84.15％,特异度为66.12％、83.47％、82.64％,ROC曲线下面积(AUC)为0.818、0.783、0.877;二者联合诊断的AUC优于各自单一诊断(与 miRNA-125b 比较,Z=2.821,P=0.005;与 miRNA-133a 比较,Z=3.521,P＜0.01).(3)Logistic 回归结果显示,APACHE Ⅱ评分≥25 分(OR=5.960)、脓毒症休克(OR=3.511)、miRNA-125b 相对表达量≥2.622(OR=2.542)和miRNA-133a相对表达量≥2.317(OR=2.781)是脓毒症合并ARDS的独立危险因素(P＜0.01).结论 血清miRNA-125b联合miRNA-133a在脓毒症合并ARDS中具有一定的临床价值,可以作为患者早期诊断的重要指标.