目的:研究miR-378在宫颈癌组织中的表达水平，并探讨其对宫颈癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:收集2012年1月至2016年1月在山东大学齐鲁医院妇科检查的宫颈组织标本185例。采用RT-qPCR检测miR-378在宫颈组织和细胞中的表达水平；用Western Blot检测细胞中不同癌基因ATG12、CCND1和pRb的表达水平；应用BrdU细胞增殖检测和Transwell侵袭实验检测细胞增殖和侵袭情况；运用Target Scan预测并筛选miR-378的基因靶点，并用双荧光素酶报告系统进行验证。结果:miR-378在宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅲ病变组织和宫颈癌组织中的表达水平明显高于正常宫颈组织（ F=103.091， t=9.381、8.936，均 P<0.05）；miR-378在淋巴结转移阳性的宫颈癌组织中的表达水平明显高于淋巴结转移阴性的宫颈癌组织（ t=1.007， P<0.01）。miR-378的过表达显著促进了C-33A细胞的迁移和侵袭（ t=5.285， P<0.05），而miR-378的低表达则显著抑制HeLa细胞的迁移和侵袭能力（ t=2.941， P<0.05）。C-33A细胞中miR-378的过表达显著降低了ATG12、CCND1和pRb的表达水平（ t=1.382、1.431、2.086，均 P<0.05）；HeLa细胞中miR-378的低表达可增加ATG12、CCND1和pRb的表达水平（ t=3.961、3.062、2.894，均 P<0.05）。 结论:miR-378能显著促进宫颈癌的转移，ATG12作为miR-378的直接作用靶点，可为宫颈癌患者病理学和治疗靶点的分子机制提供新的见解。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-185在骨肉瘤患者中的表达，探讨其在骨肉瘤诊断及预后中的价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测54对骨肉瘤患者和健康对照者(性别和年龄匹配)的miR-185表达。根据miR-185的中位数(2.381)，将所有患者分为两组：高miR-185表达组(21)和低miR-185表达组(33)。然后分析miR-185表达与患者临床病理因素的相关性。血清样本在郑州大学第一附属医院2012年1月1日至2014年12月份从接受手术但未接受化学疗法或放射疗法的患者中收集，并分析miR-185表达与骨肉瘤患者的临床病理特征和总体生存率的关系。使用Manne Whitney U检验比较骨肉瘤患者和正常对照组血清miR-185水平的差异。对数秩检验和Kaplan-Meier方法评估骨肉瘤患者的总体生存率。采用Cox回归和多因素分析评估预后价值。 结果:与正常对照组比较，骨肉瘤患者血清中的miR-185表达显著降低( U＝373.000, P<0.05)，差异有统计学意义。miR-185的低表达与较大的肿瘤体积(直径<5 cm比直径≥5 cm的miR-185：3.100±0.359比1.806±0.226， P<0.01)，较高的TNM分期(一、二期比三、四期的miR-185：2.986±1.562比1.566±1.305， P<0.01)和远处转移(未转移比转移的miR-185：3.014±1.660比1.590±1.148， P<0.01)密切相关，差异有统计学意义。Kaplan-Meier曲线生存分析和对数秩检验显示，miR-185的低表达与骨肉瘤患者的总生存率降低有关。此外，多变量分析表明，miR-185表达降低是骨肉瘤患者总体生存的独立预后生物标志物( P<0.01)，差异有统计学意义。 结论:血清miR-185可作为一种肿瘤抑制因子，有助于骨肉瘤患者的诊断、预后。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:观察前列腺癌(PC)细胞(DU145)中miR-185对活化素受体样激酶4(ALK4)基因的调控作用，及其对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:收集河北省中医院泌尿外科2019年1月至2020年6月20例前列腺癌及其癌旁组织标本。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测前列腺癌组织中miR-185及ALK4基因的表达水平；将miR-185模拟物及阴性对照转染至DU145细胞中，使用双荧光素酶报告基因实验研究miR-185与ALK4基因间的关系；随后，将ALK4过表达质粒与miR-185模拟物共转染至DU145细胞中，采用Transwell细胞侵袭实验观察miR-185和ALK4表达水平对前列腺癌细胞侵袭的影响，两组间比较采用 t检验。 结果:荧光定量PCR实验结果证明，miR-185在前列腺癌组织的表达水平(0.43±0.14)低于癌旁组织(1.03±0.06， t＝6.736， P<0.05)；相关性分析结果显示，miR-185与ALK4的表达呈负相关( r＝-0.463， P<0.05)；双荧光素酶报告基因分析实验表明，miR-185模拟物转染组荧光素酶活性(0.38±0.07)低于对照组(1.01±0.03， t＝13.676， P<0.05)；前列腺癌细胞中转染miR-185模拟物组侵袭细胞数[(125.33±13.01)个]显著低于对照组细胞数[(342.33±11.93)个， t＝21.290， P<0.05]；而与ALK4过表达质粒共转染后，miR-185模拟物转染组(322.00±18.33)与对照组(332.33±17.95)比较差异无统计学意义( t＝0.698， P>0.05)。 结论:miR-185可通过靶向抑制ALK4基因抑制前列腺癌细胞侵袭能力。

目的:观察低氧微环境对胃癌细胞增殖、转移功能的影响，并探讨其相关的分子学机制。方法:细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)、Transwell法检测SGC-7901细胞经低氧处理后的增殖、迁移及侵袭能力，应用高通量测序(Illumina Hiseq)对低氧处理后的微小RNA(miRNA，miR)差异基因进行检测；实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法、干扰低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达法验证低氧环境下HIF-1α诱导miR-210的能力；后在正常胃黏膜组织、胃癌及癌周组织中检测miR-210的表达，分析其表达量与患者临床病理学特征之间相关性；接下来进一步在体外上调/抑制miR-210后，应用CCK-8、Transwell检测miR-210对胃癌细胞株AGS、SGC-7901增殖、迁移及侵袭能力的影响；后应用生物信息分析、报告基因实验、蛋白质免疫印迹(Western blot)及靶基因干扰实验探讨其发挥功能的具体分子学机制。两组间比较采用 t检验。 结果:与常氧组比较，低氧可明显促进SGC-7901细胞的增殖(0.43±0.13比0.56±0.17， t＝5.43， P<0.05)、迁移(250±28比390±30， t＝10.28， P<0.05)及侵袭能力(220±40比310±45， t＝9.74， P<0.05)；miR-210低氧处理后显著上调的差异miRNA之一；低氧在胃癌细胞中可通过HIF-1α诱导miR-210的表达；胃癌组织中异常表达的miR-210与肿瘤的大小及临床分期相关( P<0.05)；与对照组比较，过表达miR-210可明显促进AGS与SGC-7901细胞的增殖(0.58±0.16比0.73±0.21， t＝6.58， P<0.05)、(0.53±0.11比0.63±0.25， t＝7.18， P<0.05)，迁移(200±20比295±35， t＝8.36， P<0.05)、(185±20比260±10， t＝7.54， P<0.05)，及侵袭(150±25比215±30， t＝5.87， P<0.05)、(145±25比190±30， t＝4.37， P<0.05)能力，而其拮抗剂却显著抑制胃癌细胞的上述恶性能力；最后Western blot等研究表明磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)是miR-210在胃癌细胞中发挥促癌功能的靶基因。 结论:低氧环境下HIF-1α介导miR-210可通过靶向调控PTEN的表达促进胃癌细胞的增殖及转移能力。

目的:探讨circABCC4对胰腺癌细胞发生发展的影响及分子机制。方法:收集2020年10月至2023年10月郑州大学第一附属医院收治的39例胰腺癌患者的癌组织及癌旁组织，用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circABCC4和微小RNA(miR)-185-5p的表达水平；双荧光素酶报告实验检测circABCC4和miR-185-5p的靶向关系。将胰腺癌细胞SW1990分为si-circABCC4组、si-NC组、miR-185-5p mimic组、miR-NC组、si-circABCC4＋miR-185-5p inhibitor组、si-circABCC4＋抗miR-NC组；四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率；克隆形成实验检测细胞克隆形成数；流式细胞术检测细胞凋亡率；蛋白质印迹法检测蛋白表达；Transwell检测细胞迁移和侵袭数。两组比较行 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:胰腺癌组织中circABCC4表达水平高于癌旁组织(3.13±0.29比1.03±0.11， t＝42.283， P<0.05)，miR-185-5p表达水平低于癌旁组织(0.45±0.08比1.09±0.17， t＝21.273， P<0.05)。circABCC4靶向结合并负调控miR-185-5p表达( P<0.05)。si-circABCC4组SW1990细胞抑制率[(47.13±2.23)%比0， F＝2 376.899， P<0.05]、凋亡率[(18.94±1.08)%比(7.33±0.72)%， F＝409.972， P<0.05)和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关的x蛋白(bax)表达水平(0.55±0.04比0.21±0.03， F＝310.551， P<0.05)高于si-NC组，克隆形成数[(67.44±3.44)个比(112.00±5.94)个， F＝296.029， P<0.05]、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)表达水平(0.27±0.03比0.67±0.05， F＝236.571， P<0.05)低于si-NC组。miR-185-5p mimic组SW1990细胞抑制率[(55.52±2.30)%比(0.02±0.01)%， F＝2 376.899， P<0.05]、凋亡率[(22.59±1.45)%比(7.11±0.55)%， F＝409.972， P<0.05]和bax表达水平(0.65±0.04比0.20±0.02， F＝310.551， P<0.05)高于miR-NC组，克隆形成数[(54.11±2.23)个比(112.11±6.15)个， F＝296.029， P<0.05]、bcl-2表达水平(0.17±0.02比0.67±0.07， F＝236.571， P<0.05)低于miR-NC组；si-circABCC4＋miR-185-5p inhibitor组SW1990细胞抑制率[(19.13±0.99)%比(47.09±1.73)%， F＝2 376.899， P<0.05]、凋亡率[(10.25±0.57)%比(18.78±1.25)%， F＝409.972， P<0.05]和bax表达水平(0.29±0.03比0.57±0.04， F＝310.551， P<0.05)低于si-circABCC4＋抗miR-NC组，克隆形成数[(96.67±4.45)个比(65.78±2.86)个， F＝296.029， P<0.05]、bcl-2表达水平(0.52±0.04比0.26±0.03， F＝236.571， P<0.05)高于si-circABCC4＋抗miR-NC组。si-circABCC4组SW1990细胞迁移[(97.44±3.65)个比(182.56±10.12)个， F＝576.998， P<0.05]和侵袭数[(85.56±3.56)个比(150.56±6.50)个， F＝480.065， P<0.05]低于si-NC组；miR-185-5p mimic组SW1990细胞迁移[(74.78±3.22)个比(185.56±7.21)个， F＝576.998， P<0.05]和侵袭数[(71.89±4.18)个比(149.67±6.02)个， F＝480.065， P<0.05]低于miR-NC组；si-circABCC4＋miR-185-5p inhibitor组SW1990细胞迁移[(158.67±6.15)个比(98.11±2.00)个， F＝576.998， P<0.05]和侵袭数[(137.89±5.32)个比(85.00±3.40)个， F＝480.065， P<0.05]高于si-circABCC4＋抗miR-NC组。 结论:干扰circABCC4通过上调miR-185-5p抑制胰腺癌细胞的发生发展。

目的 探讨血清miR-181c联合神经损伤标志物水平对脑出血改良大骨瓣减压术后疗效及认知功能的预测价值.方法 回顾性分析 2016 年 1 月-2019 年 6 月邢台市第三医院收治的 568 例脑出血接受改良大骨瓣减压术治疗患者的临床资料,根据脑出血患者术后疗效分为无效组 52 例和有效组 516 例,比较各组研究对象血清miR-181c、神经损伤标志物[血清铁蛋白(SF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)]表达水平.运用简易精神状态检查量表(MMSE)评估患者术后认知功能,并分析其与血清miR-181c、SF以及GFAP水平的相关性.采用受试者工作特征曲线(ROC)分析三者水平对术后认知功能的诊断价值.结果 术后血肿量、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分以及血清miR-181c、SF、GFAP 水平呈降低趋势,其中有效组各指标显著低于无效组(P＜0.001).术后 1 个月,185 例(32.57%)患者出现认知功能障碍,平均MMSE评分为(21.35±2.10)分,Pearson相关性结果显示miR-181c、SF、GFAP表达水平均与MMSE评分呈负相关性(r=-0.641,-0.498,-0.536;P＜0.05).miR-181c以 1.23 为诊断截断值时,ROC曲线下面积(AUC)为 0.814(95%CI:0.764～0.865);血清SF以325.36 为诊断截断值时,AUC为 0.681(95%CI:0.616～0.747);血清GFAP以 10.25 为诊断截断值时,AUC为 0.634(95%CI:0.567～0.701);三者联合检测的AUC为 0.886(95%CI:0.761～0.932),显著高于各单项检测(P＜0.05).结论 脑出血后认知功能受损患者血清miR-181c、SF以及GFAP水平显著升高,其表达水平与病情转归密切相关,可作为疗效评估的重要指标;且三者联合检查可提高脑出血改良大骨瓣减压术后认知功能诊断效能.

目的 明确miR-542-3p对骨肉瘤细胞系HOS和SAOS2细胞侵袭能力的影响,通过生物信息学建立miR-542-3p靶基因调控网络,并探讨其潜在作用靶点.方法 使用miR-542-3p mimics转染HOS和SAOS2细胞,同时设立正常组(未转染)及阴性对照组(转染miR-neg mimics),Transwell小室试验检测转染后细胞的侵袭能力.通过美国国立生物信息中心(NCBI)基因表达共享数据库(GEO)联合GEO2R平台,获取并分析miRNA-542-3p与miR-neg转染的U2OS细胞的基因表达谱数据及其差异表达基因,进而使用miRNA预测数据库及Cytoscape软件,预测并建立miR-542-3p靶基因调控网络.实时荧光定量PCR验证miR-542-3p转染HOS和SAOS2细胞后,部分预测目标靶基因的mRNA表达水平变化.结果 miR-542-3p干预组HOS和SAOS2细胞的侵袭能力较正常组和阴性对照组明显降低(P均<0.05).数据库差异基因分析表明,miR-542-3p与miR-neg转染的U2OS细胞的表达差异基因共有417个,其中185个基因表达下调.miRNA预测数据库预测的266个靶基因中,有14个与差异基因分析中得到的表达下调基因重合.实时荧光定量PCR分析得出,ILK、TBPL1、ETS1这3个预测靶基因在miR-542-3p干预组中的表达水平显著低于阴性对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 miR-542-3p通过下调ILK、TBPL1、ETS1显著抑制骨肉瘤细胞的侵袭能力.

胆固醇稳态受多种因素的密切调节,而胆固醇代谢紊乱与2型糖尿病、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪性肝病等多种疾病的发生、发展密切相关.微小RNA(microRNA,miRNA)是脂代谢的转录后调控因子,miRNA-185-5p、miRNA-758-5p、miRNA-33a、miRNA-21、miRNA-122和miRNA-370与胆固醇的合成有关,miRNA-33、miRNA-144、miRNA-26、miRNA-758-3p、miRNA-106b、miRNA-10b、miR-NA-302、miRNA-145、miRNA-27a/b和miRNA-613与胆固醇的转运有关,多种microRNA共同参与调控胆固醇代谢中关键蛋白的表达,调控胆固醇的稳态平衡.

目的:通过对癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中的乳腺癌数据进行综合分析,寻找在乳腺癌中差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、微小RNA(microRNA,miRNA)和信使RNA(messenger RNA,mRNA),构建乳腺癌竞争内源性RNA(competing endogenous RNA,ceR-NA)网络,识别和预测ceRNA网络在乳腺癌中的作用.方法:下载TCGA数据库中乳腺癌组织样本基因表达谱数据,寻找差异表达的lncRNA、miRNA和mRNA,通过miRcode、miRTarBase、TargetScan和miRDB四个数据库对差异表达的RNA之间的关系进行分析,构建以上调和下调的miRNA为中心的ceRNA网络.采用Kap-lan-Meier法分析乳腺癌ceRNA网络中的lncRNA、miRNA和mRNA表达量与患者生存预后的关系,采用基因富集分析法对乳腺癌ceRNA网络中mRNA基因功能和调控通路进行分析.结果:在乳腺癌中异常表达的350个lncRNA、185个miRNA和2928个mRNA中,分别有23个lncRNA、27个miRNA、70个mRNA参与构建乳腺癌的ceRNA网络.Kaplan-Meier生存分析显示,lncRNA MAGI2-AS3(P=0.01)、GRIK1-AS1(P=0.03)以及miRNA hsa-miR-301b(P=0.01)、hsa-miR-503(P=0.04)和mRNA CCNE1(P=0.01)、KP-NA2(P=0.02)、FLI1(P=0.02)、TGFBR2(P=0.02)这8个基因与乳腺癌患者的生存预后显著相关.70个mRNA主要被富集到20条通路上,其中有15条通路与肿瘤有关,最显著的通路为"Pathways in cancer".结论:ceRNA网络在乳腺癌中发挥着重要的作用,多种差异表达基因与乳腺癌预后相关,可能成为潜在的肿瘤诊断标志物和治疗靶点.