目的:研究二甲双胍对2型糖尿病患者微小RNA(miRNA)表达水平的影响，并利用网络药理学进行分析，预测其治疗作用潜在的靶点及途径。方法:筛选本院入院治疗的初发2型糖尿病患者15例，住院期间及出院后均规律服用盐酸二甲双胍片。患者服药6个月后，对比其用药前后血清基质金属蛋白酶(MMP)-9、转化生长因子(TGF)-β1及心肌纤维化相关miRNA的表达水平。对呈现统计学差异表达的miRNA进行基因本体论(GO)和KEGG通路富集分析，并构建差异表达miRNA对应靶基因信使RNA(mRNA)网络图。结果:患者用药后，血清MMP-9水平较用药前明显下降( P<0.05)。二甲双胍可显著下调患者血清人类微小RNA(hsa-miR) 29a-3p、hsa-miR133a-5p、hsa-miR21-5p、hsa-miR30c-5p、hsa-miR1-3p表达水平( P<0.05或 P<0.01)。GO和KEGG分析结果显示，差异表达miRNA主要集中在内质网腔、突触、基膜等细胞组分中，通过胶原分解代谢过程、短时神经元突触可塑性调节、轴突延伸等生物过程来发挥Rho GTP酶(Rho GTPase)结合、参与细胞外基质结构成分等分子功能；其主要富集于糖尿病并发症晚期糖基化终末产物-糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、Wnt信号通路等多种细胞信号转导通路。miRNA-mRNA网络分析结果显示，与差异表达miRNA对应mRNA共230个。 结论:二甲双胍可通过下调相关miRNA表达，参与相关细胞信号通路转导，调控染色质、核酸结合及酶活性过程而发挥其治疗2型糖尿病的作用。

目的:观察微小RNA(miRNA)-7159-5p在胃癌组织中的表达，探讨其对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制。方法:收集湖北六七二中西医结合骨科医院2018年3月至2019年11月手术切除的29例胃癌患者的癌组织和癌旁组织。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-7159-5p在癌组织和癌旁组织、癌细胞系和正常胃黏膜上皮细胞系中的表达。选择miR-7159-5p表达最低的细胞系，设置对照组和实验组，分别转染control和miR-7159-5p mimics。qRT-PCR检测转染细胞中miR-7159-5p的表达。淋巴细胞增殖检测(MTS)法检测转染细胞的增殖情况，Transwell小室法检测转染细胞的侵袭活力。miRNAMap数据库和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-7159-5p的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测转染细胞中目的基因的表达。结果:胃癌组织中miR-7159-5p表达低于癌旁组织( P<0.01)，胃癌细胞系miR-7159-5p表达低于正常胃黏膜上皮细胞(均 P<0.01)，miR-7159-5p表达最低的细胞系是SGC7901细胞( P<0.01)。转染后实验组SGC7901细胞中miR-7159-5p表达明显高于对照组( P<0.01)。转染后实验组SGC7901细胞增殖活力、侵袭活力明显低于对照组(均 P<0.05)。miR-7159-5p的靶基因是三结构域蛋白26(TRIM26)。转染后实验组SGC7901细胞中TRIM26 mRNA表达明显低于对照组( P<0.01)。Western blot结果显示，转染后实验组TRIM26、c-Myc、cyclin D1、β-catenin蛋白表达量均低于对照组(均 P<0.05)。 结论:胃癌组织中miR-7159-5p低表达，miR-7159-5p可通过下调TRIM26的表达，抑制SGC7901细胞的增殖和侵袭活力。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-518c-5p调控结直肠癌细胞HT-29细胞凋亡的机制。方法:通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测人结直肠癌细胞和人正常结直肠细胞中miR-518c-5p的表达量。通过过表达或敲低miR-518c-5p，检测结直肠癌细胞HT-29的凋亡水平。通过TargetScan和荧光素酶报告试验筛选miR-518c-5p的靶标并验证。通过敲低聚嘧啶束结合蛋白1(PTBP1)或跨膜蛋白61(TMEM61)，检测结直肠癌细胞HT-29的凋亡水平。敲低miR-518c-5p和PTBP1或过表达miR-518c-5p和PTBP1，检测结直肠癌细胞HT-29的凋亡水平。采用Student’s t检验分析。 结果:miR-518c-5p在结直肠癌细胞HCT116(0.94±0.23)，HT29(2.41±0.40)，RKO(0.84±0.22)，COLO-678(1.04±0.33)，C2BBe1(1.45±0.41)，GP2d(0.97±0.30)中的表达量均低于正常结直肠细胞NCM460[(0.32±0.05)%， F＝14.010， P<0.01]，差异均有统计学意义。过表达miR-518c-5p[(2.40±0.36)%比(4.14±1.01)%， t＝2.811， P<0.05]，HT-29d的凋亡率显著增加[(0.22±0.07)%比(0.77±0.22)%， t＝4.126， P<0.05]；敲低miR-518c-5p[(2.51±0.70)%比(0.45±0.11)%， t＝5.011， P<0.05]；HT-29d的凋亡率显著降低[(0.20±0.10)%比(0.10±0.03)%， t＝2.970， P<0.05]；敲低PTBP1后，HT-29d的凋亡水平上升[(0.23±0.04)%比(0.67±0.03)%， t＝15.240， P<0.05]；但是，敲低TMEM61后，HT-29d的凋亡水平差异无统计学意义[(0.24±0.04)%比(0.26±0.01)%， t＝0.840， P>0.05]。过表达miR-518c-5p(2.31±0.30比4.02±1.01， t＝2.828， P<0.05]和PTBP1后，HT-29d的凋亡水平差异无统计学意义[(0.24±0.08)%比(0.23±0.04)%， t＝0.194， P>0.05]；敲低miR-518c-5p[(2.40±0.70)%比(0.38±0.09)%， t＝4.975， P<0.05]和PTBP1后，发现HT-29d的凋亡水平差异无统计学意义[(0.21±0.07)%比(0.25±0.09)%， t＝0.608， P>0.05]。 结论:miR-518c-5p能够通过靶向PTBP1 mRNA的3’端非编码区(3’UTR)来减少PTBP1的表达，以达到促进结直肠癌细胞HT-29凋亡的目的。

目的:探讨血清微小RNA（miR）-29c-3p和miR-378a-3p表达与脓毒症心肌损伤患者血清炎性因子、心肌损伤指标和超声心动图指标的相关性，分析其对预后的评估价值。方法:采用前瞻性的研究方法。选择2019年2月至2021年10月邯郸市中心医院脓毒症患者286例，采用聚合酶链反应检测血清miR-29c-3p和miR-378a-3p水平，并检测血清肌钙蛋白I（TnI）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）、肌红蛋白（Mb）、B型脑钠肽（BNP）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）和降钙素原（PCT）水平；采用超声检测左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室射血分数（LVEF）、每搏输出量（SV）、心输出量（CO）和二尖瓣口舒张早期最大流速与心房收缩期最大流速比值（E/A）。将血清TnI≥0.15 μg/L定义为心肌损伤，记录心肌损伤患者住院28 d内生存情况，并评估急性生理学和慢性健康状况Ⅱ评分（APACHE Ⅱ）和序贯器官衰竭评分（SOFA）。采用Pearson法进行相关性分析；采用多因素Logistic回归分析影响脓毒症心肌损伤患者住院28 d内死亡的独立危险因素；绘制受试者工作特征（ROC）曲线，分析miR-29c-3p和miR-378a-3p预测脓毒症心肌损伤患者住院28 d内死亡的效能。结果:286例脓毒症患者中，发生心肌损伤131例（心肌损伤组），未发生心肌损伤155例（无心肌损伤组）。心肌损伤组miR-29c-3p、Mb、CK-MB、BNP、TnI、TNF-α、IL-6、IL-1β、PCT、CRP、LVEDD和LVESD明显高于无心肌损伤组[5.02 ± 1.69比2.01 ± 0.57、（102.35 ± 23.56） μg/L比（32.15 ± 9.12） μg/L、（25.01 ± 6.09） U/L比（13.02 ± 4.16） U/L、（905.23 ± 135.49） ng/L比（92.31 ± 26.35）ng/L、（0.23 ± 0.05）μg/L比（0.12 ± 0.02）μg/L、（13.41 ± 3.71）μg/L比（3.26 ± 0.95）μg/L、（9.02 ± 2.46）ng/L比（4.18 ± 1.03）ng/L、（71.45 ± 15.29）ng/L比（30.02 ± 6.39）ng/L、（1.05 ± 0.21）μg/L比（0.72 ± 0.13）μg/L、（21.35 ± 6.13）mg/L比（16.23 ± 4.57）mg/L、（37.45 ± 3.39）mm比（34.01 ± 2.15）mm和（50.12 ± 3.49）mm比（44.17 ± 3.02）mm]，miR-378a-3p、LVEF、SV、CO和E/A明显低于无心肌损伤组[1.67 ± 0.36比3.02 ± 0.79、（46.32 ± 3.26）%比（56.24 ± 4.98）%、（48.21 ± 2.81）ml比（56.02 ± 3.49）ml、（3.11 ± 0.29）L/min比（4.15 ± 0.31）L/min和0.98 ± 0.21比1.19 ± 0.32]，差异有统计学意义（ P<0.01）。Pearson相关分析结果显示，脓毒症心肌损伤患者miR-29c-3p与TNF-α、IL-6、IL-1β、PCT、CRP、Mb、CK-MB、BNP、TnI、LVEDD、LVESD呈正相关（ P<0.01或<0.05），与LVEF、SV、CO和E/A呈负相关（ P<0.01）；miR-378a-3p与TNF-α、IL-6、IL-1β、PCT、CRP、Mb、CK-MB、BNP、TnI、LVEDD和LVESD呈负相关（ P<0.01或<0.05），与LVEF、SV、CO和E/A呈正相关（ P<0.01）。131例脓毒症心肌损伤患者住院28 d内死亡55例（死亡亚组），存活76例（存活亚组）。死亡亚组机械通气率、连续性肾脏替代治疗率、APACHE Ⅱ、SOFA、miR-29c-3p、Mb、CK-MB、TnI、BNP、TNF-α、IL-6、IL-1β、PCT、CRP、LVEDD和LVESD明显高于存活亚组，miR-378a-3p、LVEF、SV、CO和E/A明显低于存活亚组，差异有统计学意义（ P<0.05或<0.01）。多因素Logistic回归分析结果显示，APACHE Ⅱ、TnI、miR-29c-3p是影响脓毒症心肌损伤患者住院28 d内死亡的独立危险因素（ OR = 1.203、2.451和1.394，95% CI 1.085~1.334、1.498~4.008和1.141~1.702， P<0.01），miR-378a-3p是影响脓毒症心肌损伤患者住院28 d内死亡的独立保护因素（ OR = 0.367，95% CI 0.217~0.622， P<0.01）。ROC曲线分析结果显示，miR-29c-3p和miR-378a-3p预测脓毒症心肌损伤患者住院28 d内死亡的最佳截断值分别为5.00和1.65，miR-29c-3p联合miR-378a-3p预测脓毒症心肌损伤患者住院28 d内死亡的曲线下面积明显大于两项指标单独应用（0.890比0.695和0.732），灵敏度为87.0%，特异度为87.3%，准确度为86.8%。 结论:脓毒症心肌损伤患者血清miR-29c-3p表达水平升高、miR-378a-3p表达水平降低，miR-29c-3p和miR-378a-3p表达与心肌损伤程度、超声心动图指标、炎性因子水平以及预后均有关，miR-29c-3p和miR-378a-3p可作为评估脓毒症心肌损伤患者预后的潜在指标。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:探讨特发性肺纤维化急性加重患者血浆天冬氨酸蛋白酶A(novel aspartie proteinase A, Napsin A)、表面活性蛋白A（surfactant protein A, SP-A）、表面活性蛋白D（surfactant protein D, SP-D）、血浆微小RNA29b-3p（miR29b-3p）、miR30c-5p、血浆外泌体miR21-5p和血浆游离线粒体DNA（mitochondrial DNA, mtDNA）的表达变化及其意义。方法:本研究为前瞻性研究，纳入2014年5月至2019年10月在河南省胸科医院就诊的特发性肺纤维化患者，记录其临床表现、肺功能情况和高分辨率CT。采用ELISA法检测血浆Napsin A、SP-A和SP-D，采用RT-PCR法检测血浆外泌体miR21-5p、血浆miR29b-3p、miR30c-5p和mtDNA。采用方差分析、非参数检验和卡方检验比较两组间上述指标的表达差异。Logistic回归分析AE-IPF的预测因素，并做ROC曲线分析上述指标诊断AE-IPF的价值。结果:本研究共纳入45例特发性肺纤维化患者，其中男性37例，女性8例，年龄为（63.1±8.5）岁。两组间年龄、性别及疾病构成进行比较，差异无统计学意义（均 P>0.05）。AE-IPF组游离线粒体DNA表达水平高于IPF组[10 143.48（8 045.85，12 609.65）copies/μL vs. 6 404.22（2 671.50，9 386.00） copies/μL， P<0.05]。AE-IPF组的抗"O"抗体（ASO）水平高于IPF组[（88.04±52.25）IU/mL vs.（32.38±19.91）IU/mL， P<0.01]。Logistic回归结果显示ASO是发生AE-IPF的独立预测因子（ OR=1.068，95% CI：1.007~1.131， P<0.05）。联合mtDNA和ASO作ROC曲线，曲线下面积为0.884，敏感度为87.5%，特异度为85.7%。 结论:IPF急性加重时，mtDNA及ASO水平均升高，ASO可作为AE-IPF发生的独立预测因子。

目的:探讨HCV感染者血清微小核糖核酸（miR）665及miR-224的表达，分析其对肝癌的诊断价值。方法:选取2017年1月至2020年5月保定市人民医院收治的130例HCV感染者和60例健康体检正常者。HCV感染者根据其诊断结果，分为慢性丙型肝炎（CHC）组54例，肝硬化组46例和肝癌组30例。根据HCV RNA的检测结果，将HCV感染者分为低病毒载量组（34例，HCV RNA<10 3 IU/mL）、中病毒载量组（57例，HCV RNA为10 3~10 6 IU/mL）和高病毒载量组（39例，HCV RNA>10 6 IU/mL）。采用Metavir评分判断HCV感染者肝纤维化程度，F0期29例，F1~F2期56例，F3~F4期45例。应用ROC曲线分析血清miR-665、miR-224及甲胎蛋白（AFP）水平诊断肝癌的价值。 结果:各组miR-665和miR-224水平差异均有统计学意义（ F=16.18和11.52， P均<0.001）。肝癌组、肝硬化组和CHC组血清miR-665（ q=17.39、13.84和10.25）及miR-224（ q=10.29、12.65和12.85）表达水平均明显高于对照组（ P均< 0.001）。肝癌组血清miR-665及miR-224表达水平均高于CHC组（ q=17.11和15.12）和肝硬化组（ q=17.00和14.97）（ P均< 0.001）。随着病毒载量的增加和肝纤维化的加重，血清miR-665及miR-224表达水平明显增高，差异有统计学意义（ F =14.83、8.71，17.62和11.18， P均<0.001）。ROC曲线显示，miR-665、miR-224及AFP三项联合诊断肝癌的曲线下面积最大（0.963），其灵敏度和特异性为99.2%和90.3%。 结论:HCV感染患者血清miR-665及miR-224表达水平明显升高，miR-665、miR-224及AFP三项联合对HCV感染导致的肝癌具有较好的诊断价值。

目的:探究过量氟暴露对小鼠睾丸微小RNA（microRNA，miRNA）表达谱的影响，并探讨氟的生殖毒性机制。方法:24只8周龄C57BL/6J雄性小鼠，体重为（23 ± 1）g，按体重采用随机数字表法分为对照组[0 mg/L氟化钠（NaF）]和氟暴露组（50 mg/L NaF），每组12只，处理90 d后麻醉处死小鼠，采集精子检测其数量、活率、畸形率，并对睾丸组织进行HE染色；提取小鼠睾丸组织RNA，利用高通量测序技术检测氟对小鼠睾丸miRNA表达谱的影响，并进行差异表达miRNA筛选及其靶基因预测，同时进行功能注释和通路富集分析；利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）验证差异表达miRNA的表达量。结果:与对照组[精子数量：（11.30 ± 2.52）× 10 6/ml、活率：（90.07 ± 4.34）%、畸形率：（15.49 ± 3.25）%]相比，氟暴露组小鼠精子数量[（9.01 ± 2.25）× 10 6/ml]和活率[（84.34 ± 4.21）%]均下降（ P = 0.041、0.003），而畸形率[（22.36 ± 6.51）%]上升（ P = 0.003）；且HE染色显示，氟暴露组小鼠睾丸间质间距增大，生精小管管腔内精子数量减少，细胞排列紊乱。通过测序，发现氟暴露组小鼠睾丸中存在34个差异表达miRNA；经qRT-PCR验证，与对照组相比，氟暴露组小鼠睾丸mmu-miR-29b-1-5p（ P < 0.001）、mmu-miR-196a-5p（ P = 0.002）和mmu-miR-196b-5p（ P = 0.031）的表达量均显著上升；而mmu-let-7a-2-3p（ P < 0.001）和mmu-miR-466n-3p（ P = 0.018）的表达量均明显下降，与测序结果一致。通过对差异表达miRNA靶基因的KEGG富集，发现氟暴露可改变小鼠睾丸中轴突导向（axon guidance）信号通路、嗅觉传导（olfactory transduction）通路、神经活动配体-受体相互作用（neuroactive ligand-receptor interaction）通路和溶酶体（lysosome）信号通路等。 结论:氟暴露可能通过改变睾丸中miRNA的表达谱，以及通过介导转录后调节的信号通路进而诱导睾丸损伤。睾丸miRNA可能是氟生殖毒性的潜在生物标志物，可为氟中毒机制的探究提供新思路和观点。

目的:探讨宫腔镜冷刀技术通过调控微小RNA（miR）-29b的表达对宫腔粘连患者的治疗效果和术后炎性反应的影响。方法:回顾性分析浙江省医疗健康集团杭州医院2018年1—12月收治的166例宫腔粘连患者的临床资料，其中行宫腔镜冷刀技术治疗83例（冷刀组），行宫腔镜下电切手术治疗83例（电切组）。比较两组手术时间、住院时间。于术后3个月随访，观察患者月经量改变情况，并行宫腔镜复查，观察宫腔内形态变化情况，评估疗效；检测子宫内膜组织白细胞介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α、C反应蛋白（CRP）和miR-29b相对表达量。结果:冷刀组手术时间和住院时间明显短于电切组[（20.01 ± 1.93）min比（26.46 ± 2.25）min和（3.84 ± 1.43）d比（5.01 ± 1.18）d]，差异有统计学意义（ t=12.134和4.051， P<0.05）。冷刀组月经量和宫腔内形态疗效均明显优于电切组，差异有统计学意义（ P<0.05）。冷刀组术后3个月IL-4和miR-29b明显高于电切组[（33.54 ± 5.61）mmol/L比（21.34 ± 3.62）mmol/L和1.59 ± 0.42比1.16 ± 0.31]，IL-8、TNF-ɑ、CRP明显低于电切组[（18.23 ± 3.67）mmol/L比（31.59 ± 7.20）mmol/L、（9.41 ± 1.41）mmol/L比（12.64 ± 2.24）mmol/L和（7.58 ± 1.59）mg/L比（11.06 ± 2.15）mg/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。Pearson相关分析结果显示，IL-4与miR-29b呈正相关（ r=0.438， P<0.01），IL-8和TNF-ɑ与miR-29b呈负相关（ r=- 0.295和- 0.377， P<0.01）。 结论:宫腔镜冷刀技术可缩短宫腔粘连患者手术时间和住院时间，通过促进miR-29b和抑炎因子的表达，抑制炎性反应，明显提高疗效。

目的:探讨外泌体来源长链非编码RNA（lncRNA）同源框基因A-反义转录本3（HOXA-AS3）对前列腺癌（PCa）去势抵抗的作用机制。方法:建立PC-3与LNCaP共培养体系，用双荧光素酶报告基因检测、荧光定量聚合酶链反应（PCR）和挽救实验等验证HOXA-AS3参与PCa去势抵抗和进展的机制。采用动物实验和人PCa组织切片，探究HOXA-AS3在由雄激素依赖性向非依赖性的转化过程中的作用。采用两样本 t检验和单因素方差分析（One-Way ANOVA）进行统计分析。 结果:ASO-NC转染组LNCaP细胞侵袭数量显著低于ASO-miR-29b-3p转染组[（116.00±5.10）个比（146.33±4.78）个， t＝6.135， P<0.05]，NC转染PC-3组显著高于miR-29b-3p mimic转染组[（394.33±11.95）个比（111.67±7.41）个， t＝28.425， P<0.05]。LNCaP-HOXA-AS3-exo中HOXA-AS3显著高于LNCaP-exo（1.46±0.08比1.01±0.02， t＝7.634， P<0.05），而PC-3-HOXA-AS3-ASO-exo中HOXA-AS3显著低于PC-3-exo（0.53±0.06比1.00±0.09， t＝5.943， P<0.05）。转染miR-29b-3p-mimic组的野生型HOXA-AS3、野生型STAT3-3和野生型Mcl-1组的细胞荧光素酶活性低于对照组（1.00±0.04比0.51±0.02、1.00±0.02比0.56±0.04、1.00±0.02比0.57±0.02， t＝18.058、15.857、26.081， P<0.01）。同时转染pcDNA3.1-STAT3和Mcl-1-promotor载体组免疫荧光强度高于对照组（1.72±0.05比1.00±0.03， t＝18.717， P<0.05），并且cytochrome c和Caspase-9的表达低于对照组（0.46±0.01比0.81±0.01、0.28±0.01比0.59±0.01， t＝92.492、97.212， P<0.01）。 结论:HOXA-AS3通过吸附miR-29b-3p调节STAT3/Mcl-1/cytochrome c/Caspase-9轴，调节PCa的去势抵抗。