目的:研究羔羊胃维生素B12胶囊原料药的药效物质基础。方法:用0.9%氯化钠溶液提取，通过饱和硫酸铵沉淀，采用二乙基氨乙基纤维素52和高压液相色谱(HPLC)方法分离、纯化凝乳酶和胃蛋白酶。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和液相色谱-串联质谱测定相对分子质量。用HPLC分析原料药的氨基酸组成和抗氧化活性。依次用水、磷酸盐缓冲液和碳酸氢钠完全提取原料药，并进行体外1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2，2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基消除活性测定。利用热水提法提取原料药中的糖蛋白，测定其对青春双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、粪肠球菌的促生长活性，分别用HPLC和气相色谱-质谱方法分析其氨基酸和单糖组成。结果:纯化得到2种不同离子强度的凝乳酶F6-2、F7-2和胃蛋白酶F7-1的酶活力分别为27 557.10、17 532.60和17 728.15 U/g；SDS-PAGE分析显示3种酶的相对分子质量相似，为35 000~40 000。原料中含有16种氨基酸，其中疏水性氨基酸占总氨基酸含量的33.03%。当样品浓度为5 g/L时，3种提取物的ABTS自由基清除活力分别为(37.80±0.45)%、(23.20±0.78)%、(62.80±0.74)%; DPPH自由基清除活力分别为(57.87±0.55)%、(5.03±0.25)%和(26.67±3.10)%。糖蛋白提取物对青春双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、粪肠球菌均有促生长作用，其中对德氏乳杆菌保加利亚亚种和粪肠球菌的促进作用差异均有统计学意义( P均<0.05)。糖蛋白的蛋白质链由15种氨基酸组成，多糖链由葡萄糖和乳糖2种单糖组成。 结论:利用多种色谱方法从羔羊胃原料药中分离、分析到至少2种凝乳酶和1种胃蛋白酶成分；原料药富含抗氧化活性成分；羔羊胃中糖蛋白成分具有体外促益生菌生长活性。

目的 探讨一种新型复方益生菌对成人糖尿病前期患者和新近诊断2型糖尿病(T2DM)患者代谢标志物的影响.方法 选取60名2019年10月至2020年10月于我院进行治疗(单独饮食或饮食加二甲双胍)的BMI≥25kg/m2且患有糖尿病前期或新近诊断为T2DM的成人患者为研究对象,按照随机分组原则,将各受试者随机分配到益生菌组(植物乳植杆菌Lp-115、德氏乳杆菌保加利亚亚种Lb-64、加氏乳杆菌Lg-36、短双歧杆菌Bb-03、动物双歧杆菌动物亚种、乳杆菌Bi-07、两歧双歧杆菌Bb-06、唾液链球菌嗜热亚种St-21 和布拉酵母菌 DBVPG.6763)和安慰剂组,每组各30名,干预治疗12周后,比较两组患者糖尿病代谢标志物水平变化.结果 益生菌组和安慰剂组患者的主要和次要指标水平差异均无统计学意义(均P＜0.05).服用二甲双胍者空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗、Zonulin蛋白和血浆丁酸盐水平增加.益生菌组患者肠道微生物产丁酸盐的作用升高,但安慰剂组患者未见此现象.结论 益生菌可以通过增加丁酸盐的产生而作为二甲双胍的辅助剂,增强患者葡萄糖的代谢.

目的 分析市售添加可食用菌种的预包装食品情况.方法 2018年7-9月通过在北京大中型超市、便利店、主要网络购物平台调查市售添加可食用菌种的各类预包装食品情况,收集添加可食用菌种产品的种类及标签等信息并进行采样和记录,对信息编码并去重,按照样品对应的食品安全产品标准类别进行统计,计算和分析样品种类分布情况、各类菌种使用频次、标签标识相关情况等.结果 共采集符合要求的样品565例,样品种类主要包括饮料、发酵乳、婴幼儿配方食品、糖果等.使用频次较高的菌种主要包括嗜热链球菌、动物双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种等.菌种名称的标识主要为标示菌种名称和菌株名称.56.5％的产品(包括灭菌型)在其包装及宣传中使用了“益生菌”进行描述.结论 各类样品标签上对于菌种名称、产品类型(活菌型或灭菌型)的标注方式各不相同,部分样品对于“益生菌”概念的使用值得商榷.

[目的]在乳酸乳球菌NZ9000中异源表达德氏乳杆菌保加利亚亚种中由双组分系统TCS1(JN675228/JN675229)调控的与酸适应相关基因,进而探究德氏乳杆菌保加利亚亚种应对酸胁迫的机制.[方法]通过逆转录聚合酶链式反应和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证由德氏乳杆菌保加利亚亚种TCS1调控的与酸适应相关基因中腺嘌呤磷酸核糖转移酶(aprt)、D-丙氨酸-D-丙氨酸连接酶(ddl)、寡肽ABC转运蛋白(oppDII)和延伸因子Ts(tsf)在乳酸乳球菌NZ9000中的表达情况.酸处理实验验证基因表达对宿主菌酸胁迫耐受能力的影响.并采用酵母双杂交验证双组分系统TCS1与表达的酸适应相关基因之间的互作关系及具体的互作部位.[结果]结果表明,乳酸乳球菌NZ9000中成功表达了aprt、ddl、oppDII和tsf aprt、ddl基因使重组菌对酸胁迫的抗性分别提高了75倍和114倍.oppDII和tsf基因的表达对重组菌株的耐酸能力没有明显影响.酵母双杂交实验表明TCS1中的组氨酸蛋白激酶HPK1与Dd1之间存在相互作用,且HPK1-C结构域是二者相互作用的关键区域.[结论]aprt和ddl过表达菌株酸刺激的适应能力显著高于对照菌株,该研究结果可为德氏乳杆菌保加利亚亚种及类似菌株耐酸性特性的获得策略提供参考.

目的 探究德氏乳杆菌保加利亚亚种的发酵产物对常见病原菌的抑制作用.方法 采用细菌共培养法及牛津杯药物敏感试验,分别探究德氏乳杆菌保加利亚亚种及其发酵产物对11种常见病原菌的抑制作用,并通过乙醇沉淀、透析、超滤离心及饱和硫酸铵盐析法,对德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵产物中抑菌物成分进行了初步研究.结果 德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵产物对多种临床常见病原菌均有较强的抑菌活性,抑菌活性与该菌代谢产生的乳酸无关,且该抑菌活性具有良好的热稳定性;发酵产物的乙醇沉淀物及80％饱和硫酸铵盐析沉淀物均无抑菌活性,以相对分子质量3×103及10×103超滤离心管将发酵液进行超滤离心后进行抑菌试验,显示滤出液及上层液均具有良好的抑菌活性,发酵产物经截留相对分子质量为0.5×103的透析袋透析后失去抑菌活性.结论 德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵产物对于临床常见的多种革兰阳性、革兰阴性病原菌均具有较强的抑菌活性,其抑菌活性物质可能是相对分子质量0.5×103左右或以下的小分子物质.