目的:探讨成纤维细胞生长因子18(FGF18)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、成骨分化的影响及其机制。方法:SD大鼠长骨提取BMSCs，用含不同浓度FGF18的成骨诱导分化培养基培养，采用细胞试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖。设定空白对照组，碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色和ALP活性检测评估BMSCs的成骨分化能力；采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测核心结合蛋白因子2(Runx2)、骨形态发生蛋白4(BMP4)和Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)基因的mRNA表达；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测成骨相关蛋白(Runx2、COLⅠ、OCN)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白[细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、磷酸化(p)-ERK1/2、p38、p-p38]的表达。两组间比较采用t检验。结果:CCK结果显示，FGF18对BMSCs的促增殖效应随浓度升高和时间延长而递增。干预7 d和14 d后，FGF18组ALP染色和茜素红染色的着色程度均明显高于对照组。ALP活性随FGF18浓度升高和时间延长而递增。干预3 d时，FGF18组Runx2、BMP4基因的mRNA表达量高于对照组，差异有统计学意义(1.891±0.327比1.103±0.331，2.115±0.403比1.134±0.327， t＝2.933、3.274， P<0.05)。干预7 d时，FGF18组Runx2、BMP4和COLⅠ基因的mRNA表达均较对照组明显上升，差异均有统计学意义(5.852±0.525比1.903±0.451，5.115±0.633比1.734±0.527，4.451±0.553比1.525±0.483， t＝9.883、7.110、6.902， P<0.05)。干预3 d和7 d时，FGF18组Runx2、COLⅠ、p-ERK1/2和p-p38蛋白表达量均高于对照组，差异有统计学意义(Runx2为0.927±0.108比0.647±0.087，1.257±0.188比0.825±0.103， t＝3.497、3.490， P<0.05；COLⅠ为0.538±0.062比0.405±0.047，0.729±0.106比0.513±0.074， t＝2.961、2.894， P<0.05；p-ERK1/2为0.908±0.113比0.614±0.072，0.968±0.142比0.686±0.086， t＝3.800、2.942， P<0.05；p-p38为1.203±0.194比0.826±0.082，1.135±0.186比0.803±0.076， t＝3.100、2.862， P<0.05)。 结论:FGF18可以通过MAPK信号通路来实现对BMSCs细胞增殖以及早期成骨分化的调控，且具有良好的诱导成骨分化的生物活性。

目的 研究老年人外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导物(TWEAK)/成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白 14(Fn14)轴及下游核因子κB(NF-κB)通路的关键因子mRNA及蛋白表达差异与老年人中心性肥胖的相关性.方法 2017 年 9 月至2018 年5 月在新疆农牧区常住居民横断面流行病学调查数据库中随机抽取80 例研究对象,根据是否为中心性肥胖分为对照组(n=40)和中心性肥胖组(n=40),提取空腹外周血中PBMC,采用待实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting方法检测TWEAK、Fn14、IκB激酶α(IKKα)、IκB激酶β(IKKβ)、NF-κBp65 的mRNA、蛋白表达.采用SPSS 26.0 软件进行数据分析.根据数据类型,组间比较分别采用t检验及 χ2 检验.相关性分析采用双变量Pearson相关分析法.结果 中心性肥胖组外周血PBMC中的Fn14、IKKα、IKKβ的mRNA表达高于对照组(P<0.05);TWEAK、NF-κBp65 的mRNA表达也高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05).中心性肥胖组的Fn14、IKKα、IKKβ蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),两组间TWEAK、NF-κBp65 蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).双变量Pearson相关性分析显示,上述因子的mRNA表达水平,TWEAK与Fn14 呈正相关(r=0.472;P<0.01),Fn14 与IKKα、IKKβ均呈正相关(r=0.262,0.275;P<0.05);IKKα、IKKβ与NF-κBp65 均呈正相关(r=0.747,0.692;P<0.01).结论 新疆农牧区常驻老年人中心性肥胖与外周血PBMC中Fn14、IKKα、IKKβ的蛋白、mRNA的高表达相关,TWEAK/Fn14 可能通过调节IKK激活NF-κB炎症通路,参与人类肥胖的发生、发展.

目的 观察新疆农牧区老年肌肉减少症(后简称肌少症)患者外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导物(TWEAK)、成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)及核因子κB(NF-κB)通路基因的表达变化,并探讨其意义.方法 在新疆农牧区常住居民中选择80例研究对象,肌少症患者40例纳入肌少症组、健康人群40例纳入对照组.提取两组空腹外周血中的PBMC,采用qRT-PCR法检测TWEAK、Fn14、IκB激酶α(IKKα)、IκB激酶β(IKKβ)、NF-κB p65 mRNA.结果 肌少症组外周血PBMC中TWEAK、Fn14、IKKα、IKKβ mRNA表达高于对照组(P均<0.05).校正性别、年龄后,协方差分析结果仍显示,肌少症组外周血PBMC中TWEAK、Fn14、IKKα、IKKβ mRNA表达高于对照组(P均<0.05).校正年龄、性别后,偏相关性分析显示,TWEAK mRNA与Fn14 mRNA表达呈正相关(r=0.424,P<0.01),Fn14 mRNA与IKKα、IKKβ mRNA表达呈正相关(r分别为0.264、0.284,P均<0.05),IKKα、IKKβ mRNA与NF-κB p65 mRNA表达呈正相关(r分别为0.724、0.660,P均<0.01).结论 新疆农牧区老年肌少症患者外周血PBMC中TWEAK、Fn14、IKKα、IKKβ mRNA高表达,TWEAK、Fn14 mRNA表达与IKKα、IKKβ mRNA表达有相关性;TWEAK、Fn14可能通过调节IKK激活NF-κB炎症通路从而参与老年人肌少症的发生发展.

肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)是肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)超家族的成员,能与成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)结合而发挥作用.研究表明,TWEAK/Fn14在多种肿瘤中表达上调,参与调节肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭及转移,与肿瘤的发生发展及预后不良密切相关,揭示TWEAK/Fn14可能成为肿瘤治疗中有效的生物标志物及靶点.本文就TWEAK/Fn14的结构、相关信号通路及其在肿瘤发生发展和治疗中的作用进行综述.

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)是肿瘤坏死因子超家族的新成员之一.TWEAK通过细胞间的相互作用或旁分泌方式与其受体成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)结合,调节细胞的增殖、分化、迁移、凋亡和炎症等多种活动.TWEAK/Fn14信号通路在肺损伤、哮喘以及肺癌等肺部疾病发生发展过程中的作用日益受到关注.

目的 探讨肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子 (TWEAK) 及其受体成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14 (Fn14) 对肝星状细胞迁徙的影响及其机制.方法 人源性肝星状细胞株LX-2分别予细胞因子TWEAK处理、特异性下调Fn14 (Fn14 siRNA) 后加入TWEAK处理,Transwell小室检测肝星状细胞迁徙;real-time PCR及Western Blot检测基质金属蛋白酶 (MMP) 9的表达量.计量资料两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 TWEAK处理组较正常LX-2细胞迁徙能力增强[ (105±8) 个vs (164±17) 个,t=5.287,P＜0.01];下调Fn14后加入TWEAK处理的LX-2细胞迁徙数目较阴性对照组减少[ (122±9) 个vs (58±7) 个,t=9.836,P＜0.01];TWEAK处理LX-2细胞后,MMP9的mRNA及蛋白水平增加 (P值均＜0.05),且存在时间依赖性;下调Fn14并加入TWEAK后LX-2细胞MMP9的mRNA及蛋白表达量减少,与单纯TWEAK处理的LX-2细胞组比较,差异有统计学意义 (t=5.358,P＜0.01).结论 TWEAK可通过其受体Fn14上调MMP9促进肝星状细胞迁徙,阻断该通路可能成为治疗肝纤维化的一个潜在的新靶点.

目的:观察参苓白术散对肿瘤恶病质患者血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、肿瘤坏死因子弱凋亡诱导剂(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)、成纤维细胞生长诱导因子-14(fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)表达的影响.方法:将64例诊断符合肿瘤恶病质,辨证属于脾气虚证患者,随机分为2组.对照组32例,予以复方氨基酸等营养支持治疗;治疗组32例,在营养支持治疗基础上加用参苓白术散汤剂,水煎服,每日1剂,分3次温服,共用4周.观察治疗前后中医临床证候、生存质量评定(Kanrofsky score,KPS)、TNF-α、TWEAK及其受体早期反应蛋白Fn14.结果:治疗组和对照组脾气虚证患者治疗后比较,中医证候总有效率分别为40.62％和15.62％,治疗组明显优于对照组(P＜0.05).在KPS评分改善率方面,治疗组优于对照组(P＜0.05).2组治疗后TNF-α、TWEAK、Fn14均降低,治疗组治疗前后差异有统计学意义(P＜0.05),2组间比较,治疗后治疗组TNF-α、TWEAK、Fn14降低更为显著,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:参苓白术散与营养支持相联合,可改善肿瘤恶病质患者中医证候,提高患者体力状况,降低患者体内TNF-α、TWEAK、Fn14表达,提示参苓白术散可能通过该途径起到控制肿瘤恶病质发生的作用.

Notch信号通路在胚胎期细胞命运转归和成体组织稳态的维持中起重要作用.各种研究已经证明Notch信号通路在角膜损伤后修复及角膜生理性稳态的维持中有重大意义,角膜缘干细胞主要通过抑制Notch信号通路来抑制细胞的分化和增生;在角膜上皮早期修复阶段生理性下调促进细胞迁移和伤口覆盖,后期修复阶段生理性上调与防止角膜上皮细胞过度分层和维持细胞分化相关;角膜基质损伤后纤维化与Notch信号通路相关;角膜内皮损伤后转化生长因子-β(TGF-β)诱导的内皮-间质转化(EnMT)过程有Notch信号通路的直接参与;此外,Notch信号通路与14-3-3σ、表皮生长因子受体(EGFR)、Sirt6、微小RNA(miRNA)、基质金属蛋白酶(MMPs)在角膜上皮稳态维持、角膜上皮分化、角膜基质过度炎症反应、角膜新生血管生成等存在相互作用.本文就Notch信号通路在角膜各层损伤修复中的功能进行综述.

目的:探讨食源性栀子方(ZZP)对四氯化碳(CC14)所致急性和亚急性肝损伤的保护作用及机制.方法:建立急性和亚急性肝损伤动物模型.C57小鼠随机分为正常组、模型组、奥贝胆酸组、食源性栀子方(简称复方)高、低剂量组(0.5、0.25 g·kg-1),根据急性、亚急性实验设计,末次给药后,分别收集各组小鼠的血清和肝脏组织.苏木素-伊红(HE)和天狼猩红染色观察肝脏病理变化;试剂盒测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL),肝匀浆羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织胶原1a1(Col1a1)、胶原3a1(Co13a1)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β受体Ⅱ(Tgfbr2)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达.结果:急性肝损伤:与正常组比较,模型组小鼠的ALT、AST、TBIL、MDA、水平均显著升高(P＜0.01),肝SOD酶活性显著性降低(P＜0.01).与模型组比较,复方高、低剂量组复方可明显降低肝细胞损伤程度,均能保护CC14所诱导的急性肝损伤,复方高剂量组效果优于低剂量组.亚急性肝损伤:模型组小鼠的ALT、AST、MDA、TNF-α和IL-6水平均显著升高(P＜0.01),肝SOD酶活性显著降低(P＜0.01).与模型组小鼠比较,复方高、低剂量组肝脏Hyp含量显著降低(P＜0.01),两组肝组织胶原沉积程度明显减轻,复方 高剂量组亦可明显下调小鼠肝脏α-SMA、Col1a1、C013a1、FN和Tgfbr2mRNA表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:复方可有效保护CC14诱导的急性和亚急性肝损伤,保护效应与浓度成正比,其机制可能与增加肝组织抗氧化酶的活性,降低脂质过氧化水平,抑制炎性反应有关,从而减少胶原沉积,改善早期肝纤维化.

目的 研究运动对肾窦异位脂肪沉积小鼠肾脏损伤的影响,为体医结合防控肾病提供更多的理论支撑.方法 4周龄健康C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组(n=10)和高脂饲料模型组,高脂饲料模型组建模成功后,将其随机均分为肥胖组(n=10)和运动组(n=10).运动组进行8周中等强度跑台实验(坡度为零,14 m/min,每次维持60 min,每周至少5次).采用HE染色法检测肾窦脂肪细胞面积,免疫组织化学和蛋白质印迹实验(Westernb lot)检测缺氧诱导因子(HIF)-1α、HIF-2α、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)、AP-1蛋白分子的表达水平.ELISA试剂盒检测小鼠血清内白介素(IL)-6、成纤维细胞生长因子(FGF)-21和肾损伤分子(KIM)-1含量.采用SPSS 24.0软件进行t检验.结果 肥胖组肾窦脂肪细胞面积显著大于正常组,差异有统计学意义(P＜0.01),肥胖小鼠建模成功.与肥胖组相比,运动组小鼠脂肪细胞面积显著变小,差异有统计学意义(P＜0.01).与正常组相比,肥胖组小鼠肾组织HIF-1α显著升高,血清中FGF-21、KIM-1和IL-6的含量显著增加,运动组上述指标均显著低于肥胖组,差异均有统计学意义(P＜0.01).与肥胖组相比,运动组小鼠肾组织磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(p-P38 MAPK)、p-c-Fos、p-c-Jun蛋白表达量显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 运动干预可以有效改善肾脏早期缺氧炎症状态,对早期肾损伤起预防作用;并可能通过下调P38 MAPK/AP-1通路改善肾脏缺氧炎性反应,为体医融合提供更多基础理论支撑.