目的 探究独活寄生汤含药血清对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖、凋亡和炎症的影响及作用机制.方法 将MH7A细胞分为正常组(10％空白血清)、模型组(10μg·L-1 TNF-α+10％空白血清)、独活寄生汤低(10 μg·L-1 TNF-α+2.5％含药血清+7.5％空白血清)、中(10 μg·L-1 TNF-α+5％含药血清+5％空白血清)、高(10μg.L-1 TNF-α+10％含药血清)剂量组共5组;MTT法筛选独活寄生汤含药血清给药浓度;EdU染色检测细胞增殖情况;免疫荧光染色检测增殖标志物Ki67表达情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;ELISA法检测细胞中IFN-γ、IL-4、IL-6和IL-10的含量;RT-qPCR 和 Western blot 检测 Bax、Bcl-2、caspase-3 及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路mRNA和蛋白的表达情况.结果 与正常组比较,模型组细胞增殖水平明显上升,凋亡水平明显减弱,IFN-γ和IL-6的含量升高,IL-4和IL-10的含量减少,TLR4/MyD88/NF-κB信号通路被激活;经独活寄生汤含药血清低、中、高剂量组干预后,均能有效改善细胞异常增殖情况,增强细胞凋亡,抑制炎性反应和TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活.结论 独活寄生汤含药血清能够抑制TNF-α诱导的RA-FLS异常增殖和促炎因子的分泌,增强细胞凋亡和抗炎水平,其作用机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关.

目的:探讨血清可溶性肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(sTWEAK)、B型利钠肽(BNP)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)水平与扩张型心肌病(DCM)患者左心室重构的相关性。方法:选取陆军第七十二集团军医院2018年11月至2019年11月收治的DCM患者106例作为研究对象，同期选取体检健康人员70例作为健康对照组，分别测定血清sTWEAK、BNP、MMP-1水平，采用超声心动图测定左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、左室质量指数(LVMI)。对血清学各指标与患者左心室重构的关系行Pearson相关性分析。结果:DCM组心功能Ⅱ、Ⅲ级与健康对照组在LVEDD、LVEF、LVMI、血清sTWEAK、BNP、MMP-1水平比较差异均有统计学意义( F＝1 447.751、208.642、147.46、55.742、319.916、205.741，均 P<0.05)。与DCM组心功能Ⅱ级比较，心功能Ⅲ级DCM患者LVEDD、LVMI、BNP、MMP-1水平更高，LVEF更低，差异均有统计学意义( t＝17.702、19.308、7.279、24.511、5.129，均 P<0.05)。血清sTWEAK与LVEDD和LVMI呈负相关( r＝－0.221、－0.462，均 P<0.05)，与LVEF呈正相关( r＝0.490， P<0.05)；BNP水平与LVEDD和LVMI呈正相关( r＝0.667、0.483，均 P<0.05)，MMP-1水平与LVEDD和LVMI呈正相关( r＝0.756、0.562，均 P<0.05)，BNP、MMP-1水平均与LVEF呈负相关( r＝－0.476、－0.404，均 P<0.05)。 结论:血清sTWEAK水平在DCM患者中降低，BNP、MMP-1水平在DCM患者中升高，三种指标均能反映患者左室重构的严重程度。

目的:研究狼疮性肾炎(LN)患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)的表达及其临床意义。方法:选取97例从2016年1月至2019年12月在汉中三二〇一医院接受诊治的LN患者作为研究对象。其中活动期组38例与非活动期组59例，选取51例健康体检者作为对照组，对比各组血清NGAL、MCP-1、TWEAK的水平与肾功能指标的水平，通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血清NGAL、MCP-1、TWEAK表达对LN疾病活动性的诊断价值。结果:活动期组和非活动期组患者的血清NGAL、MCP-1、TWEAK、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白、dsDNA水平高于对照组，且活动期组以上各指标均高于非活动期组( P<0.05)。Pearson相关分析提示，LN患者血清NGAL、MCP-1、TWEAK水平与系统性红斑狼疮疾病活动度评分(SLEDAI)、Scr、BUN、24 h尿蛋白和dsDNA水平呈正相关( P<0.05)。ROC曲线分析可得：联合血清NGAL、MCP-1、TWEAK预测LN患者疾病活动性的曲线下面积(AUC)为0.865，特异度、灵敏度、AUC、约登指数均高于单一指标。 结论:LN患者活动期时血清NGAL、MCP-1、TWEAK表达水平升高，且与疾病的活动性密切相关，对于预测LN的活动性具有较高的应用价值，可作为临床预测LN活动期的生物标志物。

目的:探讨孟鲁司特钠联合噻托溴铵治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的疗效及对血清肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和炎性因子的影响。方法:选取衢州柯城祥元中医医院2019年1月至2020年1月收治的AECOPD患者102例，按照随机数字表法分为观察组、对照组各51例。观察组给予孟鲁司特钠联合噻托溴铵治疗，对照组给予噻托溴铵治疗。两组疗程均为2周。比较两组治疗疗效，治疗前后肺功能、血气分析、TWEAK、MCP-1和炎性因子的变化。结果:观察组总有效率(92.16%，47/51)高于对照组(72.55%，37/51)(χ 2＝6.746， P<0.05)。观察组治疗后最大呼气流量(PEF)为(2.98±0.21)L/s、第1秒用力呼气容积(FEV 1)为(2.13±0.15)L、动脉血氧分压(PaO 2)为(87.81±6.31)mmHg，均高于对照组的(2.43±0.35)L/s、(1.76±0.23)L、(74.39±5.48)mmHg，而动脉二氧化碳分压(PaCO 2)为(36.28±4.15)mmHg，低于对照组的(49.83±4.26)mmHg，两组差异均有统计学意义( t＝9.623、9.620、11.467、16.271，均 P<0.05)；观察组治疗后血清TWEAK为(0.46±0.07)pg/L、MCP-1为(93.42±13.27)ng/L，均低于对照组的(0.58±0.06)pg/L和(115.63±18.43)ng/L( t＝9.295、6.984，均 P<0.05)；观察组治疗后血清白细胞介素13(IL-13)[(94.56±13.24)ng/L]、白细胞介素18(IL-18)[(43.87±3.89)ng/L]、肿瘤坏死因子α(TNF-α)[(131.29±15.36)ng/L]均低于对照组的(113.21±15.53)ng/L、(56.78±4.25)ng/L、(131.29±15.36)ng/L( t＝6.526、15.941、8.726，均 P<0.05)。 结论:孟鲁司特钠联合噻托溴铵对AECOPD患者疗效明显，可降低血清TWEAK和MCP-1水平，及减轻炎性反应。

目的:探讨氧化苦参碱(Oxy)通过调控肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)蛋白表达对大鼠继发性甲状旁腺功能亢进症发展进程的影响作用及其作用机制。方法:将20只6周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠根据随机数目表分配法随机分为5组，每组4只：正常对照组(Con)、造模对照组(VC)、低浓度氧化苦参碱干预组(VC+Oxy-L)、中浓度氧化苦参碱干预组(VC+Oxy-M)、高浓度氧化苦参碱干预组(VC+Oxy-H)。采用高腺嘌呤、高磷饮食制备大鼠慢性肾脏病模型。VC+Oxy组自造模第5周开始按照分组以25、50、100 mg/(kg·d)的剂量向大鼠腹腔注射4 ml的氧化苦参碱溶液，Con组及VC组给予同剂量生理盐水腹腔注射。检测造模8周后大鼠血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、碱性磷酸酶(ALP)、钙、磷及甲状旁腺素(iPTH)的浓度。采用蛋白质印迹法(Western blot)、荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠肾脏肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)表达水平。两组间均数比较采用独立样本 t检验，多组间均数比较采用单因素方差分析。 结果:VC组大鼠SCr、BUN、ALP、iPTH水平高于Con组[(190.25±88.96) μmol/L比(24.00±2.94) μmol/L、(18.60±12.01) mmol/L比(5.10±1.02) mmol/L、(199.00±23.62) mmol/L比(113.5±33.36) mmol/L、(56.70±4.64) ng/L比(8.65±0.94) ng/L， t＝4.828、2.871、4.350、10.630， P<0.05]。各VC+Oxy组大鼠SCr、BUN、ALP、iPTH均较VC组明显下降，其中以VC+Oxy-M组大鼠SCr、ALP水平和VC+Oxy-L组iPTH水平较VC组降低最明显[(84.00±41.66) μmol/L比(190.25±88.96) μmol/L、(129.00±19.57) mmol/L比(199.00±23.62) mmol/L、(30.58±8.28) ng/L比(56.70±4.64) ng/L， t＝3.806、3.562、5.783， P<0.05]。VC组大鼠肾脏中TWEAK基因及蛋白相对表达量高于Con组(3.76±1.61、1.17±0.14比1.01±0.19、0.49±0.02， t＝4.457、6.857， P<0.05)；VC+Oxy组大鼠TWEAK基因及蛋白相对表达量低于VC组，其中以VC+Oxy-H组较VC组降低最为明显(0.56±0.42、0.71±0.15比3.76±1.61、1.17±0.14， t＝5.189、4.657， P<0.05)。 结论:氧化苦参碱可以通过抑制炎性因子表达，减轻大鼠肾脏损伤，从而延缓继发性甲状旁腺功能亢进症进程。

目的 研究血清可溶性尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(suPAR)、脑源性神经营养因子(BDNF)、可溶性肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子(sTWEAK)水平与类风湿关节炎患者疾病活动度及骨密度的相关性.方法 选取2021年1月至2023年7月解放军联勤保障部队第九四○医院内分泌科收治的类风湿关节炎患者140例为类风湿关节炎组,以及2021年1月至2023年7月至本院体检中心体检健康者70例为对照组.评估患者组疾病活动度,测定骨密度.检测对照组和类风湿关节炎组的血清suPAR、BDNF、sTWEAK水平.根据疾病活动度水平将类风湿关节炎组患者再分为低度亚组(2.6～3.2)、中度亚组(3.2～5.1)、高度亚组(>5.1).比较类风湿关节炎组与对照组、3个亚组的suPAR、BDNF、sTWEAK、骨密度;分析suPAR、BDNF、sTWEAK与疾病活动度、骨密度的相关性;分析suPAR、BDNF、sTWEAK联合检测在预测疾病加重风险中的价值.结果 类风湿关节炎组血清suPAR、BDNF、sTWEAK高于对照组(P<0.05).高度亚组血清suPAR、BDNF、sTWEAK明显大于中度亚组和低度亚组(P<0.05),中度亚组血清suPAR、BDNF、sTWEAK明显大于低度亚组(P<0.05).类风湿关节炎组前臂远端、腰椎L1-4、股骨颈、髋关节的骨密度小于对照组(P<0.05).高度组前臂远端、腰椎L1-4、股骨颈、髋关节骨密度明显小于中度亚组和低度亚组,中度亚组前臂远端、腰椎L1-4、股骨颈、髋关节骨密度明显小于低度亚组(P<0.05).血清suPAR、BDNF、sTWEAK与疾病活动度呈正相关,与前臂远端、腰椎L1-4、股骨颈、髋关节的骨密度呈负相关(P<0.05).联合suPAR、BDNF、sTWEAK三项指标预测疾病活动度升高风险的AUC大于单独预测的AUC(P=0.000).结论 类风湿关节炎患者suPAR、BDNF、sTWEAK与疾病活动度呈正相关,与骨密度呈负相关,联合检测suPAR、BDNF、sTWEAK可为预测患者疾病未来变化趋势提供有效指导.

目的 探讨异荭草苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及其作用机制.方法 将 48 只 C57BL/6J 小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组(600 mg·kg-1)、异荭草苷低剂量组(25 mg·kg-1)、异荭草苷高剂量组(50 mg·kg-1)及异荭草苷对照组(50 mg·kg-1),每组 8 只.小鼠自由饮用 2%DSS溶液复制UC模型,实验进行 3 周后,各给药组给予相应药物灌胃治疗 4 周.给药结束后,称取体质量,摘眼球取血,剖取结肠组织.采用苏木素-伊红(HE)、阿利新蓝-过碘酸-雪夫染色(AB-PAS)法观察小鼠结肠组织病理形态变化;透射电子显微镜观察小鼠结肠组织超微结构;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、脂多糖(LPS)和髓过氧化物酶(MPO)水平;免疫组化法检测小鼠结肠组织中半乳糖凝集素(Gal-3)蛋白表达;免疫荧光法检测黏蛋白(MUC2)表达及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白 3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)共定位情况;免疫印迹(Western Blot)法检测小鼠结肠组织中 Gal-3、NLRP3、ASC、半胱氨酸蛋白酶 1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白 1(ZO-1)蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠体质量明显下降,结肠长度明显缩短,肠质量指数明显增加(P＜0.01);小鼠肠黏膜结构紊乱,微绒毛稀疏,隐窝结构见大量炎性细胞浸润,线粒体肿胀明显,杯状细胞明显减少;血清IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、LPS和MPO水平明显升高,IL-10 水平明显降低(P＜0.01);结肠组织MUC2 蛋白阳性表达减少及NLRP3 和ASC共定位增强;结肠组织中Gal-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达明显增加,Occludin和ZO-1 蛋白表达明显降低(P＜0.01).与模型组比较,异荭草苷低、高剂量组小鼠体质量明显上升,结肠长度明显增长,肠质量指数明显降低(P＜0.05,P＜0.01);肠黏膜、微绒毛及线粒体结构明显恢复,炎性浸润减轻,杯状细胞明显增加;血清IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、LPS和MPO水平明显降低,IL-10 水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01);结肠组织MUC2 蛋白阳性表达增加,NLRP3 和ASC共定位减弱;结肠组织中Gal-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达明显降低,Occludin和ZO-1 蛋白表达明显增加(P＜0.05,P＜0.01).结论 异荭草苷对DSS诱导的UC小鼠具有良好的治疗效果,其机制可能与抑制Gal-3/NLRP3/IL-1β信号通路,保护肠黏膜屏障有关.

背景 糖尿病肾病患者日益增加,仍有患者在现有治疗中进展为终末期肾病,因此迫切需要新型治疗靶点.目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白 2(insulin like growth factor binding protein 2,IGFBP2)对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制.方法 体外培养的人足细胞随机分为正常血糖(normal glucose,NG)组(5 mmol/L)以及高血糖(high glucose,HG)24 h组、HG 48 h组、HG 72 h组(30 mmol/L).采用RT-qPCR法检测IGFBP2、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)和细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达水平,Western blot检测IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白表达水平,以此确定后续实验HG处理的最佳时间点.将IGFBP2小干扰RNA转染进入足细胞并分为NG组、阴性对照干预组(NG-NC-siRNA)、IGFBP2敲低siRNA干预组(NG-IGFBP2-siRNA1、NG-IGFBP2-siRNA2、NG-IGFBP2-siRNA3),RT-qPCR检测IGFBP2 mRNA表达水平,选择敲低效率最高的IGFBP2-siRNA用于后续实验.根据实验内容将足细胞随机分为:(1)NG组和 HG组;(2)NG组和 NG+125 ng/mL rhIGFBP2组;(3)HG组和 HG-IGFBP2-siRNA组.(1)(2)(3)均通过RT-qPCR检测TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位,共聚焦显微镜检测线粒体超氧化物和活性氧荧光强度,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 随HG处理时间增加,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1 mRNA水平随时间升高,Western blot结果显示IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白水平随时间升高.与NG组比较,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1均在HG 72 h时mRNA水平最高(P＜0.05),Western blot结果显示IGFBP2在HG72h时和Cleaved Caspase 3在HG48h时蛋白水平最高(P＜0.05),据此选 72h为后续实验诱导时间点.RT-qPCR检测结果显示,与NG组相比,阴性对照干预组mRNA表达无统计学差异(P＞0.05),NG-IGFBP2-siRNA2组IGFBP2 mRNA表达水平最低(P＜0.05),敲除效率最高,因此选择IGFBP2-siRNA2进行后续实验.与NG组相比较,HG组线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均增强(P＜0.05).与NG组相比较,NG+125 ng/mL rhIGFBP2组的TNF-α和ICAM-1 mRNA水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均升高(P＜0.05).与HG组相比较,HG-IGFBP2-siRNA组的TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均降低(P＜0.05).结论 敲除IGFBP2后通过减弱高血糖处理下的线粒体功能紊乱和氧化应激降低人足细胞凋亡,因此抑制IGFBP2的表达有望成为糖尿病肾病的潜在治疗策略.

目的 研究前列腺癌(prostate cancer,PC)患者血清肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor like weak inducer of apoptosis,TWEAK)、固醇调节元件结合蛋白 1(sterol regulatory element-binding protein 1,SREBP-1)表达与临床病理特征及无进展生存预后的关系.方法 选取2018年1月～2020年1月武汉市东西湖区人民医院行PC根治术的94例PC患者为PC组,以同期50例前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)患者为BPH组,以同期体检的50例健康人为对照组.酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清TWEAK和SREBP-1表达水平.Kaplan-Meier生存分析比较血清TWEAK和SREBP-1对PC患者无进展生存预后的影响.多因素COX回归分析影响PC患者无进展生存预后的因素.结果 PC组患者血清TWEAK(77.14±15.46 ng/L),SREBP-1(334.14±33.81 ng/L)高于 BPH 组(38.69±10.58 ng/L,201.69±28.74 ng/L)和对照组(36.26±10.27 ng/L,189.51±27.65 ng/L),差异具有统计学意义(t=23.752,25.249;34.636,37.821,均 P＜0.05).PC 患者血清 TWEAK 与SREBP-1表达呈显著正相关(r=0.668,P=0.001).Gleason评分＞7分、TNM分期Ⅲ期及术前前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)水平≥20 ng/ml 的 PC 患者血清TWEAK,SREBP-1 水平高于 Gleason评分≤ 7 分,TNM 分期 Ⅰ～Ⅱ期及术前PSA水平＜20 ng/ml,差异具有统计学意义(t=8.465～16.597,均P＜0.05).TWEAK高表达组和低表达组三年总体无进展生存率分别为60.42％(29/48)和86.96％(40/46),SREBP-1高表达组和低表达组三年总体无进展生存率分别为57.78％(26/45)和87.76％(43/49);TWEAK高表达组、SREBP-1高表达组三年累积无进展生存率低于TWEAK低表达组、SREBP-1 低表达组,差异具有统计学意义(Log-rank x2=8.125,9.547,P=0.004,0.002).TNM 分期 Ⅲ期(OR=1.448,P＜0.001)、Gleason 评分＞7 分(O R=1.401,P＜0.001)、术前 PSA ≥ 20 ng/ml(OR=1.353,P＜0.001)及血清 TWEAK(OR=1.338,P＜0.001)和 SREBP-1(OR=1.293,P＜0.001)是影响 PC 患者无进展生存预后的独立危险因素.结论 PC患者血清TWEAK和SREBP-1升高,两者与PC临床病理特征相关,是评估无进展生存预后的血清标志物.

目的 检测可溶性肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(sTWEAK)在斑秃病人血清及皮损中的表达水平,并探讨其在斑秃发病过程中的作用及临床意义.方法 以2017年10月至2018年11月在首都医科大学附属北京友谊医院确诊并治疗的斑秃病人70例为斑秃组,依据病情分为轻症组(44例)、重症组(26例).同期该院因色素痣或皮肤良性肿瘤进行头皮手术的人群65例作为对照组.比较各组sTWEAK及相关细胞因子白细胞介素(IL)-4、IL-12、γ干扰素(IFN-γ)蛋白及mRNA表达水平;采用Pearson法分析两指标间相关性.多元线性回归分析各指标与sTWEAK或脱发严重度工具(SALT)评分的关系.结果 斑秃组血清及皮损中sTWEAK表达水平[(196.73±32.48)ng/L,(2.35±0.62)ng/L]高于对照组[(121.75±19.62)ng/L,(1.49±0.45)ng/L](P<0.05).斑秃组血清及皮损中细胞因子IL-12、IFN-γ表达水平高于对照组(P<0.05),IL-4表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05).斑秃病人血清及皮损中sTWEAK表达水平与IL-12及IFN-γ呈正相关,与IL-4表达水平无明显相关性.轻症组血清及皮损中sTWEAK[(173.25±26.84)ng/L,(2.04±0.57)ng/L]、IL-12及IFN-γ表达水平低于重症组[(236.47±42.02)ng/L,(2.87±0.70)ng/L](P<0.05);轻症组、重症组血清及皮损中IL-4表达水平差异无统计学意义(P>0.05);斑秃病人血清、皮损处sTWEAK、IL-12、IFN-γ与SALT评分均呈正相关(P<0.05).多元线性回归分析显示,IL-12、IFN-γ与血清和皮损处sTWEAK呈显著正相关;血清及皮损处sTWEAK、IL-12、IFN-γ与SALT评分存在正相关性(P<0.05).结论 斑秃病人血清及皮损中sTWEAK表达水平增加,与IL-12及IFN-γ呈正相关,sTWEAK、IL-12及IFN-γ均与斑秃病情严重程度密切相关,sTWEAK可能参与斑秃炎症反应过程.