目的 研究白斑冲剂含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导的正常人表皮黑色素细胞(PIG1)氧化应激(OS)和抗氧化基因表达的影响.方法 以适当浓度H2O2 处理PIG1,建立体外黑色素细胞OS模型.配制白斑冲剂中药复方含药血清.将对数生长期的PIG1 随机分为对照组(PIG1+正常大鼠血清)、模型组(PIG1+H2O2)和白斑冲剂组(PIG1+白斑冲剂含药血清+H2O2).流式细胞仪检测各组细胞内活性氧(ROS);硫代巴比妥酸(TBA)法检测各组细胞内丙二醛(MDA);实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测抗氧化基因核因子E2 相关转录因子 2(Nrf2)、血红素氧合酶 1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)、超氧化物歧化酶 2(SOD2)和醌氧化还原酶 1(NQO1)mRNA的表达.结果 与对照组比较,模型组细胞内ROS和MDA水平显著升高[ROS:(166.30±3.62)%比(100.00±3.20)%,P<0.01;MDA:(3.60±0.17)nmol/mg比(2.79±0.36)nmol/mg,P<0.01];与模型组比较,白斑冲剂组细胞内ROS和MDA水平显著下降[ROS:(137.10±13.38)%比(166.30±3.62)%,(P<0.05);MDA:(3.25±0.18)nmol/mg比(3.60±0.17)nmol/mg,P<0.01)];与对照组比较,模型组细胞中GPx和SOD2 mRNA的表达显著下降(GPx mRNA:0.26±0.01 比 1.00±0.12,P<0.01;SOD2 mRNA:0.25±0.02 比 1.00±0.09,P<0.01),Nrf2、HO-1 和NQO1 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,白斑冲剂组细胞中GPx和SOD2 mRNA的表达显著升高(GPx mRNA:0.75±0.09 比 0.26±0.01,P<0.01;SOD2 mRNA:0.62±0.10 比 0.25±0.02,P<0.01),Nrf2 和HO-1 mRNA的表达也明显升高(Nrf2 mRNA:1.95±0.23 比 1.11±0.34,P<0.05;HO-1 mRNA:1.91±0.21 比 1.03±0.32,P<0.05),NQO1 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,白斑冲剂组Nrf2 和HO-1 mRNA的表达明显升高(Nrf2 mRNA:1.95±0.23 比 1.00±0.07,P<0.01;HO-1 mRNA:1.91±0.21 比 1.00±0.23,P<0.01)].结论 白斑冲剂含药血清能明显降低OS下PIG1 内ROS和MDA的含量,有抗氧化损伤的作用.其作用机制可能是与激活Nrf2-ARE信号通路,提高下游抗氧化酶Gpx、SOD2 和HO-1 mRNA的表达有关.

目的:评价ROS在吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用及其与核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)信号通路的关系。方法:分离、培养成年大鼠心肌细胞，采用随机数字表法分为4组( n＝20)：对照组(C组)、缺氧复氧组(H/R组)、吡那地尔后处理组(P组)和活性氧清除剂N-(2-巯基丙酰基)-甘氨酸(MPG)＋吡那地尔后处理组(MPG＋P组)。C组持续于37 ℃ 95%O 2＋5%CO 2培养箱中持续培养105 min；缺氧复氧损伤模型制备：5%CO 2＋1%O 2＋94%N 2条件下缺氧45 min，复氧60 min；P组缺氧45 min，吡那地尔50 μmol/L处理5 min，复氧60 min；MPG＋P组缺氧45 min，MPG 2 mmol/L处理10 min，吡那地尔处理5 min，复氧60 min。于复氧末检测心肌细胞Ca 2＋含量和Nrf2活性；观察心肌细胞超微结构，并行线粒体Flameng评分；采用Western blot法和RT-PCR法分别检测Nrf2、超氧化物歧化酶1(SOD1)、醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素加氧酶1(HO-1)及其mRNA的表达。 结果:与C组比较，H/R组心肌细胞Ca 2＋含量、Nrf2活性和Flameng评分升高，Nrf2、SOD1、NQO1和HO-1及其mRNA表达下调( P<0.05)，心肌细胞超微结构损伤加重；与H/R组比较，P组心肌细胞Ca 2＋含量和Flameng评分降低，Nrf2活性升高，Nrf2、SOD1、NQO1和HO-1及其mRNA表达上调( P<0.05)，心肌细胞超微结构损伤减轻；与P组比较，MPG＋P组心肌细胞Ca 2＋含量和Flameng评分升高，Nrf2活性降低，Nrf2、SOD1、NQO1和HO-1及其mRNA表达下调( P<0.05)，心肌细胞超微结构损伤加重。 结论:ROS参与了吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的过程，与激活Nrf2-ARE信号通路有关。

目的:评价活性氧(ROS)在缺氧后处理激活大鼠心肌细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路中的作用。方法:分离、培养成年大鼠原代心肌细胞，采用随机数字表法分成4组( n＝20)：正常组(N)、缺氧复氧组(HR组)、缺氧后处理组(HPO组)及HPO+ROS清除剂组(HPO+MPG)。采用缺氧45 min复氧60 min的方法制备心肌细胞缺氧复氧损伤模型；HPO组缺氧45 min后，行3个循环的氧合5 min-缺氧5 min处理，再复氧60 min；HPO+MPG组缺氧35 min时加入ROS清除剂N-(2-硫基丙酰)-甘氨酸(终浓度2 mmol/L)继续缺氧处理10 min，余同HPO组。于复氧末，检测心肌细胞内Ca 2+水平和Nrf2活性，观察心肌细胞超微结构并进行线粒体Flameng评分；采用Western blot法和RT-PCR法分别检测心肌细胞Nrf2、醌氧化还原酶(NQO1)、SOD1、血红素加氧酶1(HO-1)及其mRNA表达。 结果:与N组比较，HR组心肌细胞内Ca 2+水平、Nrf2活性和Flameng评分升高，Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达下调( P<0.05)；与HR组比较，HPO组心肌细胞内Ca 2+水平和Flameng评分降低，Nrf2活性升高，Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达上调( P<0.05)；与HPO组比较，HPO+MPG组心肌细胞内Ca 2+水平和Flameng评分升高，Nrf2活性降低，Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达下调( P<0.05)。 结论:缺氧后处理激活大鼠心肌细胞Nrf2/ARE信号通路的机制可能与ROS有关。

目的:探讨电针对脑缺血再灌注损伤小鼠脑组织氧化应激的影响，并探明其潜在机制。方法:将45只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组，采用线栓法制备小鼠脑缺血再灌注模型。电针组选取百会穴、膈俞穴、肾俞穴进行针刺治疗，每天1次，连续治疗7 d。各组小鼠进行神经功能缺损评分，HE染色观察脑组织损伤情况，试剂盒检测脑匀浆液中活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）的水平，免疫组化法检测脑内Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap-1）、核因子E2相关因子（Nrf2）、抗氧化反应元件（ARE）蛋白的表达。结果:电针治疗后，脑缺血再灌注损伤小鼠神经功能缺损评分与治疗前相比显著降低[（2.95±0.53）vs（1.43±0.39）， P<0.05]，神经元病理损伤明显改善，与模型组相比ROS、MDA水平下降[（110.71±16.92）vs（67.91±10.31）,（11.06±2.33）vs（6.29±0.57）, P<0.05]，SOD、GSH水平上升[（18.27±3.14）vs（25.71±2.77）,（4.20±0.58）vs（6.27±0.81）， P<0.05]，Keap-1阳性表达降低[（0.623±0.087）vs（0.504±0.056）， P<0.05]，Nrf2和ARE阳性表达显著增加[（0.260±0.031）vs（0.571±0.066）,（0.384±0.039）vs（0.611±0.071）, P<0.05）。 结论:电针能通过激活Keap-1/Nrf2/ARE信号通路调节脑组织氧化应激因子水平，改善脑缺血再灌注损伤小鼠神经损伤行为。

目的:探讨Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1 （Kelch-like ECH-associated protein 1, Keap1 ）/核因子E2相关因子2 (nuclear factor-E2-related factor 2, Nrf2）/抗氧化反应元件（antioxidant response element, ARE）信号通路在脑缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R ）损伤中对线粒体分裂的调控。方法:将提取的大鼠原代海马神经元采用随机数字表法分为4组：正常组（C组）、氧糖剥夺再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion, OGD/R）组、OGD/R+Nrf2抑制剂组（OGD/R+N组）和OGD/R+赋形剂组（OGD/R+V组）。透射电子显微镜观察线粒体形态，蛋白免疫印迹法检测线粒体动力相关蛋白（dynamin-related protein 1, Drp1 ）、线粒体分裂蛋白1 （mitochondrial fission protein 1, Fis1）、Keap1、Nrf2的表达，免疫荧光技术观察Nrf2的核转位，流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。结果:与C组比较，OGD/R组Keap1水平降低，Nrf2核内蛋白水平升高，Drp1、Fis1水平升高，免疫荧光观察Nrf2在OGD/R的过程中发生核转位，细胞凋亡率增加（ P<0.05）；与OGD/R组比较，OGD/R+N组Nrf2核内蛋白水平降低，Keap1水平升高，细胞凋亡率增加（ P<0.05）；OGD/R+V组与OGD/R组比较，Keap1、Drp1、Fis1、Nrf2核内蛋白水平及细胞凋亡率差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:在脑I/R中，Keap1/Nrf2/ARE信号通路能调控线粒体分裂、减少细胞凋亡、减轻脑损伤。

目的:探讨丹参提取物调控核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)通路改善重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的作用机制。方法:以逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠(1 ml/kg)法建立SAP肺损伤大鼠模型，随机分为模型组、丹参提取物(1.5 g/kg)组、ML385(Nrf2/ARE通路抑制剂，剂量：20 mg/kg)组和丹参提取物(1.5 g/kg)＋ML385(20 mg/kg)组。测量腹水量，计算W/D比值(W/D＝湿重/干重)；以苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠肺组织病理，并进行Holfbauer评分；以全自动血气分析检测仪检测动脉血气指标；试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和肺组织活性氧(ROS)水平，以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Nrf2蛋白表达。结果:与对照组比较，模型组大鼠肺组织出现肺泡壁毛细血管明显扩张变厚，肺泡间隔变大，肺间质充血、水肿、炎性细胞大量浸润等病理损伤症状，腹水量、肺组织ROS水平、W/D及Holfbauer评分、PaCO 2、血清MDA水平显著升高( P<0.05)，PaO 2、氧合指数(OI)、血清SOD水平显著降低( P<0.05)。与模型组比较，丹参提取物组大鼠上述病理损伤症状减轻，腹水量、肺组织ROS水平、W/D及Holfbauer评分、PaCO 2、血清MDA水平降低( P<0.05)，PaO 2、OI、血清SOD水平、肺组织Nrf2蛋白表达升高( P<0.05)；与模型组比较，ML385组大鼠上述病理损伤症状加重，腹水量、肺组织ROS水平、W/D及Holfbauer评分、PaCO 2、血清MDA水平升高( P<0.05)，PaO 2、OI、血清SOD水平、肺组织Nrf2蛋白表达降低( P<0.05)。与丹参提取物组比较，丹参提取物＋ML385组大鼠上述病理损伤症状加重，腹水量、肺组织ROS水平、W/D及Holfbauer评分、PaCO 2、血清MDA水平升高( P<0.05)，PaO 2、OI、血清SOD水平、肺组织Nrf2蛋白表达降低( P<0.05)。 结论:丹参提取物可通过激活Nrf2/ARE信号保护急性胰腺炎肺损伤大鼠的肺组织。

目的:探究枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides，LBP）对七氟烷麻醉诱导的雄性大鼠生殖毒性的作用，分析其对细胞外信号调节激酶（extracellular-signal-regulated kinase，ERK）/核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）-抗氧化反应元件（antioxidant response element，ARE）信号通路的影响。方法:取SD雄性大鼠按计算机随机生成数字法分为空白对照组、模型组、LBP低剂量组、LBP高剂量组和阳性对照组，除空白对照组外其余均以七氟烷麻醉诱导，同时腹腔注射给药，空白对照组和模型组予以等体积生理盐水，LBP低、高剂量组分别予以100 mg/kg、200 mg/kg LBP，每天1次，阳性对照组予以10 mg/kg维生素E，隔天1次，14 d后处死。计算各组大鼠睾丸与附睾的脏器指数；检测睾丸组织标志酶酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）含量；HE染色观察大鼠睾丸组织病理学；检测睾丸组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量；TUNEL染色观察大鼠睾丸组织细胞凋亡率；Western blotting检测大鼠睾丸组织内Bax、Bcl-2及ERK/Nrf2-ARE通路蛋白表达。结果:LBP低、高剂量组和阳性对照组睾丸脏器指数［（0.39±0.04）%、（0.47±0.05）%、（0.62±0.05）%］和附睾脏器指数［（0.08±0.01）%、（0.11±0.01）%、（0.14±0.02）%］均比模型组［（0.33±0.03）%，（0.05±0.01）%］高（均 P<0.001），ACP［（122.13±5.39）U/g、（115.37±4.45）U/g、（109.74±4.73）U/g］、LDH含量［（260.43±15.18）U/g、（245.17±8.13）U/g、（236.19±10.23）U/g］均比模型组［（129.98±6.17）U/g、（279.89±18.41）U/g］低（均 P<0.001），AKP含量［（224.41±11.69）U/g、（247.59±12.17）U/g、（266.74±13.78）U/g］、SOD活性［（3.11±0.12）U·mg/蛋白、（4.05±0.14）U·mg/蛋白、（4.78±0.15）U·mg/蛋白］均比模型组［（200.48±10.48）U/g、（2.02±0.09）U·mg/蛋白］高（均 P<0.001），MDA含量［（14.86±1.41）nmol·mg/蛋白、（10.39±1.22）nmol·mg/蛋白、（5.25±0.47）nmol·mg/蛋白］均较模型组［（18.36±1.99）nmol·mg/蛋白］低（均 P<0.001），睾丸细胞凋亡率均较模型组低（均 P<0.001），且呈LBP剂量依赖性（均 P<0.001）。模型组大鼠生精小管变薄，生精细胞明显减少，部分曲精管内仅残留少量精原细胞；给药后，LBP低、高剂量组和阳性对照组生精小管结构比较完整，各级生精细胞排列有序，数量增多，空泡减少。模型组大鼠睾丸组织中Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平较空白对照组高，Bax蛋白水平较空白对照组低（均 P<0.05）；LBP低、高剂量组Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平较模型组高，Bax蛋白水平较模型组低（均 P<0.05），且呈LBP剂量依赖性（ P<0.05）。 结论:LBP对七氟烷麻醉诱导的雄性大鼠生殖毒性有拮抗作用，可能与抑制ERK/Nrf2-ARE通路有关。

氧化应激是氧化与抗氧化的失衡状态，活性氧参与了生殖系统生理病理过程。核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（nuclear factor erythroid 2 related factor 2/antioxidant response element，Nrf2/ARE）是重要的抗氧化应激通路，Nrf2可被诸多因素如活性氧、抗氧化剂等激活进入细胞核，与小Maf蛋白和ARE结合，调控多种抗氧化酶的表达，从而发挥抗氧化作用。研究表明，Nrf2/ARE抗氧化通路在生殖系统疾病中发挥了重要的调控作用。本文就近年来国内外关于Nrf2/ARE信号通路在生殖系统中的研究进展进行综述，并对存在的问题及今后研究方向进行探讨及展望。

目的:探讨绞股蓝皂苷ⅩⅦ调控核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路抗脑缺血/再灌注（I/R）的机制。方法:将40只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、I/R模型组及25、50和100 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ组，每组8只。绞股蓝皂苷ⅩⅦ组分别给予绞股蓝皂苷ⅩⅦ 25、50、100 mg/kg灌胃（灌胃量0.01 mL/g），连续给药14 d；其余两组给予相同剂量生理盐水灌胃。然后采用改良线栓法制备大鼠脑I/R模型；假手术组大鼠采用相同方法手术，但不产生实质性栓塞。再灌注后24 h，评估各组大鼠神经功能缺损评分；采集大鼠腹主动脉全血检测血清活性氧（ROS）、血红素加氧酶-1（HO-1）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）、超氧化物歧化酶（SOD）、醌NADH氧化还原酶1（NQO1）、丙二醛（MDA）水平；随后取完整大脑组织并分离大脑皮质脑梗死周围半暗带组织，观察大鼠脑组织大体情况及脑梗死体积，光镜下观察脑组织病理学变化，采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA表达，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的蛋白表达。结果:再灌注后24 h，与假手术组比较，I/R模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高，脑组织梗死体积明显增大，血清NQO1、SOD和γ-GCS水平均明显降低、血清MDA、HO-1和ROS水平均明显升高，脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA及蛋白表达均明显升高。与I/R模型组比较，50 mg/kg与100 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ能明显降低脑I/R大鼠的神经功能缺损评分（分：1.50±0.53、1.37±0.52比2.75±0.46），缩小脑组织梗死体积〔（19.8±5.1）%、（21.4±6.4）%比（42.3±5.8）%〕，明显提高血清NQO1、SOD、HO-1和γ-GCS水平〔NQO1（ng/L）：186.05±10.38、220.75±16.22比131.36±5.95，SOD（kU/L）：63.23±5.30、72.70±8.62比36.75±6.55，HO-1（ng/L）：60.57±7.93、60.35±4.72比42.72±4.95，γ-GCS（kU/L）：8.81±0.53、8.72±0.69比6.80±0.56〕，明显降低血清MDA和ROS水平〔MDA（μmol/L）：5.94±0.66、5.61±0.53比10.88±1.34，ROS（kU/L）：69.11±4.23、67.12±4.52比104.43±7.54〕，同时可明显提高脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA及蛋白表达〔Nrf2 mRNA（2 -△△Ct）：1.90±0.13、2.13±0.18比1.48±0.11，Keap1 mRNA（2 -△△Ct）：1.78±0.11、1.85±0.10比1.43±0.10，Nrf2/β-actin：0.73±0.04、0.79±0.03比0.60±0.03，Keap1/β-actin：0.71±0.01、0.76±0.03比0.61±0.01〕，比较差异均有统计学意义（均 P<0.01）；25 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ无明显作用。 结论:绞股蓝皂苷ⅩⅦ （50 mg/kg和100 mg/kg）可能通过Nrf2/ARE信号通路调节NQO1、SOD、HO-1、γ-GCS、ROS及MDA起到抗脑I/R损伤的作用。

目的:观察老年脑卒中患者基质金属蛋白酶(MMP)-3启动子区-1612基因多态性和脑卒中发病风险及与炎性反应、氧化应激的相关性。方法:回顾性分析2019年3月至2021年3月本院诊疗的老年脑卒中发病患者129例作为研究组，同时选择110例健康体检者作为对照组，检测 MMP-3启动子区-1612基因多态性、炎性反应及氧化应激指标，并分析 MMP-3基因多态性与各指标的相关性。 结果:与对照组相比，研究组的高血压、糖尿病、吸烟史比例明显增高( χ2＝16.05、17.19、14.19，均 P<0.05)，且空腹血糖及低密度脂蛋白胆固醇、同型半胱氨酸水平也增高( t＝6.22，3.64，2.69，均 P<0.05)。与 MMP-3-5A/6A及6A/6A基因型患者相比， MMP-3基因5A/5A基因型患者血清炎症指标高迁徙率蛋白1(HM-BG1)、分形素趋化因子(FKN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-17(IL-17)含量增高( t＝16.40、23.06、10.64、15.39、21.02；20.01、28.03、13.42、20.09、27.40，均 P<0.05)，同时血清氧化应激相关分子Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子(Nrf2)、抗氧化应答元件(ARE)、醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素加氧酶-1(HO-1)表达也增加(均 P<0.05)，而上述指标在 MMP-3-5A/6A和6A/6A基因型患者之间无明显差异( P>0.05)。5A/5A基因型和6A/6A基因型分别仅含970bp 1个条带和120bp 1个条带，而5A/6A基因型含97bp、120bp 2个条带；研究组中的5A/6A基因型数目与对照组差异无统计学意义( P>0.05)，研究组中的5A/5A基因数目高于对照组[69(53.49%)比35(31.82%)， χ2＝11.34， P<0.05]。 MMP-3基因的多态性与脑卒中发生之间呈正相关( r＝0.25， P<0.05)。 MMP-3-1612基因多态性( OR＝7.21，95% CI：1.13~1.83， P＝0.01)及空腹血糖升高( OR＝1.27，95% CI：1.18~2.06， P<0.001)、高同型半胱氨酸( OR＝1.05，95% CI：1.07~1.58， P<0.01)、高血压( OR＝5.41，95% CI：1.14~4.46， P<0.01)、低密度脂蛋白胆固醇升高( OR＝4.03，95% CI：1.03~2.35， P＝0.02)、冠心病( OR＝1.17，95% CI：1.47~3.19， P<0.01)以及糖尿病( OR＝8.52，95% CI：1.32~4.71， P<0.01)等均可增加脑卒中发生风险。 结论:老年脑卒中患者 MMP-3启动子区-1612基因多态性和发病风险、炎性反应和氧化应激密切相关，MMP-3基因多态性是脑卒中发生的危险因素之一。