为探讨Smad1/5基因在贝类生长发育中的调控作用,利用RACE技术克隆获得文蛤Smad1/5(Mm-Smad1/5)基因的cDNA全长序列,对其生物信息学、不同组织和不同发育时期时空表达特征进行分析,并利用直接测序法分析了外显子区域SNP位点与生长性状的相关性.结果表明:Mm-Smad1/5的cDNA全长序列为1832 bp,开放阅读框1380 bp,编码459个氨基酸;氨基酸多序列比对显示,Mm-Smad1/5蛋白与太平洋牡蛎Smad5、大西洋舟螺Smad1的一致性分别为83.7%和80.2%,与人、鸡、非洲爪蟾等脊椎动物Smad 1、Smad 5氨基酸序列的一致性达到70.5%以上,说明该基因具有较高的保守性;结构域预测发现,Mm-Smad1/5含有Smads蛋白家族特有MH1、MH2两个高度保守结构域.荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,Mm-Smad1/5基因在成体6个组织均有表达,尤其在斧足、外套膜中表达量显著高于其他组织(P<0.05);Mm-Smad 1/5基因在各发育时期广泛表达, 从原肠胚期开始大量表达, 一直持续到壳顶幼虫期, 而从眼点幼虫大量下降, 稚贝时期又有所上升.Mm-Smad1/5基因外显子区域SNP位点相关分析表明,共发现了9个SNP位点,其中936 G>T位点与文蛤的生长性状显著相关(P<0.05).Mm-Smad1/5基因在文蛤生长发育中发挥重要调控作用, 可作为高产良种选育的候选基因, 而生长关联SNP位点分析将为文蛤分子标记辅助育种研究奠定重要基础.

为了研究SRBI基因的结构、功能以及在贝类壳色形成中的作用,利用SMART RACE技术克隆得到文蛤(Meretrix meretrix) SRBI (Mm-SRBI)基因的全长序列, 并对其内含子特征及不同组织、不同壳色群体外套膜中的表达差异进行了分析.结果表明:Mm-SRBI基因cDNA全长1676 bp,开放阅读框1515 bp,编码504个氨基酸,结构域预测发现有一个CD36结构域; 氨基酸序列比对发现, 与华贵栉孔扇贝的同源性最高(55%), 与其他物种的相似性在34%—40%,表明该基因变异较大;在Mm-SRBI基因中扩增出12个内含子,均存在于开放阅读框中,且都遵循GT-AG原则;荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,Mm-SRBI在闭壳肌、外套膜、斧足、鳃、内脏团和水管6个组织均有表达, 其中在外套膜中表达量显著高于其他组织(P<0.01), 这可能与外套膜中类胡萝卜素含量较高有关; 不同壳色群体外套膜中基因表达分析表明, Mm-SRBI在黑斑和红壳文蛤中的表达量显著高于白壳文蛤(P<0.05).实验结果为文蛤壳色形成研究奠定了基础.

癌毒是恶性肿瘤发病中的特异性因子,常与风、火、痰、瘀、寒、湿等致病邪气错杂而生,构成肿瘤的复合病机,不断促进肿瘤的增长、复发与转移.肿瘤类疾病病程中存在“散”与“失固”的矛盾,一方面是正气的耗散贯穿肿瘤发生、发展的始终,另一方面是正虚导致正气失于固摄.因此,针对性地采用收敛、固摄的方法,即固摄法,符合肿瘤性疾病正气耗散及癌毒扩散的根本病机.临床上常用药物包括:①五味子、酸枣仁、白芍、乌梅等酸味药;②牡蛎、文蛤等咸味药;③乌贼骨、赤石脂、龙骨、椿根皮、芡实等涩味药;④小茴香炭、杜仲炭、芍药炭、醋大黄等某些烧炭存性或醋制药;⑤其他补益药,如冬虫夏草、黄芪、桑螵蛸、白果、蛤蚧等.

潮间带滩涂是江苏省海岸线的重要特征,腹足类、双壳贝类海洋生物资源丰富.该文基于shotgun蛋白质鉴定技术研究江苏省吕四港地区主要贝类的蛋白质组成.采用nano-LC MS/MS技术从9种贝类生物中共鉴定了265个蛋白质,其中角螺中鉴定的蛋白质最多(105个),从毛蚶中鉴定的蛋白质最少(39个).这些蛋白质以细胞骨架蛋白为主,如微管蛋白、肌动蛋白、原肌球蛋白、肌球蛋白重链及组蛋白;另外还鉴定出核糖体蛋白、精氨酸激酶、ATP合成酶、延伸因子、热休克蛋白等.采用PCA分析法将蛋白质按照细胞成分与分子功能进行统计分析,结果表明缢蛏、泥螺与角螺的蛋白质组成相似,而竹蛏、文蛤、杂色蛤和四角蛤蜊的蛋白质组成相似.Heatmap和聚类分析结果表明,杂色蛤和西施舌被聚为一类,而缢蛏、泥螺、角螺、文蛤、毛蚶和四角蛤蜊被聚为另一类,竹蛏与这两类距离较远.该文研究建立了江苏沿海潮间带主要贝类中蛋白质组成特点比较分析的方法,有利于江苏沿海贝类资源开发利用.

黄河口邻近水域是著名的贝类生产区,四角蛤蜊、菲律宾蛤仔、文蛤等是该海域重要的增养殖品种.目前,贝类底播养殖最高年产量达30万t,实现产值15.4亿元.然而,贝类过度增殖,将引起海域环境的变化,继而导致贝类死亡率的增加,影响生态系统的健康.因此,基于生态系统的贝类生态容量评估至关重要.本研究利用Ecopath with Ecosim软件构建了黄河口邻近水域生态系统营养通道模型,在此基础上分析了该生态系统功能群间的相互影响、生态系统的总体状态,并评估了贝类的生态容量.结果表明:系统的总初级生产量/总呼吸(TPP/TR)为3.45、总初级生产量/总生物量(TPP/B)为38.91,同时具有较低的循环指数(FCI=0.028)、较高的剩余生产量961.24 t·km-2·a-1和较低的系统连接指数(CI=0.38),说明该系统目前处于发育的不稳定期.贝类生物量的增加对虾虎鱼、虾类和蟹类有正影响,对中上层鱼类、底层鱼类、海蜇、浮游动物等功能群有负影响.当前贝类的生物量是5.5 t·km-2,有一定的增殖潜力.模型估算得出的贝类生态容量是18.22 t·km-2,该研究结果可为黄河口邻近水域渔业资源的可持续发展提供管理依据.

目的 评价日本福岛核电站事故对南通市海产品放射性水平的影响程度.方法 2010-2017年每年分季度(除封海季节外)分类别采集贝类、鱼类、虾类、蟹类等海产品,送实验室检测总α、总β放射性水平.2017年鲳鱼和文蛤送江苏省疾病预防控制中心进行放射性核素检测.结果 文蛤、金钩虾、梭子蟹、小黄鱼总α和总β放射性水平各年份间均无回归关系(P＞0.05);鲳鱼总α放射性水平各年份间无回归关系(F(1,25)=0.126,P＞0.05),总β放射性水平各年份间有回归关系(F(1,27)=4.65,P＜0.05).2017年文蛤和鲳鱼天然核素铀-238、钍-232、镭-226、钾-40等均在本底水平,碘-131、铯-134、铯-137等3种人工核素水平小于检测限.结论 截止到2017年,日本福岛核电站事故暂时未影响到南通市沿海海域海产品,仍需继续监测,以掌握南通市沿海海域海产品放射性水平动态变化趋势.

目的 研究海洋真菌Penicillium sp.SCS-KFD16的次级代谢产物.方法 采用正向硅胶、ODS和半制备HPLC等方法对海洋真菌Penicillium sp.SCS-KFD 16的发酵代谢产物进行分离纯化,采用MS和NMR等波谱方法对代谢产物进行结构鉴定,分别采用DPPH法、Ellman比色法和PNPG法对化合物的自由基清除能力、乙酰胆碱酯酶抑制活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性进行测试.结果 从海洋文蛤来源真菌Penicillium sp.SCS-KFD16的发酵产物醋酸乙酯部分中分离了6个化合物,分别鉴定为2-(4-hydroxy-2-methoxybenzyl)-5-methoxyphenol(1)、penicillide (2)、bioxanthracene 2 (3)、6-ethyl-2,4-dihydroxy-3-methylbenzaldehyde (4)、4-羟基苯乙醇(5)和2-(4-hydroxyphenethyl) acetate (6).结论 化合物1为新化合物,命名为青霉双酚;化合物2～6具有一定的DPPH自由基清除活性,化合物4抑制α-葡萄糖苷酶活性的IC50为24.4μmol/L.

[目的]探讨仲景应用部分"血肉有情之品"如牡蛎、龙骨、文蛤、鳖甲、阿胶、猪肤、人尿、鸡子白、鸡子黄等内涵.[方法]通过梳理《伤寒论》和《金匮要略》有上述"血肉有情之品"的部分条文,剖析仲景应用部分"血肉有情之品"的内涵.[结果]仲景应用部分"血肉有情之品"另有深意,如牡蛎、文蛤、鳖甲、阿胶、猪胆汁及人尿等多用于少阴君火热病.均宗《内经》"热淫于内,治以咸寒"之法则.如用咸寒之牡蛎、文蛤、鳖甲、人尿等清热泻火;君火引动相火,用苦寒之"猪胆汁"清泄相火;少阴热病伤及阴血,用阿胶滋阴补血,人尿补液;火热克肺金,耗伤阴津,用甘寒之猪肤、甘平之白蜜滋阴润肺,甘寒之鸡子白润肺利咽;心火(阴火)产生之源在于脾胃虚弱,用甘温之鸡子黄补脾和中.[结论]仲景应用部分"血肉有情之品"其意主要是针对心君之火所致内伤火病,李东垣之"阴火论"有助于理解其深意.

于2016年5月10日至2016年11月10日,在连云港浅海底播和池塘养殖环境下比较研究了文蛤“万里红”、“万里1号”、“万里2号”3个品种(系)商品贝养殖生长性能.6个试验组分别为池养万里红(CW)、池养万里1号(CW1)、池养万里2号(CW2)、底播万里红(DW)、底播万里1号(DW1)、底播万里2号(DW2).结果显示:幼贝经60 d养殖,CW2组壳长显著大于CW、CW1、DW和DW1组(p＜0.05);壳高和体重显著大于其余各试验组(p＜0.05);壳宽显著大于CW、CW1、DW和DW2组(p＜0.05).幼贝经120 d养殖,CW、CW1和CW2组壳长显著大于DW、DW1和DW2(p＜0.05);CW和CW2壳高显著大于CW1,DW、DW1和DW2 (p＜0.05);CW和CW2壳宽均显著大于CW1和DW(p＜0.05);CW体重显著大于CW1(p＜0.05).幼贝经180 d养殖,DW1和DW2组壳长显著小于其余各试验组(p＜0.05);CW、CW1和CW2在壳高、壳宽和体重指标上显著大于DW、DW1和DW2 (p＜0.05).以上研究表明,文蛤幼贝养成商品贝,“万里”3个新品种(系)在连云港本地池塘养殖优于海区底播养殖;在池塘养殖模式中,前期“万里2号”具有生长优势,中后期“万里”3个品种(系)末体重基本相同,无显著性差异.

厥阴病之渴乃胃热所致,此热乃虚热,“消渴”和“吐蛔”实非厥阴提纲的“必然证”,而是“或然证”.小青龙汤证水气停留在“胸膈之间”,致“寒水射肺”或“支乘于心”,寒水射肺则“欲饮水”,支乘于心则“恶水不欲饮”,故小青龙汤证有“渴”与“不渴”.文蛤散证实乃水饮所致,此水在胸隔之间时,“渴”与“不渴”均可出现.五苓散证之渴的原因比较独特,是由“肺中、心下有水”和“脾虚客热”共同作用而致,仲景称之消渴.《伤寒论》中的口渴多为“阳明有热”和“水气内停”所致,亦有复杂情况,涉及此两个因素中的一个时患者反无口渴,与人体阳气的功能状态和涉及脏腑不同相关.