随着对体外胚胎形态学参数、时差动力学参数的认知，时差成像技术（time-lapse technology，TLT）已经进入了一个快速发展的阶段。TLT能实时连续记录胚胎从受精、卵裂、囊胚形成的各项细节图像并发现传统观察胚胎技术不能发现的细节，为胚胎筛选提供依据。此外，TLT还能在临床应用、实验室质量控制中发挥作用。与此同时，TLT在体外胚胎发育分析、人工智能开发中也存在问题，本文将对其进行探讨。

目的:探讨完全型圆头精子症患者临床表型、精子形态特征及辅助生殖技术治疗的效率。方法:收集2019年11月至2022年5月期间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心就诊的完全型圆头精子症患者（完全型圆头精子症组），采集外周血进行遗传学检测，全外显子测序挖掘致病基因，并对精液常规、精子形态及超微结构进行分析；全部患者均接受了卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）联合人工卵子激活（artificial oocyte activation，AOA）治疗。选取同日取卵的行常规ICSI周期患者作为对照组，并采用时差动态监测系统监测发育全程动态参数，分析2组受精及胚胎发育效率、发育动力学参数及临床治疗结局。结果:完全型圆头精子症组4例，对照组9例。完全型圆头精子症患者均合并精子活力低下、精子DNA碎片率升高，精子形态及顶体荧光染色均显示头部呈小圆形伴顶体区缺失；透射电子显微镜下圆头精子头部顶体完全缺失且多见核质松散、空泡化等异常，颈部线粒体鞘数量减少且排列杂乱，鞭毛轴丝“9+2”结构多见异常。4例患者中1例为 DPY19L2基因纯合缺失，1例为 DPY19L2基因新发纯合移码变异。完全型圆头精子症组受精率、双原核受精率、第3天优质胚胎率、第6天囊胚形成率、第6天优质囊胚形成率与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）；完全型圆头精子症组胚胎发育早期时间参数第二极体释放时间、原核消失时间，2至6-细胞各时期时间显著早于对照组且差异均有统计学意义（均 P<0.05），2组胚胎分裂模式差异无统计学意义（ P>0.05）。4例完全性圆头精子症患者中，2例新鲜胚胎移植各活产健康男婴1名，2例解冻周期移植活产健康男婴、女婴各1名。 结论:完全型圆头精子症患者精子形态学异常表型特征明显，ICSI联合AOA是有效的辅助生殖治疗手段。

目的:通过胚胎时差成像技术（TLT）结合人工智能（AI）探索体外胚胎发育曲线（EDM）中的卵裂球计数曲线“跳变值”与胚胎形态学特征的相关性，并探讨其在体外受精（IVF）胚胎评估中应用的可行性。方法:本研究为自主研发的AI胚胎评估软件的诊断性试验，即临床数据AI再评估，为回顾性研究。收集2020年12月至2021年12月于重庆医科大学附属妇女儿童医院生殖医学中心行IVF的1 226例患者共6 545个胚胎，其中2 869个胚胎进行囊胚培养。所有胚胎通过TLT培养并进行观察，由TLT记录软件Embryo Viewer依据胚胎发育动力学绘制EDM。本课题组自主研发的AI胚胎评估软件对胚胎发育过程中的卵裂球数目进行实时识别、记录，并与EDM进行比较，分析由卵裂球计数变化而形成的跳变值与胚胎结局的相关性。采用Spearman相关性及logistic回归分析跳变值与胚胎形态学评估、胚胎着床及活产的相关性，使用受试者工作特征（ROC）曲线评估各指标对胚胎着床、活产的预测价值。结果:Spearman相关性分析显示，受精卵受精后72 h卵裂球计数曲线提取的总跳变值与卵裂模式、囊胚形成、培养至第3天胚胎（D3胚胎）的形态学评级、D3胚胎的细胞均一度、D3胚胎的细胞碎片率均呈显著负相关（ β值分别为-0.268、-0.116、-0.213、-0.159、-0.222； P均<0.001），与D3胚胎的细胞数呈显著正相关（ β=0.034； P<0.001）。多因素logistic回归分析显示，胚胎总跳变值排序与囊胚形成（ OR=0.97，95% CI为0.93~0.99； P=0.034）、胚胎着床（ OR=0.96，95% CI为0.93~0.98； P=0.044）呈显著负相关；ROC曲线分析显示，胚胎总跳变值排序预测胚胎着床能力与传统胚胎形态学评估方法相近［其曲线下面积（AUC）分别为0.679、0.620］。多因素logistic回归分析显示，活产与患者年龄（ OR=0.91，95% CI为0.88~0.93； P<0.001）、D3胚胎形态学评级（ OR=0.77，95% CI为0.59~0.99； P=0.045）及胚胎总跳变值排序（ OR=0.98，95% CI为0.96~0.99； P=0.038）呈显著负相关，而与获卵数（ OR=1.08，95% CI为1.05~1.11； P<0.001）及移植日子宫内膜厚度（ OR=1.09，95% CI为1.06~1.12； P<0.001）呈显著正相关；ROC曲线分析显示，纳入建模的以上多个因素预测活产的AUC值为0.666。 结论:跳变值及其排序是对体外胚胎卵裂期发育的系统量化，其与胚胎发育质量及临床结局相关，可能是胚胎体外评估及选择的有益补充。

目的:建立一个能够对卵胞质内单精子显微注射（ICSI）卵子受精失败进行早期判断进而实施早期补救性人工激活的技术体系，并探讨其激活效率及应用价值。方法:首先回顾性分析2017年1月至2018年3月期间广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心150个采用时差胚胎动态监测系统（Time-lapse）系统培养的ICSI周期第二极体（Pb2）释放时间分布及其与受精及胚胎发育结局的关系，探讨Pb2释放作为ICSI受精失败早期判断指标的可行性。其次采用随机对照试验，收集2018年3月至2019年6月期间93个ICSI助孕周期的225个受精失败卵子，根据人工激活方式不同分为未激活组（NAOA组）、早期激活组（RAOA组）、晚期激活组（LAOA组），同时将其余ICSI注射卵子作为对照组，比较4组受精及胚胎发育参数，探讨ICSI受精失败早期补救性人工激活的效率和应用价值。结果:Time-lapse监测ICSI注射后卵子有Pb2释放组的受精率（99.91%）、双原核（2PN）受精率（97.76%）显著高于无Pb2释放组（0.03%、0.00%）且差异均具有统计学意义（ P均<0.001）；ICSI注射后卵子Pb2释放时间为（3.04±1.45） h，Pb2释放时间分布及占比分别为0~3 h（58.58%）、3~5 h（36.29%）、5~8 h（3.92%）、>8 h（1.21%）；NAOA组Pb2释放率、受精率、2PN受精率均为0%，LAOA组2PN受精率（36.00%）、第3日（D3）优质胚胎率（8.00%）、第5日（D5）囊胚转化率（0%）、D5优质囊胚转化率（0%）均显著低于RAOA组（60.00%、44.19%、51.16%、25.58%）且差异均有统计学意义（ P=0.005， P=0.002， P<0.001， P=0.005），同时均显著低于对照组（97.63%、48.62%、63.23%、37.94%）且差异均有统计学意义（ P均<0.001）；RAOA组Pb2释放率（84.00%）、受精率（81.33%）、2PN受精率（60.00%）、2PN卵裂率（95.56%）均显著低于对照组（100.00%、99.68%、97.63%、99.51%）且差异均具有统计学意义（ P<0.001， P<0.001， P<0.001， P=0.04），但D3优质胚胎率、D5囊胚转化率、D5优质囊胚转化率2组间差异均无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:Time-lapse监测Pb2释放可以作为早期判断ICSI卵子受精失败的指标，在ICSI注射后5 h对受精失败卵子进行早期补救性人工激活可以获得正常受精和理想的胚胎发育结局。

准确评估胚胎发育对于辅助生殖技术(ART)成功至关重要.传统方法多基于主观的胚胎形态学评估,缺乏客观性和实时性.时差成像技术(TLT)提供更稳定的培养环境,实现胚胎发育的动态监测,分析和建模不同发育时期的动态学参数,用于预测胚胎的植入潜力.然而,动态学参数通常需要人工标注,引入主观干扰,数据模型分析能力差异较大,与实际情况相差甚远,尤其在染色体整倍性分析方面表现较弱.随着人工智能(AI)的不断发展,TLT与AI的结合提供了减少TLT人工标注时间、提高胚胎植入率和染色体整倍性预测等方面的可能性.旨在探讨TLT结合AI在形态学和动态学参数方面对胚胎植入潜力和染色体整倍性的应用.

目的:应用时差成像技术观察补肾中药对高龄肾气阴两虚体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者胚胎发育时间参数的调控作用.方法:将76例行IVF-ET治疗的高龄肾气阴两虚证患者随机分为中药治疗组和安慰剂组,每组38例,另选取43例因男方因素行IVF治疗者作为正常对照组,观察各组患者肾气阴两虚症候积分变化;获卵数、2pn受精率、优胚率、临床妊娠率;时间参数及卵裂模式.结果:中药治疗组治疗后肾气阴两虚症状明显改善.中药治疗组ICSI 2PN受精率、优胚率均明显高于安慰剂组(P＜0.05).在t5时间段中,正常对照组及中药治疗组均明显快于安慰剂组(P＜0.05,P＜0.01).结论:在IVF-ET治疗周期,应用补肾中药能改善高龄IVF-ET患者的肾气阴两虚症状,可能通过降低高龄女性早期胚胎的发育迟缓,纠正异常卵裂的发生,使高龄肾气阴两虚型IVF患者妊娠结局有所改善.

人类辅助生殖技术(ART)包括人工授精( AI)和体外受精－胚胎移植( IVF-ET)及其衍生技术.近年不孕不育患者比例有升高趋势,此外因二胎政策的开放,有生育需求的高龄患者比例有所增加,ART技术现已成为治疗不孕不育患者的重要方式.随着科技的发展,许多衍生技术的应用,包括卵母细胞的体外成熟培养、时差成像系统、精子微量冷冻、代谢组学评估胚胎发育潜能等,弥补了ART技术的不足,使ART技术更完善,更准确地满足患者的需求.但是,新技术的应用仍然存在一些问题,在临床实施过程中,需要不断改进、更新和完善.

近年来兴起的时差成像技术在为胚胎发育提供稳定培养环境的同时可通过拍摄系统全程记录植入前胚胎的动态发育过程,从而获得更加全面准确的胚胎发育信息.这些信息能够显示人类胚胎行为学及动力学指标,建立胚胎评估模型,能有效地克服形态学评估主观性大、所提供信息有限的弊端,成为胚胎评估更为有利的手段.本文总结了时差成像技术建立的参数与模型,及其在胚胎评估中的临床应用.

目的 观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中2、4细胞卵裂球多核细胞的发育情况,并观察其胚胎移植后的妊娠结局.方法 选取行IVF-ET的患者96例,人工受精后时差成像技术观察胚胎卵裂球发育情况,将其分为均无多核胚胎(A组)、2细胞卵裂球多核者(2细胞一个卵裂球多核及4细胞无多核、2细胞均有多核及4细胞无多核胚胎,B组)、4细胞卵裂球多核者(2细胞一个卵裂球多核及4细胞至少一个卵裂球多核、2细胞均有多核及4细胞至少一个卵裂球多核胚胎,C组)、2细胞无多核且4细胞至少一个卵裂球多核胚胎者(D组).结果 A组培养第3天优质胚胎率和培养第5、6天可利用囊胚率均显著高于B、C、D组(P均＜0.05),B组培养第3天优质胚胎率与培养第5、6天可利用囊胚率均优于C组(P均＜0.05).在妊娠结局方面,A组行72个周期胚胎移植,种植率58.33％ (42/72),流产率7.14％ (3/42),活产率54.17％ (39/72);B组共行8个周期胚胎移植,其中2细胞一个卵裂球多核及4细胞无多核胚胎4个,3例患者种植成功,0例流产,3例均为活产;2细胞均有多核及4细胞无多核胚胎4个,4例患者种植成功,1例流产,3例活产.结论 2、4细胞卵裂球多核均可影响胚胎发育及移植后妊娠结局,其中4细胞卵裂球多核对胚胎发育影响更明显.

目的:应用时差成像技术观察二至益真胶囊在改善高龄妇女胚胎质量中的作用.方法:回顾性分析2019年5月至12月于广州中医药大学第二附属医院生殖医学科行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的肾阴虚高龄妇女,根据治疗情况分为中药治疗组和对照组,对照组65例直接进行IVF-ET治疗,中药治疗组62例先行二至益真胶囊中药治疗,然后进行IVF-ET治疗.比较两组患者的胚胎动力学参数及异常卵裂事件发生情况;同时观察两组患者获卵数、正常受精率、可利用胚胎数、优质胚胎数、临床妊娠率、着床率等情况.结果:中药治疗组平均获卵数显著多于对照组(P<0.05);两组患者的可利用胚胎数和优质胚胎数无统计学差异(P>0.05),但中药治疗组有增多的趋势.两组患者的正常受精率、临床妊娠率和着床率无统计学差异(P>0.05);在原核消失时间(tPNF)、2细胞出现时间(t2)、3细胞出现时间(t3)、4细胞出现时间(t4)、5细胞出现时间(t5)时段中,中药治疗组胚胎发育速度显著快于对照组(P<0.05),中药治疗组的s2(从3细胞分裂为4细胞的持续时间)显著短于对照组,有统计学差异(P<0.05),两组患者胚胎的异常分裂发生率无统计学差异(P>0.05),但中药治疗组胚胎异常分裂发生率有降低的趋势.结论:应用二至益真胶囊,可有效改善高龄IVF-ET患者的早期胚胎发育迟缓,同时对异常卵裂的发生有一定的改善作用,最终可能通过提高胚胎质量而改善高龄女性的生育力.