目的:评价毛兰素对骨癌痛（bone cancer pain, BCP）大鼠的镇痛效应及其与脊髓星形胶质细胞和炎症反应的关系。方法:SPF级成年雌性SD大鼠50只，采用随机数字表法分为5组（每组10例）：假手术组（Sham组）、骨癌痛组（BCP组）、骨癌痛+生理盐水组（BCP+NS组）、骨癌痛+毛兰素低剂量组[BCP+erianin（L）组]、骨癌痛+毛兰素高剂量组[BCP+erianin（H）组]。通过大鼠右后肢胫骨骨髓腔注射10 μl Walker256乳腺癌细胞混悬液（约4×10 4个）的方法构建大鼠BCP模型，Sham组注射等体积煮沸灭活的乳腺癌细胞悬液。于造模开始后第6天至第21天，每天1次，BCP+erianin（L）组和BCP+erianin（H）组腹腔注射毛兰素，BCP+NS组腹腔注射生理盐水，Sham组和BCP组不进行腹腔注射。分别于术前1 d和术后1、3、6、9、12、15、18、21 d测定机械刺激缩足反射阈值（paw mechanical withdrawal threshold, PMWT）和热刺激缩足反射潜伏期（paw withdraw thermal latency, PWTL）。于术后21 d痛行为学评估结束后处死大鼠取胫骨和脊髓组织，H-E染色检测胫骨肿瘤细胞浸润情况，采用Western blot法和免疫荧光法测定脊髓星形胶质细胞特异性标记物神经胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein, GFAP）水平，ELISA法测定脊髓促炎症细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）水平变化。 结果:与Sham组比较：BCP组大鼠术侧胫骨H-E染色显示骨髓腔内充满肿瘤细胞，术侧后肢于术后6、9、12、15、18、21 d PMWT和PWTL降低（ P<0.05），对侧后肢PMWT、PWTL差异无统计学意义（ P>0.05）；术后21 d BCP组大鼠脊髓GFAP水平和TNF-α、IL-6、IL-1β水平增加（ P<0.05）。与BCP+NS组比较：BCP+erianin（L）组、BCP+erianin（H）组大鼠术侧后肢术后9、12、15、18、21 d PMWT和PWTL均升高（ P<0.05），对侧后肢PMWT、PWTL差异无统计学意义（ P>0.05）；术后21 d大鼠脊髓GFAP和TNF-α、IL-6、IL-1β水平均降低（ P<0.05）。与BCP+erianin（L）组比较：BCP+erianin（H）组大鼠术侧后肢术后12、15、18、21 d PMWT和术后9、12、15、18、21 d PWTL均升高（ P<0.05），对侧后肢PMWT、PWTL差异无统计学意义（ P>0.05）；术后21 d大鼠脊髓GFAP和TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低（ P<0.05）。 结论:毛兰素可缓解大鼠BCP，其机制可能与抑制脊髓星形胶质细胞活化，减轻炎症反应有关。

目的:探讨大鼠背根神经节(DRG)持续受压(CCD)后DRG中膜联蛋白A2(ANXA2)的表达及分布规律。方法:成年雄性Wistar大鼠102只按随机数字表法分为对照组(24只)、CCD模型后7 d组(30只)、CCD模型后14 d组(24只)及CCD模型后28 d组(24只)。后3组大鼠采用"U"形棒制备CCD模型。采用机械痛刺激仪和热痛刺激仪测量各组大鼠的机械缩足反射阈值(MWT)和热辐射缩爪反应潜伏期(TWL)。采用Western blotting和免疫荧光染色检测各组大鼠DRG中ANXA2蛋白的表达。采用免疫荧光双标染色检测CCD模型后7 d组大鼠DRG中ANXA2和神经元标志物微管蛋白β3(TUBB3)的表达。结果:与对照组比较，CCD模型后7 d组、CCD模型后14 d组大鼠的MWT与TWL均明显下降，差异均有统计学意义( P<0.05)。Western blotting检测显示，与对照组比较，CCD模型后7 d组大鼠DRG中ANXA2蛋白的表达升高，差异有统计学意义( P<0.05)。免疫荧光染色检测显示CCD模型后7 d组大鼠DRG中ANXA2的免疫反应性较对照组增强。免疫荧光双标染色检测显示CCD模型后7 d组大鼠DRG中ANXA2主要表达于神经元的细胞膜中。 结论:CCD模型大鼠的机械痛阈与热痛阈下降，受压侧DRG内ANXA2蛋白表达上调及免疫反应性增强，ANXA2可能参与CCD后神经病理性疼痛的发生发展。

目的:探究慢性神经病理性疼痛小鼠是否出现空间记忆障碍并研究其海马转录组学变化。方法:24只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为两组：假手术组（Sham组）、坐骨神经慢性缩窄性损伤（chronic constrictive injury of sciatic nerve, CCI）组（CCI组），每组12只。分别于术前、术后7 d、术后28 d采用Von Frey纤维丝实验检测小鼠机械刺激缩足阈值（paw withdrawal mechanical threshold, PWMT）；在术后7、28 d通过旷场实验检测小鼠运动能力和焦虑状况，通过空间位置识别实验检测小鼠空间记忆；于术后28 d取新鲜海马组织进行转录组学测序检测两组小鼠基因表达差异并分析测序结果，采用实时荧光定量聚合酶链反应（real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR）验证纤调蛋白（fibromodulin, FMOD）、骨形态发生蛋白7（bone morphogenetic protein 7, Bmp7）、前列腺素D2合成酶（prostaglandin D2 synthase, PTGDS）、醛脱氢酶1家族成员A2（aldehyde dehydrogenase 1 family member A2, Aldh1a2）四组基因表达情况。结果:与Sham组比较，CCI组小鼠造模侧后足PWMT在术后7 d（ t=6.01， P<0.001）、术后28 d（ t=4.49， P<0.001）明显降低。术后7、28 d两组小鼠运动能力和焦虑状况差异无统计学意义（运动距离：术后7 d t=0.25， P=0.962，术后28 d t=0.32， P=0.939。旷场中心区域活动时间：术后7 d t=1.16， P=0.439，术后28 d t=0.34， P=0.931）。术后7 d两组小鼠空间记忆差异无统计学意义（ t=2.00， P=0.101），而在术后28 d CCI组小鼠空间记忆较Sham组明显降低（ t=2.93， P=0.011）。转录组学测序发现两组小鼠海马存在大量差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs）。RT-qPCR检测发现：与Sham组小鼠海马组织比较，CCI组小鼠海马组织中FMOD（ t=8.07， P<0.001）、Bmp7（ t=4.81， P=0.003）、PTGDS（ t=4.07， P=0.007）、Aldh1a2（ t=7.93， P<0.001）基因表达均降低。 结论:慢性神经病理性疼痛小鼠可出现空间记忆障碍，且小鼠海马组织转录组学发生显著变化。

目的:探讨桔梗皂苷D（platycodin D, PD）对大鼠神经病理性疼痛模型的镇痛作用及其对脊髓小胶质细胞活化的影响。方法:将60只雄性成年SD大鼠按随机数字表法分为6组（每组10只）：假手术组（Sham组）、脊神经结扎（spinal nerve ligation, SNL）组（SNL组）、SNL+生理盐水组（SNL+NS组）、SNL+PD低剂量组（PDl组）、SNL+PD中剂量组（PDm组）、SNL+PD高剂量组（PDh组）。SNL大鼠结扎和剪断左L 5脊神经，Sham组大鼠只分离神经不进行结扎剪断处理；SNL+NS组、PDl组、PDm组和PDh组大鼠于造模后当天开始分别经口灌胃生理盐水或PD（1、5、10 mg/kg）至术后7 d。分别于术前1 d和术后1、3、5、7、10、14 d测定各组大鼠机械刺激缩足反射阈值（paw mechanical withdrawal threshold, PMWT）和热刺激缩足反射潜伏期（paw withdraw thermal latency, PWTL）。于术后7 d取大鼠脊髓，采用免疫荧光和Western blot法检测脊髓小胶质细胞离子钙接头蛋白分子1（ionized calcium-binding adaptor molecule1, Iba-1）的表达，ELISA法检测脊髓促炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量变化。 结果:与Sham组比较：SNL组、SNL+NS组、PDl组、PDm组和PDh组大鼠术侧PMWT于术后1、3、5、7、10、14 d明显降低，术侧PWTL于术后3、5、7、10、14 d明显降低（ P<0.05）；术后7 d SNL组大鼠脊髓Iba-1的表达和TNF-α、IL-6、IL-1β含量均明显升高（ P<0.05）。与SNL+NS组比较：PDm组、PDh组大鼠术后3、5、7、10、14 d术侧PMWT升高（ P<0.05），PDm组大鼠术后5、7、10、14 d术侧PWTL升高（ P<0.05）；术后7 d PDm组大鼠脊髓Iba-1的表达和TNF-α、IL-6、IL-1β含量均明显降低（ P<0.05）。与PDm组比较，PDl组和PDh组大鼠术侧PMWT于术后3、5、7、10、14 d降低，术侧PWTL于术后5、7、10、14 d降低（ P<0.05）。 结论:PD能够缓解SNL大鼠的机械痛敏和热痛敏，其作用机制可能与其抑制大鼠脊髓小胶质细胞活化，进而减少炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的含量有关。

目的:探讨Akt3基因敲除对坐骨神经结扎小鼠神经病理性痛影响的机制。方法:SPF级C57BL/6小鼠为背景的Akt3基因敲除小鼠(Akt3 -/-小鼠)12只按照随机数字表法分为Akt3基因敲除＋假手术组(Akt3 -/-＋Sham组， n＝6)，Akt3基因敲除＋模型组(Akt3 -/-＋CCI组， n＝6)；野生型小鼠(WT小鼠)12只采用随机数字表法分为野生＋Sham组(WT＋假手术组， n＝6)，野生＋模型组(WT＋CCI组， n＝6)。CCI组采用坐骨神经慢性结扎损伤制作神经病理性疼痛模型，Sham组行假手术。各组小鼠分别于术前1 d，CCI术后7 d测定机械刺激缩足反应阈值(paw withdrawal mechanical threshold，PWMT)。Sham组于造模后7 d，CCI组于造模后7 d、14 d后各处死3只小鼠，取L3～5脊髓节段，采用Western blot方法检测Akt3、磷酸化Akt(p-Akt)、GSK3β、磷酸化NR2B(p-NR2B)表达水平。采用SPSS 21.0软件进行统计学分析。 结果:小鼠PWMT，脊髓组织Akt3、p-Akt、GSK3β、p-NR2B蛋白表达的组别×时间交互效应均显著( F＝16.667, 269.899，26.651，572.998，37.836， P<0.01)。与Akt3 -/-＋Sham组比较，Akt3 -/-＋CCI组术后7 d PWMT降低[(0.34±0.20)g，(1.18±0.11)g； P<0.01]，脊髓水平p-Akt[ (0.90±0.08)，(0.51±0.06)； P<0.01]、GSK3β[ (0.74±0.04)，(0.29±0.02)； P<0.01]、p-NR2B[(0.96±0.11)，(0.71±0.04)； P<0.05]表达增加。与WT＋CCI组比较，Akt3 -/-＋CCI组术后7 d PWMT降低[(0.34±0.20)g，(0.49±0.12)g； P<0.05]；脊髓水平p-Akt表达减少[ (0.90±0.08)，(1.02±0.17)； P<0.05]、GSK3β[ (0.74±0.04)，(0.57±0.09)； P<0.01]、p-NR2B表达增加[ (0.96±0.11)，(0.91±0.08)； P<0.05]，差异有统计学意义。 结论:Akt3基因敲除后，小鼠坐骨神经结扎神经病理性疼痛加重可能与Akt/GSK3β/NR2B表达变化有关。

目的:探究早期脊髓电刺激对大鼠脊髓损伤后神经病理性疼痛的疗效和脊髓背角内瞬时感受器电位香草酸受体 1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)和C-C趋化因子配体2(C-C chemok-ine ligand 2,CCL2)表达的影响.方法:雌性SD大鼠64只按随机数字表法分为4组:空白对照组、假手术组、脊髓损伤组、脊髓损伤+电刺激组,每组16只.观察术前、术后7、14天机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)的变化,采用qPCR法和Western Blot法分别检测TRPV1和CCL2 mRNA及其蛋白表达,ELISA法检测炎性细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量.结果:与空白对照组和假手术组比较,术后7、14天脊髓损伤组大鼠50%MWT和TWL降低、TRPV1和CCL2转录和表达升高(P<0.05)、IL-6、IL-1β和TNF-α表达升高(P<0.001);与脊髓损伤组相比,脊髓损伤+电刺激组大鼠50%MWT和TWL均上升、TRPV1和CCL2转录和表达下降(P<0.05)、IL-6、IL-1β和TNF-α表达下降(P<0.05).结论:脊髓电刺激可能通过抑制TRPV1和CCL2表达、减轻炎症反应,缓解脊髓损伤后神经病理性疼痛.

目的 观察养血荣筋丸对紫杉醇诱导周围神经损伤大鼠模型的神经保护作用.方法 采用紫杉醇诱发化疗后周围神经损伤大鼠模型,以行为学方法观察大鼠给药前后对机械刺激及热刺激的反应,电生理方法检测给药前后大鼠神经传导速度,Western blot法检测组织中核因子E2(Nrf2)蛋白表达,并通过组织形态学测定足背部表皮神经纤维密度,观察坐骨神经、背根神经节细胞形态学变化,综合评价养血荣筋丸对紫杉醇诱导神经损伤大鼠模型的保护作用.结果 与模型组比较,养血荣筋丸可以提高50％缩足阈值;对热缩足潜伏期有不同程度的延长;对高、中剂量组大鼠的神经传导速度有一定升高,但均无统计学意义;对足背表皮神经纤维密度明显提高;对背根神经节和坐骨神经组织形态的损伤有一定的改善作用;对脊髓角中Nrf2蛋白的表达量升高.结论 养血荣筋丸对紫杉醇诱导周围神经损伤大鼠具有一定的神经保护作用.

目的:基于蛋白激酶C(PKC)-配体门控型非选择性离子通道3(P2X3)信号通路观察电针对神经病理性疼痛小鼠神经修复的作用机制.方法:48只小鼠随机分成假手术组、模型组、针刺组与电针组,每组12只.除假手术组外,其余小鼠构建坐骨神经慢性限制性损伤(CCI)模型.术后第8天针刺组与电针组接受针刺与电针干预,连续7 d.于术前、术后3 d、5 d、7 d、10 d、12 d、14 d对各组进行机械缩足反射阈值(MWT)与热刺激缩足反射潜伏期(TWL)测试.术后15 d处死所有小鼠,HE染色观察坐骨神经组织形态,ELISA检测脊髓组织IL-1β、TNF-α水平,Western blot检测脊髓组织PKC、P2X3水平,免疫荧光检测脊髓神经元PKC、P2X3表达情况.结果:假手术组神经元细胞大小不一,细胞膜完整,细胞质呈细小颗粒状,细胞核大而圆,核仁居中清晰可见;模型组可见萎缩的神经元,有髓神经纤维紊乱,轴突肿胀,神经元间形成间隙;与模型组相比,针刺组、电针组萎缩神经元数量减少(P<0.05),有髓神经纤维排布情况改善,电针组较针刺组改善更为明显.与相同时间点的假手术组相比,术后3 d、5 d、7 d、10 d、12 d、14 d模型组、针刺组、电针组患侧后肢的MWT、TWL值明显下降(P<0.05),IL-1β、TNF-α、PKC、P2X3表达量、PKC、P2X3阳性细胞数、平均光密度值升高(P<0.05);与模型组相比,术后10 d、12 d、14 d针刺组、电针组MWT、TWL值明显上升(P<0.05),IL-1β、TNF-α、PKC、P2X3表达量、PKC、P2X3阳性细胞数、平均光密度值降低(P<0.05);与针刺组相比,术后10 d、12 d、14 d电针组MWT、TWL值升高(P<0.05),IL-1β、TNF-α、PKC、P2X3表达量、PKC、P2X3阳性细胞数、平均光密度值降低(P<0.05).结论:电针可能减轻CCI模型小鼠神经炎症反应,降低PKC、P2X3表达水平,改善坐骨神经细胞形态与有髓神经纤维排布情况,缩小神经元间间隙,提升MWT、TWL值,缓解神经病理性疼痛程度.

目的:观察电针(EA)干预对坐骨神经分支损伤模型(SNI)小鼠背根神经节(DRG)中去甲肾上腺素(NE)、α2A肾上腺素受体(α2A-R)的作用.方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(SNI)、假电针组(SNI+NC-EA)和电针组(SNI+EA).使用机械刺激和热辐射刺激分别检测机械缩足反应阈值(PWMT)和热刺激缩足反应潜伏期(PWTL).通过免疫荧光染色检测小鼠DRG内交感神经纤维芽生及α2A-R与大直径感觉神经元共标数量;采用ELISA试剂盒检测小鼠血清及DRG中NE含量,Western Blot检测DRG内酪氨酸羟化酶(TH)和α2A-R表达水平.结果:SNI后,PWMT及PWTL均显著降低,电针治疗后,PWMT及PWTL逆转升高;免疫荧光染色显示:SNI后DRG中交感芽生增生,电针治疗后,交感芽生明显减弱;SNI后,DRG内NE、α2A-R及TH均显著升高,电针干预后降低其表达,但血清中NE无明显变化.结论:在SNI模型中,电针调控交感-感觉耦联可能是通过抑制DRG中NE的释放及α2A-R的表达,从而产生镇痛效应.

目的 通过观察"三法三穴"推拿手法干预早期对轻度坐骨神经慢性压迫性损伤(Minor chronic compression injury of sciatic nerve,Minor CCI)模型大鼠脊髓背角中白介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)、白介素-17A 受体(interleukin-17A receptor,IL-17RA)、转录因子 CCAAT增强子结合蛋白 β(transcription factor CCAAT/enhancer binding protein β,C/EBPβ)表达的影响,明确推拿对周围神经病理性疼痛(peripherally neuropathic pain,pNP)的即刻镇痛机制.方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、推拿组,8只/组,模型组、推拿组复制Minor CCI模型.使用按摩推拿手法模拟仪模拟点法、拨法、揉法,对推拿组大鼠患侧殷门、承山、阳陵泉进行定时、定性、定量干预1次,通过机械缩足反射阈值(paw mechanical withdraw threshold,PMWT)与冷敏阈值(cold sensitivity threshold,CST)评价干预后即刻对大鼠机械痛觉、温度觉敏化情况变化;通过蛋白免疫印迹法(Western Bolt,WB)检测脊髓背角中IL-17A、C/EBPβ表达;通过荧光定量聚合酶链式反应(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测脊髓背角中 IL-17A、IL-17RA、C/EBPβ表达.结果 与假手术组、模型组相比,推拿干预1次后可提高Minor CCI模型大鼠PMWT与CST(P＜0.01);WB结果显示,与模型组相比,推拿可降低IL-17A、C/EBPβ在脊髓背角中蛋白的表达(P＜0.05);RT-PCR结果显示,与模型组相比,推拿可降低IL-17A、IL-17RA、C/EBPβ在脊髓背角中mRNA的表达(P＜0.05).结论 推拿干预1次后,可通过抑制脊髓背角中IL-17A、IL-17RA、C/EBPβ信号通路的表达,改善机械痛觉及冷刺激敏化情况,从而实现即刻镇痛的作用.