目的:探讨桔梗皂苷D（platycodin D, PD）对大鼠神经病理性疼痛模型的镇痛作用及其对脊髓小胶质细胞活化的影响。方法:将60只雄性成年SD大鼠按随机数字表法分为6组（每组10只）：假手术组（Sham组）、脊神经结扎（spinal nerve ligation, SNL）组（SNL组）、SNL+生理盐水组（SNL+NS组）、SNL+PD低剂量组（PDl组）、SNL+PD中剂量组（PDm组）、SNL+PD高剂量组（PDh组）。SNL大鼠结扎和剪断左L 5脊神经，Sham组大鼠只分离神经不进行结扎剪断处理；SNL+NS组、PDl组、PDm组和PDh组大鼠于造模后当天开始分别经口灌胃生理盐水或PD（1、5、10 mg/kg）至术后7 d。分别于术前1 d和术后1、3、5、7、10、14 d测定各组大鼠机械刺激缩足反射阈值（paw mechanical withdrawal threshold, PMWT）和热刺激缩足反射潜伏期（paw withdraw thermal latency, PWTL）。于术后7 d取大鼠脊髓，采用免疫荧光和Western blot法检测脊髓小胶质细胞离子钙接头蛋白分子1（ionized calcium-binding adaptor molecule1, Iba-1）的表达，ELISA法检测脊髓促炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量变化。 结果:与Sham组比较：SNL组、SNL+NS组、PDl组、PDm组和PDh组大鼠术侧PMWT于术后1、3、5、7、10、14 d明显降低，术侧PWTL于术后3、5、7、10、14 d明显降低（ P<0.05）；术后7 d SNL组大鼠脊髓Iba-1的表达和TNF-α、IL-6、IL-1β含量均明显升高（ P<0.05）。与SNL+NS组比较：PDm组、PDh组大鼠术后3、5、7、10、14 d术侧PMWT升高（ P<0.05），PDm组大鼠术后5、7、10、14 d术侧PWTL升高（ P<0.05）；术后7 d PDm组大鼠脊髓Iba-1的表达和TNF-α、IL-6、IL-1β含量均明显降低（ P<0.05）。与PDm组比较，PDl组和PDh组大鼠术侧PMWT于术后3、5、7、10、14 d降低，术侧PWTL于术后5、7、10、14 d降低（ P<0.05）。 结论:PD能够缓解SNL大鼠的机械痛敏和热痛敏，其作用机制可能与其抑制大鼠脊髓小胶质细胞活化，进而减少炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的含量有关。

目的 采用多成分定量分析结合化学计量学和熵权逼近理想解排序(TOPSIS)法综合评价益肺清化膏质量.方法 采用高效液相色谱法测定14批益肺清化膏(S1～S14)中党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、黄芪紫檀烷苷、黄芪异黄烷苷、黄芪甲苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、鸡矢藤次苷甲酯、车叶草苷酸、车叶草苷、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量,然后利用化学计量学(主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析)和熵权TOPSIS法对14批益肺清化膏的质量进行评价.结果 化学计量学结果显示,14批益肺清化膏可聚为3类,编号S1～S6的样品为第Ⅰ类,编号S7～S10的样品为第Ⅱ类,编号S11～S14的样品为第Ⅲ类;毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、鸡矢藤次苷甲酯、黄芪甲苷、黄芪紫檀烷苷、党参炔苷、麦冬甲基黄烷酮A和桔梗皂苷E的变量重要性投影值均大于1.熵权TOPSIS分析结果显示,14批样品的最优解的欧氏贴近度在0.152 9～0.736 6之间,以编号S14样品最高(0.736 6).结论 14批益肺清化膏中以编号S14样品的质量最优,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷等8个成分可能是影响益肺清化膏质量的差异标志物.

目的 采用多指标成分定量结合化学计量学方法对不同产地和不同采收期的桔梗Platycodon grandiflorum进行质量评价.方法 采用热浸法测定其醇溶性浸出物含量,应用超高效液相-电喷雾检测器(UPLC-CAD)法同时测定桔梗皂苷D、桔梗皂苷D3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷E、去芹糖桔梗皂苷E 5 个活性成分含量,揭示不同采收期桔梗化学成分含量动态积累规律.运用主成分分析法分别对不同生长年限、不同产地桔梗进行综合评价,单因素方差分析比较不同产地桔梗各指标成分含量.结果 以春季4月、秋季 9～10 月、三年生为桔梗的最佳采收期.主成分分析、方差分析表明不同产地桔梗中指标含量存在显著性差异,同一产地不同批次间也有区别;根据主成分分析对不同产地桔梗进行综合评分,排名靠前的产地为甘肃陇南及河南省地区,陕西商洛、安徽亳州、内蒙古赤峰产地次之,山东淄博和山西太原产地排名较后.结论 以多指标成分定量结合化学计量学建立的评价方法明确了桔梗最佳采收期,评价了不同产地桔梗的质量,为桔梗药材质量控制研究提供依据.

目的:探究不同产地趁鲜切加工方式对桔梗饮片质量的影响,明确最优产地趁鲜切加工方法.方法:通过不同干燥方法加工桔梗趁鲜切后的饮片,记录不同加工方式的加工时长,评价饮片外观形态;采用高效液相色谱法(HPLC)测定桔梗皂苷D(PD)的含量;采用分光光度法分别测定总皂苷、总多糖及总黄酮含量;评价醇浸出物含量,并通过熵权-逼近理想解排序法(TOPSIS)进行综合评价.结果:在不同加工方法中,热风干燥至半干切制再烘干所制备的饮片外观较优,以PD、总皂苷、总多糖、总黄酮及醇浸出物含量为标准的综合评价得分最优,且工艺耗时短,适合作为产地初加工方式.结论:优化出的桔梗产地趁鲜切加工方式切实可行,工艺简便,可操作性强,为桔梗产地初加工提供参考依据.

目的:建立同时测定桔贝合剂中苦杏仁苷、甘草苷、贝母素甲、桔梗皂苷D、黄芩苷和麦冬皂苷D 6个成分含量的一测多评方法.方法:采用Waters T3 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;流动相为乙腈-1％乙酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;蒸发光检散射检测器(ELSD).以甘草苷为内参物,分别建立其他5个成分的相对校正因子,并计算其含量.结果:苦杏仁苷、甘草苷、贝母素甲、桔梗皂苷D、黄芩苷、麦冬皂苷D在各自浓度范围内线性关系良好,10批桔贝合剂中6个成分的一测多评法与外标法的实测值之间无显著性差异,含量分别为 0.116～0.245 mg/mL、0.035～0.048 mg/mL、0.012～0.055 mg/mL、0.086～0.125 mg/mL、0.177～0.432 mg/mL、0.011～0.032 mg/mL.结论:该方法结果准确、重复性好,可用于桔贝合剂的质量控制.

目的:考察桔梗经米泔水炮制后挥发性成分及桔梗皂苷D的含量变化.方法:将桔梗生制饮片与米泔水按照100 g∶600 mL配比加入同一容器中于28℃浸泡24 h,烘干,得到桔梗炮制品,采用气相色谱-质谱测定桔梗生品及炮制品挥发油化学成分,采用高效液相色谱法测定桔梗皂苷D的含量.结果:在桔梗生品中检出22个化学成分,占挥发油总量的69.94％;在桔梗炮制品中检出20个化学成分,占挥发油总量的89.11％.生品和炮制品共有化合物11个,炮制后桔梗中新增9个化合物,减少11个化合物,共有化合物中除正三十一烷相对含量降低外,亚油酸等其他成分相对含量均有不同程度升高.桔梗经米泔水炮制后桔梗皂苷D含量明显增加.结论:米泔水炮制桔梗改变了挥发性成分及桔梗皂苷D的含量.

[目的]干旱严重影响药材的产量和品质.揭示外源钙缓解桔梗干旱胁迫伤害的潜在生理机制,可为利用外源钙提高干旱、半干旱地区桔梗耐旱性和药用品质提供理论依据.[方法]以桔梗幼苗为材料,采用盆栽试验在干旱条件下叶面喷施10 mmol/L CaCl2,研究外源钙对桔梗幼苗生长、光合气体交换参数、抗氧化酶活性及药用部位品质等的影响.[结果](1)外源钙能促进干旱胁迫下桔梗根长和干鲜生物量增加,同时促使其叶片气孔开度、叶绿素a含量、总叶绿素含量、类胡萝卜素含量、净光合速率、气孔导度和蒸腾速率分别显著增加30.28％、57.67％、44.44％、100.33％、89.53％、60.00％和83.11％.(2)外源钙使干旱胁迫下桔梗叶片丙二醛、过氧化氢含量分别显著降低13.82％和18.66％,同时使其叶片过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性分别增加了25.43％、7.90％和33.92％,也显著提高其根中可溶性蛋白含量.(3)外源钙促进桔梗根中皂苷D、多糖、总黄酮、游离氨基酸在正常条件下分别显著增加35.34％、34.87％、4.19％和6.52％,在干旱胁迫分别显著增加10.94％、7.53％、6.07％和5.78％.(4)桔梗地上部和地下部N、P、K、Ca、Cu、Mn含量在干旱胁迫下显著降低,而在外源钙处理下能不同程度地提高.[结论]喷施10 mmol/L CaCl2能增强干旱环境中桔梗叶片抗氧化系统活性和渗透调节能力,提高光合色素含量和光合性能,协同促进次生代谢产物和矿质元素累积,改善药用部位品质,缓解干旱对桔梗幼苗的伤害.

宫颈癌是严重威胁女性身体健康的常见恶性肿瘤.现代医学常采用手术、放疗、化疗等治疗方法,取得较好的临床疗效,但肿瘤复发和转移仍然是宫颈癌患者死亡的主要原因.中医药发展历史悠久,中药复方、中成药、中药注射液等在肿瘤治疗中疗效显著.中药单体是源自于中药的有效提取物,在抗肿瘤方面发挥着重要作用.其中黄芩素、茯苓酸等可以通过抑制分泌型糖蛋白/β-链蛋白(Wnt/β-catenin)通路活性抑制宫颈癌细胞生长;紫草素、青蒿素等抗肿瘤的作用机制与调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素哺乳靶蛋白(Phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin,PI3 K/Akt/mTOR)相关;姜黄素、人参皂苷等可以通过调控核转录因子-κB(p-nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路抑制细胞增殖;牡荆素、白藜芦醇等可以上调p53蛋白表达发挥其抑癌作用;常春藤皂苷元、五味子乙素等可以抑制转录激活因子3(Recombinant signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路活性;柚皮素、半枝莲多糖可以上调腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)表达;而神经源性位点缺口同源蛋白(Notch)信号通路在宫颈癌发生中的作用机制具有争议.斑蝥素、黄芩素等中药单体可以调控丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路;土槿皮乙酸、去氢骆驼蓬碱可以抑制磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B/糖原合酶激酶-3β(Phosphoinositide-3-kinase/protein kinase B/glycogen synthase kinase-3,PI3K/Akt/GSK-3β)信号通路;虫草素、桔梗皂苷-D具有调控Hippo信号的作用;黄芩素、白藜芦醇抗宫颈癌作用机制则与Hedgehog信号有关.目前,关于中药单体调控宫颈癌信号通路的研究众多,但缺乏系统总结.本研究通过总结中药单体调控宫颈癌相关信号通路,以期为中药单体在宫颈癌中的广泛应用提供指导,为中医药防治宫颈癌提供新的药物靶点.

目的 优化桔梗生药粉湿热灭菌工艺,并考察辐照灭菌、湿热灭菌、乙醇灭菌、干热灭菌对其质量的影响.方法 在单因素试验基础上,以灭菌时间、灭菌温度、干燥温度为影响因素,桔梗总皂苷、桔梗皂苷D含量及灭菌率的综合评分为评价指标,响应面法优化湿热灭菌工艺.评价不同灭菌方法对微生物限度、鉴别项、水分、总灰分、浸出物、含量测定、指纹图谱相似度的影响.结果 最佳条件为灭菌时间 35 min,灭菌温度 103℃,干燥温度 76℃,综合评分为 95.14 分.4 种灭菌方法下微生物限度检查全部合格;灭菌后桔梗皂苷D含量有不同程度的下降,依次为辐照灭菌>湿热灭菌>乙醇灭菌>干热灭菌;指纹图谱相似度依次为辐照灭菌>乙醇灭菌>湿热灭菌>干热灭菌.结论 该方法便于操作,重复性好,生产成本低,灭菌彻底,可为桔梗生药粉大规模工业化生产提供理论依据.

目的 建立银翘解毒片的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱.方法 采用HPLC-二极管阵列检测器(PDA)-蒸发光散射检测器(ELSD)联用技术.以牛蒡苷峰为参照峰建立 15 批样品的HPLC-PDA-ELSD指纹图谱.采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 版)进行相似度评价.结果 PDA及ELSD下分别标定了 15 批样品指纹图谱中 35 个及 26 个共有峰,指认了其中 9 个化学成分,分别为绿原酸、甘草苷、连翘酯苷A、木犀草苷、橙皮苷、连翘苷、牛蒡苷、甘草酸铵、桔梗皂苷D.2 种检测器下分别有 14 批和 13 批样品的指纹图谱相似度大于 0.9.结论 所建立的方法可用于银翘解毒片的质量控制.