目的 将白藜芦醇制备成柔性脂质体后再制备为脂质体凝胶,并考察其白藜芦醇脂质体凝胶体外特性和治疗黄褐斑效果.方法 将白藜芦醇制备成柔性脂质体,与凝胶结合制备成脂质体凝胶,对两种制剂进行体外释放、体外透皮、初步药效学、皮肤刺激性考察.结果 制备得到的白藜芦醇脂质体凝胶粒径为(148.27±2.90)nm,PDI为0.132±0.01,属于剪切变稀的非牛顿流体.体外释放结果表明,白藜芦醇乙醇溶液释放速度相对较快,4 h时释放量为75.99%,达到释放平衡;而白藜芦醇柔性脂质体与脂质体凝胶在8h时释放量分别为59.99%和40.30%,可显著延缓药物的释放,维持较长的释放周期.体外透皮试验结果表明,白藜芦醇柔性脂质体的透过量大于脂质体凝胶,但滞留量低于脂质体凝胶.白藜芦醇柔性脂质体与脂质体凝胶均无皮肤刺激性,且能够减少皮肤组织中紫外线照射引起的黑色素含量,与空白组相似,显著低于造模组.结论 白藜芦醇纳米制剂在皮肤中都有较好的滞留,不仅可以有效治疗黄褐斑,还能增强抗氧化能力,减少局部损伤.

目的:制备雪上一枝蒿总生物碱(简称"雪总碱")柔性脂质体凝胶膏剂,并考察其体外透皮性能.方法:以包封率、粒径、表面Zeta电位及多分散系数(PDI值)综合评分为指标,采用Box-Behnken响应面法优化雪总碱柔性脂质体处方并对其形态进行表征.通过混料均匀设计,以均匀性、延展性、渗透性、残留量、皮肤追随性、内聚力、初黏力、持黏力及剥离强度等多因素综合评分,优选凝胶膏剂处方.采用Franz扩散池,以大鼠皮肤为透皮模型,考察雪总碱柔性脂质体凝胶膏剂的体外透皮性能.结果:优选得到的雪总碱柔性脂质体处方为:加药量11.7 mg,脂固比7.5∶1,脂表比62∶38,水化时间10 min,柔性脂质体外观为球形或类球形,包封率为(61.38±3.89)％,粒径为(56.27±0.75)nm,Zeta电位为(-27.50±0.28)mV,PDI值为(0.225±0.009).优选得到的柔性脂质体凝胶膏剂处方为:6.24％Viscomate NP 700、19.86％高岭土、23.17％甘油、4.96％PVP、42.18％柔性脂质体溶液、3.59％甘羟铝.体外透皮结果表明,雪总碱柔性脂质体凝胶膏剂中药物的48 h累积渗透率是普通凝胶膏剂的3.8倍.结论:将雪总碱包封于柔性脂质体制成凝胶膏剂,可显著提高药物透皮速率,有望作为新型给药载体.

目的:制备白藜芦醇柔性脂质体,并考察其体外特性.方法:采用乙醇注入法制备脂质体,以包封率、粒径为指标,通过单因素考察和星点设计-响应面法优化白藜芦醇脂质体处方;以皮肤滞留量筛选表面活性剂的配比,制备白藜芦醇柔性脂质体;并对其表面特征、粒径、Zeta电位、体外释放度及皮肤滞留进行考察.结果:最终处方:大豆卵磷脂量为7.5mg·mL-1,磷脂-胆固醇的质量比为3.16∶1,磷脂-白藜芦醇的质量比为30.28∶1,磷脂-吐温-80 的质量比为3∶1.制得的白藜芦醇柔性脂质体的平均粒径为(143.70±1.74)nm,多分散系数(PDI)为(0.092±0.060),Zeta电位为-(9.65±0.61)mV.体外释放研究表明,白藜芦醇乙醇溶液在4h释放了80%,达到释放平衡;白藜芦醇柔性脂质体在8h时的累计释放度为54%,24h内持续缓慢释放,符合Higuchi动力学模型.皮肤滞留实验结果表明,其在 2～6h时皮肤滞留量缓慢升高,证明其可以缓慢释放,且在6h时达到34.14 μg·cm-2.结论:优选的柔性脂质体重现性好、包封率高、粒径小,具有明显的缓释效果,皮肤滞留量高,适合于局部给药.

目的 制备6种不同的阿达帕林脂质体,研究其粒径、皮肤透过率和皮内滞留量.方法 以阿达帕林原料药为对照,选用薄膜水化法制备载阿达帕林的脂质体、2种温敏脂质体、柔性脂质体、弹性纳米脂质体和可变形脂质体,分别测定包封率、粒径.并以大鼠腹部皮肤为实验模型,进行透皮扩散试验,考察不同脂质体的皮肤透过效果.结果 6种脂质体的粒径在79～303nm范围内,其中温敏脂质体与弹性纳米脂质体的粒径较小,粒径分布范围较窄.6种脂质体的包封率在58.38%～85.25%范围内,其中温敏脂质体的包封率最高,为80.15%.该剂型在12h累积渗透量为0.708 8 mg/cm2,高于载阿达帕林的脂质体、柔性脂质体、弹性纳米脂质体和可变形脂质体.体外经皮渗透试验结果表明阿达帕林脂质体的渗透具有缓慢和持续的特征,符合一级动力学模型.结论 阿达帕林脂质体均在不同程度上增加了阿达帕林原料药的皮肤透过量及皮内滞留量,在37℃时,温敏脂质体达到了相变温度,透皮吸收量及皮内滞留量最高.

目的 制备雷公藤甲素(triptolide,TP)柔性纳米脂质体(flexible nanoliposomes,FNLs),并对其体外抗炎活性及透皮性能进行考察.方法 以(2,3-二油酰基-丙基)-三甲基氯化铵(N-[1-(2,3-dioleoyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium me-thyl-sulfate,DOTAP)、胆固醇(cholesterol,CHOL)为主要囊材,用薄膜分散法制备TP-FNLs,并对其进行理化性质表征;以RAW 264.7细胞为模型,考察TP-FNLs的细胞摄取及抗炎活性;用Franz扩散池法考察TP-FNLs经大鼠离体皮肤的累积渗透量和滞留量.结果 TP-FNLs 的粒径为(178±13)nm,多分散性系数(polymer dispersity index,PDI)为(0.237±0.021),Zeta电位为(12.39±1.80)mV,包封率为(56.3％±4.1％).在透射电子显微镜下,TP-FNLs呈梭形,且具有良好的变形性.TP-FNLs具有较高的稳定性,并具有一定的pH响应释药特性.TP-FNLs能够时间依赖性地被RAW 264.7细胞摄取,并可有效降低炎症因子的分泌.Franz扩散池结果显示,TP-FNLs中TP的36 h皮肤累积渗透量为(397.08±29.61)μg·cm-2,约为TP混悬液的4.5倍.36 h后TP-FNLs中TP的皮肤滞留量为(46.56±6.39)μg·cm-2,约为TP混悬液的4倍.结论 TP-FNLs具有较好的稳定性,能环境响应性地发生释药,能有效降低RAW 264.7细胞炎症因子的分泌,且具有良好的透皮性能.

目的 制备磷酸氯喹柔性脂质体,并考察其离体皮肤渗透特性.方法 采用逆向蒸发法制备以吐温80为边缘活化剂的磷酸氯喹柔性脂质体,通过动态光散射技术和微柱离心法考察其粒径、PDI、Zeta电位、包封率.以常规脂质体和溶液为参比制剂,采用Franz扩散池考察柔性脂质体离体皮肤渗透与滞留特性.结果 磷酸氯喹柔性脂质体粒径为(78.59±1.11)nm,PDI为(0.278±0.004),Zeta 电位为(0.394±0.027)mV,包封率为(95.13±1.09)％.与常规脂质体和溶液相比,磷酸氯喹柔性脂质体24 h的累积渗透量更高.结论 磷酸氯喹柔性脂质体具有较好的皮肤渗透特性.

目的 探讨靶向人类表皮生长因子受体2(Her-2)的曲妥珠单抗(Trastuzumab)与UL16结合蛋白2(ULBP2)的融合蛋白(T-ULBP2)激活自然杀伤(NK)细胞,杀伤乳腺癌细胞SK-BR-3的治疗策略及治疗效果.方法 使用重叠聚合酶链反应(PCR)法通过G4S柔性肽将曲妥珠单抗重链C末端及人ULBP2胞外区基因连接,构建人工程载体pCDNA3.1中,通过脂质体转染法将质粒转入人胚肾细胞HEK-293中进行表达.流式细胞术检测T-ULBP2对乳腺癌SK-BR-3细胞的结合能力.噻唑蓝(MTT)法检测T-ULBP2是否保留亲本曲妥珠单抗对SK-BR-3细胞的增殖抑制能力.通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)实验验证T-ULBP2激活NK细胞杀伤肿瘤细胞的效果.流式细胞术检测T-ULBP2是否可以诱导NK-92细胞的活化.结果 成功表达融合蛋白T-ULBP2.流式细胞术检测T-ULBP2与乳腺癌细胞SK-BR-3的结合率为79.5％,与亲本曲妥珠单抗结合率(72.9％)相当.结论 成功构建并表达了T-ULBP2.T-ULBP2具有与亲本曲妥珠单抗相似的乳腺癌细胞结合能力和抑制肿瘤增殖能力.

目的 以白及多糖(BSP)为成膜材料,制备黄藤素(PA)纳米柔性脂质体(PFL)膜剂,并评价其药剂学相关性能,为其进一步应用奠定基础.方法 采用注入法制备黄藤素纳米柔性脂质体,匀浆涂布法制备黄藤素纳米柔性脂质体白及多糖膜剂(PFL-BPF);采用电子显微镜、差示扫描量热仪(DSC)和体外透黏膜实验等对PFL-BPF进行表征和评价.结果 以BSP为成膜材料时,PFL与BSP的相容性良好且易于成膜;所得PFL-BPF的外观平滑、无气泡、柔韧性与挺度适宜;PFL-BPF具有良好的生物黏附性,黏附于黏膜后耐生理盐水冲刷时间为(130±7)min.PFL-BPF在0.5h时,促进PA渗入黏膜的剂量为32.41 μg/g,分别为黄藤素水溶液白及多糖膜剂(PL-BPF)、空白柔性脂质体十黄藤素白及多糖膜剂(BLP+PA-BPF)的3.17倍和1.9倍(t检验,P＜0.05);2.5 h,分别为PL-BPF、BLP+PA-BPF的2.67倍和1.89倍.表明其能够显著促进水溶性药物PA透过黏膜且缓释作用强;DSC显示其促进药物透黏膜吸收的可能机制为柔性脂质体扰乱黏膜上皮细胞紧密排列而携带药物进入黏膜组织.结论 PFL-BPF成膜性好、黏附作用持久、耐冲刷能力强,且制备工艺简单可行,能够显著地促进药物透过黏膜,因此,纳米柔性脂质体膜剂是一种良好的透黏膜给药载体,具有广阔的应用前景.

目的 建立黄藤素纳米柔性脂质体的含量及包封率测定方法.方法 采用注入法制备黄藤素纳米柔性脂质体,用透射电镜和激光粒度仪评价脂质体的粒径和结构,鱼精蛋白凝聚法分离脂质体.选用Hypersil BDS C18(150 mm×4.6 mm,5.0 μm)为色谱柱;流动相为乙腈-0.4 mL·L-1磷酸(20∶80);检测波长:345 nm;流速:1.0 mL·min-1;进样量:20 μL;柱温:25℃.测定黄藤素纳米柔性脂质体的含量及包封率.结果 在所选定的色谱条件下,辅料及溶剂对测定无干扰,黄藤素在0.84～25.2μg·mL-1范围内线性良好(r=0.999 8),平均回收率为96.0％,精密度RSD值小于2％.结论 HPLC法可用于测定黄藤素纳米柔性脂质体的含量及包封率,该方法准确可靠、简便快速.

中药经皮给药属于中医外治法范畴,也是中药给药系统的重要组成部分.随着药物制剂新剂型和新技术的不断发展,被动和主动促透技术在中药经皮给药领域已实现较为广泛的应用,前者如凝胶贴膏、微乳、柔性脂质体等,后者包括微针、离子导入、超声导入等.两种技术相结合或可进一步提高药物经皮吸收的效率,扩大经皮给药的药物适用范围.促透技术能够显著提高中药成分的溶解度,促进中药的经皮吸收,同时增强疗效和患者顺应性.