目的 将白藜芦醇制备成柔性脂质体后再制备为脂质体凝胶,并考察其白藜芦醇脂质体凝胶体外特性和治疗黄褐斑效果.方法 将白藜芦醇制备成柔性脂质体,与凝胶结合制备成脂质体凝胶,对两种制剂进行体外释放、体外透皮、初步药效学、皮肤刺激性考察.结果 制备得到的白藜芦醇脂质体凝胶粒径为(148.27±2.90)nm,PDI为0.132±0.01,属于剪切变稀的非牛顿流体.体外释放结果表明,白藜芦醇乙醇溶液释放速度相对较快,4 h时释放量为75.99%,达到释放平衡;而白藜芦醇柔性脂质体与脂质体凝胶在8h时释放量分别为59.99%和40.30%,可显著延缓药物的释放,维持较长的释放周期.体外透皮试验结果表明,白藜芦醇柔性脂质体的透过量大于脂质体凝胶,但滞留量低于脂质体凝胶.白藜芦醇柔性脂质体与脂质体凝胶均无皮肤刺激性,且能够减少皮肤组织中紫外线照射引起的黑色素含量,与空白组相似,显著低于造模组.结论 白藜芦醇纳米制剂在皮肤中都有较好的滞留,不仅可以有效治疗黄褐斑,还能增强抗氧化能力,减少局部损伤.

目的:观察猪大网膜来源的细胞外基质（ECM）水凝胶与人源诱导多能干细胞分化的心肌细胞（hiPSC-CM）的生物相容性及其作为细胞移植递送载体的可行性。方法:通过化学、物理和酶解的系列方法对猪大网膜组织进行脱细胞处理，然后将提取的ECM制备成可注射性温敏水凝胶，通过组织学染色鉴定其生化成分，用扫描电镜观察其显微表观结构，并向小鼠心肌内注射水凝胶观察其原位凝胶形成能力。采用小分子诱导法将人源诱导性多能干细胞定向分化成心肌细胞，随后将获得的hiPSC-CM分组培养，接种在水凝胶上共培养的为凝胶组，常规培养的为对照组，通过活/死细胞染色、CCK-8和鬼笔环肽染色检测心肌细胞存活状况和生长形态，采用心肌细胞标志物免疫荧光染色及Western blot法分析心肌细胞生存数量和表型维持情况。结果:苏木素-伊红染色、油红O染色和DAPI荧光染色结果显示制备的大网膜ECM水凝胶中无明显的细胞碎片、细胞核和脂质残留，天狼猩红和阿利新蓝染色显示该水凝胶保留了ECM的主要成分胶原蛋白和糖胺聚糖。所制备的水凝胶在4 ℃条件下表现为黏性液体，在37 ℃条件下呈凝胶态。扫描电镜结果显示该水凝胶的微观结构由不规则的纤维和大小不一的孔隙组成。在超声引导下可顺利将制备的ECM水凝胶注射到小鼠心肌内，注射后即刻超声下可见高回声信号，提示水凝胶在心肌内滞留，并通过后续的心肌组织苏木素-伊红染色发现注射区有团状凝胶的存在。活/死细胞染色结果显示凝胶组和对照组的hiPSC-CM均大多数存活，很少有死细胞，CCK-8实验结果显示两组吸光度值差异无统计学意义（ P>0.05）。鬼笔环肽染色结果显示hiPSC-CM可以在与ECM水凝胶共培养时正常伸展，凝胶组与对照组细胞形态相似，且两组的每细胞F-肌动蛋白覆盖面积差异无统计学意义（ P>0.05）。心肌细胞标志物免疫荧光染色结果显示，凝胶组与对照组每视野α-心肌肌动蛋白（α-actinin）和连接蛋白-43（Cx-43）的覆盖面积差异均无统计学意义（ P均>0.05），DAPI染色的定量结果显示，两组细胞数量差异无统计学意义（ P>0.05），同时Western blot结果显示凝胶组细胞的α-actinin和Cx-43蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:该研究成功制备了猪大网膜来源的ECM水凝胶，其与hiPSC-CM的生物相容性良好，无明显细胞毒性，能够支持hiPSC-CM的体外生存并维持其表型，是一种具有潜在应用前景的可注射性心脏组织工程材料。

目的:制备新型的靶向长链非编码RNA （lncRNA）同源异型盒基因转录的反义基因间RNA (HOTAIR）的反义寡核苷酸（ASON）探针 99Tc m-HYNIC-ASON (HYNIC为联肼尼克酰胺），探讨其对人脑胶质瘤U87细胞增殖和迁移能力的影响。 方法:设计并通过化学修饰合成HOTAIR的ASON，使用双功能螯合剂HYNIC偶联 99Tc m并进行纯化。采用快速薄层层析(ITLC）法和琼脂糖凝胶电泳分别检测探针的标记率、放射化学纯度、体外稳定性及完整性。细胞摄取实验分为2组：Lipo- 99Tc m-HYNIC-ASON组（转染组）和 99Tc m-HYNIC-ASON组（未转染组），通过脂质体转染探针，测定人脑胶质瘤U87细胞对探针的摄取率；细胞计数试剂盒8(CCK-8）实验和细胞划痕实验分为3组：Lipo- 99Tc m-HYNIC-ASON组（转染组）、 99Tc m-HYNIC-ASON组（未转染组）、 99Tc m-Control组（对照组），分别检测转染探针后细胞增殖和迁移能力的变化。2组间比较采用Student t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:99Tc m-HYNIC-ASON的标记率为（90.0±5.6）%。琼脂糖凝胶电泳结果显示， 99Tc m与探针成功标记并且没有明显的降解，探针孵育12 h的放射化学纯度>80%。细胞摄取实验结果显示，转染后5 h，探针Lipo- 99Tc m-HYNIC-ASON在人脑胶质瘤U87细胞中的摄取率最大（0.70%），与未转染组（0.16%）相比，差异有统计学意义（ t=17.81， P<0.01）。CCK-8实验结果显示，转染探针Lipo- 99Tc m-HYNIC-ASON能抑制人脑胶质瘤U87细胞的增殖能力，与未转染组相比，在各个时间点（1、2、3、4、5 d）的差异均有统计学意义（ t=2.336~30.230,均 P<0.05）。细胞划痕实验结果显示，转染探针Lipo- 99Tc m-HYNIC-ASON能抑制人脑胶质瘤U87细胞的迁移，3组细胞间隙融合率的差异有统计学意义( F=331.8， P<0.01)，与未转染组相比，转染组细胞间隙融合率明显降低，且差异有统计学意义（60.0％对23.6%， t=51.54， P<0.01）。 结论:成功合成了靶向人脑胶质瘤lncRNA HOTAIR的探针 99Tc m-HYNIC-ASON，该探针具有良好的体外稳定性和靶向结合能力，能够抑制人脑胶质瘤U87细胞的增殖和迁移。

目的:评价0.05%环孢素A联合维生素A棕榈酸酯治疗睑板腺功能障碍（MGD）相关干眼的疗效。方法:单中心、前瞻性、随机平行对照试验。纳入2022年7至11月在首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心确诊为MGD相关干眼患者，采用随机数字表法随机分为CsA+VA组（0.05%环孢素A滴眼液双眼点药，每日2次；维生素A棕榈酸酯眼用凝胶双眼点药，每日3次）、CsA+HA组（0.05%环孢素A滴眼液双眼点药，每日2次；0.1%玻璃酸钠滴眼液双眼点药，每日3次）、HA组（0.1%玻璃酸钠滴眼液双眼点药，每日3次）3个组治疗12周，分别记录并比较治疗前（基线）以及治疗后第4、8、12周的眼表疾病指数（OSDI）、泪河高度、荧光素泪膜破裂时间、Schirmer Ⅰ试验结果（无麻醉）、泪膜脂质层厚度、睑板腺形态、睑板腺分泌物排出能力和性状评分、角膜荧光素染色评分。采用单因素方差分析、单因素重复测量方差分析、两因素重复测量方差分析、Bonferroni检验等进行统计学分析。结果:共收集120例（120只眼）符合标准的MGD相关干眼患者，失访10例（10只眼），最终纳入研究患者110例（110只眼），年龄为22~73岁，男性22例（22只眼），女性88例（88只眼）；其中CsA+VA组38例（38只眼），CsA+HA组36例（36只眼），HA组36例（36只眼）。3个组OSDI、泪河高度、荧光素泪膜破裂时间和睑板腺分泌物性状评分治疗后均有明显改善，其中治疗第12周，CsA+VA组［25.45±15.11，（0.30±0.13）mm，（3.72±1.40）s，（5.03±2.52）分］和CsA+HA组［26.98±16.89，（0.27±0.10）mm，（4.34±1.76）s，（5.11±2.39）分］与HA组［24.57±11.26，（0.24±0.06）mm，（3.18±1.11）s，（9.11±3.34）分］相比，差异均有统计学意义（均 P<0.05）；CsA+VA组的泪膜脂质层厚度［（72.61±23.65）nm］明显高于CsA+HA组［（68.39±26.66）nm］（ P<0.05）。在CsA+VA组中，睑板腺分泌物性状和排出能力重度异常者［治疗第12周，（6.28±2.59）和（5.89±2.77）分］、中度异常者［治疗第12周，（4.27±2.02）和（4.64±2.02）分］和轻度异常者［治疗第12周，（2.80±0.84）和（2.60±0.55）分］的睑板腺分泌物性状评分和排出能力评分比较，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:0.05%环孢素A联合维生素A棕榈酸酯可明显改善MGD相关干眼患者的症状和体征，尤其可明显改善泪膜脂质层厚度和重度患者的睑板腺分泌物性状和排出能力。

目的:利用脂质体同时包载具有促进神经分化作用的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和成骨诱导小分子(Dex),与海藻酸钠溶液混合,构建一种具有温敏性和可注射性的bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架,评价复合支架促进神经分化和新骨再生的作用.方法:通过薄膜分散法制备bFGF/Dex脂质体,与RGD多肽活化后的海藻酸钠溶液混合,通过自由基聚合反应合成温敏性bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架.使用Zeta粒径仪检测脂质体的粒径、多分散度和Zeta电位,扫描电镜观察支架的微观结构,利用万能材料试验机测定支架的机械强度,通过RT-PCR和免疫荧光染色检测bFGF促进hBMSCs成神经分化相关基因和蛋白的表达.构建兔颅骨缺损模型,通过micro-CT及免疫组织化学染色,评价复合支架在体内促进神经化骨再生的作用.采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学分析.结果:成功构建温敏性bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架,该支架在常温下(25℃)呈溶液状态且具有流动性,大于临界温度(32 ℃)时可迅速转变为凝胶状态.支架表面呈疏松多孔的蜂窝状,能够承担一定应力.体外成神经相关基因和蛋白表达提示,bFGF在诱导hBMSCs成神经分化中具有重要作用.动物实验结果表明,复合支架具有高效促进神经化骨再生的作用.结论:具有温敏性、可注射性和突出生物功能的智能bFGF/Dex脂质体-水凝胶复合支架,为颌骨缺损修复提供了新的材料.

目的 制备黄芪甲苷(ASⅣ)脂质体原位凝胶(ASⅣ lips gel),对ASⅣ lips gel进行制剂学表征及细胞学评价,探讨ASⅣ lips gel在眼部给药系统的应用潜力.方法 采用乙醇注入法制备黄芪甲苷脂质体(ASⅣ lips),以包封率为考察指标进行ASⅣ lips处方及制备工艺优化,对最优处方及工艺制得的ASⅣ lips进行表征;以壳聚糖(CS)和甘油磷酸钠(GP)为凝胶基质,通过物理交联制备CS/GP凝胶,对CS/GP凝胶进行表征;将ASⅣ lips载入CS/GP凝胶构建ASⅣ lips gel,并对ASⅣ lips gel进行稳定性研究、体外释放研究、细胞毒性及细胞摄取考察.结果 最优处方及工艺制得的ASⅣ lips平均粒径为(75.09±0.65)nm,与透射电镜观察到的粒子大小接近,且粒径分布均匀;包封率可达71.68％,对ASⅣ具有较好的包载效率.红外光谱与X射线衍射分析可知已成功制得CS/GP凝胶;CS/GP凝胶在扫描电镜下呈明显的三维网状结构,35℃下胶凝时间为3 min.ASⅣ lips gel连续7 d粒径基本无明显变化,稳定性良好;体外释放结果表明,与黄芪甲苷滴眼液相比,ASⅣ lips gel有明显的缓释作用.细胞毒性结果显示ASⅣ lips gel对人视网膜色素上皮细胞毒性较低,细胞相容性较好.分别用荧光显微镜定性观察、流式细胞仪定量分析制剂的细胞摄取情况,结果表明,脂质体原位凝胶制剂比滴眼液更易被人视网膜色素上皮细胞摄取.结论 制备的ASⅣ lips gel在眼部温度下可自发成胶,具有明显的缓释作用,更易被人视网膜色素上皮细胞摄取,有作为眼部给药系统的潜力.

目的:制备雪上一枝蒿总生物碱(简称"雪总碱")柔性脂质体凝胶膏剂,并考察其体外透皮性能.方法:以包封率、粒径、表面Zeta电位及多分散系数(PDI值)综合评分为指标,采用Box-Behnken响应面法优化雪总碱柔性脂质体处方并对其形态进行表征.通过混料均匀设计,以均匀性、延展性、渗透性、残留量、皮肤追随性、内聚力、初黏力、持黏力及剥离强度等多因素综合评分,优选凝胶膏剂处方.采用Franz扩散池,以大鼠皮肤为透皮模型,考察雪总碱柔性脂质体凝胶膏剂的体外透皮性能.结果:优选得到的雪总碱柔性脂质体处方为:加药量11.7 mg,脂固比7.5∶1,脂表比62∶38,水化时间10 min,柔性脂质体外观为球形或类球形,包封率为(61.38±3.89)％,粒径为(56.27±0.75)nm,Zeta电位为(-27.50±0.28)mV,PDI值为(0.225±0.009).优选得到的柔性脂质体凝胶膏剂处方为:6.24％Viscomate NP 700、19.86％高岭土、23.17％甘油、4.96％PVP、42.18％柔性脂质体溶液、3.59％甘羟铝.体外透皮结果表明,雪总碱柔性脂质体凝胶膏剂中药物的48 h累积渗透率是普通凝胶膏剂的3.8倍.结论:将雪总碱包封于柔性脂质体制成凝胶膏剂,可显著提高药物透皮速率,有望作为新型给药载体.

水飞蓟素具有保护肝细胞的作用,但其肠通透性低、水溶性差,口服生物利用度较低,很大程度限制了在临床上的应用.近年来,各种药物递送技术改善了水飞蓟素的生物利用度、控缓释性,实现了药物靶向性以及减毒等作用,使水飞蓟素可应用范围更广泛.该综述从载体方面统计梳理了近几年来水飞蓟素药物递送技术的研究进展以及存在的问题.结果表明脂质体、脂质纳米粒载体、乳剂(包括自微乳化给药系统与纳米乳)、聚合物载体(包括壳聚糖与聚合物胶束)、无机纳米载体(包括铁纳米粒、金纳米粒、硅纳米粒)、蛋白质载体和水凝胶等药物递送系统研究较多,为水飞蓟素的开发提供了一定的参考.

背景:油酸能够调节炎症和免疫反应,具有修复皮肤创面的潜力,但油酸在病灶处滞留时间短、在空气中易自氧化而变质,需要合适的药物载体才能充分发挥疗效.目的:探究油酸脂质体凝胶修复慢性烧伤创面的疗效.方法:采用薄膜分散法制备油酸脂质体溶液,随后溶于泊洛沙姆凝胶基质中制备油酸脂质体凝胶.①体外实验:将不同体积油酸脂质体凝胶加入细胞培养基中制备油酸脂质体凝胶溶液(体积比分别为1∶3、1∶9、1∶27),应用阿尔玛蓝染色检测不同体积比油酸脂质体凝胶溶液对人角质形成细胞和人成纤维细胞增殖的影响,结晶紫染色观察细胞形态.②体内实验:取成年SD大鼠,采用背部全层烧伤叠加创面皮下注射表柔比星复合因素构建慢性烧伤创面模型,将造模成功的30只大鼠随机分5组,每组6只:油酸脂质体凝胶组、油酸组、脂质体凝胶组、阳性对照组、阴性对照组创面分别外敷涂抹油酸脂质体凝胶、油酸、脂质体凝胶、重组人表皮生长因子凝胶与生理盐水的纱布,隔日换药一次,总共给药16次,观察创面愈合情况.结果与结论:①体外实验:阿尔玛蓝试剂检测与结晶紫染色显示,体积比为1∶9的油酸脂质体凝胶溶液可促进人角质形成细胞和人成纤维细胞的增殖.②体内实验:油酸脂质体凝胶组创面愈合时间短于其他4组(P＜0.01),用药第4,8,12,16,20天的创面愈合率高于其他4组(P＜0.01).给药结束后,苏木精-伊红染色显示5组创面均上皮化愈合,其中油酸脂质体凝胶组表皮厚度最接近于正常皮肤,并且优于其他4组;免疫组化染色显示,油酸脂质体凝胶组创面中细胞角蛋白10、肿瘤蛋白63、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、丙二醛及超氧化物歧化酶的表达最接近正常皮肤,并且优于其他4组.用药第12,32天,油酸脂质体凝胶组创面匀浆上清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、丙二醛及超氧化物歧化酶的表达最接近正常皮肤,并且优于其他4组.③结果表明:油酸脂质体凝胶可促进角质形成细胞和成纤维细胞的增殖,减轻炎症反应及氧化应激损伤,促进慢性烧伤创面的愈合.

目的 研究八角莲Dysosma versipellis根茎的化学成分,并采用网络药理学方法对其抗癌活性进行分析.方法 运用硅胶柱层析色谱、凝胶色谱、ODS柱色谱等分离技术,现代波谱技术(NMR、MS、IR、UV)对八角莲的化学成分进行分离纯化及结构鉴定,采用GO、KEGG等方法对分离所得的化学成分可能的作用靶点、通路等信息进行富集分析.结果 分离得到了14个化合物,鉴定为:苦鬼臼脂毒酮(1)、异苦鬼臼酮(2)、苦鬼臼素-4-O-β-D-葡萄糖苷(3)、鬼臼毒酮(4)、苦鬼臼毒素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、苦鬼臼毒素(6)、4'-去甲基去氢鬼臼毒素(7)、4'-去甲去氧鬼臼毒素(8)、4'-去甲基鬼臼毒酮(9)、山荷叶素(10)、4'-去甲基鬼臼毒素(11)、山荷叶-4-O-β-D-葡萄糖苷(12)、鬼臼毒素-4-O-β-D-葡萄糖苷(13)、去氢鬼臼毒素(14).网络药理学研究结果表明上述成分可能通过对激素响应、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、胰岛素样生长因子受体信号通路等生物学过程,作用于AKT1、EGFR、HSP90AA1、MAPK3、MTOR等关键靶点,癌症通路、前列腺癌通路、脂质与动脉粥样硬化通路等发挥抗癌活性.结论 其中化合物1、2、5、7～9和14为首次从八角莲中分离得到;八角莲中的多种成分可以通过多个靶点、多个通路发挥抗癌作用.