目的:探讨与分析托法替布对类风湿关节炎患者的干预效果.方法:选择 2021年 6月—2023年 1月我院收治的 80例类风湿关节炎患者作为研究对象,根据随机数字表法分为托法替布组与对照组,各 40例.对照组给予甲氨蝶呤治疗,托法替布组在对照组治疗的基础上给予托法替布治疗,2组均治疗观察 12周,比较 2组患者的滑膜增生程度与骨侵蚀变化情况、肌骨超声半定量评分、生活质量评分及治疗期间不良反应发生率.结果:2组治疗 12周后的骨侵蚀评分、滑膜增生评分均低于治疗前,且托法替布组治疗 12周后骨侵蚀评分、滑膜增生评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).2组治疗期间恶心呕吐、嗜睡、静脉血栓、白细胞减少等不良反应发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05).2组治疗12周后的肌骨超声半定量评分均低于治疗前,且托法替布组治疗 12周后的肌骨超声半定量评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).托法替布组治疗 12周后的功能状况、情感状况、社会功能状况、生理功能状况等生活质量评分均高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论:托法替布在类风湿关节炎患者的应用能缓解滑膜增生程度与骨侵蚀程度,且不会增加不良反应的发生,还可降低患者的肌骨超声半定量评分,提高患者的生活质量,从而持续改善患者的预后.

目的 通过观察沉默Periostin后小鼠成骨细胞中特异性转录因子(Runx2)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)及骨保护素(OPG)表达变化,探讨其影响破骨活性的分子机制.方法 将小鼠成骨细胞株(MC3T3-E1)分为实验组和对照组,实验组使用LVpFU-GW-016PSC66473-1病毒转染,对照组用pFU-GW-016PSC53349-1病毒,保持两组细胞状态相当.用MDC法检测基因沉默效果,Western blot法检测两组细胞Runx2、RANKL和OPG蛋白表达情况.结果 沉默Periostin后发现:实验组荧光表达较对照组明显增强(P＜0.01);实验组Runx2和RANKL蛋白表达较对照组明显下调(P＜0.05);OPG蛋白表达较对照组显著升高(P＜0.05).结论 沉默Periostin可改变小鼠成骨细胞RANKL和OPG表达,并可能通过核因子-κB(NF-κB)信号通路介导影响Runx2基因,增强成骨细胞功能并抑制骨破坏.

骨结核是一种严重危害人体健康的骨科感染性疾病,其病灶组织破坏的最大特点是骨质的吸收及破坏,其中破骨细胞是骨吸收的主要细胞.破骨细胞是由造血干细胞分化而来的多核细胞,通常是由核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-KB ligand,RANKL)与核因子 κB 受体活化因子(receptor activa-tor for nuclear factor-KB,RANK)调控产生.结核分枝杆菌可以通过RANKL信号通路激活破骨细胞生成转录因子,以增强破骨细胞对骨质的吸收.笔者通过综述RANKL信号通路的结构及破骨细胞的研究进展,以及它们在骨结核临床治疗中可能发挥的潜在作用,为该领域的研究提供新的思路.

类风湿关节炎(RA)是一种以进行性关节破坏为特征的慢性自身免疫性疾病,病理改变主要以关节软骨及骨破坏为主,其发病机制与诸多细胞因子有着密切的关系,治疗不及时常常导致患者致畸致残.破骨细胞(OCs)在RA骨破坏的病理过程中起关键作用,其调控依赖于OCs形成、分化及活化的过程.白细胞介素-17(IL-17)是由辅助性T细胞17(Th17)产生的多效性细胞因子,相关研究发现它可以调节核因子-KB受体活化因子配体(RANKL)/核因子κB受体活化因子(RANK)/骨保护素(OPG)信号通路促进OCs的成熟及分化,引起骨质破坏.本文通过检索相关文献探讨IL-17通过RANKL/RANK/OPG信号通路在RA骨破坏机制中的作用,为早期RA的治疗提供新的靶点.

目的 基于Wnt/β-连环蛋白(β-Catenin)信号通路研究吴门骨密葆方含药血清促进骨髓间充质干细胞成骨分化机制.方法 将大鼠骨髓间充质干细胞为正常血清组、经典诱导剂[间充质干细胞成骨诱导分化培养基(OBM)]组、吴门骨密葆方含药血清低(10g生药/kg)和高剂量(20g生药/kg)组、抑制剂[分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK-1),0.1 ng·mL1]组以及吴门骨密葆方含药血清低、高剂量+抑制剂组,成骨诱导分化后干预7d时采用CCK8法检测细胞活力,随后采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法和ALP试剂盒检测不同剂量吴门骨密葆方含药血清及加入Wnt/β-Catenin信号通路特异性阻滞剂DKK-1干预的间充质干细胞ALP染色强度和活性,Western Blot测定间充质干细胞Wnt信号蛋白家族 3alpha(Wnt3a)、β-Catenin、糖原合成酶激酶 3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)、破骨细胞抑制因子(osteoprotegerin,OPG)和核因子 κ B 受体活化因子配体(receptor activator ofNF-KB ligand,RANKL)蛋白表达水平.结果 与正常组比较,吴门骨密葆方含药血清干预均可有效促进间充质干细胞增殖(P均＜0.05),吴门骨密葆方含药血清可有效促进间充质干细胞ALP染色的强度和活性(P均＜0.05),以及调控成骨分化相关的Wnt3a、β-Catenin、GSK3β、OPG和RANKL蛋白表达(P均＜0.05),但是这些调控作用均可被DKK-1在一定程度上逆转.结论 吴门骨密葆方含药血清诱导骨髓间充质干细胞的成骨分化,可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路以及影响OPG/RANKL通路而实现.

目的 探讨丹参酮Ⅱ A(Tan Ⅱ A)通过介导Yes激酶相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)、核因子-KB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)/核因子 KB 受体活化因子(eceptor activator of nuclear factor-KB,RANK)/骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)调节骨关节炎小鼠骨代谢的作用机制.方法 建立骨关节炎小鼠模型,将60只小鼠随机分成假手术组、模型组、Tan ⅡA低剂量组和Tan Ⅱ A高剂量组,每组15只,造模成功后灌胃给药,连续4周.HE和番红O固绿染色观察软骨组织病理损伤并进行Mankin评分.酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、Ⅰ 型胶原交联羧基末端肽(C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-8 和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α).蛋白质印迹法(Western blotting)检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、YAP、RANK、RANKL和OPG蛋白.结果 Tan ⅡA可改善小鼠软骨组织病理变化并降低Mankin评分.与假手术组比较,模型组BALP、OC水平下降,CTX、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8、MMP1、MMP3和MMP13水平升高(P＜0.05).与模型组比较,Tan ⅡA低剂量组、Tan ⅡA高剂量组BALP、OC水平升高,CTX、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8、MMP1、MMP3和MMP13水平降低(P＜0.05).与假手术组比较,模型组小鼠软骨组织中YAP、OPG和RANK蛋白水平下降,RANKL蛋白水平升高(P＜0.05);与模型组比较,Tan Ⅱ A 2组小鼠软骨组织中YAP、OPG和RANK蛋白水平上升,RANKL蛋白水平下降(P＜0.05).结论 Tan ⅡA可能通过介导YAP、RANK/RANKL/OPG信号通路调控骨关节炎.

目的:观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)兔软骨下骨的骨保护素(OPG)/核因子KB受体活化子配体(RANKL)及Notch1信号通路的影响,探讨温针灸治疗KOA的作用机制.方法:选取新西兰雌雄兔共50只(6个月),随机分为空白组、模型组、药物组和温针灸组.采用管型石膏伸直位固定法建立兔KOA模型.经6周实验干预后采用HE染色观察各组软骨下骨形态结构,蛋白质印迹法检测OPG、RANKL及Notch1蛋白表达,实时荧光定量PCR检测各组软骨下骨中OPG、RANKL及Notch1 mRNA含量.结果:与模型组比较,药物组和温针灸组软骨表面相对光滑完整,结构较为清晰,软骨下骨处细胞分布较为整齐均匀.与空白组比较,模型组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).与模型组比较,药物组和温针灸组 Lequesne MG 评分、Mankin 评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL 及 Notch1 蛋白表达水平均明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01),而OPG mRNA、OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1比值均明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).温针灸组Lequesne MG评分及Mankin评分均明显低于药物组,差异具有统计学意义(P＜0.01),而OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1水平均高于药物组,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:温针灸可促进OPG表达,抑制RANKL及Notch1表达,通过调控OPG/RANKL及Notch1信号通路,减轻KOA兔软骨下骨的损伤,从而起到治疗KOA的作用.

目的 探讨仙茅苔黑酚龙胆二糖苷(orcinol gentiobioside,OGB)对氧化应激诱导的破骨细胞(osteoclasts,OCs)的作用及机制.方法 可溶性核因子-κB受体活化因子配体(soluble receptor activator of nuclear factor-KB ligand,sRANKL)联合H2O2诱导RAW264.7细胞,建立氧化应激诱导的OCs模型;CCK-8法检测OCs活力;抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色测定OCs的数目;磷酸苯二钠法测定OCs的TRAP活性;免疫荧光法观察OCs的F-actin环结构和形态,以及p65和核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的核转位;ELISA法测定OCs相关的生化指标;Western blotting检测骨吸收关键蛋白及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和Nrf2通路相关蛋白的表达.结果 OGB显著抑制氧化应激诱导的OCs的形成和分化(P＜0.01),并抑制TRAP活性、F-actin环的形成及其骨吸收作用(P＜0.05、0.01),下调骨吸收关键蛋白c-Fos、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9)的表达(P＜0.05、0.01),降低活性氧(reactiveoxygen species,ROS)和还原型辅酶 Ⅱ(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶 4(NADPH oxidase 4,NOX4)的活性(P＜0.05、0.01),增加抗氧化酶血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(gamma-glutamyl cysteine synthetase,γ-GCS)的活性(P＜0.05、0.01),增强 OCs 中 Nrf2 的表达和核转位,抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白 6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的募集、核因子-κB 抑制因子 α(inhibitor of NF-κB-α,IκBα)的降解,并阻止p65的磷酸化和核转位(P＜0.05).结论 OGB能够通过调控NF-κB和Nrf2通路,抑制氧化应激诱导的OCs形成分化和骨吸收作用.

目的:探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达与牙槽骨成骨活性、内氧水平的关系.方法:选择2021年3月—2023年3月收治的56例慢性牙周炎且牙槽骨感染的患者为试验(牙周炎)组,同一时段53例健康牙槽骨为对照组.采用组织块培养法进行成骨细胞培养,采用改良Kaplow碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色鉴定细胞,利用ELISA试剂盒检测COX-2、PGE2、破骨细胞抑制因子(osteoclastogen-esis inhibitory factor,OPG)和核因子 κB 受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-K b ligand,RANKL)等的表达,比较2组患者PGE2、COX-2、OPG、内氧水平、ALP和RANKL的表达水平,并分析其相关性.采用SPSS 27.0软件包对数据进行统计学分析.结果:牙周炎组的PGE2、COX-2、RANKL显著高于对照组,而OPG、内氧水平、ALP显著低于对照组(P＜0.05).PGE2、COX2呈高度正相关,与OPG、内氧水平和ALP呈高度负相关,但与RANKL呈高度正相关(P＜0.05).结论:PGE2、COX-2表达与ALP、内氧水平呈高度负相关,可考虑通过增加内氧水平,加大氧分压,并通过药物调节ALP水平,改变牙周炎或其他类似疾病的炎症状况.

目的:探讨慢性牙周炎伴咬合创伤患者龈沟液骨硬化蛋白(Sclerostin)、神经轴突导向因子3(SLIT3)与牙周临床指标和核因子-Kb受体活化因子配体(RANKL)-骨保护蛋白(OPG)系统的相关性.方法:选择2021年1月至2023年1月我院收治的123例慢性牙周炎伴咬合创伤患者(创伤组)和101例不伴咬合创伤的慢性牙周炎患者(对照组).治疗前,检测龈沟液中Sclerostin、SLIT3、RANKL、OPG水平,计算RANKL/OPG比值,评估临床牙周指标出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)、探诊深度(PD)、附着丧失(AL).分析Sclerostin、SLIT3与牙周临床指标、RANKL、OPG、RANKL/OPG之间的相关性.结果:创伤组治疗前龈沟液中Sclerostin、SLIT3、RANKL 水平,RANKL/OPG,PLI、SBI、AL、PD 高于对照组(P＜0.05),OPG 低于对照组(P＜0.05).创伤组治疗前龈沟液中 Sclerostin、SLIT3 与 PLI、SBI、AL、PD、RANKL、RANKL/OPG 呈正相关(P＜0.05),与 OPG 呈负相关(P＜0.05).结论:慢性牙周炎伴咬合创伤患者龈沟液中Sclerostin、SLIT3水平显著增高,且与牙周临床指标异常、RANKUOPG增加有关.