非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是目前最常见的慢性肝病，大约有1/3的NAFLD患者会发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。多数学者认为，NASH的发病主要与肝脏脂肪异常积累和氧化应激等因素有关。核因子E2相关因子2(Nrf2)是细胞内抗氧化应激反应中的关键因子，而P62是一种多功能蛋白质，能够通过多种途径激活Nrf2。研究发现，抑制P62-Nrf2通路会加重肝脏脂肪变性、炎性反应和纤维化程度。而一些应用于其他疾病的药物，包括氯硝柳胺乙醇胺、依西替米等能够通过激活该通路抑制NASH的发生、发展。

目的:探索碳离子（ 12C 6+）照射后JAK2/STAT3通路的改变及下游蛋白FOXP3调控的肺癌中CD8 +T细胞的浸润差异。 方法:基于C57BL/6小鼠Lewis荷瘤模型的RNA测序分析，筛选出碳离子照射后肺癌中显著改变的JAK2/STAT3通路及相关的差异表达基因及蛋白如FOXP3。利用R软件“GSVA”中ssGSEA免疫浸润算法，探索FOXP3与肺癌免疫微环境中主要免疫细胞浸润的相关性并基于碳离子联合STAT3抑制途径（氯硝柳胺）对肺癌中CD8 +T细胞浸润进行分析。 结果:碳离子照射后，肺癌中JAK2/STAT3通路被抑制，相关基因和蛋白表达下调。基于ssGSEA算法的免疫评分显示，FOXP3表达与肺癌免疫微环境中CD8 +T细胞浸润呈显著负相关。通过碳离子照射联合STAT3抑制剂氯硝柳胺，进一步明确了靶向JAK2/STAT3通路对于增加肺癌中CD8 +T细胞浸润的协同作用。 结论:碳离子（ 12C 6+）可以通过靶向JAK2/STAT3通路与免疫治疗发挥协同增效的作用。

目的 本研究旨在探讨具有交替氧化酶(AOX)抑制活性的中药单体分子没食子酸和氯硝柳胺的联合灭螺效果及其灭螺机制.方法 阴性钉螺采自湖北省公安县,随机分为7组,空白对照组(H2O),实验组分别为氯硝柳胺(N1组:0.06 mg/L,N2组:0.1mg/L)和没食子酸(G1组:0.8 g/L,G2组:1.6 g/L)单独使用,及联合使用(M1组:0.06 mg/L氯硝柳胺+0.8 g/L没食子酸,M2组:0.06 mg/L氯硝柳胺+1.6 g/L没食子酸).检测各组钉螺经药物浸杀12、24和48 h后的存活率,液氮包埋后切片并染色,光学显微镜下观察并定量分析,检测钉螺软体切片中细胞色素C氧化酶(CCO)和乳酸脱氢酶(LDH)的相对酶活力值,以平均光密度值表示.钉螺匀浆后离心、取上清,DCFH-DA探针共孵育,用BCA蛋白定量试剂盒测定总蛋白含量,多功能酶标仪检测荧光强度,ROS值以样品测得的荧光强度(FI)除以蛋白质浓度(μg)的值表示,用总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒测定SOD水平.钉螺死亡率的差异分析采用卡方检验;CCO活性和氧化应激水平的数据用Levene's Test确定方差齐性后,用Tukey HSD的多重比较方法进行不同组间的两两比较.结果 G1和G2组浸杀后未表现出显著的灭螺效应.M1组和M2组在浸杀48 h后的钉螺死亡率分别达到70.0％(56/80)和84.2％(101/120),均高于N1组(44.4％,32/72)(x2=9.13、32.52,均P＜0.05);与N2组相比,钉螺死亡率差异均无统计学意义(x2=0.11、2.58,均P＞0.05).N1和N2组钉螺的LDH活性呈下降趋势;M1组和M2组钉螺体内CCO和LDH活性均降低(均P＜0.05),48 h后M1组的LDH活性在肌肉组织和肝脏分别为0.152±0.002和0.172±0.016,CCO活性分别为 0.180±0.022 和 0.335±0.014;M2 组的 LDH 活性为 0.166±0.008 和 0.173±0.022,CCO 活性为 0.199±0.009 和0.294±0.015,与空白对照组 LDH 活性(0.229±0.006 和 0.227±0.010)、CCO 活性(0.259±0.008 和 0.428±0.024)的差异均有统计学意义(均P＜0.05).M1组在处理后24 h的SOD活性为(5.56±0.91)UI/g,高于空白对照组的(5.26±0.08)UI/g(P＜0.05);M2组的SOD活性在处理后12、24和48 h呈现先升高后降低的趋势[(2.40±0.45)、(8.14±0.15)、(1.60±0.21)UI/g],与空白对照组在相应时间点的(3.54±0.94)、(5.26±0.08)、(5.10±0.87)UI/g相比,变化趋势显著(均P＜0.05).M1组在处理后24h和48h的ROS水平分别为(1 619.00±168.25)FI/μg和(1 866.65±211.79)FI/μg,M2组在48 h后的ROS水平达到(2 451.29±195.91)FI/μg,均高于空白对照组在相应时间点的(802.37±114.69)、(1 393.81±86.12)FI/μg(均P＜0.05).结论 没食子酸显著增强了低浓度氯硝柳胺的灭螺效果,其灭螺机制为通过阻断AOX的代偿上调,进一步加重了钉螺能量代谢失衡和氧化应激压力.

目的 观察新型灭螺剂10％氯代水杨胺制剂(chlorosalicylicamide,LDS)对曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni)中间宿主光滑双脐螺(Biomphalaria glabrata)和藁杆双脐螺(Biomphalaria straminea)的作用效果,为该灭螺剂的现场应用提供实验基础.方法 将10％LDS配制成有效浓度分别为0.400 0、0.200 0、0.100 0、0.050 0、0.025 0、0.012 5 mg/L的系列标准溶液,在实验室浸泡光滑双脐螺和藁杆双脐螺,观察在不同浓度溶液中浸杀上述2种双脐螺24、48、72 h后螺的死亡情况,统计各组死亡率并计算半数致死浓度(LC50)和相对毒力指数,同时设立50％氯硝柳胺乙醇胺盐(50％wet-table power of niclosamide ethanolamine salt,WPN)为药物对照组,并设立空白对照组(去氯水).结果 LDS有效浓度在0.100 0 mg/L及以上时,WPN有效浓度在0.200 0 mg/L及以上时光滑双脐螺和藁杆双脐螺浸泡24、48、72 h后死亡率均能达到100％.光滑双脐螺浸泡在LDS系列浓度溶液中,24、48、72hLC5.分别为0.047 95、0.046 52、0.037 10 mg/L;光滑双脐螺浸泡在WPN系列浓度溶液中,24、48、72 h LC5.分别为0.063 48、0.057 05、0.057 05 mg/L.藁杆双脐螺浸泡在LDS系列浓度溶液中,24、48、72 h LC50分别为0.012 35、0.013 99、0.008 40 mg/L;藁杆双脐螺浸泡在WPN系列浓度溶液中,24、48、72 h LC50分别为0.058 95、0.025 71、0.023 75 mg/L.以LC50值较大的WPN为标准药物,其相对毒力指数为1.00,LDS对光滑双脐螺浸杀24、48、72 h后的相对毒力指数分别为1.32、1.23、1.54;LDS对藁杆双脐螺浸杀24、48、72 h后的相对毒力指数分别为4.77、1.84、2.83.使用LDS浸杀上述2种双脐螺24、48、72 h后,光滑双脐螺存活数均高于藁杆双脐螺,差异有统计学意义(x2=8.044、5.263、4.658,P＜0.05).结论 相较于传统灭螺药物WPN,10％LDS对光滑双脐螺和藁杆双脐螺杀灭效果更佳,尤其对藁杆双脐螺作用效果更为敏感,具有替代作用.

目的 研究信号传导及转录激活因子3(STAT3)在阿尔茨海默病小鼠认知障碍发生发展中的作用及机制.方法 利用C57BL/6J小鼠双侧海马脑立体定位注射β-淀粉样蛋白建立阿尔茨海默病模型,给予STAT3抑制剂氯硝柳胺,运用动物行为学分析检测、Western blot分析检测等探究STAT3在认知障碍中的作用及机制.结果 行为学实验表明,与模型组小鼠相比,给药组小鼠的焦虑症状、空间探索能力、物体识别能力和学习记忆能力均得到改善;Western blot分析结果表明,给药后小鼠阿尔茨海默病的病理标志物改善,促炎因子表达下调;试剂盒分析结果显示给药组小鼠氧化应激相关指标改善;HE染色结果显示给药组小鼠海马神经元组织形态的改善.结论 本研究初步证明了抑制STAT3可减轻神经炎症和氧化应激,从而改善阿尔茨海默病小鼠的认知障碍.

目的 探讨抑制钙结合蛋白S100A4表达在脓毒血症相关肺损伤中的意义及潜在的调控机制.方法 复制脓毒血症模型小鼠,部分加氯硝柳胺Niclosamide预处理,收集肺泡灌洗液和肺组织.BCA蛋白定量法检测小鼠肺泡灌洗液总蛋白浓度;酶联免疫吸附试验检测肺S100A4蛋白含量;苏木精-伊红染色评估小鼠肺部炎症;免疫组织化学检测肺S100A4蛋白和紧密连接蛋白Occludin表达情况,Western blotting检测潜在信号分子的表达.结果 与Con组比较,LPS组小鼠肺泡灌洗液总蛋白浓度升高(P＜0.05),与Con组比较,肺S100A4水平差异无统计学意义(P＞0.05);免疫组织化学染色结果显示,肺支气管上皮细胞高表达S100A4,且LPS组S100A4表达较Con组升高(P＜0.05),Occludin表达较Con组降低(P＜0.05);Western blotting结果显示,LPS组STAT3和MAPK3表达较Con组升高(P＜0.05).与LPS组比较,Niclosamide预处理可有效降低小鼠肺支气管上皮细胞S100A4表达(P＜0.05),一定程度上恢复Occludin表达和下调STAT3、MAPK3表达.结论 Niclosamide可能通过STAT3、MAPK3信号下调S100A4和上调Occludin表达,进而缓解脓毒血症相关肺损伤.

目的:探讨氯硝柳胺对脂多糖(L PS)诱导小胶质细胞炎症作用的影响.方法:建立脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞系BV2炎症反应模型;采用Griess 法检测细胞上清中 NO 释放量, MTT 法检测细胞活性;实时定量 PCR(qPCR)检测促炎症因子iNOS、COX-2、TNF-α和IL-6的表达量.分析氯硝柳胺对小胶质细胞炎症的影响.结果:氯硝柳胺能够显著抑制LPS激活的BV2细胞中NO释放量;qPCR结果显示,与正常细胞组相比,LPS组BV2中促炎因子的表达水平明显升高;氯硝柳胺显著降低LPS诱导的BV2细胞中促炎因子表达.结论:氯硝柳胺对LPS诱导的小胶质细胞炎症反应有明显抑制作用.

目的 探讨氯硝柳胺乙醇胺盐(niclosamide ethanolamine,NEN)对离体大鼠冠状动脉(rat coronary artery,RCA)的舒张作用及其机制.方法 采用微血管张力法测定RCA血管张力,观察NEN对预收缩血管的舒张作用;通过抑制剂实验探讨NEN舒张RCA与钾通道和MAPK信号通路的关系;通过观察NEN对血管收缩剂所致的在去钙和复钙液中收缩的影响,探讨NEN的作用与细胞内外钙的关系.结果 NEN(0.5~3.0 μmol/L)对KCl或U46619所致的RCA收缩均具有浓度依赖性的舒张作用.MAPK抑制剂PD98059和SB239063减弱NEN的舒张作用,而钾通道阻断剂四乙胺、4-氨基吡啶、氯化钡和格列本脲对NEN的舒张作用无显著影响.NEN减弱KCl或U46619所致的细胞外钙内流依赖性RCA收缩,而对细胞内钙释放依赖性RCA收缩无显著影响.结论 NEN对离体RCA有显著的舒张作用,其机制可能与其激活MAPK信号通路、抑制细胞外钙内流有关.

目的 研究氯硝柳胺和低剂量顺铂联合应用对人肾上腺皮质癌SW-13细胞株增殖、凋亡,以及迁移力、侵袭力的影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养SW-13细胞,CCK-8法检测氯硝柳胺和不同浓度顺铂对细胞增殖的影响.设对照组、氯硝柳胺组、顺铂组、联合用药组,分别用Annexin V/PI和吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色检测细胞凋亡率的变化,Transwell实验和细胞划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力的变化,Western blot检测B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、波形蛋白(Vimnetin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的变化.结果 氯硝柳胺增强顺铂对SW-13细胞增殖的抑制作用.Annexin V/PI和AO/EB染色结果表明,与联合用药组比较,氯硝柳胺、顺铂促进细胞凋亡(P<0.05).Transwell和划痕实验结果表明,与联合用药组比较,氯硝柳胺、顺铂降低SW-13细胞的侵袭能力(P<0.05).Western blot检测结果表明,与联合用药组比较,氯硝柳胺、顺铂抑制Bcl-2、Vimentin的表达,促进Caspase-3、E-cadherin的表达(P<0.05).结论 氯硝柳胺能够增强低剂量顺铂对SW-13细胞增殖的抑制作用,促进细胞凋亡,抑制侵袭及迁移能力,可能与其抑制Bcl-2、Caspase-3、E-cadherin、Vimentin的表达有关.

目的:研究肠愈宁颗粒对二硝基氯苯乙酸复合法诱导大鼠溃疡性结肠炎的作用,并初步探讨其作用机制.方法:将雄性SD大鼠分成6组:正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(SASP)和肠愈宁颗粒低、中、高剂量组.以二硝基氯苯乙酸复合法诱导大鼠溃疡性结肠炎模型.评估疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)和病理组织学.ELISA方法测定血清IL-β、TNF-α、钙卫蛋白(Calproteein,CP),Western blot方法检测结肠黏膜CP的表达水平.结果:DAI结果提示造模成功,与正常组比较,模型组血清中IL-β、TNF-α、CP均明显升高,而CMDI指数、结肠黏膜CP均明显升高.肠愈宁颗粒各组DAI、CMDI、结肠组织中黏膜CP均降低,血清中IL-β、TNF-α、CP水平也明显降低.结论:肠愈宁颗粒能够有效缓解二硝基氯苯乙酸复合法诱导的大鼠溃疡性结肠炎,其作用机制可能与下调IL-β、TNF-α表达,减少CP水平有关.