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氚水对斑马鱼早期发育阶段的剂量-效应关系研究
编辑人员丨1周前
目的:研究氚水对早期发育阶段的斑马鱼造成的辐射剂量,并与其造成的生物效应相结合,初步观察剂量-效应关系。方法:模拟真实实验条件,建立物理模型,计算斑马鱼受精后24 h (24 hpf)胚胎和96 hpf幼鱼在3.7×10 3、3.7×10 4、3.7×10 5 Bq/ml 3种不同浓度氚水中的吸收剂量率。观察经3种不同浓度氚水染毒后24 hpf胚胎和96 hpf幼鱼的翻转频率和心率,并与对照组(E3溶液)进行比较。多组间比较采用单因素方差分析,对照组与处理组之间的比较采用LSD- t检验。 结果:随着斑马鱼发育时间的延长,其吸收剂量有所提高。24 hpf斑马鱼胚胎在3种不同浓度的氚水中对应的吸收剂量率分别为2.15×10、2.21×10 2、2.55×10 3 μGy/h;96 hpf斑马鱼幼鱼对应的吸收剂量率分别为2.95×10、3.03×10 2、3.47×10 3 μGy/h。24 hpf斑马鱼胚胎翻转实验结果显示,与对照组比较,3.7×10 3 Bq/ml氚水处理组的翻转频率明显减少( t=3.94, P<0.001)。96 hpf斑马鱼幼鱼心率随着不同氚水浓度的变化明显,与对照组比较,3.7×10 3 Bq/ml氚水处理组心率明显下降( t=2.86, P=0.01),而3.7×10 5 Bq/mL氚水处理组心率上升( t=-12.12, P<0.001)。 结论:随着吸收剂量率的变化,24 hpf斑马鱼胚胎翻转频率和96 hpf斑马鱼幼鱼心率均出现显著改变。
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编辑人员丨1周前
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海藻糖对小鼠放射性肠损伤的防护作用及机制研究
编辑人员丨1周前
目的:探讨海藻糖对小鼠放射性肠损伤的防护作用及分子机制。方法:采用简单随机抽样法将8周龄的雄性C57 BL/6 J小鼠分为4组:对照组(不给予任何处理)、海藻糖组(饮用2 g/100 ml海藻糖水)、照射组(以13 Gy剂量对小鼠腹部照射)、海藻糖+照射组(饮用2 g/100 ml海藻糖水+以13 Gy剂量对小鼠腹部照射),每组6只。经13 Gy照射和2 g/100 ml海藻糖饮水处理后,每天记录小鼠体重,14 d后处死小鼠并采集小鼠的血液、小肠和结肠,测量结肠长度。采用苏木精-伊红(HE)染色法和过碘酸-雪夫(PAS )染色法评估小鼠肠道损伤程度;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清和小肠组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)的水平;小鼠小肠上皮MODE-K细胞增殖实验、细胞克隆形成实验、细胞凋亡检测实验、活性氧测定实验和DNA损伤检测实验分别检测细胞活力、细胞克隆形成能力、细胞凋亡率、活性氧水平和DNA双链断裂数量;实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法和Western blot法分别检测自噬相关基因mRNA和蛋白水平的表达情况。组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:动物实验结果显示,与照射组比较,海藻糖+照射组可显著缓解电离辐射(IR)后小鼠体重的下降,并可促进其恢复( t=4.064 , P<0.05 ),且小鼠结肠缩短程度较轻,2组间的差异有统计学意义( t=4.044 , P<0.05 )。HE和PAS染色法评估结果显示,海藻糖可缓解IR后小鼠小肠黏膜损伤,与照射组比较,海藻糖+照射组小鼠绒毛较长、隐窝较深、杯状细胞数量较多,2组间的差异有统计学意义( t=4.373、8.414、6.515,均 P<0.05 )。ELISA检测结果显示,与照射组比较,海藻糖+照射组可显著降低IR后小鼠血清及小肠组织中TNF-α和IL-6的水平,且差异均有统计学意义( t= 4.475、8.686、3.993、6.007,均 P<0.05)。细胞增殖和克隆实验结果显示,与照射组比较,海藻糖+照射组可促进IR后小鼠小肠上皮MODE-K细胞活性和克隆形成能力[(0.885±0.127)对(0.644±0.151)、(97.330±5.937)对(64.000±7.324)],且差异均有统计学意义( t=2.566、4.411,均 P<0.05 );细胞凋亡检测实验结果显示,与照射组比较,海藻糖+照射组可抑制IR后小鼠小肠MODE-K细胞凋亡率[(15.270±0.647)%对(9.334±0.854)%],且差异有统计学意义( t=8.315 , P<0.05 );活性氧测定实验和DNA损伤检测实验结果显示,与照射组比较,海藻糖+照射组可降低IR后小鼠细胞内ROS水平和DNA双链断裂数量( t=8.884、4.802,均 P<0.05 )。qRT-PCR法和Western blot法检测结果显示,与照射组比较,海藻糖+照射组小鼠小肠组织和MODE-K细胞中自噬相关基因TFEB、MAP1LC3B的表达水平显著增加[(208.210±26.143)对(8.986±5.362)、(13.970±4.587)对(5.815±1.873)] ,且差异均有统计学意义( t=8.875 ,8.461,均 P<0.05 )。 结论:海藻糖通过调控转录因子EB介导的自噬反应激活缓解小鼠放射性肠损伤。
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编辑人员丨1周前
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气道抽吸液标本单细胞转录组测序前细胞处理技术的比较
编辑人员丨1周前
目的:探索适用于气道抽吸液标本单细胞转录组测序的细胞前处理方法。方法:从4例急性呼吸道感染患者中新鲜采集4份气道抽吸液标本,用痰消化液消化后过细胞滤网制备成单细胞悬液,分别用新鲜细胞直接建库(direct emulsion,DE)、用10×Genomics的单细胞RNA固定试剂固定后混合建库(direct-fix,DF)、将细胞冻存复苏再固定后(frozen-fix,FF)混合建库3种方法操作,3种方法均以10 4个细胞进行油包水处理,用10×Genomics平台进行单细胞测序,对获取的细胞数量、数据质量、注释的细胞种类、标记基因的表达水平进行比较分析,用Pearson相关性分析3种前处理方法获得的同种细胞亚群高变基因表达差异。比较3种前处理方法获得的同一细胞亚群的差异基因在不同方法之间的表达水平。通过Pearson相关分析研究3种前处理方法获得的同一细胞亚群之间差异基因表达的相关性。 结果:DE、FF、DF方法获得的单细胞数量中位数分别为2 733、1 140和5 897个( P>0.05),唯一分子识别符高于500,基因中位数分别为801、887、1 259( P>0.05)。评估RNA复杂度的新颖性评分超过0.8的细胞比例分别为99%、87%和93%。3种方法获得的细胞亚群均有鳞状上皮细胞、分泌细胞、纤毛细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、巨噬细胞、浆细胞、中性粒细胞等9种细胞亚群,与DE方法比较,DF和FF方法可多获得特异性高表达角蛋白5的基底细胞。3种前处理方法中同一细胞亚群差异基因和高变基因在不同方法之间表达高度一致,具有显著相关性( P<0.001)。 结论:在相同的测序数据量下,气道抽吸液标本单细胞悬液先固定再进行探针杂交和转录组测序的方法得到的数据质量与新鲜细胞直接操作的质量相近,该方法更适用于临床样本的单细胞转录组测序分析的样本前处理过程。
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编辑人员丨1周前
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富氢水通过降低小鼠神经细胞OGD/R后过度自噬减轻细胞损伤
编辑人员丨1周前
目的:探讨富氢水是否通过影响小鼠海马神经元细胞株(HT22细胞)氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后自噬水平而发挥细胞损伤的保护作用。方法:取体外培养的对数增长期小鼠HT22细胞,用细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,寻找Na 2S 2O 4的最佳制模浓度。将HT22细胞分为对照组(NC组)、OGD/R组(无糖培养基+ 10 mmol/L Na 2S 2O 4处理90 min后换正常培养基继续培养4 h)和富氢水处理组(HW组,无糖培养基+ 10 mmol/L Na 2S 2O 4处理90 min后换含富氢水培养基继续培养4 h)。采用倒置显微镜观察HT22细胞形态;CCK-8法检测细胞活性;透射电镜观察细胞超微结构;免疫荧光法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1的表达;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测细胞自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1的蛋白表达。 结果:倒置显微镜下显示:与NC组比较,OGD/R组细胞状态差,胞体肿胀,可见细胞裂解碎片,细胞活性明显降低〔(49.1±2.7)%比(100.0±9.7)%, P<0.01〕;与OGD/R组比较,HW组细胞状态改善,细胞活性明显升高〔(63.3±1.8)%比(49.1±2.7)%, P<0.01〕。透射电镜下显示:与NC组比较,OGD/R组细胞神经元核膜溶解,可见较多数量自噬溶酶体;与OGD/R组比较,HW组细胞神经元损伤减轻,自噬溶酶体数量明显减少。免疫荧光法检测结果显示:与NC组比较,OGD/R组细胞LC3和Beclin-1的表达明显增强;与OGD/R组比较,HW组LC3和Beclin-1的表达明显减弱。Western blotting检测结果显示:与NC组比较,OGD/R组细胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达均明显升高(LC3Ⅱ/Ⅰ:1.44±0.05比0.37±0.03,Beclin-1/β-actin:1.00±0.02比0.64±0.01,均 P<0.01);与OGD/R组比较,HW组细胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达均明显降低(LC3Ⅱ/Ⅰ:0.54±0.02比1.44±0.05,Beclin-1/β-actin:0.83±0.07比1.00±0.02,均 P<0.01)。 结论:富氢水对OGD/R致HT22细胞损伤有明显的保护作用,其机制可能与抑制自噬相关。
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编辑人员丨1周前
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上海市94所医疗机构内镜终末漂洗用水管理现场调查
编辑人员丨2周前
目的 调查上海市各级医疗机构内镜中心终末漂洗用水的管理现状,为提高用水质量、制定质控标准及监管措施提供依据.方法 2023年上海市院内感染质量控制(简称质控)督查期间,现场对所督查医疗机构的内镜中心进行终末漂洗用水的管理调研,调研内容包含终末漂洗水的管理、采样和检测方法、水路消毒方法.结果 在质控调查的106所医疗机构中,有94所医院配备了内镜中心;不到30%的医疗机构对检查性内镜和治疗性内镜分区域进行独立的清洗和消毒,而大约15%的内镜中心无独立的纯化水处理系统;三级医院、二级医院和社会办医院的内镜终末漂洗水中使用纯化水的比例分别为85.7%、87.8%和90.9%;调查发现78.6%的三级医院、51.2%的二级医院和81.8%的社会办医院每月对终末漂洗水进行采样监测(P<0.05);通过投放含氯等化学消毒剂的方式消毒管路的比例分别为14.3%、22.0%和18.2%;使用R2A平板培养纯化水的比例分别是35.7%、36.6%和27.3%,而各级医院之间无统计学差异.结论 上海市内镜用水现状不容乐观,存在管理人员认知不足,医院重视程度不够,临床执行不统一,监管力度不够等现象,今后应开展针对性培训,以降低感染发生风险.
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编辑人员丨2周前
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原位电解活性氯溶液对细菌消毒性能观察
编辑人员丨2023/9/16
目的 探索原位电解活性氯溶液对水中3种指示细菌的消毒效果和相关影响因素.方法 采用间歇式电解槽制备活性氯溶液,并对菌悬液进行电解试验;改变试验参数探索不同因素对杀灭率的影响,并对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和枯草杆菌黑色变种芽孢3种指示菌的消毒效果进行对比.结果 在试验范围内,原位电解活性氯溶液对3种试验菌的杀灭对数值与极板间距和pH值有负相关关系,与电解液浓度和外加电压有正相关关系.间歇式电解槽的极板间距为3 mm、电解液浓度为4%、pH值为7、电压为13 V时对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和枯草杆菌黑色变种芽孢3种细菌消毒20 s的杀灭对数值分别为7.0、4.7和2.4,该条件下所制得的消毒剂有效氯浓度为9.2 mg/L,消毒效果远高于相同有效氯浓度下的次氯酸钠溶液.结论 原位电解活性氯溶液可以有效灭活水中微生物.
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编辑人员丨2023/9/16
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北京市朝阳区自备井集中式供水系统风险评估
编辑人员丨2023/8/6
目的 了解北京市朝阳区自备井集中式供水系统运行管理现状,查找供水系统存在的主要风险.方法 在北京市朝阳区抽取30口自备井集中式供水系统作为评估对象,参照WHO《Guidelines for drinkingwater quality》的半定量风险评价模型对供水系统的各个环节进行风险评估.结果 北京市朝阳区自备井集中式供水系统中影响供水安全的关键风险点涉及从水源到用户的多个环节,主要风险即关键风险点包括:无安全密闭的井房或设备间(13.33%)、无水处理措施(10.00%)、无简单水质检验设备(93.33%)、不进行消毒剂余量日常检测(92.60%)、管材没有卫生批件(70.00%)、管网老旧(13.33%).结论 北京市朝阳区自备井集中式供水系统存在一定的安全风险,需进一步加强管理.
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编辑人员丨2023/8/6
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基于生物信息学分析法探讨丙戊酸钠对肝细胞生物功能网络的干扰作用
编辑人员丨2023/8/6
目的 利用已发表的丙戊酸钠(VPA)处理的大鼠原代肝细胞的基因芯片原始数据,深入分析VPA对肝细胞生物过程/通路的干扰作用,为VPA毒性机制的深入研究提供参考.方法 将NCBI的GEO(Gene Expression Omnibus)数据库中,VPA处理的大鼠肝原代细胞样本的数据GSE40338取出,采用GCBI在线平台分析,样本数据分为VPA处理组(实验组)和蒸馏水处理组(对照组),进行差异基因分析,功能分析及信号通路分析.结果 基因芯片分析结果显示,不同剂量和不同时间VPA处理,肝细胞的基因调控变化不同,进一步分析提示VPA干扰了的生物过程(biological process)、代谢(metabolism)和发育(development)等过程.与发育相关的通路主要包括血管新生(vasculogenesis)、胚胎发育(embryonic development)、神经发育(neural development)及器官发育(organ development),其中器官发育和神经发育的富集度为最高.结论 体外肝细胞基因组学分析表明,除代谢外,VPA可以干扰多种生物学过程,包括干扰发育相关的生物功能网络,提示其可能具有器官发育和神经发育毒性,与体内动物实验的致畸效应和神经管发育毒性相一致.本研究表明对基因芯片数据的生物网络/过程的深入分析对预测药物毒性和理解作用机制具有重要价值.
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编辑人员丨2023/8/6
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噬菌蛭弧菌对医院污水分离细菌捕食作用研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究医院污水细菌分布情况及噬菌蛭弧菌对分离细菌的捕食作用.方法 采用定量接种法对温州地区两家综合性医院污水出水口样本进行菌量计数,并采用VITEK 2 Compact细菌鉴定仪对分离细菌进行鉴定;将噬菌蛭弧菌与分离菌进行共培养,根据每隔12 h培养后菌落数的变化,判断噬菌蛭弧菌对分离菌的作用.结果 两家医院污水中菌量分别为2.8×105 cfu/ml和1.5×105 cfu/ml,主要分离菌为肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、蜡样芽胞杆菌、弧菌属细菌、普通变形杆菌等;噬菌蛭弧菌对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和弧菌属细菌具有一定的捕食作用,经过72 h的共培养,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和弧菌属的菌量均发生约3 log10降低;对变形杆菌及蜡样芽胞杆菌未出现捕食作用.结论 噬菌蛭弧菌可捕食部分革兰阴性菌,提示其可作为一种生物消毒剂应用于医院污水处理.
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编辑人员丨2023/8/6
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城市不同污染程度地表水中有机物的蓝棉富集及致突变性研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 探究某城市不同污染程度地表水中有机污染物的致突变性,初步探讨蓝棉的吸附效能.方法 于2010年11月,选择某城市5个采样点,其中,A、B点的水样分别为流经该城市上游乡村和郊区的河水,C点的水样为某污水处理厂进水口污水,D、E点的水样分别为某自来水厂的水源水和出厂水.将各采样点40L水样以15 ml/min流速经蓝棉过滤后,用甲醇洗脱经蓝棉吸附的有机提取物,配置成10 L/ml浓度储备液.将储备液设置0.1、1 L/皿剂量组,选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌TA98和TA100菌株进行Ames试验.选取储备液对金鱼腹腔进行一次性注射染毒,染毒容量为10 μl/g,并设阴性、阳性对照,进行金鱼鱼鳃细胞微核试验和金鱼外周血细胞彗星试验.结果 Ames试验显示,5个采样点受检水样中主要存在移码型间接致突变物,C点的水样有机提取物Ames试验阳性最强;金鱼外周血细胞彗星试验显示,与阴性对照组相比,C点与E点的水样有机提取物染毒组金鱼外周血细胞尾矩增加,差异有统计学意义(P<0.05);金鱼鱼鳃细胞微核试验显示,C点的水样有机提取物染毒组金鱼鱼鳃细胞微核率升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在一定剂量浓度下,该城市部分受检水样中有机提取物具有致突变作用,污水处理厂进水口水样的有机提取物致突变性较强,水体污染程度较为严重.蓝棉对受检水样中有机污染物具有较好的富集作用,主要吸附移码型间接致突变物.
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编辑人员丨2023/8/6
