目的:研究江南卷柏药材与混淆品旱生卷柏、兖州卷柏的性状与HPLC特征图谱的区别,为江南卷柏和近缘种的鉴定寻找解决方案.方法:观察比较江南卷柏与混淆品的性状特征.采用HPLC法,利用相似度软件计算其HPLC谱图的相似度,选择具有鉴别意义的指纹区,以穗花杉双黄酮色谱峰为参照,计算色谱峰相对保留时间,建立特征图谱,采用HPLC-DAD-ESI-MS/MS指认江南卷柏特征图谱的化学成分,并与其近缘种图谱进行比较.结果:江南卷柏、旱生卷柏、兖州卷柏具有其专属的性状特征.HPLC特征图谱方法学考察良好,10批江南卷柏样品的相似度为0.871～0.985,具有稳定的共有峰.江南卷柏特征图谱中13种黄酮类化学成分得到指认,江南卷柏特征图谱与其分类关系最近的兖州卷柏、旱生卷柏的特征图谱有明显区别.罗布斯塔双黄酮、罗布斯塔双黄酮-4'-甲醚为首次从旱生卷柏中发现.结论:该方法简便,可靠,实用性强,能准确地鉴别江南卷柏以及近缘混淆品,为江南卷柏的鉴定提供了科学依据.

目的:建立深绿卷柏和江南卷柏的HPLC特征图谱及其中穗花杉双黄酮、橡胶树双黄酮、7,4',7'',4'''-四-O-甲基穗花杉双黄酮3种成分的含量测定方法,对两药材进行质量比较分析.方法:采用HPLC法研究两种药材的特征图谱和含量测定方法,并对样品进行分析.结果:深绿卷柏与江南卷柏的HPLC特征图谱中分别有12个和11个共有峰,但两者的共有峰仅有3个,说明化学成分差异显著.深绿卷柏中穗花杉双黄酮、橡胶树双黄酮及7,4',7'',4'''-四-O-甲基穗花杉双黄酮的含量分别为1.12～ 1.79 mg/g、0.38 ～0.60 mg/g、0.14～0.27 mg/g,而江南卷柏中没有检测到橡胶树双黄酮,且7,4',7'',4'''-四-O-甲基穗花杉双黄酮含量极低.结论:深绿卷柏和江南卷柏的HPLC指纹图谱中化学成分种类及共有成分含量具有显著差异.研究结果为两类药材的鉴别及质量控制提供了参考依据.

目的:为江南卷柏的进一步研究与开发利用提供参考.方法:对江南卷柏的名称、产地分布和药用历史等进行考证.以"江南卷柏""卷柏属""化学成分""药理作用""Selaginella moelledorffii""Chemical composition""Pharmacological activity"等为关键词,检索中国知网、万方、PubMed、NCBI等数据库中收录的关于江南卷柏化学成分和药理作用的研究文献,据此综述国内外对其化学成分和药理作用的研究进展.结果与结论:江南卷柏为民间常用药,药用历史悠久,在我国资源丰富,分布广泛;含有黄酮类、苯丙素类、生物碱类等多种化学成分;具有止血、抗炎、免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗病毒等多种药理作用.目前对江南卷柏的药理作用研究大多集中在双黄酮类成分.江南卷柏拥有独特的生物学及基因特征,对其化学及生物学等方面进行广泛深入的研究仍然具有较大的空间和价值.

Mlo作为一类广谱抗病因子,参与植物多种生物与非生物胁迫反应.为研究不同物种Mlo基因的基本特征及进化关系,选取己测序的29种代表性植物,利用生物信息学方法对其进行鉴定及系统进化分析.结果 显示:共有198个植物Mlo基因被鉴定,各基因具有11～14个外显子,编码400～600个氨基酸,翻译碱性疏水性稳定蛋白,部分Mlo含信号肽和钙调素结合区,绝大多数Mlo定位于细胞膜,含5～7个跨膜螺旋结构.基序分析发现,10个保守基序长21～50个氨基酸.染色体定位发现174个Mlo不均衡地散布于不同染色体或scaffold上,且主要位于两端,形成19个(24.1％)基因簇、5对(5.7％)串联重复和61对(36.2％)片段重复.系统聚类可将164个Mlo分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三个区组,被子植物Mlo主要聚在ⅠA组,江南卷柏Mlo聚在ⅠA和ⅢB组,小立碗藓Mlo聚在ⅠB和ⅢA组,几乎所有藻类Mlo聚在Ⅱ组.同源性分析发现52.4％的Mlo以同源基因形式存在,包括25对直系同源基因和28对旁系同源基因,其Ka/Ks值为0.01～0.78,说明进化中主要受到纯化选择.研究表明植物Mlo基因家族较保守,具有成簇存在的特点,在进化过程中经重复扩张,形成了大量同源基因,同时也发生了不同程度的丢失,结果为相关基因分离及植物抗病育种应用提供了理论依据.

以中国特有植物香格里拉水韭(Isoetes shangrilaensis X.Liu)为材料,通过转录组测序数据分析筛选出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(IsPEPC),根据该基因序列,从香格里拉水韭cDNA中克隆获得磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)的编码基因IsPEPC,并将此基因插入pCAMBlA-2300-N-eGFP及pMD质粒载体上,再采用农杆菌介导的花序浸染法将2个重组载体分开转入野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana(L.)Heynh.)中.结果显示:IsPEPC基因蛋白编码序列长度为2928 bp,编码975个氨基酸;同源性检索分析结果表明,该蛋白与其近源物种江南卷柏(Selaginella moellendorffii Hieron.)的PEPC基因蛋白序列同源性为79.8％.对转基因的T1代拟南芥通过抗性筛选并在gDNA水平上阳性鉴定,初步鉴定得到pC2300-N-eGFP-lsPEPC转基因株系26个和pMD-lsPEPC转基因株系32个.

目的 研究江南卷柏的化学成分.方法 综合采用中压C18和制备HPLC等色谱技术对江南卷柏全草水溶性化学成分进行分离,通过NMR、ESI-MS等波谱技术并结合文献进行对比鉴定化合物结构.结果 从江南卷柏中分离得到8个化合物,分别鉴定为:(2S)-5-羧甲基-4′,7-二羟基二氢黄酮(1);芹菜素-7-O-β-D-呋喃芹菜糖基-6,8-C-β-D-二吡喃葡萄糖苷(2);4′,5,7-三羟基-3′,6-二甲氧基黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(3);vicenin-2(4);5-甲氧基-4'-羟基黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5);5,5″,7,7″,4′,4(")-六羟基-(2′,8″)-双黄酮(6);unciflavoneD(7);4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(8).结论 化合物2、3、6-8为首次从该植物中分离得到.

GNOM是一种ADP核糖基化因子(ARF)的鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF),为探索GNOM在香鳞毛蕨(Dryopteris fragra ns)中的抗逆功能,该研究克隆了DfGNOM并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析了DfGNOM基因在不同植物激素及逆境胁迫处理下的表达模式,为进一步探索该基因的功能以及香鳞毛蕨的抗逆机制奠定基础.结果 表明:(1)成功获得DfGNOM全长4338 bp,蛋白质多序列比对以及进化树分析表明,DfGNOM与江南卷柏(Selaginella moellendorffii)SmGNOM亲缘较近,motif分析表明该蛋白含有sec7保守结构域.(2) qRT-PCR分析显示,DfGNOM在香鳞毛蕨的根、叶柄和叶中均有表达,但在叶中表达量最高;DfGNOM的相对表达量在生长素(IAA)处理后总体上调,在脱落酸(ABA)处理后总体下调;在NaC1处理下呈"降-升-降"的变化趋势,高温和低温处理下呈"升-降-升"变化趋势;在茉莉酸甲酯(MeJA)、乙烯利(ETH)以及PEG处理下,DfGNOM的相对表达也表现出不同的模式.研究认为,DfGNOM在香鳞毛蕨非生物胁迫响应过程中发挥调控作用.

通过比较种子植物与蕨类植物的基因及其调控网络,为研究种子性状出现的分子机制提供更多的信息.下载拟南芥(Arabidopsis thaliana)种子特异基因和基因网络数据,构建拟南芥种子特异基因调控网络,并与江南卷柏(Selaginella moellendorffii)基因组数据比较,发现其中重要的调控节点.分析得到构成调控网络的1053个拟南芥种子特异基因,其中的969个基因形成一个复杂的调控网络.该网络的核心模块包括39个基因,形成哑铃状的子网络,其中重要节点基因AT1G54860只存在于种子植物基因组中.AT1G54860基因编码GPI锚定蛋白,参与细胞壁的形成、细胞间信号传导及生长分化等过程,推测其在种子形成中具有重要地位,可能起了"开关"的作用.

[目的]利用二代高通量测序技术获得金毛狗的转录组信息.[方法]金毛狗叶片总RNA经过提取、建库、测序和组装,获得单基因簇(Unigene)序列,再进行注释和分析,得到金毛狗转录组信息.[结果]共获得877918条金毛狗Unigene,平均长度为697.85 bp,N50为1262 bp.其中,33682条(38.37％)Unigene在数据库中获得功能注释,并与江南卷柏的序列相似度最高.分别有20379条和25246条Unigene在京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)数据库获得注释,包括代谢过程、刺激响应、生物调节、转运活性等.此外,4605条1000 bp以上Unigene经过卫星识别工具(MISA)进行简单重复序列(SSR)检测,共鉴定到6456个SSR位点,并使用Primer 3.0软件设计引物.[结论]金毛狗的转录组信息为其生物学过程、次生代谢通路和功能基因的挖掘提供了遗传资源信息,有利于其资源保护和开发利用.