患者女，57岁。因左眼无痛性视力下降1周，于2019年11月11日到湖南省人民医院眼科就诊。患者近1年来有反复肺部感染和贫血，曾于外院诊断为"纯红细胞再生障碍性贫血"，并接受抗感染及输血治疗，但是情况无明显好转。2005年行胆道结石取出手术。否认高血压、糖尿病、恶性肿瘤等病史。否认长期口服糖皮质激素及其他药物史。否认家族史和遗传病史。眼部检查：右眼视力0.6，矫正视力1.0；左眼视力眼前手动，无法矫正。右眼、左眼眼压均为16 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa）。双眼结膜无充血，角膜透明；左眼可见尘状及色素性角膜后沉着物，丁达尔征（+），前房细胞（++）；双眼晶状体皮质轻度混浊。眼底检查：左眼玻璃体中度混浊、细胞（+），视盘颜色偏淡；后极部及鼻侧视网膜呈灰白色，血管管径细，动脉闭塞，视网膜下方及颞侧可见颗粒状坏死灶，累及黄斑区（ 图1A）。荧光素眼底血管造影（FFA）检查，左眼视网膜动静脉充盈时间延迟，视盘下方大片视网膜荧光着染，后期轻微荧光素渗漏，视盘鼻侧视网膜弥漫性透见荧光夹杂弱荧光斑点；晚期部分视网膜血管及微血管荧光素渗漏，累及黄斑（ 图1B）。右眼眼底及FFA检查均未见明显异常。胸部CT检查提示前上纵膈占位，性质待定（ 图2）。实验室检查：血红蛋白67 g/L（正常值：110~150 g/L），红细胞计数2.22×10 12个/L（正常值：3.5~5.0×10 12个/L），血清铁蛋白1 413 ng/ml（正常值：80~400 μg/L）。免疫学检查：B细胞缺乏、低丙种球蛋白血症、低CD4 T细胞计数和低CD4/CD8 T细胞计数比率。前房穿刺抽取房水行荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测，巨细胞病毒（CMV）含量35.8拷贝/ml。诊断：左眼CMV性视网膜炎（CMVR）。给予玻璃体腔注射更昔洛韦2 mg，2次/周，连续1个月；全身静脉注射更昔洛韦250 mg，2次/d；局部使用1%醋酸泼尼松龙滴眼液和0.5%托吡卡胺滴眼液滴眼。

目的:探讨血小板聚集在新生犬动脉导管闭合发生发展过程中的作用，以及血小板膜糖蛋白Ⅱb-Ⅲa（GPⅡb-Ⅲa）受体拮抗剂替罗非班的影响。方法:选取24月龄比格母犬4只，分别编号为1、2、3、4，分两批在预产期前1~2 d进行剖宫产取出仔犬。母犬1和2为第一批，经剖宫产取出新生犬18只，作为对照组，按出生后时间点分为1、4、12 h 3个亚组，每个亚组6只；新生犬出生后即刻经颈静脉注射生理盐水10 mL/kg。母犬3和4为第二批，经剖宫产取出新生犬19只，作为替罗非班组，按出生后时间点分为1 h（ n＝6）、4 h（ n＝6）、12 h（ n＝7）3个亚组；新生犬出生后即刻经颈静脉注射盐酸替罗非班注射液10 mL/kg（10 mL注射液含替罗非班2.5 mg）。采用超声心动图测量动脉导管内径；手术剥离取出动脉导管并分成两部分，分别采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）和免疫组化法检测血小板膜GPⅡb-Ⅲa表达。 结果:对照组1 h亚组中有1只新生犬于出生后0.5 h死亡；替罗非班组19只均顺利完成实验。出生后1 h，对照组和替罗非班组新生犬动脉导管均未闭合，导管内径差异无统计学意义（mm：1.72±0.08比1.70±0.11， P>0.05）；出生后4 h，对照组有1只新生犬动脉导管闭合，替罗非班组均未闭合，且动脉导管内径明显大于对照组（mm：1.52±0.15比0.95±0.48， P<0.05）；出生后12 h，对照组新生犬动脉导管均闭合，替罗非班组仍有2只未闭合，导管内径分别为1.0 mm和1.1 mm。Western blotting结果显示，两组新生犬出生后1、4、12 h动脉导管内血小板膜GPⅡb-Ⅲa蛋白表达均呈逐渐升高趋势；替罗非班组1 h GPⅡb-Ⅲa蛋白表达明显低于对照组（GPⅡb-Ⅲa/β-actin：0.67±0.07比0.84±0.16， P<0.05），4 h和12 h时GPⅡb-Ⅲa蛋白表达略低于对照组（GPⅡb-Ⅲa/β-actin：4 h为0.85±0.12比0.95±0.11，12 h为1.04±0.16比1.09±0.17，均 P>0.05）。免疫组化结果显示，两组新生犬动脉导管内血小板膜GPⅡb-Ⅲa表达的变化趋势与Western blotting检测结果相似。 结论:新生犬动脉导管在出生后1~4 h开始闭合，12 h全部闭合；出生后动脉导管内血小板膜GPⅡb-Ⅲa表达逐步升高，血小板聚集可能在一定程度上参与并促进了动脉导管闭合。血小板膜GPⅡb-Ⅲa受体拮抗剂替罗非班可能通过抑制血小板聚集在一定程度上延缓新生犬动脉导管闭合。

目的:鉴定糖尿病性心肌病（DCM）小鼠心肌组织差异表达的环状RNA（circRNA），并分析其可能的生物学功能及调控网络。方法:C57BL/6小鼠，雄性，8周龄，体重21~27 g。选取8只小鼠作为正常组，15只进行建模。通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病小鼠模型。注射1周后，测定小鼠空腹血糖水平，经检测12只小鼠建模成功。在相同的实验室条件下饲养小鼠12周，通过超声心动图检测小鼠的心脏结构和功能，筛选出左心室射血分数≤60%，且二尖瓣舒张早期最大血流速度与心房收缩期最大血流速度比值（E/A）≤1.6的糖尿病小鼠作为DCM组（ n=3）。于DCM组确立当天麻醉后处死正常组和DCM组小鼠，取出心脏，从心肌组织中提取RNA备用。采用高通量测序对DCM组和正常组小鼠心肌组织中的RNA进行测序和鉴定分析，并利用DeSeq2进行差异性分析，通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）在组织水平上对分析结果进行验证，并对鉴定的差异circRNA进行GO分析和KEGG通路分析。通过微小RNA（miRNA）靶基因预测软件进行差异表达circRNA-miRNA相互作用预测。 结果:DCM小鼠心肌组织中共鉴定出63种差异表达circRNA。RT-qPCR验证结果示同源性分析筛选出的16种差异表达circRNA中8种组织水平的表达与测序结果一致，其中7种表达上调、1种表达下调。KEGG通路分析结果示，上调的circRNA主要与腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号通路以及细胞间的黏着连接通路有关，下调的circRNA主要与心肌病有关。GO功能分析显示，上调表达的circRNA在分子功能方面主要与离子、蛋白质、激酶等因子的结合过程有关，并且在细胞组分方面参与调节细胞内结构尤其是细胞器的构成。分子功能与细胞组分方面的功能分析显示，上调的circRNA与细胞组分起源、募集、组织的生物学过程相关，并由此参与细胞生物学过程的调控；下调的circRNA在分子功能方面与催化活性相关，也与蛋白激酶的结合过程、转移酶及钙调蛋白的活性有关，在细胞组分方面与收缩性纤维的组分、肌原纤维的构成密切相关，而在富集的生物学过程GO分析术语中，包括赖氨酸肽基修饰、肌节的构成、肌原纤维的装配、心肌组织的形态学发育、心肌肥厚等生物学过程。本研究鉴定的差异表达circRNA均存在miRNA的结合位点，且部分miRNA与保护心肌细胞正常生理功能、抗氧化应激损伤、抑制心肌细胞凋亡以及抗心肌肥厚有关。结论:DCM小鼠心肌组织中circRNA存在差异表达，且其与DCM的发生发展密切相关。

目的:制备靶向肿瘤血管生成的MR/CT双模态纳米探针t金@谷胱甘肽@钆(tAu@GSH@Gd)，探讨其性能及用于活体MR/CT成像的潜能。方法:以GSH为模板包载Au和Gd原子，共价偶联靶向多肽环状天冬酰胺－甘氨酸－精氨酸(cNGR)构建纳米探针tAu@GSH@Gd。建立荷乳腺癌(EMT－6)BALB/c小鼠皮下移植瘤模型30只，分为空白对照组(生理盐水)、对照组(Au@GSH@Gd纳米粒子)和实验组(tAu@GSH@Gd纳米探针)，每组10只，经尾静脉给药后于不同时间点行MR、CT成像及生物分布研究，根据小鼠肿瘤部位及主要脏器相对MR信号值与相对CT值评价成像效果和生物分布。成像实验后，取出小鼠肿瘤组织进行银染，研究Au@GSH@Gd纳米粒子及tAu@GSH@Gd纳米探针在肿瘤血管生成部位的聚集。2组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:tAu@GSH@Gd纳米探针水合粒径为(6.40±0.22) nm，T 1弛豫效率为(36.91±0.07) mmol·L －1·s －1，体外MR/CT成像效果良好。荷瘤小鼠注射tAu@GSH@Gd纳米探针后2 h，肿瘤MR/CT成像均明显强化，24 h达峰值，相对MR信号值由给药前的1.04±0.12增至1.84±0.26( t＝12.61， P＝0.006)，相对CT值由给药前的1.01±0.04增至1.95±0.05( t＝15.34， P＝0.004)。对照组小鼠给药后16 h，肿瘤强化达峰值，相对MR信号值为1.50±0.06，相对CT值为1.53±0.10，均低于实验组(1.84±0.26和1.95±0.05； t值：5.35和16.46，均 P<0.05)。生物分布结果显示，大部分tAu@GSH@Gd纳米探针经肾代谢。组织银染验证了该纳米探针对肿瘤血管生成的靶向作用。 结论:制备的tAu@GSH@Gd纳米探针具有肿瘤血管生成靶向和MR/CT双模态成像功能，为肿瘤血管生成的影像学评估提供了新的设计理念和基础。

患者男性，35岁，主因"上腹部疼痛伴恶心呕吐4h"于2022-11-12 08:36至湖州市中心医院急诊科就诊。患者于4 h出现上腹部持续性剧烈绞痛症状，并伴有恶心、呕吐，呕吐物为胃液，有肛门停止排气排便。体格检查：血压190/100 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），心率159次/min，指氧饱和度98%，呼吸23次/min，肺部听诊呼吸音粗，啰音听诊不明显，心脏各瓣膜区杂音未及，腹部无压痛反跳痛。急诊内科医生开具血常规、超敏C反应蛋白、电解质、肝功能、肾功能、淀粉酶、凝血功能、D二聚体、肌钙蛋白I、肌红蛋白、肝胆胰腺B超检查。遗憾的是该患者未遵照医生的建议完善上述检查，并且未将上述情况告知医生，强烈要求医生予药物治疗改善腹痛、呕吐症状。所以医生开具了药物"甲氧氯普胺10 mg肌肉注射即用，间苯三酚注射液80 mg加入5%葡萄糖注射液250 mL静滴即用"。11:13患者家属再次来到急诊内科诊室并告知医生患者腹痛症状未缓解。医生此时发现该患者未完成此前开具的所有血化验及超声检查，立即陪同患者至急诊化验室抽取血化验标本。11:50该患者出现胸闷气促症状，随即送入抢救室。心电监护提示心动过速，心率162次/min，血压86/62 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），指氧饱和度92%，呼吸14次/min，立即查心电图，结果示：Ⅱ、Ⅲ、AVF、V 1~V 5 ST段广泛抬高。并加测床旁快速B型钠尿肽测定。12:10血化验结果全部取出，其异常的结果有：白细胞计数22.9×10 9/L,中性粒细胞计数百分率95.2 %，血红蛋白180.0 g/L，超敏C反应蛋白22.3 mg/L，肌酐209 μmol/L，镁1.80 mmol/L，D二聚体19.60 mg/L，BNP 1 256.1 pg/mL，肌钙蛋白I 11.43 pg/mL，肌红蛋白>1 200 ng/mL。12:15心电监护提示患者心率151次/min，血压86/62 mmHg，指氧饱和度92%，呼吸14次/min，同时查超声心动图，结果提示室间隔及室壁活动弥漫性减弱，心律失常，三尖瓣、二尖瓣、肺动脉瓣轻度反流，左室收缩功能不全。12:40患者突发肢体抽搐、双眼向上凝视、叹息样呼吸，心电监护示心律进行性下降至50次/min，查体颈动脉搏动未触及，意识丧失，立即行心肺复苏，呼吸球囊辅助通气，气管插管，机械辅助通气，并予药物"肾上腺素1 mg每3分钟静推（共20支）"。令人遗憾的是经过积极的抢救，该患者仍未恢复自主心率及呼吸，于14:00宣布死亡。

目的:探索百草枯（paraquat，PQ）肺损伤的分子机制。方法:6至8周龄的C57BL/6雄鼠按照完全随机化分组的方法分为四组，实验组（共3组，每组9只）经腹腔注射40 mg/kg PQ建立染毒模型，对照组（9只）小鼠腹腔注射同等剂量生理盐水。PQ注射后2 d、7 d和14 d，分别麻醉后处死小鼠取出肺组织，苏木精-伊红染色法（HE）观察肺组织的病理变化，并应用串联质谱标记技术(tandem mass spectrometry tag technology, TMT)分析各时间点实验组与对照组比较，肺组织中差异蛋白表达情况，并进行功能性分析。结果:与对照组比较，PQ-2 d、7 d、14 d分别有91个（69升高，22降低）、160个（103升高，57降低）和78个（45升高，33降低）蛋白的差异表达有统计学意义；亚细胞定位结果显示，与对照组相比，PQ-2 d和PQ-7 d组差异蛋白均以细胞外分布最多，而PQ-14d组中差异蛋白位于细胞核内最多；GO分析显示，与对照组相比，PQ-2d和7 d以体液免疫和凝血相关的反应为主，PQ-14d以中性粒细胞聚集等趋化和调控反应为主；KEGG分析显示，补体-凝血级联在PQ-2 d和7 d组中占据首要地位，而PQ-14 d组中以细胞色素P450对异生物的代谢途径为首。结论:本研究应用TMT技术对PQ中毒小鼠不同时间点的肺脏进行蛋白组学分析，从蛋白分子角度揭示了PQ肺损伤的分子机制，发现并提出体液免疫和补体-凝血途径是PQ肺损伤的关键，为后续临床研究和治疗方向提供了重要的理论基础。

目的:探索脱细胞真皮基质微粒(mADM)与颗粒脂肪联合注射后是否能提高移植物体积保留率及二者混合的适宜比例。方法:2022年11月至2023年3月，于解放军联勤保障部队第九四○医院动物实验科取16只大鼠腹股沟脂肪，剪碎后与mADM分别以不同比例混合，另取15只大鼠分别在背部两侧注射不同的填充物。根据注射物的不同，分为6组，对照组为单纯颗粒脂肪组(C1组)、单纯mADM组(C2组)，实验组分别为颗粒脂肪与mADM 1∶1混合组(E1组)、颗粒脂肪与mADM 2∶1混合组(E2组)、颗粒脂肪与mADM 4∶1混合组(E3组)、颗粒脂肪与mADM 6∶1混合组(E4组)，每组注射0.5 ml，分别于第4、8、12周随机抽取5只取出标本检测移植物的体积，对移植物进行组织学分析并观察新生血管生成情况。采用SPSS 25.0软件进行统计分析，对整体多组间、多时间点数据比较采用重复测量方差分析，多组间各时间点数据比较采用单因素方差分析。 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:6组移植物体积均随时间有显著变化，差异有统计学意义( P<0.05)，在注射后的第4、8、12周，C2组体积均大于C1组，在各实验组中，E1组体积保留率最高。组织学分析显示，C2组早期无明显炎性细胞浸润，8周后逐渐发生炎症反应，C1组可见空泡形成，且炎性细胞浸润明显，实验组中E1组炎症反应最轻微；mADM与颗粒脂肪混合注射物随mADM占比越大，其胶原纤维越多、排列越规则。6组移植物新生血管数量在移植后第4周差异有统计学意义( P<0.05),在8、12周差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:mADM联合颗粒脂肪皮下注射能较长时间有效维持注射物的体积，且二者1∶1混合后效果较为适宜。

目的:探究过硫谷胱甘肽（glutathione persulfate，GSSH）是否可以改善雄性肥胖小鼠的低睾酮水平，并探讨其作用机制。方法:将45只小鼠平均分为3组，低脂饮食（low-fat diet，LFD）组：喂LFD 10周，随后45 d继续LFD同时每天腹腔注射生理盐水（normal saline，NS），记为LFD+NS组（ n=15）；高脂饮食（high-fat diet，HFD）组：喂HFD 10周，随后45 d继续HFD同时每天腹腔注射NS，记为HFD+NS组（ n=15）；HFD+GSSH组（ n=15）：HFD 10周，随后45 d HFD同时每天腹腔注射GSSH（200 mg/kg）。处理结束后所有小鼠眼眶取血，断颈处死小鼠并解剖取出睾丸，分别用ELISA、qPCR以及Western blotting的方法检测小鼠血清睾酮和丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平、睾酮关键合成酶（StAR、3β-HSD、Cyp11a1、Cyp17a1）以及抗氧化蛋白（StAR、3β-HSD、NR5A1、EHD3）表达水平等。此外，用100 μmol/L的GSSH处理小鼠睾丸碎片后检测睾酮合成酶表达水平。最后用50 μmol/L和100 μmol/L的GSSH分别处理小鼠睾丸间质TM3细胞株24 h后，加入100 μmol/L的H 2O 2，继续培养TM3细胞24 h，然后收集细胞检测NR5A1、SOD与Nrf2蛋白表达水平。 结果:①给药结束后，LFD+NS组、HFD+NS组与HFD+GSSH组小鼠的体质量分别是（30.67±1.22）g、（40.43±1.56）g、（33.30±0.95）g；HFD+NS组体质量增加了24.53%，给药前后差异有统计学意义（ P=0.002），而LFD+NS组、HFD+GSSH组的体质量在给药前后差异均无统计学意义（均 P>0.05）。②HFD+NS组小鼠睾酮浓度为（12.9±1.7）μg/L，显著低于LFD+NS组［（18.3±1.2）μg/L］，差异有统计学意义（ P=0.020）；HFD+GSSH组小鼠睾酮浓度为（25.4±2.1）μg/L，显著高于HFD+NS组，差异有统计学意义（ P=0.030）。RT-PCR检测结果显示，与LFD+NS组小鼠相比，HFD+NS组小鼠睾丸所有被检测的睾酮合成关键基因（ StAR、3β- HSD、 Cyp11a1及 Cyp17a1）表达水平都显著下降（ P=0.003、 P=0.007、 P<0.001、 P<0.001）。这些基因的表达水平则在HFD+GSSH组小鼠睾丸中得到了恢复（ P=0.002、 P<0.001、 P<0.001、 P=0.006）。③与LFD+NS组小鼠［（9.00±1.59）nmol/mL］相比，HFD+NS组小鼠血清MDA水平［（10.61±1.73）nmol/mL］显著升高（ P=0.016）；与HFD+NS组小鼠相比，HFD+GSSH组小鼠血清MDA水平［（9.23±0.94）nmol/mL］下降，且具有统计学意义（ P=0.048）。④HFD+NS组的肥胖小鼠睾丸中NR5A1、EHD3、StAR与3β-HSD蛋白水平与LFD+NS组小鼠相比明显下调（ P=0.002、 P=0.012、 P=0.004、 P=0.043），HFD+GSSH组小鼠睾丸中NR5A1、EHD3、StAR与3β-HSD蛋白水平与HFD+NS组的肥胖小鼠相比则显著上升（ P<0.001、 P=0.017、 P=0.004、 P<0.001）。⑤TM3细胞在H 2O 2的存在下，NR5A1、Nrf2与SOD的表达水平皆发生显著下调（ P<0.001、 P=0.002、 P=0.004）。 结论:GSSH通过提高睾酮合成所需关键基因表达而改善HFD喂养的雄鼠睾酮水平。

目的:探讨组织扩张术在乳腺癌术后乳房再造中的应用价值和临床效果。方法:2013年1月至2019年5月，北京大学第三医院收治173例乳腺癌术后需行乳房再造的女性患者，年龄(38.2±8.0)岁，体质量指数为(21.5±2.1) kg/m 2。均为单侧发病，其中右侧76例，左侧97例；行保留乳头乳晕的乳腺癌切除术8例，行乳腺癌改良根治术165例；接受化疗150例，放疗9例。一期行即刻或延期胸壁软组织扩张；二期行单纯假体置换、置换假体联合自体组织移植或单纯自体组织移植完成乳房再造。术后进行随访，并采用Harris方法评价临床效果。 结果:173例中，即刻乳房再造95例，延期再造78例。组织扩张周期为(7.7±3.2)个月，二期手术中采用单纯置换假体105例，置换假体联合自体脂肪注射移植48例，置换假体联合内镜下背阔肌肌瓣移植17例，腹壁下动脉穿支皮瓣移植3例。术后随访3.5～41.0个月，平均12.6个月，1例出现肿瘤局部复发，最终取出假体；其余大部分患者乳房再造效果良好，Harris评价结果为外形完美23例，优129例，良13例，差7例，优以上者为88.4%(152/172)。结论:组织扩张术在乳腺癌术后乳房再造中可起到重要的中转站作用，二期手术时可灵活选择乳房再造方式，其适应证广泛，尤其适用于乳腺癌术后乳房即刻再造，可获得较好的效果。

目的:探讨转化生长因子β(TGF-β)信号通路与幼兔激素性股骨头坏死的关系。方法:选取8周龄新西兰白兔60只，体质量1.5~2.0 kg。按随机数表法将实验动物分为2组：实验组(48只)，醋酸泼尼松龙7.5 mg/kg双侧臀肌交替注射，每周2次，共注射8周，其中造模成功的设为发病组，造模未成功的设为未发病组；对照组(12只)，于同样部位相同频次注射等体积9 g/L盐水，为预防感染，每周注射1次青霉素钠(50 000 U/只)。第8周注射完后行CT检查并处死所有实验动物，取出股骨头。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测TGF-β信号通路相关因子TGF-β1、TGF-β2、Smad2、Smad3在股骨头中的表达，实时荧光定量PCR(qPCR)检测下游矮小相关转录因子2(Runx2)在股骨头中的表达，比较各组中相关因子的表达差异。结果:实验组造模过程中处死6只，存活32只，发病6只(发病组)，未发病26只(未发病组)，造模成功率为18.75%(6/32只)。ELISA示：对照组、未发病组及发病组的TGF-β1表达量分别为(77.12±14.62) ng/L、(90.17±11.90) ng/L、(126.14±25.66) ng/L，发病组与未发病组及对照组比较，差异均有统计学意义( t＝3.35、4.24，均 P<0.05)；对照组、未发病组及发病组的TGF-β2表达量分别为(74.54±7.63) ng/L、(89.24±9.51) ng/L、(109.74±16.45) ng/L，发病组与未发病组及对照组比较，差异均有统计学意义( t＝4.12、5.65，均 P<0.01)；对照组、未发病组及发病组的Smad2表达量分别为(17.74±2.72) μg/L、(23.82±3.58) μg/L、(31.28±3.88) μg/L，发病组与未发病组及对照组比较，差异均有统计学意义( t＝4.54、7.99，均 P<0.01)；对照组、未发病组及发病组的Smad3表达量分别为(1.76±0.52) μg/L、(2.39±0.45) μg/L、(3.53±0.47) μg/L，发病组与未发病组及对照组比较，差异均有统计学意义( t＝5.60、6.71，均 P<0.01)。qPCR示：Runx2在对照组、未发病组及发病组的相对表达量分别为1.02±0.17、1.27±0.14、1.72±0.11，发病组与未发病组及对照组比较，差异均有统计学意义( t＝7.60、8.91，均 P<0.01)。 结论:TGF-β信号通路在幼兔激素性股骨头坏死病程中表达上调，刺激成骨细胞与破骨细胞增殖分化，骨重建过程增强，参与坏死骨组织的修复过程。