目的 探讨低频电脉冲通过RhoA/Rho激酶信号通路在流产模型子宫内的影响.方法 选取在河北省实验动物中心购入的30只雌性大鼠和15只雄性大鼠进行交配,将未怀孕的雌性大鼠分为正常组,怀孕的雌性大鼠随机分为模型组和低频电脉冲组,正常组的大鼠在处死前未接受任何治疗,模型组用于构建人工流产模型,低频电脉冲组采用电针疗法治疗.检测并比较3组宫内膜厚度、腺体数、纤维化面积比例、E-cadherin、β-catenin、CLDN1 蛋白及 Rho GTP 酶激活蛋白(ArhGAP1)信使 RNA(mRNA)、RhoA mRNA、ROCK1 mR-NA表达水平,以及RhoA、ROCK1、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)蛋白表达水平.结果 正常组、模型组、低频电脉冲组的大鼠各有10只.低频电脉冲组子宫内膜厚度高于模型组,子宫内腺体数多于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).正常组子宫内膜厚度高于模型组,子宫内膜腺体数多于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).正常组和低频电脉冲组子宫内膜纤维化面积比例低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).模型组E-cadherin蛋白、β-catenin、CLDN1蛋白表达水平高于正常组,低频电脉冲组E-cadherin蛋白、β-catenin蛋白表达水平低于模型组,CLDN1蛋白表达水平高于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).模型组ArhGAP1 mRNA表达水平低于正常组,RhoA mRNA和ROCK1 mRNA表达水平高于正常组,差异均有统计学意义(P＜0.05).低频电脉冲组 ArhGAP1 mRNA表达水平高于模型组,RhoA mRNA、和ROCK1 mRNA表达水平低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).模型组RhoA蛋白、ROCK 1蛋白、IL-6蛋白、TNF-α蛋白表达水平高于正常组和低频电脉冲组(P＜0.05).结论 人工流产后大鼠给予低频电脉冲可以抑制RhoA/Rho激酶信号,减少炎症反应和子宫内膜纤维化.

目的 研究桃红四物汤(Taohong Siwu Tang,TSD)对子宫异常出血(abnormal uterine bleeding,AUB)大鼠血清脂类代谢物的影响,分析TSD改善AUB脂质代谢紊乱的作用机制.方法 采用药物不完全流产法复制AUB大鼠模型,应用UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS技术检测血清的脂质代谢物,结合主成分分析、正交偏最小二乘-判别分析筛选差异脂质,明确TSD干预前后血清中脂质变化.结果 共筛选出11种差异性脂质,主要有磷酯酰肌醇、磷脂酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、固醇脂、神经酰胺、丙烯醇脂及脂肪酸.给予TSD干预后,筛选的差异脂质均有回调至正常的趋势.结论 TSD改善AUB可能与磷脂酸、磷酯酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、神经酰胺等脂质代谢有关.

目的 观察补肾活血方对复发性流产(RSA)大鼠白细胞介素-17(IL-17)的治疗作用.方法 用腹腔注射雌二醇苯甲酸酯的方法构建RSA模型大鼠.将40只RSA模型随机分为模型组、对照组和低、高剂量实验组,每组10只;另取10只健康孕鼠设为空白组.低、高剂量实验组分别灌胃含7.77、15.54 g·kg-1生药的补肾活血方溶液;对照组灌胃含2.10 mg·kg-1地屈孕酮的溶液;空白组和模型组均灌胃等量0.9％NaCl.5组大鼠的给药剂量均为10 mL·kg-1,每天1次,连续给药9 d.观察各组活胎数、胚胎丢失数、胚胎丢失率,用流式细胞仪检测外周血中Th17细胞构成比,用蛋白质印迹法检测蜕膜组织中IL-6、IL-17、IL-23蛋白的表达水平.结果 高剂量实验组、对照组、模型组和空白组的活胎数分别为(11.50±2.84)、(11.50±3.10)、(6.30±1.25)和(12.50±3.24)个,胚胎丢失数分别为(1.80±0.42)、(1.90±0.57)、(4.90±1.37)和 0 个,胚胎丢失率分别为(14.01±4.52)％、(14.79±6.06)％、(43.50±9.49)％和0个,外周血Th17细胞构成比分别为(3.12±0.47)％、(3.10±0.59)％、(5.31±1.16)％和(2.54±0.71)％,IL-6 蛋白相对表达水平分别为 0.19±0.04、0.18±0.05、0.85±0.16 和 0.11±0.03,IL-17 蛋白相对表达水平分别为 0.28±0.04、0.29±0.05、0.84±0.12 和 0.09±0.01,IL-23 蛋白相对表达水平分别为 0.35±0.04、0.34±0.06、0.90±0.11 和 0.08±0.01.模型组的上述指标与高剂量实验组、对照组和空白组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 补肾活血方可减少RSA大鼠胚胎丢失、改善蜕膜组织病理变化,降低Th17细胞构成比和其相关细胞因子IL-6、IL-17、IL-23的表达.

目的 研究大豆异黄酮对先兆流产大鼠的保胎作用及可能机制.方法 取雌鼠促情,与雄鼠交配、妊娠后随机分为正常组(纯化水灌胃,n=10)、模型组(纯化水灌胃,n=9)、阳性对照药组(黄体酮4 mg/kg,肌内注射,n=9)和大豆异黄酮低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg灌胃,n=10).除正常组外,其余各组大鼠均于孕8 d以米非司酮+米索前列醇灌胃建立先兆流产模型.各组大鼠分别于孕1～7 d、孕9～12 d给药/纯化水,每天1次.孕14 d时,计算各组大鼠的保胎率,检测大鼠血清中β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕酮(P)水平,观察大鼠胎盘与蜕膜组织病理形态学变化并检测其细胞凋亡指数,检测胎盘组织中凋亡相关因子(Fas)、凋亡相关因子配体(FasL)、增殖细胞核抗原(PCNA)和肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)mRNA及其蛋白表达,检测蜕膜组织中Fas、PCNA和HB-EGF mRNA及其蛋白表达.结果 模型组大鼠胎盘组织充血扩张明显,血管较少且形态不规则,可见大量严重基质水肿、炎症细胞浸润和铁胆黄素沉积.与模型组比较,大豆异黄酮各剂量组大鼠的保胎率,血清β-HCG、P水平,胎盘与蜕膜组织中PCNA、HB-EGF mRNA及其蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05),病理学变化显著改善;胎盘与蜕膜组织细胞凋亡指数,胎盘组织中Fas、FasL mRNA及其蛋白表达水平,蜕膜组织中Fas mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05),且大豆异黄酮的上述作用呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 大豆异黄酮对先兆流产模型大鼠有保胎作用;其作用机制可能与下调母-胎界面Fas、FasL mRNA及其蛋白表达,上调PCNA、HB-EGF mRNA及其蛋白表达有关.

目的 探讨补肾活血方对抗心磷脂抗体(aCL)致复发性流产(RSA)大鼠的治疗效果及对血小板/嘌呤能离子通道型7(P2X7)/Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路的影响.方法 随机将受孕大鼠24只,分为aCL-RSA、aCL-RSA+低分子肝素组、aCL-RSA+丹寿汤组、模型组,每组6只;建立aCL-RSA孕鼠模型,给予补肾活血方干预,观察16天孕鼠体质量,孕鼠胚胎吸收率,胎鼠体质量;检测大鼠血浆血小板活化因子受体(PAFR)、血小板第4因子(PF4)含量,大鼠胎盘组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18含量,HE染色检测胎盘组织病理学改变,TUNEL染色法检测胎盘组织中细胞凋亡;Western Blot检测cleaved caspase-1、人细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、NLRP3、Bcl2、Bax、cleaved caspase-3、嘌呤能离子通道型7(P2X7)蛋白的表达,探讨aPL致复发性流产与血小板活化、NLRP3炎症小体通路及P2X7的相关性,及丹寿汤对aCL-RSA孕鼠的影响及对血小板活化/P2X7/NLRP3通路的影响.结果 与模型组比较,aCL-RSA组能明显降低孕鼠体质量,增加孕鼠胚胎吸收率,降低胎鼠体质量,增加血浆PAFR、PF4含量(P＜0.05);aCL-RSA组胎盘组织迷宫区母性红细胞较少,较多血栓形成,胎盘血窦空间明显减小;胎盘组织中凋亡细胞数目明显增加,胎盘组织中IL-1β、IL-18增加,胎盘组织中cleaved caspase-1、ASC、NLRP3、Bax、cleaved caspase-3、P2X7 蛋白表达增加(P＜0.05),Bcl2 蛋白水平降低(P＜0.05).结论 补肾活血方能抑制血小板活化,下调P2X7的表达,抑制NLRP3的激活,减轻胎盘的高凝、炎症状态进而减少aCL-RSA的发生.

目的 观察补肾固胎合剂通过PKA-CREB信号通路对羟基脲片联合米非司酮诱导的流产大鼠模型子宫血供的作用及安胎机制.方法 将SPF级SD大鼠以2∶1比例合笼,制备孕鼠60只,依其妊娠顺序随机分为6组,每组10只,分别为正常组、模型组、补肾固胎合低、中、高剂量剂组(0.5、1.0、2.0 g·kg-1),及地屈孕酮组(3.02 mg·kg-1).除正常组外,余下每组采用妊娠1-9天羟基脲灌胃(450.0 mg·kg-1),妊娠第10天予米非司酮灌胃(4.0 mg·kg-1)复制流产模型.妊娠第1-9天,给予对应药物灌胃治疗,模型组和正常妊娠组予等量0.9%生理盐水灌胃.末次给药24 h取子宫蜕膜组织;苏木素-伊红(HE)染色观察子宫蜕膜组织中螺旋动脉管腔直径及管壁厚度;免疫组化学染色方法(IHC)检测血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在蜕膜组织中的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组孕鼠子宫蜕膜组织中磷酸化蛋白激酶A(Phosphorylated protein kinase A,p-PKA)、蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(Phosphorylated cyclic adenosine monophosphate response element binding protein,p-CREB)、cAMP反应元件结合蛋白(Cyclic Adenosine monophosphate response element binding protein,CREB)、水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)的蛋白表达情况;DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测蜕膜细胞凋亡水平.结果 与模型组比较,螺旋动脉管壁厚度均高于其他组(P<0.05)管腔直径均低于其他组(P<0.05),VEGF蛋白表达量低于其他组(P<0.05);与模型组比较,补肾固胎合剂高、中、低剂量组和地屈孕酮组流产大鼠子宫蜕膜组织蜕膜细胞凋亡水平不同程度的减轻.补肾固胎合剂可上调流产大鼠子宫蜕膜组织p-PKA/PKA、p-CREB/CREB水平(P<0.01),促进AQP5蛋白的表达(P<0.01),具有统计学意义.结论 补肾固胎合剂可以通过激活PKA、CREB磷酸化,上调AQP5表达水平,促进螺旋动脉生理性重铸以及VEGF的高表达,发挥改善流产大鼠子宫血供的作用.

目的 考察桃红四物汤通过调节FTH1调控铁死亡对子宫异常出血大鼠的影响.方法 雌性大鼠随机分为怀孕组,药物流产组,桃红四物汤高(18 g·kg-1)、中(9g·kg-1)、低(4.5 g·kg-1)剂量组与益母草颗粒组(4.5g·kg-1).采用药物不完全流产法复制大鼠子宫异常出血模型,记录大鼠子宫异常出血量;HE染色法进行大鼠子宫组织病理研究;透射电镜观察子宫组织线粒体形态;免疫组织化学检测子宫组织铁蛋白水平;蛋白质印迹法检测大鼠子宫组织中转铁蛋白受体1(TfR1)、铁蛋白重链(FTH1)表达水平;酶联免疫吸附法及生化检测法检测大鼠子宫内膜组织中活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)和Fe2+的含量.结果 与怀孕组相比,药物流产组大鼠子宫出血量及出血时间显著升高,子宫组织病理损伤严重,大鼠子宫内膜组织中出现线粒体皱缩、嵴减少、膜密度增加等铁死亡特征,TfR1蛋白表达水平显.著升高,FTH1蛋白表达水平显著降低,ROS和Fe2+含量显著增加(P＜0.05).桃红四物汤干预后,与药物流产组相比大鼠子宫出血量及出血时间显著缩短,子宫组织病理损伤及线粒体形态显著改善,TfR1蛋白表达水平显著降低,FTH1蛋白表达水平显著升高,ROS和Fe2+含量显著降低(P＜0.05).结论 桃红四物汤能够有效减少SD大鼠子宫异常出血,发挥抗氧化作用;其作用机制可能与上调FTH1,调控铁代谢有关.

目的 研究当归多糖通过调节磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对先兆流产模型大鼠的保胎作用及Th1/Th2平衡的影响.方法 将妊娠大鼠随机分为对照组、模型组、当归多糖组(200 mg/kg)、PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002组(5 mg/kg)和当归多糖+LY294002组(200 mg/kg当归多糖+5 mg/kg LY294002),每组10只.除对照组外其余各组大鼠均灌胃米非司酮(8.3 mg/kg)和米索前列醇(100 μg/kg)建立先兆流产模型,并灌胃或腹腔注射相应药物.检测大鼠血清中雌激素、孕激素、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)水平;测定大鼠子宫卵巢指数及胚胎死亡率;观察大鼠子宫组织形态;检测大鼠外周血中Th1/Th2平衡以及子宫组织中PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠子宫组织出现病理损伤;血清中雌激素、孕激素、IL-4水平,子宫卵巢指数、外周血中Th2细胞比例,子宫组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值均显著降低(P＜0.05);胚胎死亡率、Th1细胞比例、Th1/Th2比值和血清中IFN-γ、TNF-α水平均显著升高(P＜0.05).与模型组比较,当归多糖组大鼠子宫组织病理损伤减轻,上述指标均显著改善(P＜0.05),且LY294002可减弱当归多糖对模型大鼠的改善作用(P＜0.05).结论 当归多糖可通过激活PI3K/AKT信号通路改善先兆流产模型大鼠Th1/Th2失衡,进而抑制免疫炎症,促使胚胎存活.

目的 探究滇桂艾纳香活性部位(BRA)对功能失调性子宫出血症(DUB)大鼠的治疗作用及潜在的作用机制.方法 通过流产不全建立功能失调性子宫出血大鼠模型,随机分空白对照组、正常妊娠组、DUB模型组、益母草组及BRA低、高剂量组,连续灌胃至妊娠第14天,记录子宫出血量,并检测凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)及血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的含量.结果 与DUB模型组子宫出血量(0.272±0.067)mL相比,BRA高剂量组和BRA低剂量组子宫出血量[(0.197±0.035)mL、(0.175±0.051)mL]均减少,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与DUB模型组FIB含量(19.184±2.879)mg/dL相比,BRA低剂量组FIB含量(24.865±4.587)mg/dL显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与DUB模型组PT(23.313±3.741)s相比,BRA高剂量组PT(18.889±1.061)s显著减少,差异有统计学意义(P＜0.05).与 DUB 模型组 TXB2/6-keto-PGF 1α(1.26±0.18)相比,BRA 低剂量组大鼠TXB2/6-keto-PGF 1α(1.50±0.10)显著上升,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 BRA具有减少DUB大鼠子宫出血的作用,其作用机制可能是通过影响外源性凝血途径、诱导生成纤维蛋白原,并通过提升TXB2/6-keto-PGF1α调节凝血系统障碍,从而对功能失调性子宫出血症发挥治疗作用.

目的:探究菟丝子总黄酮三阴交贴敷对流产大鼠妊娠结局及Th1/Th2 细胞因子平衡的影响.方法:将确认受孕的SPF级SD雌鼠随机分为正常组、模型组、地屈孕酮组、菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮三阴交贴敷组,每组15 只.妊娠第1 天开始,地屈孕酮组灌胃地屈孕酮水溶液5 mg/kg并于三阴交处贴敷淀粉膏贴,菟丝子总黄酮组灌胃菟丝子总黄酮200 mg/kg并于三阴交处贴敷淀粉膏贴,菟丝子总黄酮三阴交贴敷组灌胃等体积蒸馏水并于三阴交处贴敷菟丝子总黄酮膏贴,正常组、模型组灌胃等体积蒸馏水并于三阴交处贴敷淀粉膏贴,每日 1 次,持续 11 天.除正常组外,其余 4组孕鼠于孕11 天时灌服米非司酮4 mg/kg诱导建立SD大鼠的流产模型.实验结束后麻醉大鼠采集眼静脉血,分离血清检测催乳素(PRL)、孕酮(P)含量;分离子宫蜕膜组织,免疫组化法检测蜕膜组织中孕激素受体(PR)的表达,ELISA 法检测蜕膜组织中肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、γ 干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-10 含量,Western Blot法检测蜕膜组织TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10 及胎盘组织中转录因子T-bet、GATA结合蛋白3(GATA-3)蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中PRL、P含量、蜕膜组织中PR的表达、IL-4、IL-10 含量与蛋白表达及胎盘组织中GATA-3 表达明显降低(P<0.05),流产率、蜕膜组织中TNF-α、IFN-γ含量与蛋白表达及胎盘组织中T-bet表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,地屈孕酮组、菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮三阴交贴敷组大鼠血清中PRL、P含量、蜕膜组织中PR的表达、IL-4、IL-10 含量与蛋白表达及胎盘组织中GATA-3 表达明显升高(P<0.05),流产率、蜕膜组织中TNF-α、IFN-γ含量与蛋白表达及胎盘组织中T-bet表达明显降低(P<0.05),且菟丝子总黄酮三阴交贴敷组和地屈孕酮组各项指标较菟丝子总黄酮组变化更明显(P<0.05).结论:菟丝子总黄酮三阴交贴敷可能通过调节Th1/Th2 细胞因子平衡改善流产大鼠妊娠结局.