目的 探究葛根芩连汤调节lncRNA-TUSC7/miR-182/TBX5信号轴对结直肠癌(CRC)发生发展的作用机制.方法 1)体外实验:将培养好的HCT-116细胞分为对照组、oe-NC组、oe-TUSC7组、inhibitor-NC组、miR-182 inhibitor组、oe-TUSC7+miR-NC组、oe-TUSC7+miR-182 mimic组.RTqPCR检测 lncRNA-TUSC7、miR-182、TBX5 mRNA的表达;CCK-8检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting检测细胞TBX5、Ki67、Caspase-9蛋白表达水平;双萤光素酶报告基因实验检测miR-182与lncRNA-TUSC7和TBX5的靶向关系.2)体内实验:皮下注射DMH建立大鼠CRC模型,将大鼠分为模型组、葛根芩连汤组、葛根芩连汤+LV-NC组、葛根芩连汤+LV-shTUSC7组,另设对照组(无处理).测量肿瘤数量、质量和体积;RT-PCR检测肿瘤组织TUSC7、miR-182、TBX5 mRNA 的表达;Western blotting检测TBX5、Ki67、Caspase-9蛋白表达.结果 1)体外实验:与对照组和oe-NC组相比,oe-TUSC7组细胞中TUSC7、TBX5 mRNA表达、凋亡率、TBX5、Caspase-9蛋白表达显著升高,miR-182表达、OD450值(24、48 h)、Ki67表达显著降低(P＜0.05);与inhibitor-NC组相比,miR-182 inhibitor组细胞中TBX5 mRNA表达、凋亡率、TBX5、Caspase-9蛋白表达显著升高,miR-182表达、OD450值(24、48 h)、Ki67表达显著降低(P＜0.05);与 oe-TUSC7+miR-NC组相比,oe-TUSC7+miR-182 mimic组细胞中TBX5 mRNA表达、凋亡率、TBX5、Caspase-9蛋白表达显著降低,miR-182表达、OD450值(24、48h)、Ki67表达显著升高(P＜0.05);双萤光素酶报告基因实验验证miR-182与TUSC7和TBX5存在靶向调控关系.2)体内实验:与对照组相比,模型组大鼠肿瘤数量、肿瘤质量和肿瘤体积、miR-182表达、Ki67蛋白表达显著升高,肿瘤组织中TUSC7和TBX5 mRNA表达、TBX5、Caspase-9蛋白表达显著降低(P＜0.05);与模型组相比,葛根芩连汤组大鼠肿瘤数量、肿瘤质量和肿瘤体积、肿瘤组织miR-182表达、Ki67表达显著降低,肿瘤组织TUSC7和TBX5 mRNA表达、TBX5、Caspase-9蛋白表达显著升高(P＜0.05);与葛根芩连汤组和葛根芩连汤+LV-NC组相比,葛根芩连汤+LV-shTUSC7组大鼠肿瘤数量、肿瘤质量和肿瘤体积、miR-182表达、Ki67表达显著升高,肿瘤组织中TUSC7和TBX5 mRNA表达、TBX5、Caspase-9蛋白表达显著降低(P＜0.05).结论 葛根芩连汤可能通过上调TUSC7,海绵化miR-182,从而促进TBX5表达,进而抑制CRC细胞的生长.

目的:探讨阻断阴茎血液回流对干细胞治疗大鼠阴茎勃起功能障碍（ED）的细胞滞留、勃起功能改善及组织病理变化的影响。方法:采用随机数法将30只雄性SD大鼠分为假手术组（6只）、ED模型组（6只）、治疗组A（9只，阻断阴茎根部血液回流）及治疗组B（9只，不阻断阴茎根部血液回流）。模型建立24 h后，治疗组A及治疗组B经海绵体注射总细胞数量为1×10 6的脂肪干细胞（ADSCs）。干细胞注射前，治疗组A暂时性阻断阴茎血液回流，并于注射后5 min放开。注射后，检测阴茎局部生物发光信号动态变化及肺内信号。注射28 d后，检测最大海绵体内压/平均动脉压（ICP max/MAP），评估阴茎勃起功能，并观察组织病理变化。 结果:治疗组A与治疗组B相比，各时间点（0、10、60 min）大鼠阴茎内生物发光信号强度（×10 6·p·s -1·sr·cm -2）差异均无统计学意义（8.76±1.17比8.16±1.12，6.45±1.47比6.72±0.69，3.77±0.30比3.36±1.06，均 P>0.05）。注射60 min后，治疗组A与治疗组B均能在肺脏观察到大量ADSCs聚集；不论是否阻断阴茎血液回流，ADSCs对阴茎勃起功能（ICP max/MAP为0.44±0.11比0.43±0.07）及组织病理变化（平滑肌/胶原比值为0.08±0.02比0.08±0.03）改善情况不显著，差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:暂时性阻断阴茎血液回流对提高干细胞在大鼠阴茎内滞留及改善ED治疗效果无明显优势。

糖尿病性勃起功能障碍(DMED)是糖尿病患者最常见的并发症之一，发病机制复杂，整体发病率偏高。近年来DMED模型的建立为治疗DMED提供了一个理想的试验平台，通过移植脂肪来源干细胞(ADSCs)治疗DMED也得到了许多学者的关注。研究表明阴茎海绵体内注射脂肪来源干细胞可以通过分泌多种细胞因子及生长因子，改善平滑肌细胞、血管内皮细胞及神经元的功能来恢复勃起功能。本文主要阐述了脂肪来源干细胞治疗DMED的最新进展。

目的:探讨基于视听觉性刺激下的超声造影技术联合海绵体动态测压在静脉型勃起功能障碍(VED)诊断中的应用。方法:选取2020年1月至2022年1月在本院行经阴茎海绵体注射试验(ICI)结合彩色多普勒双功能超声检查(CDDU)并怀疑诊断VED的88例患者的临床资料。所有患者行基于视听觉性刺激下的超声造影联合海绵体动态测压检查，根据造影剂外泄、维持灌注速度(FTM)、海绵体内压(ICP)、海绵体压力衰退值(PD)确定是否存在静脉漏及其严重程度。结果:13例未发现静脉漏，FTM<0.5 mL/s，PD<20 mmHg，均未见造影剂回流影，FTM多在0.1～0.3 mL/s。重度VED共10例，FTM≥2.0 mL/s，PD≥100 mmHg，均发现患者有较明显的造影剂外溢情况。中度VED共33例，1.5 mL/s≤FTM<2.0 mL/s，70 mmHg≤PD<100 mmHg，均发现明显的造影剂外溢情况。轻度VED共32例，1.0 mL/s≤FTM<1.5 mL/s，40 mmHg≤PD<70 mmHg，2例未发现造影剂外溢现象。2例患者出现阴茎海绵体血肿形成，均在一周内自行消失。所有患者均无发热、感染等不良反应。结论:基于视听觉性刺激下的超声造影联合海绵体动态测压有望成为一种安全、有效、可行性、创造性的诊断VED和分类的新技术，可为VED治疗提供客观的指导依据。

目的 探索人脐带间充质干细胞通过再生修复海绵体神经对糖尿病大鼠勃起功能的改善作用.方法 收集健康足月产新生儿脐带,提取分离人脐带间充质干细胞(hUCMSC)并鉴定表面标志物.通过高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法诱导大鼠糖尿病,10周后选取高血糖大鼠进行阿扑吗啡(APO)试验,筛查、建立糖尿病引起的勃起功能障碍(DIED)大鼠模型.hUCMSC移植8周后,通过APO实验及最大海绵体内压/平均动脉压(ICP/MAP)评估大鼠勃起功能;通过免疫组化法分析大鼠海绵体组织中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)水平;通过ELISA法检测各组大鼠阴茎组织中BDNF、NGF、VEGF和IGF-1神经营养生长因子的表达水平.结果 第4代hUCMSC表面高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD11b、CD19、CD34、CD45、HLA-DR.糖尿病引起的勃起功能障碍大鼠模型制备成功.海绵体内移植hUCMSC 8周后,APO实验表明hUCMSC可增加正常勃起的大鼠数量;中剂量和高剂量hUCMSC治疗后,相对于阴性对照组,ICP/MAP值升高,阴茎内血流灌注明显改善;免疫组化实验显示中剂量和高剂量hUCMSC治疗后,大鼠阴茎海绵体中nNOS水平明显增加,启动大鼠阴茎勃起;ELISA检测结果证实中剂量和高剂量hUCMSC治疗后,均能不同程度恢复DIED大鼠阴茎组织中BDNF、NGF、VEGF和IGF-1表达水平.结论 hUCMSC是一种多功能的成体干细胞,经海绵体移植治疗高脂饮食联合STZ诱导的DIED大鼠是有效的,且有剂量依赖性.hUCMSC治疗DIED的机制与上调BDNF、NGF、VEGF和IGF-1表达水平提供的神经保护和再生修复作用有关.

目的 探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化的影响,以明确地龙蛋白改善DMED大鼠勃起功能的机制.方法 于2021年7月选取60只SPF级雄性SD大鼠作为研究对象,随机选取50只腹腔注射链脲佐菌素(STZ),构建糖尿病(DM)大鼠模型,余下10只作为正常组.8周后大鼠颈部皮下注射阿朴吗啡(APO),并筛选出DMED大鼠.将DMED大鼠随机分为模型组、西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组(45、90、180 mg/kg),各6只,并随机选取正常组6只作为空白组.给药4周后,检测大鼠血糖、体重、阴茎海绵体内压(ICP)和颈动脉内压(MAP)水平,计算ICP/MAP评估大鼠勃起功能.采用免疫组织化学法检测大鼠阴茎海绵体中收缩型标志物碱性调宁蛋白(Caiponin)、肌间线蛋白(Desmin)表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测阴茎海绵体中Desmin、骨桥蛋白(OPN)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测阴茎海绵体中Caiponin、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)蛋白表达水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠体重、ICP/MAP显著下降,血糖显著升高(P＜0.01);各给药组大鼠阴茎海绵体中Caiponin、Desmin表达显著下降(P＜0.01);Desmin mRNA 表达下降,OPN mRNA 表达显著上升(P＜0.01);Caiponin、SMMHC 蛋白表达显著下降(P＜0.01).与模型组比较,西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组大鼠ICP/MAP水平显著升高(P＜0.01),但西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组大鼠的体重及血糖水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);各给药组大鼠阴茎海绵体中Caiponin、Desmin表达显著上升(P＜0.01);Desmin mRNA表达显著上升,OPN mRNA表达显著下降(P＜0.01);Caiponin、SMMHC蛋白表达显著上升(P＜0.01).结论 地龙蛋白可通过上调阴茎海绵体组织中合成型(增殖型)标志蛋白或下调收缩型标志蛋白影响CCSMC转化,进而改善DMED大鼠的勃起功能.

目的 探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化及其勃起功能的影响.方法 将 60 只勃起功能正常的雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、西地拉非组(5 mg·kg-1)及地龙蛋白低、中、高剂量组(45、90、180 mg·kg-1),每组 10 只.采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg·kg-1)结合高脂饲料喂养建立糖尿病大鼠模型;8 周后,颈部注射阿朴吗啡(APO,100 μg·kg-1),制备DMED大鼠模型.造模成功后,按剂量灌胃给药,每日 1 次,连续 4 周.测定各组大鼠造模前、造模第 3 天、给药 4 周后的血糖水平及体质量.采用多导生理记录仪测定大鼠阴茎海绵体内压(ICP)、颈动脉内压(MAP),计算ICP/MAP比值;免疫组织化学法检测阴茎海绵体中收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)和合成型标志物Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、骨桥蛋白(OPN)表达情况;RT-PCR法检测阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、CollagenⅠmRNA表达水平;Western Blot法检测阴茎海绵体中α-SMA、肌间线蛋白(Desmin)、CollagenⅠ、OPN蛋白表达水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠在造模第 3 天和给药 4 周后的血糖值均显著升高(P＜0.01),给药 4 周后的体质量显著降低(P＜0.01);ICP及ICP/MAP比值显著降低(P＜0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、Desmin蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),Collagen Ⅰ、OPN蛋白表达水平显著升高(P＜0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC mRNA表达水平显著降低(P＜0.01),Collagen Ⅰ mRNA表达水平显著升高(P＜0.01).与模型组比较,给药组大鼠的血糖值及体质量均无明显变化(P＞0.05);ICP 及 ICP/MAP 比值均显著升高(P＜0.01);阴茎海绵体中 α-SMA、SMMHC、Desmin蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),Collagen Ⅰ、OPN蛋白表达水平显著降低(P＜0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC mRNA 表达水平显著升高(P＜0.01),Collagen Ⅰ mRNA 表达水平显著降低(P＜0.01).结论 地龙蛋白能够改善DMED大鼠勃起功能,其机制可能与通过抑制CCSMC由"收缩型"向"合成型(增殖型)"转化有关.

本研究旨在考察将聚乙二醇双硬脂酸酯作为液晶材料制备载药液晶纳米粒(LCNPs)的可行性.分别合成了 2种液晶材料,甲氧基聚乙二醇(mPEG)双硬脂酸酯(mPEG350-DS)和聚乙二醇(PEG)双硬脂酸酯(S-PEG400-S).所得的2种材料遇水均可形成溶致液晶,其中S-PEG400-S液晶可被稳定地分散而得到LCNPs.以多西他赛为模型药,添加适量卵磷脂后可获得具有良好负载能力的LCNPs,其粒径为137.9 nm、ζ电位为-19.7 mV、包封率96.5％、载药量为3.4％、含量为标示量(2 mg/mL)的98.2％.载药LCNPs在体外抑瘤试验和体内药动学研究中显示出优于市售注射液(泰索帝)的抑瘤效果和显著的长循环特征.根据偏光显微镜、小角X射线散射和冷冻透射电镜的观察结果,推测该LCNPs中的液晶相态为海绵(L3)相.上述试验结果表明,S-PEG400-S具备成为载药LCNPs材料的良好潜力.

勃起功能障碍(ED)是成年男性的常见病和多发病,目前国内外ED诊疗指南推荐的口服药物、阴茎海绵体内血管活性药物注射和阴茎假体植入等治疗方案均不能针对ED病因,故无法从纠正发病机制方面彻底治愈ED.低强度体外冲击波疗法(Li-ESWT)和低强度脉冲式超声波(LIPUS)治疗ED,因其独特的作用机制和生物学效应,不仅能够改善患者的勃起功能,亦能针对病因治疗,促进阴茎功能康复.然而,目前临床上存在Li-ESWT和LIPUS治疗ED适应证不明确、治疗方案不统一、疗效差异大等问题,限制了该类疗法的进一步应用.据此,中国性学会组织本领域内多位临床专家,根据现有的Li-ESWT和LIPUS治疗ED的国内外循证医学证据,经共同研究、讨论达成一致,制定了本共识,旨在为从事Li-ESWT及LIPUS治疗ED领域的临床医生、设备研发人员提供规范的治疗方法和参考.

目的:探讨环状RNA circ_104939 在肺腺癌组织中的临床意义.方法:采集10 例肺腺癌病人的肿瘤组织和癌旁组织进行环状RNA测序分析,以肿瘤组织表达明显增高的环状RNA circ_104939 作为研究对象.利用qRT-PCR检测30 对肺腺癌组织与癌旁组织中circ_104939 的表达量,验证测序结果.用qRT-PCR检测和分析circ_104939 在肺腺癌细胞系(HCC-78、A549、KTA-7 以及PC-9)和正常人支气管上皮细胞BEAS-2B中的表达差异.siRNA敲减circ_104939 后,用MTT、平板划痕实验、Transwell实验、流式细胞术检测细胞周期实验分别检测肺腺癌细胞(KTA-7 和PC-9)增殖、迁移、侵袭以及细胞周期的变化.利用RNA pulldown和荧光素酶报告实验验证circ_104939 的可能靶标miR-191-5p.siRNA敲减circ_104939 后,将肺腺癌细胞(KTA-7 和PC-9)分别皮下注射到裸鼠体内构建荷瘤小鼠模型,检测移植瘤体积以及质量.结果:相比癌旁组织,肺腺癌组织中的circ_104939 表达显著增高(P<0.01);circ_104939 在肺腺癌细胞中的表达水平明显高于正常人支气管上皮细胞(P<0.05 或P<0.01).circ_104939 敲减后,KTA-7 和PC-9 细胞增殖、侵袭能力、细胞周期进展、PC-9 细胞迁移能力下降(P<0.05 或P<0.01).circ_104939 能够海绵样吸附miR-104939.circ_104939 敲减后,荷瘤小鼠肿瘤体积减小(P<0.05 或P<0.01),肿瘤质量显著降低(P<0.01 或P<0.001).结论:circ_104939 在肺腺癌组织中呈高表达,有望作为肺腺癌诊断和治疗的靶点.