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臭虫击倒抗性基因突变检测及抗性测定
编辑人员丨2023/8/19
近20 多年,臭虫(Cimex spp.)在世界范围内成为常见的卫生害虫,其防治主要采用化学防治,但很多种群发现击倒抗性(Knockdown resistance gene,kdr)基因突变的存在以及抗药性.监测kdr的发生频率以及不同种群对农药的抗性对臭虫有效防治很重要,但我国对臭虫种群的抗药性报道很少.本试验采用点滴法测定了 1 个温带臭虫Cimex lectularius野外种群对氯虫苯甲酰胺、呋虫胺、吡虫啉、噻虫嗪和高效氯氰菊酯等5 种药剂的毒性及抗性水平,使用区分剂量快速鉴定抗性方法对2 个温带臭虫和2 个热带臭虫Cimex hemipterus种群对高效氯氰菊酯的抗性水平进行了检测,此外用PCR方法检测8 个臭虫地理种群(1 个温带臭虫实验室种群,1 个温带臭虫野外种群和6 个热带臭虫野外种群)174 个个体的kdr突变频率.点滴法结果表明,5 种杀虫剂对温带臭虫的毒性是吡虫啉和呋虫胺>噻虫嗪>氯虫苯甲酰胺和高效氯氰菊酯,测试的野外温带臭虫种群仅对噻虫嗪无明显抗性.热带臭虫2 个野外种群对高效氯氰菊酯的抗性均远高于温带臭虫.在温带臭虫的实验室种群中未检测到突变,在野外种群中检测到了V419L和L925I突变,可分为 2 种基因型类型(A:无突变位点;B:同时有L925I和V419L),而在热带臭虫的6 个种群检测到M918I和L1014F突变,只有 1 种基因型类型,即M918I和L1014F双位点突变.温带臭虫1 个野外种群及热带臭虫6 个野外种群kdr突变的存在与臭虫对高效氯氰菊酯敏感密切关联.基于kdr基因突变检测结果推测我国臭虫种群广泛存在对拟除虫菊酯的抗性.
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编辑人员丨2023/8/19
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DNA条形码技术在臭虫物种鉴定中的应用
编辑人员丨2023/8/6
目的 准确鉴定臭虫样品,为制定和实施有效预防措施提供参考依据.方法 联合利用形态学鉴定和基于线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(CO Ⅰ)基因片段遗传距离的DNA条形码技术对山东省泰安市某学校发现的臭虫样品进行鉴定.结果 臭虫样品的前胸背板宽约为身长的1/2,与温带臭虫的特征相符.遗传距离分析显示,实验样品与温带臭虫的遗传距离为0~1.3%,与热带臭虫的遗传距离为27.6%~28.0%.结论 形态鉴定和DNA条形码分析结果均表明该实验样品为温带臭虫.臭虫通常是群居生活,且易于借助人类活动进行传播,长期、合理的防制是减少或避免臭虫危害的关键.
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编辑人员丨2023/8/6
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热带臭虫及温带臭虫形态与分子鉴定
编辑人员丨2023/8/6
目的 建立近似种热带臭虫与温带臭虫形态学和分子鉴定的方法.方法 2017年7月在深圳市某大学集体宿舍和山东省泰安某大学集体宿舍分别发现并采集到热带臭虫和温带臭虫.比较热带臭虫与温带臭虫外部形态特征及线粒体基因细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ (COI)基因、16S rDNA和核糖体基因28S rDNA、ITS2的序列,构建(Neighbor-Joining,NJ)进化树.结果 虽然热带臭虫与温带臭虫成虫的外部形态相似,但仍可以从前胸背板、翅基、足和腹部的细微特征区别进行鉴定,COI、16S rDNA、28S rDNA、ITS24个基因的DNA序列种内差异均<2%,种间差异均>2%,在构建的4个基因NJ进化树中,2个种均能各自聚为一支,且支持率均达100%.结论 热带臭虫和温带臭虫成虫可以利用外部形态鉴定,并能用常规的分子标记进行分子鉴定.形态和分子相结合的鉴定方法,为仅依赖形态特征难以区分的近似种的鉴定提供了一个高效的方法.
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编辑人员丨2023/8/6
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昆虫内向整流钾离子通道的结构与功能
编辑人员丨2023/8/6
内向整流钾离子通道(inwardly-rectifying potassium channels,Kir)在动物体内承担着重要的生理功能.有关昆虫Kir的研究虽然不多,但近5年来却取得许多重要进展,本文就昆虫Kir近年来的研究进展进行评述.目前对昆虫Kir的研究主要集中在双翅目与半翅目,对基因组的分析以及基因克隆研究表明,昆虫Kir基因数量较少,远低于哺乳动物.双翅目的冈比亚按蚊Anopheles gambiae与埃及伊蚊Aedes aegypti有5~6个Kir基因,黑腹果蝇Drosophila melanogaster仅3个Kir基因,半翅目的褐飞虱Nilaparvata lugens与热带臭虫Cimex lectularius也只有3个Kir基因,而大豆蚜Aphis glycines的Kir基因数则减少到2个,第3个Kir基因的丢失可能与其马氏管的退化有关.系统进化分析表明昆虫Kir具有3个亚家族,但与哺乳动物的7个Kir亚家族没有直系同源关系.尽管如此,昆虫Kir具有与哺乳动物Kir类似的基本结构特征:由4个亚基组成四聚体通道,每个亚基具有2个跨膜区(TM1与TM2),TM1与TM2之间具K+选择过滤序列.昆虫的Kir基因主要在唾液腺与马氏管中高水平表达,Kir抑制剂可阻断唾液腺与马氏管的分泌活性,从而影响昆虫的取食与排泄活动并使昆虫致死,说明这2类组织器官的分泌活性与Kir有关,Kir介导的K+跨膜转运驱动了这类组织中上皮细胞的分泌活动.更为重要的发现是氟啶虫酰胺对褐飞虱Kir具有很高的阻断活性,并影响其唾液分泌与排泄功能,证明了Kir就是该杀虫剂的分子靶标.最后本文还对昆虫Kir研究中存在的科学问题进行了分析,展望了开发靶向Kir的新型杀虫剂的研究前景.
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编辑人员丨2023/8/6
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我国臭虫防治中存在的问题及解决对策
编辑人员丨2023/8/5
臭虫(温带臭虫和热带臭虫)以吸食人和动物的血液为生,严重影响人们的生活和健康.第二次世界大战后,随着化学药剂的应用,臭虫在世界多数地区逐渐销声匿迹.然而,从20世纪90年代后期开始,臭虫在世界范围内(除南极洲)出现了再暴发.由于其善于躲藏和夜间活动的特点,以及日益严重的抗药性问题,使得臭虫成为当前一种最难防治的城市害虫.2017-2019年在对广东省部分地区进行的臭虫危害及防治调查中,发现该虫的危害程度正日益加重,且防治过程中存在诸多不足.因此,如何有效地控制/抑制臭虫的再暴发,并采取合理的防治措施成为当前亟待解决的问题.该文在分析有关臭虫防治研究文献的基础上,针对当前我国臭虫防治工作中存在的问题提出相应的解决对策,以期为我国臭虫防治策略的制定提供参考.
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编辑人员丨2023/8/5
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驻守热带岛礁官兵传染病防治知识调查及需求分析
编辑人员丨2023/8/5
目的 调查岛礁部队官兵对热带传染病防治知识的了解程度,为相关卫勤机构在制定政策和配备资源时提供依据,并为相关教学培训和宣教服务提供具体信息.方法 设计调查问卷,组织官兵集中填写,现场回收问卷,整理数据录人Excel,采用SPSS 24.0进行统计分析.结果 共发放问卷182份,有效问卷176份,占96.70%.本次调查官兵均为男性,平均年龄(24.5 ±3.8)岁,平均累计上岛工作时间(13.1 ±12.2)月.受调查的官兵中,听说过鼠疫、登革热、艾滋病和疟疾的占50%以上,对蚊、蝇、鼠和蟑螂较熟悉的占68.2% ~88.1%,对其他传染病(血吸虫病、霍乱、流行性乙型脑炎、黑热病、斑疹伤寒、丝虫病、恙虫病)和媒介生物(蜱、螨、臭虫)的知晓率较低;对媒介生物未采取任何防护措施的占6.3% ~ 11.4%,即使采取防护措施,方式也相对单一;岛礁环境的"消杀灭"工作主要是喷洒杀虫剂(占92.0%)和放置鼠夹/鼠笼(占79.5%).官兵对传染病防治工作的需求,主要集中在药品(占67.4%)和防护装备、器械(占44.2%).结论 岛礁部队官兵对热带传染病相关知识掌握尚欠缺,防护意识需要提高,提示要加强相关知识宣教,并尽快增加配备传染病防护的药品和装备.
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编辑人员丨2023/8/5
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热带臭虫转录组分析
编辑人员丨2023/8/5
目的 获得热带臭虫转录组数据,为后续基因功能研究奠定基础.方法 基于Illumina NovaSeq 6000高通量测序平台,对热带臭虫混合样本进行测序,采用Trinity软件组装有效测序数据获得unigenes.将unigenes分别与非冗余蛋白数据库(NR)、基因本体论(G0)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)、直系同源蛋白分组比对数据库(eggNOG)和注释蛋白数据库(Swiss-Prot)进行比对和功能注释,利用MISA软件对热带臭虫的unigenes进行简单重复序列位点分析,使用Samtools和GATK软件检测热带臭虫单核苷酸多态性(SNP).结果 转录组测序数据质控后获得5.49 Gb高质量数据,组装后获得21619个unigenes,总长度为29322540 bp,平均长度为1356 bp.将unigenes序列与5个公共数据库进行比对和功能注释,得到45362个有功能注释的unigenes,预测发现10906条编码区序列,检测到7754个简单重复序列(SSR)位点信息和33144个SNP位点信息.结论 报道并构建了热带臭虫转录组数据库,并对21619个unigenes进行组装和功能注释分析,该数据的获得可为后期热带臭虫的功能基因研究、SSR和SNP分子标记开发、遗传多样性分析以及遗传图谱构建等奠定基础.
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编辑人员丨2023/8/5