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犬尿氨酸代谢通路对牙周膜干细胞成骨分化的影响
编辑人员丨6天前
目的:探索犬尿氨酸代谢通路对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)成骨分化的影响,为研究牙周炎微环境对牙周组织再生的影响提供依据。方法:于2022年6至10月在南京大学医学院附属口腔医院牙周病科、口腔综合科收集19例牙周炎患者(牙周炎组)和19例牙周健康者(牙周健康组)的非刺激性唾液,采用超高效液相色谱-串联质谱检测两组受试者唾液中犬尿氨酸及其代谢产物的含量。对牙周炎组和牙周健康组的牙龈组织通过免疫组化检测吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)与芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)的表达情况。收集因正畸治疗需要拔除的前磨牙5颗(来自2022年7至11月南京大学医学院附属口腔医院口腔颌面外科12~18岁的5例就诊患者),从离体牙上提取PDLSC,使用成骨诱导分化培养基(对照组)或含有20 μmol/L犬尿氨酸的成骨诱导分化培养基(犬尿氨酸组)培养7 d,对成骨诱导的PDLSC进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和ALP活性测定。通过实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测对照组和犬尿氨酸组PDLSC成骨相关基因ALP、骨钙素、runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen type-Ⅰ,COL-Ⅰ)mRNA表达和犬尿氨酸通路相关基因AhR、细胞色素P450家族成员(cytochrome P450 family,CYP)1A1、1B1 mRNA的表达。通过蛋白质印迹法检测对照组和犬尿氨酸组RUNX2、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和AhR蛋白表达情况。培养21 d时,用茜素红染色评估对照组和犬尿氨酸组PDLSC矿化情况。结果:牙周炎组唾液中犬尿氨酸[8.26(0,19.60)nmol/L]及犬尿喹啉酸[11.4(3.34,13.52)nmol/L]含量均显著高于牙周健康组[分别为0.75(0,4.25)、1.92(1.34,3.88)nmol/L]( Z=-2.84, P=0.004; Z=-3.61, P<0.001)。牙周炎组牙龈组织中IDO(18.33±2.22)和AhR的表达(44.14±13.63)均显著高于牙周健康组(分别为12.21±2.87、15.39±5.14)( t=3.38, P=0.015; t=3.42, P=0.027)。ALP活性测定显示,与对照组(329.30±19.29)相比,犬尿氨酸组PDLSC ALP活性(291.90±2.35)显著下降( t=3.34, P=0.029)。RT-qPCR结果显示,犬尿氨酸组PDLSC ALP、骨钙素和RUNX2表达(0.43±0.12、0.78±0.09、0.66±0.10)均较对照组(1.02±0.22、1.00±0.11、1.00±0.01)显著下降( t=4.71, P=0.003; t=3.23, P=0.018; t=6.73, P<0.001),AhR、CYP1A1 mRNA表达(1.43±0.07、1.65±0.10)均较对照组(1.01±0.12、1.01±0.14)显著升高( t=5.23, P=0.006; t=6.59, P<0.001),两组间COL-Ⅰ、CYP1B1 mRNA表达差异均无统计学意义( P>0.05)。蛋白质印迹法结果显示,犬尿氨酸组OPN、RUNX2表达(0.82±0.05、0.87±0.03)与对照组(1.00±0.00、1.00±0.00)相比均显著下降( t=6.79, P=0.003; t=7.95, P=0.001),AhR表达(1.24±0.14)显著高于对照组(1.00±0.00)( t=3.04, P=0.039)。 结论:牙周炎患者犬尿氨酸通路异常激活,不仅能上调AhR相关通路,还能抑制PDLSC的成骨向分化。
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编辑人员丨6天前
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ID-LC-MS/MS检测L-色氨酸及其代谢物的方法建立及方法学评价
编辑人员丨6天前
目的:建立同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC-MS/MS)方法检测血清中L-色氨酸及其代谢物。方法:方法学建立及评价。收集2022年11月至2023年1月的华西医院166例健康体检者的血清样本。采用L-色氨酸(Trp)、L-犬尿氨酸(Kyn)和犬尿喹啉酸(KA)的同位素标记物为内标,通过蛋白沉淀处理血清样本,应用LC-MS/MS同时检测Trp、Kyn和KA含量。评价该方法的选择性、特异性、线性、检出限(LOD)、定量限(LOQ)、携带污染、精密度、加标回收率、基质效应和稀释一致性。结果:Trp、Kyn和KA的线性相关系数均>0.999,LOD分别为0.10 μmol/L、0.01 μmol/L和1.00 nmol/L,LOQ分别为0.20 μmol/L、0.04 μmol/L和2.00 nmol/L,批内精密度和批间精密度均<10%,平均加标回收率与相对基质效应均在100%左右,超线性范围的样本最多可稀释16倍。健康体检者血清中Trp、Kyn、KA含量、Kyn/Trp和KA/Kyn比值分别为(59.55±10.92)μmol/L、(1.85±0.43)μmol/L、(39.89±17.93)nmol/L、(31.64±8.19)×10 -3和21.51±6.72。 结论:建立了基于ID-LC-MS/MS定量检测Trp、Kyn和KA的方法,该方法简便快捷、灵敏度高、结果准确可靠,为临床相关研究提供了可靠支撑。
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编辑人员丨6天前
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犬尿氨酸途径在认知功能障碍中的作用及机制
编辑人员丨6天前
色氨酸(TRP)是人体的必需氨基酸,是许多信号分子形成的前体。犬尿氨酸途径是TRP代谢的主要途径,在吲哚胺2,3-双加氧酶的催化下,形成代谢产物犬尿喹啉酸和喹啉酸,他们通过不同机制作用于N-甲基-D-天冬氨酸受体,参与神经调节,影响认知过程,在许多中枢神经系统疾病的发生发展中起着重要作用。在生理和病理条件下,犬尿氨酸代谢过程不同,而且在犬尿氨酸代谢途径中有许多限速酶,通过影响这些限速酶可以干预犬尿氨酸代谢。本文就色氨酸/犬尿氨酸代谢与认知障碍之间作一综述。
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编辑人员丨6天前
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色氨酸-犬尿氨酸代谢途径及其代谢产物在抑郁症中的研究进展
编辑人员丨6天前
抑郁症是一种严重的慢性致残性精神疾病,其高患病率、高复发率、高致残率给社会和家庭带来巨大的经济负担。越来越多的研究显示色氨酸-犬尿氨酸代谢途径异常在抑郁症的病理生理机制中可能具有重要作用。本文中系统的介绍了近年来色氨酸-犬尿氨酸代谢途径及其代谢产物在抑郁症中的相关研究,并梳理了基于该代谢途径的靶向药物潜在的抗抑郁效果,为探索抑郁症的病因及发病机制提供一定的理论基础。
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编辑人员丨6天前
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色氨酸及其代谢产物对肠粘膜免疫屏障的调节作用
编辑人员丨6天前
作为一种必需氨基酸,色氨酸(tryptophan,Trp)通过血清素(5-羟色胺)、犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)的内源性代谢途径和微生物代谢途径产生5-羟色胺、烟酸、CO 2、犬尿喹啉和吲哚衍生物等代谢产物。Trp及其代谢产物在机体内可通过激活芳香烃受体(aromatic hydrocarbon receptor,AhR)、孕烷X受体(progesterone X receptor,PXR),诱导胰高血糖素样肽-1(glucagon like peptide-1,GLP-1)释放,改善肠道抗氧化能力及线粒体功能,促进5-HT释放等机制参与调节机体健康。这里通过阐述Trp、Trp代谢过程以及Trp代谢物的作用机制,探讨Trp及其代谢产物对肠粘膜免疫屏障的调节作用。
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编辑人员丨6天前
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首次发病精神分裂症患者犬尿氨酸代谢异常及与血糖-胰岛素水平的关系
编辑人员丨6天前
目的:探讨首次发病精神分裂症患者犬尿氨酸代谢通路异常及其与血糖-胰岛素水平的关系。方法:纳入160例首次发病精神分裂症患者(患者组)和122名年龄、性别、受教育程度与之相匹配的健康对照者(对照组)。采用液相色谱-串联质谱法测定血清中色氨酸、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸、喹啉酸的水平,同时测定所有受试者的空腹血浆葡萄糖及空腹血浆胰岛素水平,采用独立样本 t检验或Mann Whitney U检验进行组间比较;采用双变量相关、偏相关分析空腹血浆葡萄糖-胰岛素代谢指标与犬尿氨酸代谢物之间的关系。 结果:与对照组相比,患者组空腹血浆葡萄糖水平升高[5.5(4.8,6.4)mmol/L与5.1(4.8,5.4)mmol/L, Z=-3.93, P<0.01],空腹血浆胰岛素水平下降[(6.2±2.9)pmol/L与(7.2±4.0)pmol/L, t=-2.45, P=0.015];患者组色氨酸[11 449.5(10 053.5,12 828.5)nmol/L与 16 780.0(13 735.0,18 997.5)nmol/L, Z=-10.69, P<0.01],犬尿氨酸[252.2(208.7,307.4)nmol/L与637.8(355.5,827.4)nmol/L, Z=-11.02, P<0.01],犬尿喹啉酸[5.0(3.7,6.9)nmol/L与11.0(8.5,14.3)nmol/L, Z=-11.48, P<0.01]和喹啉酸[39.7(31.0,47.3)nmol/L与53.2(44.7,68.6)nmol/L,Z=-8.29, P<0.01]水平均显著低于对照组。相关分析显示首次发病精神分裂症患者胰岛素水平与犬尿喹啉酸水平呈正相关( r=0.46, P<0.01)。 结论:精神分裂症患者犬尿氨酸代谢通路水平降低,并可能与高胰岛素-葡萄糖代谢风险相关。
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编辑人员丨6天前
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血清吲哚胺2,3-双加氧酶和犬尿喹啉酸在支气管肺发育不良早产儿中的变化
编辑人员丨6天前
目的:探讨血清吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)及犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)早产儿中的变化。方法:采用巢式病例对照研究。建立早产儿队列,纳入2021年12月1日至2022年12月31日生后24 h内收住苏州大学附属儿童医院新生儿科的胎龄<32周的早产儿。诊断BPD者作为BPD组( n=35),按1∶1比例选取与BPD组胎龄相差<1周、出生体重相差<150 g的非BPD早产儿作为对照组( n=35)。检测患儿生后第1、7、14、28天血清IDO及KYNA水平。分析BPD组与对照组间、轻度BPD与中-重度BPD患儿间血清IDO及KYNA水平的差异,以及血清IDO及KYNA水平与BPD严重程度的关系。采用两独立样本 t检验和Spearman相关分析进行统计学分析。 结果:与对照组患儿相比,BPD组患儿生后第7、14、28天血清IDO水平[分别为(60.68±9.37)与(50.66±10.46)、(57.81±11.07)与(44.45±8.20)、(50.62±10.77)与(41.31±7.74)pg/ml, t值分别为4.21、5.73和4.15]及第14、28天血清KYNA水平均升高[(439.31±41.22)与(368.99±68.79)、(376.97±45.74)与(325.50±60.07)μmol/L, t值分别为5.18和4.03],差异均有统计学意义( P值均<0.05)。生后第7、14、28天血清IDO水平与BPD严重程度均呈正相关( r值分别为0.546、0.495和0.502, P值均<0.05),生后第14、28天血清KYNA水平与BPD严重程度也呈正相关( r值分别为0.536和0.458, P值均<0.05)。 结论:BPD患儿血清IDO及KYNA水平升高,提示IDO和KYNA可能在BPD发生和发展中发挥一定作用。
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编辑人员丨6天前
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九香虫HPLC特征图谱构建和8个核苷类成分含量测定
编辑人员丨6天前
目的:通过HPLC建立九香虫药材特征图谱,并测定尿嘧啶、腺嘌呤、尿苷、尿酸、次黄嘌呤、腺苷、黄嘌呤和犬尿喹啉酸8个核苷类成分含量,为其质量控制及评价提供参考。方法:采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇(A)-0.05%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,柱温25 ℃,流速0.8 ml/min,检测波长254 nm,建立九香虫药材HPLC特征图谱,并对8个指标成分含量进行测定。结果:建立了15批九香虫药材特征图谱,确定10个共有特征峰,并指认其中8个,各样品特征图谱与对照图谱相似度在0.969~0.997之间。含量测定结果表明,尿嘧啶、腺嘌呤、尿苷、尿酸、次黄嘌呤、腺苷、黄嘌呤和犬尿喹啉酸线性范围分别为0.002 0~0.644 0 μg、0.001 4~0.448 0 μg、0.001 0~1.257 0 μg、0.005 4~6.221 0 μg、0.001 0~0.724 0 μg、0.001 0~0.644 0 μg、0.002 0~1.113 0 μg、0.003 8~2.059 0 μg,线性关系良好( r≥0.999);重复性和稳定性 RSD均<2.0%,平均加样回收率在99.36%~103.40%之间。 结论:本研究建立的特征图谱及核苷类成分含量测定方法简便、可靠、重复性好、精密度高,可用于九香虫药材的定性、定量分析,可为九香虫质量评价提供参考。
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编辑人员丨6天前
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犬尿喹啉酸免疫调节作用的研究进展
编辑人员丨6天前
犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)作为内源性离子型谷氨酸受体和α7-烟碱型乙酰胆碱受体拮抗剂,一直被认为是一种神经调节剂,近年来,随着对KYNA与G蛋白偶联受体35和芳香烃受体的作用的进一步研究,发现KYNA与免疫系统、炎症和癌症密切相关。文章从KYNA对免疫细胞的免疫调节作用及机制入手,对KYNA近年来的研究进展作一综述,为未来KYNA在抗炎、调节免疫及相关疾病等方面的探讨提供参考。
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编辑人员丨6天前
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肠道菌的色氨酸代谢与急性放射性肠损伤诊治的研究进展
编辑人员丨6天前
肠道菌群不仅影响肠道细胞中色氨酸代谢限速酶的活性,而且协同产生多种催化酶直接影响肠道色氨酸代谢物的种类和数量。研究发现,在2~10.4 Gy范围内,多种肠道菌群来源的色氨酸代谢产物在全身照射后的小鼠外周血中明显减少,并与照射剂量负相关,可能是肠道急性辐射损伤相关的生物标志物。在肠道急性辐射损伤的动物模型中,肠道菌群来源的色氨酸代谢物吲哚丙酸、犬尿喹啉酸、吲哚-3-甲醛,肠道芳香烃受体激动剂、肠道色氨酸代谢限速酶吲哚胺2,3-双加氧酶1抑制剂,均具有辐射防护作用。进一步研究肠道菌群参与的色氨酸代谢在急性放射性肠损伤发生发展中的变化特征和作用,筛选对肠道急性辐射损伤具有防护作用的色氨酸代谢物,可能有益于研发有效的诊治手段。
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编辑人员丨6天前
