目的:了解甘肃省文县、迭部县两个犬源型内脏利什曼病流行区犬利什曼原虫感染现状，为当地制定有效的内脏利什曼病防治措施提供依据。方法:2019年，采用入户调查方法，在甘肃省文县、迭部县以往内脏利什曼病病例较多的村，收集犬性别、年龄等基本信息；并采集犬静脉血，采用PCR法检测利什曼原虫小环DNA。结果:共调查537只犬，PCR检测阳性率为41.15%（221/537），其中文县和迭部县犬阳性率分别为64.63%（95/147）和32.31%（126/390），文县高于迭部县（χ 2=46.044， P < 0.05）。有内脏利什曼病临床症状的犬35只，PCR检测阳性率为74.29%（26/35），其中文县和迭部县有症状感染犬的阳性率分别为84.62%（22/26）和4/9，文县高于迭部县（ P < 0.05）；无症状犬502只，PCR检测阳性率为38.84%（195/502），其中文县和迭部县无症状犬的阳性率分别为60.33%（73/121）和32.02%（122/381），文县高于迭部县（χ 2=39.982， P < 0.05）。 结论:甘肃省文县和迭部县犬利什曼原虫感染率较高，无症状感染犬PCR检测阳性率较高，提示当地居民和犬感染利什曼原虫风险高，建议相关部门提高居民主动防护意识，并加大控制犬感染利什曼原虫的力度。

目的:了解甘肃省迭部县犬利什曼原虫虫种类型和种系发育关系，为探索犬源型内脏利什曼病防控新方法提供依据。方法:提取8份甘肃省迭部县洛大行政村无症状感染利什曼原虫犬血液样本DNA，采用PCR法扩增分离核糖体内转录间隔区1（ITS-1）基因片段，对扩增的目的片段进行基因测序；采用MEGA 7.0软件进行多序列比对，并经邻接法构建系统发育树，分析甘肃省迭部县犬利什曼原虫种系发育关系。结果:8份无症状感染利什曼原虫犬血液样本均扩增出约320 bp的片段，与目标序列ITS-1大小一致。ITS-1序列比对显示，8份样本与婴儿利什曼原虫MG969403、MN648755虫株序列同源性为99.1% ~ 100.0%；系统发育树显示，8份样本均与婴儿利什曼原虫聚为一支。结论:甘肃省迭部县8份无症状感染利什曼原虫犬血液样本的原虫种型均为婴儿利什曼原虫。

寄生虫病仍然是全球最大的健康问题，给贫困地区造成巨大的经济负担。目前用于治疗原虫病和蠕虫病的药物存在一定缺陷，亟待研发更为有效的治疗药物。小檗碱最早从黄连的根茎中提取获得，是一类重要的抗炎药物。小檗碱的衍生物通过修饰小檗碱的结构位点获得，除了具有抗菌和抗微生物活性以外，小檗碱及其衍生物还具有显著的抗寄生虫活性。本文概括了小檗碱及其衍生物抗原虫（利什曼原虫、锥虫、刚地弓形虫、恶性疟原虫和柔嫩艾美尔球虫）和蠕虫（曼氏血吸虫、日本血吸虫、细粒棘球绦虫和犬弓首蛔虫）感染的作用，以期为相关研究工作者提供参考。

目的:了解甘肃省文县和迭部县利什曼原虫感染犬的空间分布特征，为实施精准防控措施提供科学依据。方法:2019年，采用整群抽样方法，在甘肃省内脏利什曼病流行区文县兴隆村和迭部县洛大村采集村内所有犬的血样，选择内脏利什曼病诊断引物RV1-RV2对犬血DNA进行PCR扩增，检测犬利什曼原虫感染情况；并采用SaTScan V9.5软件对犬利什曼原虫感染情况进行空间聚集性分析。结果:共调查犬537只，感染阳性犬221只，阳性率为41.2%；其中，文县和迭部县犬利什曼原虫感染阳性率分别为64.6%（95/147）、32.3%（126/390）。SaTScan分析结果显示，文县和迭部县利什曼原虫感染犬在空间范围内聚集性均无统计学意义（ P均> 0.05）。 结论:文县和迭部县利什曼原虫感染犬无空间聚集性，但犬利什曼原虫感染阳性率较高，存在较高流行风险。建议当地加强健康教育工作，严格驱蛉灭蛉、查杀病犬，降低内脏利什曼病传播风险。

患者,男,74岁,农民,山西省阳泉市平定县人.2023年1月因咳嗽、咳痰伴全身乏力就诊于当地医院,诊断为支原体、新型冠状病毒等合并肺部感染伴轻度贫血,予持续吸氧、抗感染等对症治疗后暂时好转.后患者仍因反复全身乏力,于多家医院治疗长达6月余,7月10日至山西医科大学第一医院感染病科就诊.入院查体:间断低热,贫血貌,全身皮肤可见搔抓后瘢痕伴色素沉着,腹软、膨隆,肝、脾大,双下肢轻度水肿.血常规示白细胞计数2.4× 109/L,血红蛋白62.0g/L,红细胞计数2.09× 1012/L,血小板计数94 × 109/L;丙型肝炎病毒抗体阳性;腹部CT示,肝硬化、肝大、脾大;腹部彩超示,腹腔积液;肝脏瞬时弹性硬度值24.7.初步诊断为丙型病毒性肝炎肝硬化.行骨髓穿刺,涂片示粒细胞胞浆内可见中毒颗粒,未见利什曼原虫.7月17日复查,ELISA检测结果示丙型肝炎病毒抗原及抗体均为阴性,荧光定量PCR检测结果为丙型肝炎病毒核酸低于1.0×103IU/ml,发现初诊有误.患者曾多次因贫血输血,有多次流浪犬接触史,白蛉叮咬史不详.血清经内脏利什曼病rK39免疫层析试纸检测为阳性,全血病原微生物高通量基因检测示利什曼原虫属DNA序列数检出4 101条,其中婴儿利什曼原虫DNA序列数检出95条,最终确诊为内脏利什曼病.予葡萄糖酸锑钠注射液肌肉注射1疗程(6ml/d,10d),同时保肝、补充人血白蛋白、输注浓缩红细胞、补液、利尿等治疗共15 d后,患者体温恢复正常,B超检查示肝脏及脾脏体积明显缩小,皮肤瘙痒及皮损改善,病情稳定后出院.

目的 了解2017年陕西省韩城市利什曼病流行现状,为制定疫情监测方案及防治措施提供依据. 方法 通过中国疾病预防控制中心疾病监测信息报告管理系统,收集2017年韩城市利什曼病疫情信息和调查报告,采集患者静脉血.选择韩城市2012年以来有病例报告的桑树坪(王峰)镇程家洞村、杨湾村和水草塔村,西庄(盘龙)镇曹家山村,昝村镇东贾村,龙门镇西塬村等6个村为调查点,其中程家洞村、杨湾村、水草塔村、曹家山村为丘陵区生境,西塬村和东贾村为黄土台原地区生境.在调查点内以人工小时捕捉法从6月中旬至9月下旬连续监测白蛉密度.以既往病例家庭为线索,随机采集人群、家犬E DTA-K2抗凝血及普通血样各3 ml,采集疑似病犬的骨髓,血清学抗体阳性犬捕杀后采集骨髓拭子.人群血清采用rK39免疫层析试纸条检测利什曼原虫抗体;犬血清以ELSIA试剂盒检测利什曼原虫抗体,血清学抗体阳性犬利用rK39免疫层析试纸条进行复检.家犬骨髓进行病原学检测.提取患者和血清学抗体阳性犬骨髓和阳性白蛉组织DNA,PCR检测利什曼原虫动基体靶基因,分别扩增内转录间隔区1(ITS-1)、小亚单位核糖体核糖核酸(SSU rRNA)、DNA重复序列并测序,进行聚类分析,鉴定虫种. 结果 韩城市2017年共报告10例利什曼病,其中8例为外来务工人员,2例为本地儿童.人群利什曼病血清抗体阳性率为3.1％ (7/224),无症状人群PCR未检出阳性.犬利什曼原虫血清抗体阳性率为34.3％ (115/335),丘陵区犬血清抗体阳性率51.5％ (105/204)高于黄土台原地区的7.6％ (10/131)(x2=68.000,P＜ 0.05);媒介监测,6-9月白蛉平均密度为16.7只/(人工·h),最高密度为122只/(人工·h),丘陵区平均密度23.6只/(人工·h),高于黄土台原地区的0.3只/(人工·h) (t=2.19,P＜0.05).共捕获白蛉336只,其中雌蛉168只,雄蛉168只.鉴定白蛉228只,其中中华白蛉占29.4％ (67/228).PCR检测中华白蛉利什曼原虫阳性率为1.5％(2/137).在1只病犬、2例患者骨髓中分离到利什曼原虫,根据ITS-1、SSU rRNA、DNA重复序列聚类分析结果鉴定所感染的为婴儿利什曼原虫. 结论 韩城市人群、犬和白蛉均存在婴儿利什曼原虫感染,丘陵区犬感染率高于黄土台原地区.

对来自犬源型内脏利什曼病流行区甘肃省文县和迭部县的537只家犬血样和来自非流行区天祝县的37只家犬血样,分别采用人用rk39试条、犬用rk39试条和循环抗原(CA)试条进行平行测试,以PCR检测结果为标准比较3种试条的敏感性和特异性.结果显示,574份犬血样中,221份PCR检测结果为阳性,阳性率为38.5％(221/574).CA试条与犬用、人用rk39试条检测221份PCR阳性血样的敏感度分别为90.0％(199/221)、65.2％(144/221)和64.3％(142/221),三者与PCR检测结果的差异具有统计学意义(x2=141.76、20.31、17.96,P＜0.05).CA试条与犬用、人用rk39试条检测316份流行区非内脏利什曼病感染犬血样,特异度分别为95.3％(301/316)、99.7％(315/316)和99.4％(314/316),三者与PCR检测结果的差异具有统计学意义(x2=258.85、312.01、308.05,P＜ 0.05).CA试条与犬用、人用rk39试条检测流行区有症状犬的结果与PCR检测阳性的符合率分别为88.5％(23/26)、88.5％(23/26)和84.6％(22/26),三者与PCR检测的差异有统计学意义(x2 = 23.22、23.22、20.50,P＜ 0.05);检测流行区无症状犬的结果与PCR检测阳性的符合率分别为91.8％(179/195)、62.1％(121/195)和61.5％(120/195),3种试条与PCR检测结果的差异有统计学意义(x2 = 136.25、11.33、10.39,P＜ 0.05).运用曲线下面积(AUC)方法评估3种试条,其准确性均在0.8以上.kappa一致性检验系数为0.671～0.857,表明3种试条均适用于利什曼感染犬的初筛,CA试条优于犬用、人用rk39试条,是流行地区开展利什曼感染犬筛查较好的检测方法.

黑热病是一种经白蛉叮咬传播的慢性地方性传染病,也是一种致命性的人畜共患的寄生虫病.该病是由内脏利什曼原虫引起,患者和感染利什曼原虫的病犬为黑热病主要的传染源,我国黑热病的传播媒介主要为近野栖的中华白蛉.

目的 了解甘肃省犬感染利什曼原虫影响因素,为探索犬源型黑热病防控新方法提供依据.方法 在甘肃省迭部县和文县犬源型黑热病流行区,通过入户问卷调查及犬血PCR检测,调查当地家犬位置、居住场所环境、犬离房屋距离、犬来源、犬主黑热病知识知晓状况和犬感染利什曼原虫现状等信息.利用IBM SPSS23.0 Pearson x2检验和多元Logistic回归分析与犬感染利什曼原虫有关的影响因素.结果 共调查当地居民445人,家犬537只.家犬血样利什曼原虫PCR检测阳性率为41.15％(221/537),其中文县PCR检测阳性率64.63％(95/147),迭部县PCR检测阳性率32.31％(126/390).村中央和村边缘犬的阳性率分别为33.92％(96/283)和49.21％(125/254),两者之间有统计学差异(x2=12.923,P=0.000).居住场所附近房屋墙面为砖混/粉刷墙壁的犬和附近为土坯/石片墙壁的犬,阳性率分别为30.99％(110/355)、60.99％ (111/182),两者之间有统计学差异(x2 =44.723,P=0.000).家庭存在阳性犬的犬主是否知晓黑热病基础知识与犬感染无统计学差异.多因素分析犬的环境位置、犬居住场所附近房屋条件显示与犬感染具有显著相关性.结论 甘肃省文县和迭部县分布在村边缘的犬、犬附近房屋墙壁土坯/石片结构是犬感染的影响因素.针对不同的影响因素应制定针对性的防治措施,减少黑热病和犬利什曼病的传播.

建立一种快速准确检测利什曼原虫的实时荧光定量PCR(qPCR)方法.以利什曼原虫动基体小环保守序列为靶基因,设计1对特异性引物和Taq-Man探针,以利什曼原虫阳性患者骨髓样品DNA为模板进行PCR扩增,扩增产物长83 bp.扩增产物连接至pESI-T载体进行克隆、测序,测序结果在GenBank上进行BLAST比对,结果显示,其序列与婴儿利什曼原虫和杜氏利什曼原虫的序列一致性为100％.取测序正确的质粒梯度稀释至102～107拷贝/μl作为标准品进行qPCR,绘制获得标准曲线方程y=39.23-2.956 x,扩增效率为117.93％,R2为0.994;当阈值循环数为35时,最低检测限为26.98拷贝/μl,理论上可检出小于1个利什曼原虫.用所建立的qPCR检测内脏利什曼病患者骨髓样品14份、血样26份,利什曼病病犬的骨髓、血液、脾、肺、淋巴结、肝、肾组织样品各1份,利什曼原虫阳性白蛉2份,患者和病犬骨髓培养物各1份,结果均为阳性;检测利什曼原虫血清抗体阳性犬骨髓9份,结果7份阳性;检测利什曼原虫血清抗体阴性人群血样56份,沙门菌、志贺菌、蜡样芽胞杆菌DNA各1份,疟疾患者血样4份,刚地弓形虫病患者血样、卫氏并殖吸虫病患者血样各1份,结果均为阴性.所建立的qPCR具有较高灵敏度及特异度,可用于利什曼病患者、宿主动物、传播媒介利什曼原虫感染与带虫状态的快速检测,可用于患者的疗效判定.