将 3-琥珀酸-30-硬脂基甘草次酸(18-GA-Suc)插入甘草次酸(GA)-丹参酮ⅡA(TSN)-丹酚酸B(Sal B)脂质体(GTS-lip),制备甘草次酸(GA)受体介导的肝靶向复方脂质体(Suc-GTS-lip);通过UPLC比较Suc-GTS-lip与GTS-lip的药代动力学和组织分布,并对Suc-GTS-lip进行活体成像追踪;考察Suc-GTS-lip对肝星状细胞(HSC)增殖抑制的影响,并探究其改善肝纤维化的分子机制.药代动力学研究结果表明,Sal B的AUC由(636.06±27.73)μg·h·mL-1 降至(550.39±12.34)μg·h·mL-1,TSN的AUC由(1.08±0.72)μg·h·mL-1降至(0.65±0.04)μg·h·mL-1,GA的AUC由(43.64±3.10)μg·h·mL-1 增至(96.21±3.75)μg·h·mL-1;组织分布结果表明,Suc-GTS-lip组肝脏中Sal B的AUC和Cmax 分别是GTS-lip组的10.21、4.44 倍,Suc-GTS-lip组中Sal B、TSN、GA对肝脏的靶向效率分别为40.66%、3.06%、22.08%;体内成像研究显示,修饰后的脂质体有肝脏积聚的趋势;MTT实验结果显示,Suc-GTS-lip能显著抑制HSC的增殖;RT-PCR结果显示,各给药组MMP-1 的表达均显著增加;各给药组TIMP-1与TIMP-2表达显著降低;各给药组Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ)与Ⅲ型胶原(collagen-Ⅲ)的mRNA 表达显著降低.实验结果表明,Suc-GTS-lip具有肝脏靶向性,且能够抑制HSC增殖和诱导其凋亡,为Suc-GTS-lip靶向治疗肝纤维化提供了实验依据.

α-生育酚琥珀酸酯(α-TOS)是维生素E(VE)的衍生物,具有广泛的抗肿瘤活性,能选择性抑制乳腺癌、肺癌、前列腺癌和结肠癌等多种肿瘤细胞生长.α-TOS口服易被胃肠道酯酶水解为无抗肿瘤活性的VE,为避免α-TOS被胃肠道酯酶水解,需将其通过腹腔或静脉注射给药,然而α-TOS在水溶液中溶解度差,因此极大地限制了其临床应用.随着新剂型的开发,纳米粒、脂质体、纳米乳、纳米囊泡和胶束等纳米技术的应用可改善α-TOS的溶解度,增强其抗肿瘤疗效.本文通过文献检索,对国内外α-TOS抗肿瘤新剂型的研究概况进行综述,为其新剂型的开发提供参考.

维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)是天然维生素E衍生物,具有抑制不同肿瘤细胞生长、增殖和选择性诱导肿瘤细胞凋亡的作用.VES能够有效的抑制乳腺癌细胞增殖作用,其作用机制主要与Fas蛋白及TGF-β1蛋白水平上调有关.VES联合化疗药物后能够使乳腺癌细胞表面的Fas表达上调,显著的抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.VES与他莫西酚(Tamoxifen,TAM)具有协同作用,联合用药后对乳腺癌细胞的凋亡诱导作用增强.因此,这些机制的研究发现可以评价VES的临床应用价值,对肿瘤学的发展及抗肿瘤药物的开发起着重要作用.

目的:运用同位素内标,建立同时测定体内琥乙红霉素及其活性代谢产物红霉素的LC-MS/MS检测方法,并进行比格犬体内的药代动力学研究.方法:以氘代同位素(红霉素-D6)为内标,血浆样品经乙腈蛋白沉淀处理后,采用LC-MS/MS法同时测定琥乙红霉素及红霉素的血药浓度.色谱条件:采用ThermoHypersil GOLD色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm),以10 mmol·L-1甲酸铵水溶液-乙腈(60∶40,含0.5％甲酸)为流动相,流速0.3 mL· min-1;质谱参数:电喷雾离子源(ESI),选择离子监测(SRM模式),监测离子对为m/z 734.486→m/z 157.906(红霉素)、m/z 862.522→ m/z 285.722(琥乙红霉素)、m/z 740.509→m/z 163.932(红霉素-D6).结果:本方法检测血浆中琥乙红霉素及红霉素的线性范围分别为4～4 000ng·mL-1(r=0.999 8)、2～1 000 ng·mL-1(r=0.999 9),定量下限分别为4、2 ng· mL-1,相对误差(RE)分别为-1.17％～4.92％、-2.20％～6.44％,批内及批间RSD分别为3.28％～9.43％、0.91％～6.10％,提取回收率分别为98.3％～107.9％、97.9％～103.4％,内标归一化的基质因子RSD分别为2.18％～6.77％、0.36％～3.68％.比格犬灌胃给予琥乙红霉素混悬剂每只200 mg,体内琥乙红霉素T1/2为(3.50±2.43)h,Cmax为(1 466.24±479.49)ng·mL-1,AUC(o-t)为(1 080.18±311.86) μg·L-1·h-1;红霉素T1/2为(6.46±5.49)h,Cmax为(233.34±83.78) ng·mL-1,AUC(o-t)为(324.09±58.85) μg· L-1·h-1.结论:本方法简便、灵敏、高效,特异性强,可用于体内琥乙红霉素和活性代谢产物红霉素的同时检测及其药代动力学研究.

维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)长期以来一直作为药物载体在临床应用,近年来研究发现,TPGS除了作为药物载体,有提高抗肿瘤药物疗效的作用,同时还可以逆转耐药.由于其作为一个维生素的衍生物,目前的研究主要集中在其作为辅料的研究上,而其作为潜在的抗肿瘤的活性目前研究较少.此外,其作用机制尚有待于深入研究.全文对TPGS抗肿瘤的研究进展进行综述.

目的 维生素E琥珀酸酯(vitamin E sucinate,VES)是天然维生素E衍生物中抑制肿瘤活性最强的一种,国内外研究已证实VES在体内外均能有效抑制肿瘤细胞生长,而对正常细胞无任何毒副作用.本研究旨在探讨VES是否通过肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)途径诱导胃癌细胞凋亡,及VES是否可促进人CD4+T淋巴细胞表达TRAIL及其受体,并探讨在体外联合应用VES与CD4+T淋巴细胞是否可增强对人胃癌细胞的凋亡诱导作用.方法 以中分化人胃癌MKN28细胞作为体外肿瘤模型.体外培养人胃癌MKN28细胞,用20 μg/mL VES处理胃癌细胞不同时间(0、6、12、18和24 h)后,流式细胞仪检测各组凋亡率;不同剂量(0、5、10和20 μg/mL) VES处理MKN28细胞12h,或10 μg/mL VES分别处理MKN28细胞不同时间(0～24 h)后,利用RT-PCR与蛋白质印迹法分别检测细胞内TRAIL受体DR4、DR5的mRNA和蛋白表达水平;用特异siRNA分别沉默人胃癌MKN28细胞DR4、DR5表达后,加入20 μg/mL VES处理细胞24 h,流式细胞仪检测各组凋亡率;不同剂量(0、5、10和20 μg/mL)VES处理人CD4+T细胞12h后,利用RT-PCR分析人CD4+T细胞中TRAIL和TRAIL受体的mRNA表达情况;将CD4+T细胞与胃癌细胞共培养后用20 μg/mL VES处理,将实验设置为对照组(Control)、CD4+T细胞作用组、VES作用组和CD4+T细胞+ VES联合作用组,光镜下观察细胞形态变化;并进行DAPI染色,荧光显微镜观察细胞核与染色质形态变化.结果 20 μg/mL VES处理胃癌细胞0、6、12、18和24 h,各组凋亡率分别为(2.8±0.46)％、(4.37±0.06)％、(7.27±0.64)％、(29.7±4.17)％和(42.02±2.35)％,不同作用时间组凋亡率之间差异有统计学意义,F=198.288,P＜0.001;RT-PCR及蛋白质印迹法结果显示,10 μg/mL VES作用下,DR4、DR5的mRNA和蛋白表达均呈先升高后降低的趋势,DR4、DR5的mRNA分别在9和6h处达到峰值,而蛋白表达在12 h达到峰值;用不同剂量VES作用胃癌细胞12 h,结果显示,细胞中TRAIL表达无变化,DR4、DR5蛋白表达升高,而DcR1、DcR2蛋白表达降低;用特异siRNA分别沉默人胃癌MKN28细胞DR4、DR5的表达后,加入20 μg/mL VES处理细胞24 h,各组细胞凋亡率分别为对照组(2.8±0.46)％、DR4 siRNA(3.23±0.25)％、DR5 siRNA(2.97±0.87)％、VES(42.02±2.35)％、VES+DR4 siRNA(14.00±0.61)％和VES+-DR5 siRNA(21.65±1.14)％,不同处理组凋亡率之间差异有统计学意义,F=528.344,P＜0.001;不同剂量VES处理人CD4+T细胞12h后,细胞中TRAIL的mRNA表达升高,而其他TRAIL受体表达无变化;将CD4+T细胞与胃癌细胞共培养后用20 μg/mL VES处理,与VES单独作用组相比,人CD4+T细胞与VES联合处理胃癌细胞后,细胞状态下降,染色质呈现凋亡形态细胞增多.结论 VES可通过TRAIL途径诱导胃癌细胞凋亡,VES可刺激人CD4+T细胞增强表达TRAIL,将CD4+T细胞与VES联合处理胃癌细胞,可增强胃癌细胞的凋亡.

目的 利用代谢组学探讨兔体外循环(ECC)期间心肌代谢变化.方法 18只新西兰白兔随机分为对照组(C组,n=6)、缺血组(I组,n=6)、缺血再灌注组(IR组,n=6).I组与IR组行右腋动脉、右房插管建立ECC,I组主动脉阻断120 min后取左室心肌组织;IR组主动脉阻断120 min开放,心肌恢复灌注120 min后取左室心肌组织;C组正中开胸、右腋动脉、右房插管后取左室心肌组织.采用气相色谱-质谱法检测,代谢组学数据进行多元变量统计分析:主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)作得分图,差异物质鉴定采用OPLS-DA分析的变量重要性投影(VIP)值与独立样本t检验P<0.05,代谢物行载荷图、热力图分析,并进行差异物代谢通路分析.结果 缺血期间代谢差异不显著(Q2 Y=0.357),13个代谢物质存在统计学差异(所有VIP差异物>1,P差异物<0.05),主要涉及鸟氨酸循环及嘧啶代谢通路.再灌注期间,心肌代谢发生显著变化(Q2 Y=0.714),82个代谢物质存在统计学差异(所有差异代谢物VIP值>1,P差异物<0.05),不饱和脂肪酸及其衍生物代谢(花生四烯酸、油酸、亚油酸、茉莉酸甲酯)上调,与黄嘌呤氧化酶系统相关的产物次黄嘌呤、黄嘌呤核苷均增加,腺苷相关代谢产物及三羧酸循环琥珀酸及其代谢产物下调.结论 基于兔ECC灌注HTK液模型的代谢组学分析表明缺血期间心肌代谢变化不显著,但再灌注期间心肌代谢显著上调,参与氧化应激的氨基酸、不饱和脂肪酸、嘌呤代谢明显增加,抗氧化剂谷氨酰胺生成减少.

背景与目的:维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)是天然维生素E的酯化衍生物,研究已证实其可诱导乳腺癌、前列腺癌、舌癌及肾癌等恶性肿瘤凋亡,却对正常细胞组织没有毒性作用.本实验以VES、紫杉醇单独及联合作用于Her-2过表达乳腺癌细胞,检测各组药物对乳腺癌细胞的诱导凋亡率.方法:免疫细胞化学法检测MDA-MB-453细胞Her-2蛋白表达水平.以VES、紫杉醇单独作用于MDA-MB-453细胞24、48?h,用TUNEL法检测细胞凋亡率,以浓度为10、20?mg/L的VES与浓度为50和100?nmol/L的紫杉醇组合,作用于MDA-MB-453细胞24、48?h,用TUNEL法检测不同组合的细胞凋亡率,比较各种组合对Her-2过表达乳腺癌细胞的诱导凋亡作用.结果:MDA-MB-453细胞Her-2表达率95％CI:63.32％～69.60％;VES与紫杉醇对MDA-MB-453细胞均有诱导凋亡作用,并成剂量和时间依赖关系,其中10?mg/L VES联合100?nmol/L紫杉醇作用于MDA-MB-453细胞48?h对其的诱导凋亡作用最强.结论:VES和紫杉醇对MDA-MB-453细胞均有诱导凋亡作用,两药联合时诱导凋亡作用增强.