目的 探讨血清瓜氨酸组蛋白H3(CitH3)、调节激活正常T淋巴细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)对重症急性胰腺炎(SAP)合并腹腔感染患者预后不良的预测价值.方法 选取2021年7月至2023年7月河北北方学院附属第一医院收治的96例SAP合并腹腔感染患者为感染组,并根据预后情况将其分为生存组和死亡组.另选取同期河北北方学院附属第一医院收治的108例未合并腹腔感染的SAP患者为未感染组.比较感染组和未感染组及生存组和死亡组的临床资料.采用Pearson相关分析SAP合并腹腔感染患者血清CitH3、RANTES水平与APACHE Ⅱ评分的相关性.采用多因素Logistic回归分析SAP合并腹腔感染患者预后不良的危险因素.绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CitH3、RANTES对SAP合并腹腔感染患者预后不良的预测价值.结果 感染组患者APACHE Ⅱ评分及血清CitH3、RANTES水平高于未感染组,差异均有统计学意义(P＜0.05).随访结果显示,生存组有69例患者,死亡组有27例患者.死亡组患者血清CitH3、RANTES水平及APACHE Ⅱ评分高于生存组,差异均有统计学意义(P＜0.05).Pearson相关分析结果显示,SAP合并腹腔感染患者血清CitH3、RANTES水平与APACHE Ⅱ评分均呈正相关(r=0.461、0.442,P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,APACHE Ⅱ评分及血清CitH3、RANTES水平升高为SAP合并腹腔感染患者预后不良的危险因素(P＜0.05).ROC曲线分析结果显示,2项指标联合预测的AUC为 0.959,大于 CitH3、RANTES 单独预测的AUC(Z联合-CitH3=2.009,P=0.045;Z联合-RANTES=2.213,P=0.027).结论 在SAP合并腹腔感染患者中,血清CitH3、RANTES水平均升高,且2项指标联合检测对SAP合并腹腔感染患者预后不良具有较高的预测价值.

目的 观察多肌炎/皮肌炎(polymyositis/dermatomyositis,PM/DM)患者血清肽基精氨酸脱亚胺酶4(peptidyl argi-nine deiminase 4,PAD4)水平及其与血清中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap,NET)标志物水平和其他临床指标的相关性.方法 收集60例PM/DM患者(DM 36例、PM 24例)和20例健康对照者的外周血,检测其血清中PAD4及NET标志物[瓜氨酸化组蛋白H3(citrullinated histone H3,CitH3)及细胞游离DNA(cell free DNA,cfDNA)]水平,分析其相关性,并与患者临床资料进行相关性分析.结果 与健康对照者比较,PM/DM患者血清中PAD4水平显著升高(t=13.21,P＜0.001).PM/DM患者血清NET标志物水平相比健康对照者显著升高(CitH3:t=9.518,P＜0.001;cfDNA:t=2.984,P=0.0038).将PM/DM患者PAD4与NET标志物水平进行相关性分析,结果显示,两者均呈正相关(PAD4与CitH3:r=0.835,P＜0.001;PAD4与cfDNA:r=0.322,P=0.012).将PM/DM患者血清PAD4、CitH3、cfDNA水平与临床数据做相关性分析,结果显示,血清PAD4水平与红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、降钙素原(procalcitonin,PCT)呈正相关,与白蛋白(albumin,ALB)水平呈负相关;血清CitH3水平与谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)呈正相关;血清cfDNA水平与白细胞计数(white blood cell count,WBC)、中性粒细胞绝对值(neutrophil,NE#)、中性粒细胞百分比(neutrophil ratio,NE％)、C 反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、ALT、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、尿素(UREA)等指标均呈正相关,与ALB水平呈负相关.结论 PM/DM患者血清PAD4水平显著升高并且与NET异常增多有关,同时,血清PAD4及NET标志物水平与PM/DM患者炎性指标呈正相关,提示PAD4异常增多介导NET过度形成可能参与PM/DM的发病.

目的 探讨枫杨总黄酮(PHSTF)干预类风湿关节炎(RA)的机制,为治疗类风湿关节炎提供新的理论基础.方法 将25只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组(CIA组)、枫杨总黄酮低剂量组[CIA+PHSTF(45 mg/kg)]、枫杨总黄酮高剂量组[CIA+PHSTF(90 mg/kg)]、雷公藤多苷片组[CIA+TPG(10 mg/kg)],5只/组.除正常组外,对其余大鼠采用二次免疫法建立CIA大鼠模型.二次免疫结束后,枫杨总黄酮组和雷公藤多苷片组按相应剂量灌胃给药,1次/d,连续4周.采用ELISA检测血清中细胞因子(TNF-α、IL-1β)的水平;HE染色检测踝关节组织损伤情况;免疫组化(IHC)检测踝关节中性粒细胞胞外陷阱网(NETs)标志物瓜氨酸化组蛋白3(Cit-H3)的表达水平.建立细胞模型,设立枫杨总黄酮不同剂量组(0、12.5、25、50、100、200 μg/mL),利用CCK-8探索PHSTF用药浓度,采用迪夫快速染色法观察中性粒细胞的形态;设立对照组(Control),佛波酯(PMA)刺激中性粒细胞模拟NETs形成建立模型组(PMA),枫杨总黄酮低剂量组[CIA+PHSTF(100 μg/mL)],枫杨总黄酮高剂量组[CIA+PHSTF(200 μg/mL)].Western blotting检测枫杨总黄酮干预后NETs标志性蛋白Cit-H3,肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4),中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)以及髓过氧化物酶(MPO)的表达,免疫荧光检测Cit-H3的表达观察NETs形成.结果 体内实验中,与模型组相比较枫杨总黄酮可明显改善CIA大鼠踝关节的肿胀程度(P<0.05),降低血清中炎症因子水平(P<0.05),显著改善踝关节组织病理程度,降低血清以及踝关节软骨中性粒细胞胞外诱捕网浓度,抑制中性粒细胞胞外诱捕网的释放(P<0.05).体外实验中,枫杨总黄酮并未对中性粒细胞活性有明显影响(P<0.01),此外枫杨总黄酮显著抑制PMA诱导的中性粒细胞胞外诱捕网的释放(P<0.05).结论 枫杨总黄酮可以通过抑制NETs的产生,达到干预类风湿关节炎的目的.

目的:通过肠道生物标志物肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）、瓜氨酸的动态变化来协助评价不同程度休克患者早期肠内营养是否能够获益。方法:①由2021年2月至2023年2月，纳入南京医科大学附属苏州医院重症监护室目标患者133例，观察期为入院7 d，肠道生物标志物监测3次，分别为：入院后24 h（D1）、入院第3天（D3）、入院第7天（D7）。②纳入患者根据入院48 h内接受去甲肾上腺素剂量分为：安全剂量组[接受去甲肾上腺素<0.3 μg/（kg·min）]，危险剂量组[接受去甲肾上腺素≥0.3 μg/（kg·min）]。③安全剂量组标按照指南推荐意见实施早期肠内营养，危险剂量组随机予早期肠内营养（EEN）和延迟肠内营养（DEN）。④观察三组肠型脂肪酸结合蛋白、瓜氨酸的动态变化；比较危险剂量EEN/DEN不同时间点肠道生物标志物的差异。⑤记录危险剂量EEN/DEN组28 d内生存时间，绘制Kaplan-Meier生存曲线。⑥纳入总体进行28 d死亡的单因素及多因素回归分析。结果:①比较安全剂量EEN组/危险剂量EEN组基线资料，APACHE Ⅱ评分、动脉血乳酸、AGI分级、喂养中断、7 d内喂养总时间、28 d生存人数差异有统计学意义（ P<0.05）；比较危险剂量EEN组/危险剂量DEN组基线资料，仅喂养中断数差异有统计学意义（ P<0.05）。②安全剂量EEN组与危险剂量DEN组变化趋势相同：I-FABP从D3至D7开始有明显下降趋势（ P<0.05）；瓜氨酸从D1至D3降低，但从D3至D7开始回升（ P<0.05）；危险剂量EEN组，I-FABP在监测期内无明显变化（ P>0.05）；瓜氨酸在D1至D3有明显下降（ P<0.05）；危险剂量EEN/DEN比较仅D7-I-FABP差异有统计学意义（ P<0.05）。③比较危险剂量EEN/DEN生存曲线，DEN可以提高危险剂量下危重患者早期生存率（Breslow检验 P = 0.0447）。④年龄（ OR=1.069, 95% CI: 1.002~1.140， P=0.044）是28 d死亡的独立危险因素；BMI（ OR=0.772, 95% CI: 0.604~0.987， P=0.039）、无喂养中断（ OR=0.044，95% CI: 0.004~0.455， P=0.009）、7 d内喂养总时间（ OR=0.959，95% CI: 0.923~0.997， P=0.036）是其保护因素。 结论:安全剂量下EEN和危险剂量下DEN能有效地逆转肠细胞的的坏死，促进肠细胞功能的恢复。危险剂量EEN不能明确是28 d死亡的危险因素，但其不仅增加了喂养中断发生率，从肠道生物标志物的角度也不利于肠细胞功能的恢复。

目的:探讨胆总管结石患者胆汁中性粒细胞胞外诱捕网(NET)激活水平及其临床意义。方法:纳入2021年5月至2022年10月在安徽医科大学第一附属医院消化内科行内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)的患者130例。根据病因，将患者分为胆总管结石组(90例)和非胆总管结石组(40例)，胆总管结石组进一步分为大结石组(最大径>1 cm，36例)和小结石组(最大径≤1 cm，54例)。收集130例患者术中和16例留置鼻胆管患者ERCP术后24 h胆汁样本。采用酶联免疫吸附试验测定胆汁中髓过氧化物酶(MPO)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)的水平。比较胆总管结石组与非胆总管结石组、小结石组与大结石组、胆总管结石患者ERCP治疗前与治疗后的MPO、NE、CitH3水平。统计学方法采用Mann-Whitney U检验、Wilcoxon符号秩检验。 结果:胆总管结石组患者胆汁MPO、NE、CitH3分别为32.6 U/L(28.5 U/L)、30.6 ng/L(35.2 ng/L)、0.37 μg/L(0.73 μg/L)，均高于非胆总管结石组[MPO为19.9 U/L(36.4 U/L)、NE为18.2 ng/L(27.4 ng/L)、CitH3为0.10 μg/L(0.25 μg/L)]，差异均有统计学意义( Z＝2.91、3.20、3.34， P＝0.004、0.001、0.001)。大结石组患者胆汁MPO、NE、CitH3分别为47.0 U/L(49.4 U/L)、48.4 ng/L(39.5 ng/L)、0.83 μg/L(1.08 μg/L)，均高于小结石组[MPO为29.3 U/L(17.5 U/L)、NE为24.0 ng/L(25.8 ng/L)、CitH3为0.27 μg/L(0.45 μg/L)]，差异均有统计学意义( Z＝2.01、3.58、3.63， P＝0.044、<0.001、<0.001)。胆总管结石患者行ERCP治疗后的胆汁MPO[19.4 U/L(19.8 U/L)]、NE[12.7 ng/L(15.1 ng/L)]、CitH3[0.05 μg/L(0.12 μg/L)]与ERCP治疗前[MPO为33.6 U/L(36.7 U/L)、NE为22.7 ng/L(25.9 ng/L)、CitH3为0.14 μg/L(0.27 μg/L)]相比均明显降低，差异均有统计学意义( Z＝3.52、3.30、3.18，均 P<0.001)。 结论:胆总管结石患者胆汁中NET激活水平升高，ERCP术后胆汁NET激活水平降低，提示NET可能参与胆总管结石的形成过程。

目的:探讨瓜氨酸（citrulline, Cit）对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）导致的小鼠急性肺损伤（acute lung injury, ALI）是否具有保护作用。方法:42只7~9周的C57雄性小鼠，进行2批实验，每批小鼠按完全随机分组法分为3组（每组7只）：正常对照组（Con组）、LPS组和LPS+Cit组。首先对小鼠腹腔注射Cit 900 mg·kg ?1·d ?1（LPS+Cit组）或等容量生理盐水（Con组、LPS组）进行预处理7 d，第8天腹腔注射LPS 10 mg/kg（LPS组、LPS+Cit组）或等容量生理盐水（Con组），LPS干预后6 h麻醉插管检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）中蛋白浓度和细胞数量，测定肺组织湿/干重比（wet/dry weight ratio, W/D），观察肺组织病理改变，Western blot法检测肺组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NOD-like receptor pyrin domain containing 3, NLRP3）炎性体、半胱氨酸蛋白酶-1（cysteine aspartate-specific protease-1, caspase-1）蛋白水平，ELISA法检测肺组织中IL-1β、IL-18水平。 结果:与Con组比较，LPS组BALF中蛋白浓度、细胞数量及肺组织W/D明显升高（ P<0.05），NLRP3、caspase-1蛋白水平及IL-1β、IL-18蛋白含量明显升高（ P<0.05）；与LPS组比较，LPS+Cit组BALF中蛋白浓度、细胞数量及肺组织W/D明显降低（ P<0.05），NLRP3、caspase-1蛋白水平及IL-1β、IL-18蛋白含量明显降低（ P<0.05）。 结论:Cit可能通过抑制NLRP3炎性体激活，降低炎症因子释放，从而发挥对肺损伤的保护作用。

目的:总结河南人群瓜氨酸血症Ⅰ型的发病率及基因变异特点，为瓜氨酸血症Ⅰ型的早期诊断、治疗和遗传咨询提供依据。方法:横断面研究。回顾性分析2016年1月至2022年12月在郑州大学第三附属医院应用串联质谱法完成的河南省814 625例新生儿的遗传代谢病筛查结果。采用二代高通量测序法对瓜氨酸血症Ⅰ型筛查阳性患儿进行 ASS1基因变异分析及父母基因验证。对新检测到的 ASS1基因变异使用罕见外显子组变体集成学习器(REVEL)方法分析表型-基因型相关性，并构建蛋白质三维结构模型进行生物信息学分析。 结果:814 625例新生儿中共确诊8例(1/101 828)瓜氨酸血症Ⅰ型患儿。8例患儿均有特异性瓜氨酸水平增高。基因测序共检出12种变异，均为错义突变，其中包括5种新发现的变异：c.552C>A(p.N184K)、c.140C>T(p.A47V)、c.173A>G(p.K58R)、c.920G>A(p.R307H)和c．790G>A(p.G264S)，其中c.552C>A检出率最高，占18.75%(3/16)。REVEL分析预测这5种变异均为有害性，ASS蛋白三维结构模型显示c.140C>T(p.A47V)和c.920G>A(p.R307H)未发生氨基酸残基间氢键数量的变化，而c.552C>A(p.N184K)、c.173A>G(p.K58R)和c.790G>A(p.G264S)导致氢键减少，可能会影响到ASS蛋白的功能。结论:河南省新生儿瓜氨酸血症Ⅰ型发病率为1/101 828。新发现了5种变异，丰富了人类 ASS1基因变异谱，为瓜氨酸血症Ⅰ型的早期诊断、治疗和遗传学研究提供了重要依据。

目的:评价GSK484对小鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)及中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的影响。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠48只，5~6周龄，体质量15~20 g，采用随机数字表法将小鼠分为4组( n＝12)：自主呼吸组(S组)、自主呼吸+GSK484干预组(SG组)、VILI组(V组)、VILI +GSK484干预组(VG组)。S组及SG组气管插管后自主呼吸4 h；V组及VG组机械通气4 h(潮气量30 ml/kg、呼吸频率75次/min、吸呼比1∶2、呼吸末正压0 mmHg、吸入氧气浓度21%)。于VILI建模前3 d，SG组及VG组腹腔注射GSK484 4 mg/kg，1次/d，S组及V组每天以等容量生理盐水代替。小鼠自主呼吸或机械通气4 h时，采集腹主动脉血样，行血气分析，记录PaO 2；随后处死小鼠，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。确定肺组织湿重/干重比值(W/D)；肺组织HE染色后，光镜下观察病理学结果并行损伤评分；采用ELISA法检测BALF IL-1β、IL-6、TNF-α及髓过氧化物酶(MPO)浓度；采用Western blot法检测肺组织肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及瓜氨酸化组蛋白3(Cit-H3)表达水平。 结果:与S组和SG组比较，V组和VG组肺损伤评分和W/D比值升高，PaO 2降低，BALF IL-1β、IL-6、TNF-α和MPO浓度升高，肺组织PAD4、NE、HMGB1和Cit-H3表达上调( P<0.05)；与V组比较，VG组肺损伤评分和W/D比值降低，PaO 2升高，BALF IL-1β、IL-6、TNF-α和MPO浓度降低，肺组织PAD4、NE、HMGB1和Cit-H3表达下调( P<0.05)。 结论:GSK484可减轻小鼠VILI，机制与抑制PAD4表达，减少NETs产生，减轻肺组织炎症反应有关。

目的:评价高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在肠缺血再灌注小鼠肺损伤中的作用及其与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的关系。方法:SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠24只，体重20～25 g，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、IgY对照抗体组(IgY组)和Anti-HMGB1中和抗体组(Anti-HMGB1组)。采用夹闭肠系膜上动脉1 h后恢复灌注的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。Anti-HMGB1组于缺血1 h后肠道血流恢复即刻腹腔注射Anti-HMGB1中和抗体1.0 mg/kg；IgY组于缺血1 h后肠道血流恢复即刻腹腔注射IgY同型对照抗体1.0 mg/kg。于再灌注4 h时处死小鼠，收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)，测定总蛋白、游离双链DNA(dsDNA)及HMGB1的浓度；取肺组织HE染色后光镜下观察病理学结果，采用Western blot法测定瓜氨酸化组蛋白H3(Cit-H3)表达。 结果:与Sham组比较，I/R组和IgY组肺组织病理学损伤评分、BALF总蛋白、HMGB1和dsDNA浓度升高，Cit-H3表达上调( P<0.05)；与IgY组比较，Anti-HMGB1组肺组织病理学损伤评分、BALF总蛋白、HMGB1和dsDNA浓度降低，肺组织Cit-H3表达下调( P<0.05)。 结论:HMGB1参与了肠缺血再灌注小鼠肺损伤的过程，与介导NETs形成有关。

目的:旨在明确百日咳毒素（PTX）能否促进实验性自身免疫性肌炎（EAM）模型间质性肺疾病（ILD）的发生并探究其潜在的致病机制。方法:构建单用骨骼肌匀浆或骨骼肌匀浆联合PTX诱导的EAM模型，通过组织病理学、血清学研究明确PTX与EAM小鼠ILD表型及中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的关系；健康小鼠单独给予PTX腹腔注射，明确是否能在体内诱发NETs形成，PTX体外干预健康人中性粒细胞明确能否诱发NETs形成。计量资料使用Shapiro-Wilk正态性检验，采用 t检验或单因素方差分析，采用图基事后检验（Tukey）进一步比较组间差异。 结果:与单用骨骼肌匀浆组相比，使用骨骼肌匀浆联合PTX组的EAM模型肺组织有着类似于多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM）相关ILD的多种病理学改变，以非特异型间质性肺炎、普通型间质性肺炎为主要类型；EAM组肺间质伴有明显的NETs浸润；EAM组血清NETs标记物水平明显升高，与对照组[ n=5，（87±10）ng/ml]相比，肌匀浆组[ n=4，（115±27）ng/ml]和EAM组[ n=7，（150±50）ng/ml]循环核酸（cfDNA）水平均升高且差异具有统计学意义（ F=4.24， P=0.038）；与对照组（ n=4，0.13±0.02）相比，肌匀浆组（ n=4，0.24±0.09），EAM组（ n=6，0.33±0.11）的瓜氨酸化组蛋白H3（Cit-H3）-DNA水平升高（ F=6.21， P=0.016）。PTX干预后，PTX组血清cfDNA水平[ n=3，（100±40）ng/ml]高于对照组[ n=3，（45±12）ng/ml， t=2.27， P=0.086]；PTX在体外可诱导中性粒细胞形成NETs。 结论:PTX可能通过诱导NETs形成促进EAM模型ILD的发生，提示EAM小鼠可以作为靶向NETs研究ILD的模型。