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甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1对肝癌细胞增殖和迁移的作用及机制研究
编辑人员丨3天前
目的:探究甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)对肝癌细胞生物学行为的影响及可能分子机制。方法:选取2022年1月10日至10月25日在南通大学附属医院行肝癌切除手术患者的20对新鲜肝癌组织和癌旁(距癌组织3 cm)正常组织标本并分析MASP1的表达情况。收集2012年3月1日至2017年5月20日南通大学附属医院病理科组织标本库中67例肝癌患者的癌组织及对应的癌旁(距癌组织3 cm)正常组织,分析MASP1的表达水平与肝癌患者临床资料的相关性。培养人肝癌细胞系SK-Hep1、Hep3B并构建 MASP1过表达和 MASP1敲减细胞株,设立SK-Hep1阴性对照、SK-Hep1 MASP1过表达组与Hep3B阴性对照和Hep3B MASP1敲减组。通过裸鼠皮下移植瘤实验分析MASP1对肝癌细胞增殖的影响。通过蛋白质印迹法检测MASP1对上皮-间质转化相关蛋白质[神经钙黏素、基质金属蛋白酶9(MMP9)、上皮钙黏素]表达的影响,以及MASP1对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白质的表达及其磷酸化水平的影响。统计学方法采用独立样本 t检验、配对 t检验和卡方检验。 结果:20对新鲜组织标本的免疫组织化学染色结果显示,MASP1在肝癌组织中的表达低于癌旁正常组织(3.73±1.03比6.76±1.46),差异有统计学意义( t=16.97, P<0.001)。67例肝癌患者的临床资料与MASP1的表达水平相关性分析显示,MASP1的表达水平与肿瘤有无侵犯血管有关,差异有统计学意义( χ2=5.20, P=0.023)。裸鼠皮下移植瘤实验显示,SK-Hep1 MASP1过表达组小鼠的皮下肿瘤比SK-Hep1阴性对照组体积更小、重量更轻[(165.42±149.08) mm 3比(260.42±179.78) mm 3、(0.13±0.12) g比(0.18±0.12) g],差异均有统计学意义( t=5.15、3.89,均 P<0.05)。蛋白质印迹法显示,SK-Hep1 MASP1过表达组神经钙黏素和MMP9表达低于SK-Hep1阴性对照组,上皮钙黏素表达高于SK-Hep1阴性对照组(0.73±0.01比1.02±0.02、0.40±0.01比0.69±0.01、0.91±0.02比0.78±0.02),差异均有统计学意义( t=24.23、36.87、9.27,均 P<0.001)。Hep3B MASP1敲减组神经钙黏素和MMP9表达高于Hep3B阴性对照组,上皮钙黏素表达低于Hep3B阴性对照组(1.04±0.01比0.31±0.01、0.54±0.02比0.04±0.01、0.56±0.01比0.93±0.01),差异均有统计学意义( t=163.20、53.16、60.74,均 P<0.001)。SK-Hep1 MASP1过表达组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达低于SK-Hep1阴性对照组(0.59±0.01比1.02±0.01、0.64±0.01比1.12±0.02、0.10±0.01比1.05±0.02),Hep3B MASP1敲减组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达高于Hep3B阴性对照组(0.96±0.01比0.55±0.01、0.99±0.01比0.38±0.01、0.93±0.02比0.06±0.01),差异均有统计学意义( t=40.87、40.91、87.30、44.17、107.50、67.28,均 P<0.001)。 结论:MASP1在肝癌组织中低表达,并且与肝癌患者的不良预后及肿瘤血管侵袭的发生显著相关,其可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖和迁移能力,提示 MASP1有望成为治疗肝癌的关键基因。
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编辑人员丨3天前
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过敏性哮喘基因多态性研究进展
编辑人员丨3天前
过敏性哮喘是以慢性炎症、气道高反应为特征的复杂的、多基因相关的疾病。真菌、尘螨是过敏性哮喘最主要的吸入过敏原,并常以多种过敏原混合形式存在。近年来,遗传学研究证明多个基因与过敏性哮喘发作相关。该文主要对与尘螨、真菌所致过敏性哮喘相关的基因如解整合素-金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloproteinase 33,ADAM33)、白介素4(interleukin-4,IL-4)、糖蛋白A为主的重复序列(glycoprotein A repetitions predominant,GARP)、Toll样受体3 (toll like receptor 3,TLR3)、甘露糖结合凝集素2(mannose-binding lectin 2,MBL2)、趋化因子(CC基序)配体17[chemokine(C-C motif) ligand 17,CCL17]等进行综述。
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编辑人员丨3天前
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Luminex液相芯片技术检测血清MBL在肾移植患者中的应用价值
编辑人员丨3天前
目的:评价Luminex液相芯片磁珠免疫法检测血清甘露糖结合凝集素(MBL)的性能指标,进一步阐明血清MBL检测在肾移植患者中的应用价值。方法:回顾性分析2012年2月至2016年5月北京大学第一医院行肾移植手术的患者110例,同时选择同期体检的表观健康人群50名作为正常对照。与传统的ELISA方法比较,评价Luminex磁珠免疫法进行血清MBL检测的精密度、线性范围,同时比较两种方法的相关性。基于Luminex磁珠免疫法检测110例肾移植患者移植前血清MBL,评估不同水平MBL分组肾移植患者移植后发生感染和临床排异事件的频率,采用SPSS 19.0和MedCalc12.7.0进行统计学分析。结果:Luminex液相芯片磁珠免疫测定法检测血清MBL重复性精密度≤7.15%,日间精密度≤8.44%,线性范围为0.05~11 233.00 μg/L;ELISA方法检测血清MBL的线性范围为3.20~4 202.70 μg/L。Luminex液相芯片磁珠免疫法检测MBL线性范围较宽。相关性分析显示两种方法检测血清MBL具有较好的相关性,回归方程为 Y=1.248 6 X+231.81,相关系数 r=0.978( P<0.01);采用Bland-Altman差异分析法显示Luminex方法的测定值高于ELISA方法,平均偏差百分比为37.4%(95 %CI 33.7%~41.1%)。检测110例肾移植患者移植前血清MBL中位数(四分位数)为4 164.0(2 124.0,7 064.5)μg/L,将肾移植患者以血清MBL<4 164.0 μg/L为中/低水平组,以血清MBL≥4 164.0 μg/L为高水平分组进行比较,血清MBL中/低水平组移植后感染的发生率为47.4%(27/57),高水平组移植后感染的发生率为28.3%(15/53),两组间差异具有统计学意义,χ 2=4.230, P<0.05;血清MBL中/低水平组移植后排异事件的发生率为43.9%(25/57),高水平组移植后排异事件的发生率为20.8%(11/53),两组间差异具有统计学意义,χ 2=6.659, P<0.05。 结论:Luminex液相芯片磁珠免疫法检测血清MBL线性范围宽,方法学性能优于ELISA方法。肾移植患者在移植前检测血清MBL水平,对于移植后感染和排异事件的预测具有重要价值。
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编辑人员丨3天前
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肝脏免疫调控蛋白LSECtin-CRD突变体可溶性表达及其活性分析
编辑人员丨3天前
目的:构建肝脏及淋巴结窦内皮细胞C型凝集素糖基识别结构域(LSECtin-CRD)双半胱氨酸(Cys)突变体原核表达载体,获得LSECtin-CRD突变体蛋白,并鉴定其生物学活性。方法:基于LSECtin-CRD的三维结构模型选择突变位点;通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对LSECtin-CRD基因引入Cys点突变,构建pET28b-Tat-LSECtin-CRD突变体载体;IPTG诱导可溶性表达LSECtin-CRD突变体蛋白,SDS-PAGE鉴定蛋白质表达水平;亲和层析方法对突变体蛋白进行纯化;通过检测突变体蛋白的甘露糖和GlcNAc结合能力鉴定其生物活性。结果:菌液PCR和测序结果表明LSECtin-CRD双Cys突变体G205C-A227C和G205C-D279C原核表达载体构建成功,SDS-PAGE结果显示两个突变体蛋白均实现高效可溶性表达,单糖结合试验结果显示两个突变体蛋白均具有良好的生物学活性。结论:本研究获得了具有生物学活性的LSECtin-CRD双Cys突变体蛋白,为进一步研究LSECtin-CRD结构和功能关系提供实验依据。
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编辑人员丨3天前
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基因多态性与新生儿败血症的遗传易感性研究进展
编辑人员丨3周前
新生儿败血症是常见的感染性疾病,病情严重,病死率高.其发病机制复杂,缺乏特异性表现,培养阳性率低,早期诊断和个体化治疗仍然是临床医生面临的挑战.对双胞胎的流行病学研究表明,遗传因素与新生儿败血症存在关联.基因多态性与其易感性、病情发展和预后密切相关.该文就新生儿败血症相关的白细胞介素、肿瘤坏死因子、Toll样受体、NOD样受体、CD14、髓系细胞触发受体1、甘露糖结合凝集素和其他免疫蛋白基因多态性进行综述,以期促进该疾病的精准医疗.
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编辑人员丨3周前
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润肺膏联合氨溴特罗治疗儿童慢性支气管炎急性发作期的临床研究
编辑人员丨1个月前
目的 探讨润肺膏联合氨溴特罗口服溶液治疗儿童支气管炎的临床疗效.方法 选取石家庄市妇幼保健院在 2021年 2 月—2024 年 1 月收治的 120 例慢性支气管炎急性发作期患儿,按随机数字表法将所有患儿分为对照组和治疗组,每组各 60 例.对照组口服氨溴特罗口服液,2~3 岁7.5 mL/次,4~5 岁 10 mL/次,6~12 岁 15 mL/次,12 岁以上 20 mL/次,2次/d.治疗组在对照组基础上开水冲服润肺膏,15 g/次,2次/d.两组持续治疗 7 d.比较两组的临床疗效、症状缓解时间、通气功能指标和血清炎症指标.结果 治疗后,治疗组的总有效率(95.00%)明显高于对照组的总有效率(83.33%),差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,治疗组患儿发热、日间咳嗽、夜间咳嗽、喘息、肺啰音缓解时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组的呼吸频率(BF)、吸气/呼气时间比(TI/TE)低于治疗前,潮气量(VT)高于治疗前(P<0.05);治疗组的BF、TI/TE低于对照组,VT高于对照组(P<0.05).治疗后,两组的血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平低于治疗前,血清甘露糖结合凝集素(MBL)水平高于治疗前(P<0.05);治疗组的血清hs-CRP、TNF-α水平低于对照组,血清MBL水平高于对照组(P<0.05).结论 润肺膏联合氨溴特罗口服溶液提高了儿童支气管炎的临床疗效,改善了临床症状和肺通气功能,减轻了炎症反应.
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编辑人员丨1个月前
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MIF和MBL2基因多态性与双相情感障碍患者自杀未遂的关联
编辑人员丨2024/7/6
目的 探讨巨噬细胞抑制因子(MIF)和甘露糖结合凝集素 2(MBL2)基因多态性与双相情感障碍(BD)患者自杀未遂的关系.方法 选取 321 例BD患者作为研究对象,依据自杀未遂定义分为BD伴自杀未遂组 120 例,BD不伴自杀未遂组 201 例.采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性技术检测MIF和MBL2 基因多态性.通过计算比值比(OR)和95%置信区间(95%CI)评估MIF、MBL2 基因多态性与BD患者自杀未遂的关联性,采用Logistic回归分析探讨多态性位点基因型与 BD 易感性的关系.结果 两组 MIF、MBL2 各基因型分布频率比较,差异存在统计学意义(P<0.001).BD伴自杀未遂组MIF、MBL2 A等位基因频率高于BD不伴自杀未遂组,MIF G等位基因、MBL2 T等位基因频率低于BD不伴自杀未遂组(P<0.05).MIF AA基因型、MBL2 A等位基因频率为BD患者自杀未遂发生的危险因素(P<0.05).结论 MIFAA基因型、MBL2 A等位基因频率与BD患者自杀未遂具有一定相关性.
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编辑人员丨2024/7/6
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维持性血液透析患者血清Irisin、MBL与炎症因子和动静脉内瘘血栓形成的关系研究
编辑人员丨2024/4/27
目的:探讨维持性血液透析(MHD)患者血清鸢尾素(Irisin)、甘露糖结合凝集素(MBL)与炎症因子和动静脉内瘘(AVF)血栓形成的关系.方法:选取2021年1月~2022年10月石家庄市人民医院收治的125例MHD患者为MHD组,根据是否合并血栓形成分为血栓形成组41例和无血栓形成组84例,另选取我院同期85名体检健康者为对照组.采用酶联免疫吸附法检测血清Irisin、MBL和炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平.通过Spearman相关性分析MHD患者血清Irisin、MBL与炎症因子水平的相关性,多因素Logistic回归分析MHD患者AVF血栓形成的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Irisin、MBL对MHD患者AVF血栓形成的预测效能.结果:与对照组比较,MHD组血清Irisin水平降低,MBL、IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05).Spearman相关性分析显示,MHD患者血清Irisin与IL-1β、IL-6、TNF-α水平呈负相关,MBL与IL-1β、IL-6、TNF-α水平呈正相关(P<0.05).多因素Logistic回归分析显示,透析龄延长和血小板计数、D-二聚体、TNF-α、MBL升高为MHD患者AVF血栓形成的独立危险因素,Irisin升高为独立保护因素(P<0.05).ROC曲线分析显示,血清Irisin、MBL联合预测MHD患者AVF血栓形成的曲线下面积(AUC)为0.826,大于单一指标预测.结论:MHD患者血清Irisin水平降低和MBL升高,与炎症因子升高和AVF血栓形成有关,血清Irisin、MBL联合对MHD患者AVF血栓形成的预测效能较高.
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编辑人员丨2024/4/27
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基于LC-MS的结直肠癌瘀毒内阻证与气血两虚证患者的血清代谢组学研究
编辑人员丨2024/4/27
目的 探讨瘀毒内阻证和气血两虚证结直肠癌患者血清代谢物差异.方法 纳入30例结直肠癌患者,分为瘀毒内阻证组(n=17)和气血两虚证组(n=13).采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术检测血清代谢谱,使用主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)和正交-偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)进行多元统计分析,并结合受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),计算ROC曲线下面积(area under curve,AUC)值,进一步评估代谢物对证型诊断的敏感度和特异度,对差异代谢物进行层次聚类分析得到热图并通过京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)数据库寻找出共同富集的代谢通路.结果 筛选出差异代谢物13种,其中5种显著上调,8种显著下调,其中有2种差异代谢物AUC值大于0.9,除此之外,还有6种差异代谢物AUC值大于0.8.4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-D-甘露聚糖、红豆碱、甘露糖、肌苷为气血两虚证敏感代谢物,2-羟基琥珀酸为瘀毒内阻证敏感代谢物.两组的差异代谢物主要富集的信号通路有3个,分别为半乳糖代谢(Galactose metabolism)通路、溶酶体(Lyso-some)通路及C型凝集素受体信号通路(C-type lectin receptor signaling pathway).结论 结直肠癌瘀毒内阻证、气血两虚证患者的代谢物存在显著差异,为结直肠癌患者准确、客观的综合征分化和中医治疗提供了可能.
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编辑人员丨2024/4/27
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补体凝集素与呼吸系统疾病
编辑人员丨2024/4/27
补体凝集素途径是补体系统激活的一种途径,纤维胶凝蛋白(ficolin)与甘露糖结合凝集(MBL)是激活免疫补体途径的一类起始物,两者结构及功能极其相似,可通过识别病原表面的某些物质,激活补体,加强调理吞噬作用或直接杀灭和溶解相关病原,从而在免疫系统中尤其在抗感染方面发挥重要作用.呼吸系统疾病多以感染性疾病为主.近年来,也有相关研究报道ficolin/MBL与众多其他呼吸系统疾病具有相关性,本文就ficolin/MBL与呼吸系统疾病的相关研究进行综述,以期为相关研究提供理论支撑.
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编辑人员丨2024/4/27
