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甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1对肝癌细胞增殖和迁移的作用及机制研究
编辑人员丨3天前
目的:探究甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)对肝癌细胞生物学行为的影响及可能分子机制。方法:选取2022年1月10日至10月25日在南通大学附属医院行肝癌切除手术患者的20对新鲜肝癌组织和癌旁(距癌组织3 cm)正常组织标本并分析MASP1的表达情况。收集2012年3月1日至2017年5月20日南通大学附属医院病理科组织标本库中67例肝癌患者的癌组织及对应的癌旁(距癌组织3 cm)正常组织,分析MASP1的表达水平与肝癌患者临床资料的相关性。培养人肝癌细胞系SK-Hep1、Hep3B并构建 MASP1过表达和 MASP1敲减细胞株,设立SK-Hep1阴性对照、SK-Hep1 MASP1过表达组与Hep3B阴性对照和Hep3B MASP1敲减组。通过裸鼠皮下移植瘤实验分析MASP1对肝癌细胞增殖的影响。通过蛋白质印迹法检测MASP1对上皮-间质转化相关蛋白质[神经钙黏素、基质金属蛋白酶9(MMP9)、上皮钙黏素]表达的影响,以及MASP1对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白质的表达及其磷酸化水平的影响。统计学方法采用独立样本 t检验、配对 t检验和卡方检验。 结果:20对新鲜组织标本的免疫组织化学染色结果显示,MASP1在肝癌组织中的表达低于癌旁正常组织(3.73±1.03比6.76±1.46),差异有统计学意义( t=16.97, P<0.001)。67例肝癌患者的临床资料与MASP1的表达水平相关性分析显示,MASP1的表达水平与肿瘤有无侵犯血管有关,差异有统计学意义( χ2=5.20, P=0.023)。裸鼠皮下移植瘤实验显示,SK-Hep1 MASP1过表达组小鼠的皮下肿瘤比SK-Hep1阴性对照组体积更小、重量更轻[(165.42±149.08) mm 3比(260.42±179.78) mm 3、(0.13±0.12) g比(0.18±0.12) g],差异均有统计学意义( t=5.15、3.89,均 P<0.05)。蛋白质印迹法显示,SK-Hep1 MASP1过表达组神经钙黏素和MMP9表达低于SK-Hep1阴性对照组,上皮钙黏素表达高于SK-Hep1阴性对照组(0.73±0.01比1.02±0.02、0.40±0.01比0.69±0.01、0.91±0.02比0.78±0.02),差异均有统计学意义( t=24.23、36.87、9.27,均 P<0.001)。Hep3B MASP1敲减组神经钙黏素和MMP9表达高于Hep3B阴性对照组,上皮钙黏素表达低于Hep3B阴性对照组(1.04±0.01比0.31±0.01、0.54±0.02比0.04±0.01、0.56±0.01比0.93±0.01),差异均有统计学意义( t=163.20、53.16、60.74,均 P<0.001)。SK-Hep1 MASP1过表达组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达低于SK-Hep1阴性对照组(0.59±0.01比1.02±0.01、0.64±0.01比1.12±0.02、0.10±0.01比1.05±0.02),Hep3B MASP1敲减组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达高于Hep3B阴性对照组(0.96±0.01比0.55±0.01、0.99±0.01比0.38±0.01、0.93±0.02比0.06±0.01),差异均有统计学意义( t=40.87、40.91、87.30、44.17、107.50、67.28,均 P<0.001)。 结论:MASP1在肝癌组织中低表达,并且与肝癌患者的不良预后及肿瘤血管侵袭的发生显著相关,其可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖和迁移能力,提示 MASP1有望成为治疗肝癌的关键基因。
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编辑人员丨3天前
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过敏性哮喘基因多态性研究进展
编辑人员丨3天前
过敏性哮喘是以慢性炎症、气道高反应为特征的复杂的、多基因相关的疾病。真菌、尘螨是过敏性哮喘最主要的吸入过敏原,并常以多种过敏原混合形式存在。近年来,遗传学研究证明多个基因与过敏性哮喘发作相关。该文主要对与尘螨、真菌所致过敏性哮喘相关的基因如解整合素-金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloproteinase 33,ADAM33)、白介素4(interleukin-4,IL-4)、糖蛋白A为主的重复序列(glycoprotein A repetitions predominant,GARP)、Toll样受体3 (toll like receptor 3,TLR3)、甘露糖结合凝集素2(mannose-binding lectin 2,MBL2)、趋化因子(CC基序)配体17[chemokine(C-C motif) ligand 17,CCL17]等进行综述。
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编辑人员丨3天前
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Luminex液相芯片技术检测血清MBL在肾移植患者中的应用价值
编辑人员丨3天前
目的:评价Luminex液相芯片磁珠免疫法检测血清甘露糖结合凝集素(MBL)的性能指标,进一步阐明血清MBL检测在肾移植患者中的应用价值。方法:回顾性分析2012年2月至2016年5月北京大学第一医院行肾移植手术的患者110例,同时选择同期体检的表观健康人群50名作为正常对照。与传统的ELISA方法比较,评价Luminex磁珠免疫法进行血清MBL检测的精密度、线性范围,同时比较两种方法的相关性。基于Luminex磁珠免疫法检测110例肾移植患者移植前血清MBL,评估不同水平MBL分组肾移植患者移植后发生感染和临床排异事件的频率,采用SPSS 19.0和MedCalc12.7.0进行统计学分析。结果:Luminex液相芯片磁珠免疫测定法检测血清MBL重复性精密度≤7.15%,日间精密度≤8.44%,线性范围为0.05~11 233.00 μg/L;ELISA方法检测血清MBL的线性范围为3.20~4 202.70 μg/L。Luminex液相芯片磁珠免疫法检测MBL线性范围较宽。相关性分析显示两种方法检测血清MBL具有较好的相关性,回归方程为 Y=1.248 6 X+231.81,相关系数 r=0.978( P<0.01);采用Bland-Altman差异分析法显示Luminex方法的测定值高于ELISA方法,平均偏差百分比为37.4%(95 %CI 33.7%~41.1%)。检测110例肾移植患者移植前血清MBL中位数(四分位数)为4 164.0(2 124.0,7 064.5)μg/L,将肾移植患者以血清MBL<4 164.0 μg/L为中/低水平组,以血清MBL≥4 164.0 μg/L为高水平分组进行比较,血清MBL中/低水平组移植后感染的发生率为47.4%(27/57),高水平组移植后感染的发生率为28.3%(15/53),两组间差异具有统计学意义,χ 2=4.230, P<0.05;血清MBL中/低水平组移植后排异事件的发生率为43.9%(25/57),高水平组移植后排异事件的发生率为20.8%(11/53),两组间差异具有统计学意义,χ 2=6.659, P<0.05。 结论:Luminex液相芯片磁珠免疫法检测血清MBL线性范围宽,方法学性能优于ELISA方法。肾移植患者在移植前检测血清MBL水平,对于移植后感染和排异事件的预测具有重要价值。
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编辑人员丨3天前
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润肺膏联合氨溴特罗治疗儿童慢性支气管炎急性发作期的临床研究
编辑人员丨1个月前
目的 探讨润肺膏联合氨溴特罗口服溶液治疗儿童支气管炎的临床疗效.方法 选取石家庄市妇幼保健院在 2021年 2 月—2024 年 1 月收治的 120 例慢性支气管炎急性发作期患儿,按随机数字表法将所有患儿分为对照组和治疗组,每组各 60 例.对照组口服氨溴特罗口服液,2~3 岁7.5 mL/次,4~5 岁 10 mL/次,6~12 岁 15 mL/次,12 岁以上 20 mL/次,2次/d.治疗组在对照组基础上开水冲服润肺膏,15 g/次,2次/d.两组持续治疗 7 d.比较两组的临床疗效、症状缓解时间、通气功能指标和血清炎症指标.结果 治疗后,治疗组的总有效率(95.00%)明显高于对照组的总有效率(83.33%),差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,治疗组患儿发热、日间咳嗽、夜间咳嗽、喘息、肺啰音缓解时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组的呼吸频率(BF)、吸气/呼气时间比(TI/TE)低于治疗前,潮气量(VT)高于治疗前(P<0.05);治疗组的BF、TI/TE低于对照组,VT高于对照组(P<0.05).治疗后,两组的血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平低于治疗前,血清甘露糖结合凝集素(MBL)水平高于治疗前(P<0.05);治疗组的血清hs-CRP、TNF-α水平低于对照组,血清MBL水平高于对照组(P<0.05).结论 润肺膏联合氨溴特罗口服溶液提高了儿童支气管炎的临床疗效,改善了临床症状和肺通气功能,减轻了炎症反应.
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编辑人员丨1个月前
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MIF和MBL2基因多态性与双相情感障碍患者自杀未遂的关联
编辑人员丨2024/7/6
目的 探讨巨噬细胞抑制因子(MIF)和甘露糖结合凝集素 2(MBL2)基因多态性与双相情感障碍(BD)患者自杀未遂的关系.方法 选取 321 例BD患者作为研究对象,依据自杀未遂定义分为BD伴自杀未遂组 120 例,BD不伴自杀未遂组 201 例.采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性技术检测MIF和MBL2 基因多态性.通过计算比值比(OR)和95%置信区间(95%CI)评估MIF、MBL2 基因多态性与BD患者自杀未遂的关联性,采用Logistic回归分析探讨多态性位点基因型与 BD 易感性的关系.结果 两组 MIF、MBL2 各基因型分布频率比较,差异存在统计学意义(P<0.001).BD伴自杀未遂组MIF、MBL2 A等位基因频率高于BD不伴自杀未遂组,MIF G等位基因、MBL2 T等位基因频率低于BD不伴自杀未遂组(P<0.05).MIF AA基因型、MBL2 A等位基因频率为BD患者自杀未遂发生的危险因素(P<0.05).结论 MIFAA基因型、MBL2 A等位基因频率与BD患者自杀未遂具有一定相关性.
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编辑人员丨2024/7/6
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基于LC-MS的结直肠癌瘀毒内阻证与气血两虚证患者的血清代谢组学研究
编辑人员丨2024/4/27
目的 探讨瘀毒内阻证和气血两虚证结直肠癌患者血清代谢物差异.方法 纳入30例结直肠癌患者,分为瘀毒内阻证组(n=17)和气血两虚证组(n=13).采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术检测血清代谢谱,使用主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)和正交-偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)进行多元统计分析,并结合受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),计算ROC曲线下面积(area under curve,AUC)值,进一步评估代谢物对证型诊断的敏感度和特异度,对差异代谢物进行层次聚类分析得到热图并通过京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)数据库寻找出共同富集的代谢通路.结果 筛选出差异代谢物13种,其中5种显著上调,8种显著下调,其中有2种差异代谢物AUC值大于0.9,除此之外,还有6种差异代谢物AUC值大于0.8.4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-D-甘露聚糖、红豆碱、甘露糖、肌苷为气血两虚证敏感代谢物,2-羟基琥珀酸为瘀毒内阻证敏感代谢物.两组的差异代谢物主要富集的信号通路有3个,分别为半乳糖代谢(Galactose metabolism)通路、溶酶体(Lyso-some)通路及C型凝集素受体信号通路(C-type lectin receptor signaling pathway).结论 结直肠癌瘀毒内阻证、气血两虚证患者的代谢物存在显著差异,为结直肠癌患者准确、客观的综合征分化和中医治疗提供了可能.
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编辑人员丨2024/4/27
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18种中药多糖与Siglec-9的亲和力测试及其抗炎作用研究
编辑人员丨2024/4/27
目的 比较18种中药多糖与唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin,Siglec-9)的亲和力以及抗炎能力,探讨中药多糖发挥抗炎作用的新机制.方法 选择18种不同药性的中药用水提醇沉法提取多糖,苯酚硫酸法检测多糖含量,高效液相色谱法检测多糖的单糖组成,红外光谱法检测中药多糖结构.通过竞争性ELISA法检测多糖与Siglec-9的亲和力,并研究中药多糖对LPS诱导巨噬细胞炎症反应以及R848诱导中性粒细胞NETosis的影响,利用髓系细胞特异性敲除Siglec-E(Lyz2-cre:Siglec-E flox/flox)小鼠来源的原代巨噬细胞和腹腔中性粒细胞进一步明确多糖结合Siglec-9产生抗炎作用的机制.结果 中药多糖的糖含量均在55%以上,主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等组成,但单糖构成比各不相同.红外光谱检测4种代表性中药多糖均有典型的多糖吸收峰,柴胡和蒲公英多糖具有葡萄糖醛酸结构.枸杞和黄芪多糖与Siglec-9的亲和力,对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应和R848诱导的中性粒细胞NETosis反应无显著抑制作用.柴胡和蒲公英多糖与Siglec-9亲和力较强(P<0.01),能够显著抑制上述炎症反应,但其抗炎作用在髓系细胞特异性敲除Siglec-E基因小鼠来源的巨噬细胞和中性粒细胞中消失.结论 中药多糖与Siglec-9的亲和力有潜力成为研究中药抗炎作用的新的现代药理学机制.
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编辑人员丨2024/4/27
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LMAN2在HR阳性乳腺癌组织中的表达与患者预后的关系及其对MCF-7细胞增殖和迁移的影响
编辑人员丨2024/3/2
目的:探究甘露糖结合凝集素2(LMAN2)在激素受体(HR)阳性乳腺癌组织中的表达水平与乳腺癌患者预后的关系及其对MCF-7 细胞增殖和迁移的影响.方法:通过TCGA、Bc-GenExMiner、GEPIA和Kaplan-Meier Plotter数据库分析LMAN2在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的差异性表达及其与患者预后的关系.采用小RNA干扰技术将si-LMAN2#1、si-LMAN2#2及si-NC转染至MCF-7细胞,将过表达LMAN载体(pc-LMAN)及空载体pcDNA3.1阴性对照(pc-NC)转染至MCF-7细胞,实验分为si-LMAN2#1、si-LMAN2#2、si-NC、pc-LMAN2和pc-NC组.通过qPCR和WB实验检测各组细胞中LMAN2 mRNA和蛋白的表达水平,CCK-8、克隆形成、Transwell迁移、WB等实验检测敲低和过表达LMAN 2对MCF-7细胞增殖、克隆形成、迁移及AKT信号通路相关蛋白表达的影响.结果:LMAN2在乳腺癌组织中的表达水平显著高于正常乳腺组织(P<0.001).HR阳性乳腺癌组织中LMAN2表达水平显著高于HR阴性乳腺癌组织(P<0.001);LMAN2高表达与HR阳性乳腺癌患者不良预后有关联.敲低LMAN2可显著降低MCF-7细胞的增殖和迁移能力(P<0.01或P<0.001),过表达LMAN2可显著提高MCF-7细胞的增殖和迁移能力(均P<0.001).敲低LMAN2组MCF-7细胞中PTEN和P21蛋白表达水平均显著升高,p-AKT蛋白表达水平显著降低(均P<0.01).结论:LMAN2在乳腺癌组织和HR阳性乳腺癌组织中高表达,且与不良预后有关联.LMAN2高表达与MCF-7细胞增殖和迁移有关联,其作用机制可能涉及AKT信号通路.
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编辑人员丨2024/3/2
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MBL2作为男性肝癌患者预后标志物的分析与验证
编辑人员丨2023/8/19
目的 探究甘露糖结合凝集素 2(MBL2)基因表达对肝细胞癌(HCC)细胞系增殖和预后的影响.方法 采用生物信息学方法分析MBL2 在不同性别HCC患者中的表达及其对HCC患者预后的影响.利用qRT-PCR和Western blot检测基因的mRNA和蛋白表达水平.MTT实验和细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力;采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的变化.基因集富集分析(GSEA)筛选MBL2 富集的相关信号通路.结果 生物信息学分析和qRT-PCR结果显示,MBL2 在男性HCC患者中的表达高于女性患者,并且与HCC患者预后相关;与对照组比较,MBL2 过表达后Huh7 细胞和MHCC-97H细胞的活力和克隆形成率下降,细胞周期转化受阻,细胞凋亡数增加;GSEA和Western blot结果表明,MBL2 富集在细胞周期信号通路上,过表达MBL2 能够抑制CDK4 蛋白表达,促进P16 和BAX蛋白表达.结论MBL2 在HCC组织中表达下调,与男性HCC患者预后相关,并且参与细胞增殖过程.MBL2 可能是男性HCC患者治疗的潜在靶点.
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编辑人员丨2023/8/19
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肝细胞肝癌患者血浆中甘露聚糖结合凝集素和甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2的表达水平
编辑人员丨2023/8/6
目的 检测肝细胞肝癌患者血浆中甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)的表达水平,探讨其与肝细胞肝癌发生发展的相关性.方法 用酶联免疫吸附测定方法检测64例肝细胞肝癌患者及30例健康人血浆中MBL及MASP-2的表达水平,并用统计学方法分析患者血浆中MBL及MASP-2的浓度与各临床指标的相关性.结果 肝细胞肝癌患者血浆中MBL和MASP-2的浓度均显著高于健康人群(P=0.014、0.002),MBL/MASP-2比值在健康人群与肝细胞肝癌患者中的差异无统计学意义,此外,患者血浆中MBL与MASP-2并无相关性.在肝细胞肝癌患者中,血浆MBL水平与肿瘤的血管侵犯(r=0.253,P=0.047)和总胆红素水平(r=0.283,P=0.024)呈正相关;血浆中MASP-2水平与肝细胞肝癌的TNM分期呈正相关(r=0.276,P=0.027),而与血浆白蛋白呈负相关(r=0.-0.317,P=0.015).经ROC曲线分析,MBL和MASP-2曲线下面积分别为0.665(P=0.010)和0.694(P=0.003),对肝细胞肝癌诊断的敏感性分别为50%和89.1%.结论 补体凝集素途径的关键分子MBL、MASP-2与肝细胞肝癌患者的炎症状态和疾病进展相关,参与了肝癌的发生与发展.
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编辑人员丨2023/8/6
