环状RNA (circular RNA，circRNA)是一类大量存在于真核、细菌、病毒及类病毒等生物中的单链闭合环状RNA。环状RNA虽然与线性RNA具有相同的一级结构但不易受核糖核酸酶R(ribonuclease R，RNase R)降解。环状RNA在生物体内高度稳定，具有组织、细胞类型、发育特异性，且已被证明可在肿瘤、心血管等疾病中作为诊断标志物。近年来，环状RNA在法医学领域中成了研究热点。本文对环状RNA的结构功能进行简单总结，并重点在法医学领域的研究及应用新进展，包括年龄推断、多种体液鉴定、法医精神病鉴定、法医毒物分析、死亡间隔时间和死亡原因推断等方面进行综述。

1 案例资料1.1 案情简况[案例 1]王某将汽车停在某停车场,晚上去开车的时候发现车内钱包里的 2 000 元人民币被盗,钱包被翻动.

目的 研究泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响.方法 泥浆悬液和稀释血混合,制成混有灰尘、泥土的生物样本以模拟现场生物物证,分别用加热裂解和胍盐化学裂解的方式进行细胞裂解,硅珠法提取DNA后用Identifiler Plus试剂盒进行PCR扩增及毛细管电泳检测,并对电泳结果进行比较;用泥浆悬液代替硅珠提取稀释血DNA,反向验证泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响.结果 混有泥浆悬液的4μL、20 μL稀释血加热裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 969.7±376.9 RFU、9 706.7±349.8 RFU;混有泥浆悬液的4 μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后无法获得完整STR分型;混有泥浆悬液的20 μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 899.8±801.3 RFU;泥浆悬液代替硅珠提取20 μL稀释血得到完整STR分型.结论 泥土中的二氧化硅在胍盐存在条件下会与DNA结合,导致硅珠法提取现场生物物证DNA的回收效率降低.

目的 通过对细菌16S rRNA基因全长的测序分析,探究利用人类皮肤及口腔微生物推断个体地理位置来源的可能性.方法 提取上海和内蒙古赤峰两地汉族人群手掌及口腔微生物DNA,通过16S rRNA基因全长测序,分析两地人群微生物群组成和多样性情况,随后筛选差异性物种并构建地理位置预测模型.结果 上海与赤峰两地汉族人群手掌侧皮肤及口腔微生物的组成结构均不相同.对于手掌侧皮肤微生物,赤峰样本的丰富度和均匀度均高于上海样本,而口腔微生物的差异则不显著.置换多元方差分析(permutational multivariate analysis of variance,PERMANOVA)证实两地样本的β多样性差异具有统计学意义,皮肤样本与口腔样本的决定系数(R2)分别为0.129和0.102.通过主坐标分析(principal co-ordinates analysis,PCoA)可以对两地样本进行初步区分.预测模型利用皮肤和口腔样本对地理来源进行预测的准确率分别为0.90和0.83.结论 上海和赤峰两地汉族人群手掌侧皮肤和口腔微生物的结构均存在差异,利用随机森林算法构建的预测模型可以对来自以上两地的未知个体进行溯源.

目的 建立依赖切口酶Nt.BstNBI的等温全基因组扩增体系,并对该体系的微量生物物证STR分型效能进行验证.方法 选用切口酶Nt.BstNBI(识别序列为GAGTC)和等温扩增的聚合酶Bst,建立切口酶依赖的扩增体系(NDA).对DNA样本进行NDA并纯化NDA产物,对NDA前后的样本进行复合扩增和毛细管电泳,检测该方法 的有效性、灵敏性.结果 007标准品12个常染色体基因座的扩增效率提高2倍以上,灵敏度约为3 pg/μL;19个Y染色体个基因座的扩增效率提高 2 倍以上,灵敏度约为 6 pg/μL.8 个人血样本扩增效率提高 2 倍以上的常染色体基因座与 007 标准品一致.结论 本文建立的NDA体系准确性好,能够对包含特定侧翼序列的STR基因座进行有效的线性扩增,对法医微量生物物证的高效扩增检测具有重要意义.

混合斑组成复杂,长期以来是法医物证研究的难题之一.混合斑主要分为两类:一是性侵害案件中大量女性阴道上皮细胞混合少量精子;二是普通来源的生物检材之间的混合,如血-血、唾液-血液混合等.近些年来,对混合斑的研究日渐深入,技术层面或理论分析都更加客观和多元化.针对第一类混合斑,出现了荧光/磁性激活、显微操纵、声波差异分离法等分离精子的新技术;第二类混合斑是研究的难点,近年来大规模平行测序、液滴微流控技术、乳液PCR(ePCR)、全基因组扩增等技术的出现,提高了次要成分的检出机率.此外,遗传标记也有相应的发展,传统遗传标记常染色体STR、Y-STR、SNP等检测位点越来越丰富,新兴遗传标记DIP、DIP-STR、SNP-STR、mtDNA-SNP、微单倍型等在混合斑研究中发挥的作用初步显露出来.文章最后涉及混合斑分析理论和计算软件的最新发展.

目的 初探环氧乙烷消杀DNA污染的效果.方法 收集98例分别含有唾液、皮屑、汗斑、毛发、血斑、肋软骨的法医物证样本,分两组进行环氧乙烷灭菌6h和8h,提取DNA后扩增,使用3130XL或3500XL测序仪检测进行STR分型.结果 EO 6h 组44例样本中有2例口腔拭子检出阳性结果,EO 8h 组54例样本中有1例毛发检出阳性结果,阳性样本STR图谱表明仅有少量DNA残留,其余生物样本未检测到STR图谱.结论 环氧乙烷能有效消杀DNA污染,可适用于DNA检验耗材的灭菌.

就现场提取的生物检材而言,我们除了需要准确获得DNA STR分型进行个体识别和亲子鉴定,还希望能够通过技术手段获知其遗留时间、空间定位等更多信息.本文以血迹为主要研究对象,就国内外采用光学、细胞生物学、分子生物学等方法推断生物斑迹遗留时间进行总结,并对法医微生物学这一法庭科学新领域在时空线索推断中的应用做以介绍,为现场生物斑迹遗留时间推断研究提供参考.

自DNA指纹技术应用于司法实践的报道以来,法医DNA分析发挥着越来越重要的作用.近年来,随着基因组学高通量测序技术的快速发展,生物信息学分析手段也逐渐开始与法医学应用结合,极大地扩展了法医物证的分析能力.本文综合阐述了法医遗传学所涉及的基因组、表观组以及转录组生物信息分析相关研究现状以及发展趋势.

目的 统计分析1574例盗窃案件中提取的2496个现场生物检材,为提高DNA在盗窃案件侦破中的应用成效提供参考.方法 根据2496个生物检材的类型、现场提取方法、重点提取部位、DNA检测结果等进行统计和分析比较,总结常见类型盗窃案件现场生物检材的主要发现提取部位以及不同方法提取的现场生物检材DNA检出率.结果 接触类检材已成为盗窃案件最多见的生物检材类型,但检出率仍然较低,对混合分型应进一步分析筛选以提高DNA的认定率;不同方法提取的现场生物检材在DNA检出率方面存在统计学差异,接触类生物检材以植绒拭子和原物提取的方式为首选;现场生物检材的主要发现提取部位根据盗窃案件的类型不同有所侧重.结论现场勘查人员在盗窃案件中发现和提取到有价值的生物检材是提高DNA检出认定能力的关键因素,应着力培养现场勘查人员的微量生物物证意识,提高现场勘查人员提取和处理微量生物检材的能力.