目的:对2例罕见超数小标记染色体(sSMC)患者进行细胞分子水平的遗传学分析，为携带者夫妇的遗传咨询和生育指导提供借鉴。方法:选取2018年10月31日和2021年5月10日于中信湘雅生殖与遗传专科医院进行生殖与遗传咨询的不孕不育患者2例为研究对象。应用常规G显带、荧光原位杂交(FISH)和基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)确定sSMC的来源，应用显微切割结合高通量全基因组测序(MicroSeq)精准分析sSMC的常染色质片段大小和基因组信息。结果:患者1的G显带和FISH结果提示其核型为mos 47，XY，del(16)(p10p12)，＋mar[65]/46，XY，del(16)(p10p12)[6]/ 48，XY，del(16)(p10p12)，＋2mar[3].ish mar(Tel 16p-，Tel 16q-，CEP 16-，WCP 16＋)，基因组CNV-seq结果为arr[GRCh37]16p12.1p11.2(24999364_33597595)×1[0.25]，MicroSeq结果显示该sSMC来源于16p12.1p11.2(24979733-34023115 bp)。患者2的G显带和反向FISH结果提示其核型为mos 47，XX，＋mar[37]/46，XX[23].rev ish CEN5，基因组CNV-seq结果为seq[GRCh37] dup(5)(p12q11.2)chr5：g(45120001_56000000)dup[0.8]，MicroSeq结果显示该sSMC来源于5p12-q11.2(45132364-55967870 bp)。2对夫妇分别接受了植入前遗传学检测(PGT)和体外受精(IVF)助孕治疗。结论:sSMC携带者的个性化分析对其后期的遗传咨询和生育指导具有重要意义，对于存在高遗传风险的sSMC携带者夫妇可考虑选择MicroSeq-PGT助孕。

目的:探讨细菌人工染色体标记-磁珠鉴别/分离技术在产前诊断中的适应证及应用价值。方法:采集2016年4月至2020年12月在济宁市妇幼保健计划生育服务中心进行产前诊断的3 579例单胎：高龄产妇（年龄≥35岁）、血清学产前筛查高风险/临界风险、无创基因检测（NIPT）高风险、超声指标异常、不良妊娠史的羊水样本进行细菌人工染色体标记-磁珠鉴别/分离技术（BoBs）检测，同步进行G显带染色体核型分析检测。核型分析或BoBs检测出的非整倍体异常/微缺失/微重复样本根据需要进行荧光原位杂交（FISH）/单核苷酸多态性（SNP）微阵列验证。结果:（1）高龄、NIPT高风险、血清学筛查高风险指征样本占比89.44%（3 201/3 579），非整倍体异常检出率96.19%（202/210），微缺失/微重复异常检出率87.5%（28/32），合计异常检出率95.04%（230/242）；超声指标异常、不良妊娠史、中孕期血清学筛查临界风险指征样本占比10.66%，检出非整倍体及微重复/微缺失的异常占4.96%。（2）BoBs检出198份常见染色体非整倍体（13/18/21/X/Y）异常，12例≥20%的嵌合体，与核型结果一致；2份21-三体、3份X/Y、7份探针检测范围外的2、7、8、9、10、20、mar染色体核型嵌合、8份臂间倒位和5份易位由染色体核型分析检出。BoBs检测对5种非整倍体的敏感度为94.6%（210/222），特异度为100%，假阴性率5.4%（12/222）。BoBs检出32份微缺失/微重复，染色体核型分析检出9份。G显带染色体核型分析与BoBs检测联合应用相较于单一的染色体核型分析，额外检出9.4%（23/244）阳性样本。结论:单纯高龄、NIPT高风险、血清学筛查高风险指征的样本更适合作为BoBs在产前诊断应用的适应证。

目的 分析肿瘤标记物糖类抗原 125(Carbohyhr Ateantigen 125,CA125)、糖类抗原 724(Carbohyhr Ateantigen 724,CA724)、人附睾蛋白4(Human epididymal protein 4,HE4)联合测定在卵巢癌诊断和预后中的指导价值.方法 纳入2022年7月-2023年7月泰安市妇幼保健院收治的病理学确诊卵巢癌患者63例(研究组),纳入同期病理学检查良性卵巢肿瘤患者60例为对照组,采用化学发光免疫定量分析法检测组间肿瘤标记物CA125、CA724、HE4水平,采用单因素与多因素logistic回归分析卵巢癌病情进展及预后相关影响因素,作受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)预测肿瘤标记物CA125、CA724、HE4及三项指标联合测定在卵巢癌患者中的诊断及预测价值.结果 研究组CA125、CA724及HE4水平分别为(96.69±26.93)U/ml、(16.93±2.93)U/ml、(176.96±17.93)pmol/L,对照组 CA125、CA724 及 HE4 水平分别为(24.63±4.67)U/ml、(6.49±1.03)U/ml、(74.93±13.67)pmol/L,研究组 CA125、CA724 及 HE4 水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05);Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者 CA125、CA724、HE4 水平分别为(143.69±34.63)U/ml、(24.67±4.07)U/ml、(141.97±15.93)pmol/L,Ⅰ～Ⅱ 期卵巢癌患者 CA125、CA724、HE4 水平分别为(89.63±17.61)U/ml、(15.63±3.93)U/ml、(194.63±27.93)pmol/L,Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者CA125、CA724、HE4水平高于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者,差异均有统计学意义(均P＜0.05);研究组与对照组年龄、婚姻状况、居住地、抽烟史、饮酒史、慢性疾病、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05);研究组文化程度低于对照组,未生育人数、子宫内膜异位症例数高于对照组,CA125、CA724、HE4水平高于对照组,雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)阳性率高于对照组(P＜0.05);logistic回归分析结果显示,文化程度、生育因素(未生育)、子宫内膜异位症、CA125、CA724、HE4、ER、PR为卵巢癌疾病发生独立危险因素;根据模型拟合程度检验Hosmer-Lemeshow检验分析可得x2=3.493,P＞0.05;肿瘤标记物CA125、CA724、HE4联合检测预测模型最佳临界值为0.090,CA125、CA724、HE4联合检测卵巢癌灵敏度为96.83％,特异度为93.33％,联合诊断预测价值高,ROC 曲线下面积(area under curve,AUC)为 0.719(0.646～0.797)、0.708(0.653～0.789)、0.699(0.653～0.810)、0.887(0.788～0.980).结论 肿瘤标记物CA125、CA724、HE4高表达为卵巢癌病情进展及不良预后独立危险因素,三项联合测定在卵巢癌患者诊断及预后中指导价值更高.

定量生育期内植物光合碳在植物组织-土壤的分配规律,对于理解全球碳循环有着重要意义.采用13C-CO,脉冲标记结合室内培养,通过元素分析仪-稳定同位素联用(Flash HT-IRMS)分析植物各部分及土壤δ13C值,比较了不同生育期下水稻光合碳在不同组织间的分配规律,并量化了水稻光合碳向土壤碳库的转移.结果表明:(1)水稻地上部和根系干物质量随水稻生育期的增加而呈现递增趋势,不同的生育期表现为:分蘖期＞拔节期＞抽穗期＞扬花期＞成熟期.而整个生育期的根冠比为0.2-0.4,分蘖期的根冠比最高,随着水稻生育期的增加而递减,到抽穗期以后根冠比稳定在0.2左右.(2)脉冲标记6h后,水稻地上部和地下部(根系)的δ13C值在-25.52‰-28.33‰,不同器官的δ13C值存在明显分馏效应,且趋势基本一致,即茎杆(籽粒)＞叶片(根系);这种由于水稻生育期特性导致的各器官碳同位素分馏的现象,可用于指示不同生育期下水稻光合碳的分配和去向.(3)不同生育期13C-光合碳在植物-土壤系统的分配规律不同,生长前期光合碳向根系及土壤中分配的比例高,具有较强的碳汇能力,而随生育期光合碳在根系及土壤中的分配比例呈下降趋势,但积累量不断增加.(4)不同生育期13C光合碳在水稻-土壤系统中的分配比例差异明显.水稻分蘖期有近30％光合碳用于根系建成并部分通过根系分泌物进入土壤有机碳库(10％),而到成熟期则向籽粒中分配较多,而且光合碳在土壤中的分配比例也随生育期呈下降趋势.研究结果对稻田土壤有机碳循环过程和调控机制的揭示具有重要的理论意义.

目的:研究纺锤体检查点功能复合物基因MAD1L1基因变异与潮汕地区女性乳腺癌易感性的关系.方法:采用病例-对照研究,收集2015年12月-2017年12月在汕头大学医学院附属肿瘤医院住院的乳腺癌新发病例191例及同期社区健康对照225例,采用TaqMan荧光双标记探针法对MAD1L1基因位点rs1801368进行基因分型.同时收集其人口学特征、女性生理生育相关信息、生活方式、既往病史及乳腺癌患者临床病理指标.结果:MAD1L1 rs1801368位点基因型CC、CT、TT的频率分布在病例组中分别为20.63％、42.86％、36.51％,在对照组中分别为30.14％、41.15％、28.71％,两组中分布的差异无统计学意义(P＞0.05).多因素分析表明,调整了年龄、初潮年龄、绝经状态等混杂因素后,相较于野生型纯合子CC,突变型纯合子TT增加乳腺癌患病风险(OR=3.399,95％CI:1.288～8.973,P=0.013).结论:MAD1L1基因位点rs1801368多态性与潮汕地区女性乳腺癌易感性可能相关,携带TT基因型的较携带CC或CT基因型的女性患乳腺癌的风险高.

目的 比较辅助生育受孕和自然受孕的孕妇孕中期产前血清学筛查各标记物中位数的差异.方法 选择2016年12月至2017年10月间通过辅助生育技术受孕的单胎孕妇140例为辅助生育组,筛取同期孕周、年龄、体重相匹配的自然妊娠且为单胎的孕妇420例为自然妊娠组,采用时间分辨荧光免疫法进行三联血清学筛查.结果 比较两组孕妇各孕周阶段的甲胎蛋白(AFP)和游离雌三醇(uE3)的中位数倍数(MoM)值均接近1,差异无统计学意义(P>0.05);游离β人绒毛膜促性腺激素(free-βHCG)在辅助生育组中的MoM值小于1,而自然妊娠组MoM值大于1,差异有统计学意义(P<0.05).结论 辅助生育可能会引起各标记物中位数及MoM值的差异,建立此类人群的产前筛查指标的参考范围,引入适当的校准系数评估风险将有利于提高产前筛查的检出率.

目的:抗苗勒氏管激素(AMH)在评价卵巢储备功能方面具有更高的准确性,将其用于青春期、生育期女性的生育指导时具有很好的临床价值.目前对于AMH的检测,临床上常采用的是酶联免疫分析法,但存在灵敏度低、检测范围窄等缺点,而影响AMH实际水平的测定,使得对病情的预估不准确对疾病的治疗产生影响.因此,建立一种低成本、高敏感度的检测AMH水平的方法尤为重要.方法:利用生物素-亲和素放大系统,将一组抗AMH的第一抗体包被微孔板,同时用生物素标记第二抗体,与第一抗体-抗原复合物结合之后,再与生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物结合,加入发光底物,建立AMH酶促化学发光免疫分析方法,同时对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行检测,并与常规ELISA法进行相比检测AMH浓度.结果:线性检测范围为(0.42～50.00)U/ml,该体系稳定性好,灵敏度0.42 U/ml,批内差异小于10.0％,批间差异小于10.0％,与常规ELISA对比差异有统计学意义.结论:AMH的生物素-链霉亲和素一辣根过氧化物酶酶促化学发光免疫分析易于操作、灵敏度高、价格低廉,适用于临床检测.

为了改良水稻优良恢复系福恢673的稻瘟病抗性,以该恢复系为轮回亲本,以携有3个稻瘟病抗性基因(Pi-1、Pi-9和Pi-kh)的优质恢复系金恢1059为供体亲本,通过回交育种结合分子标记辅助选择,选育出10个导入了这3个抗稻瘟病基因的福恢673近等基因系,其遗传背景恢复率为92.96％-98.59％.抗性鉴定结果表明,这些近等基因系及其与不育系宜香A配制的杂种一代均表现抗稻瘟病,抗性明显强于对照福恢673和宜优673,且半数以上杂种一代基本保留了原组合的主要优点.用近等基因系Line 9配组的杂交稻新组合两优7283和金泰优683在区试中均表现出产量高、稻瘟病抗性强、生育期适中等特点,表明该近等基因系具较好的应用前景.

目的 探讨复发性流产(RSA)患者绒毛膜组织中血小板反应蛋白-1(TSP-1)的表达水平及临床意义.方法 收集42例行早期人工流产的复发性流产患者记为观察组,选择同期35例既往分娩过足月正常胎儿、无不良生育史且自愿行人工流产产妇记为对照组,2组流产时分别留取绒毛、蜕膜组织并采用免疫组化SP法检测TSP-1表达水平,同时采用CD34标记血管内皮细胞检测绒毛、蜕膜组织中微血管密度(MVD).结果 2组绒毛组织中TSP-1阳性区域灰度值均明显低于蜕膜组织(P均<0.05),即绒毛组织中TSP-1表达量高于蜕膜组织,观察组绒毛组织中TSP-1灰度值明显低于对照组(P<0.05),即RSA患者绒毛组织中TSP-1表达量高于对照组.观察组绒毛组织中MVD分别较对照组、本组蜕膜组织低(P均<0.05),而对照组绒毛组织中MVD显著高于蜕膜组织(P<0.05).RSA患者绒毛、蜕膜组织中TSP-1灰度值与MVD均呈显著正相关(r=0.584,0.397,P均<0.05),即绒毛、蜕膜组织中TSP-1表达量与MVD呈显著负相关.结论 RSA患者绒毛、蜕膜组织中TSP-1表达量异常升高,绒毛组织中MVD较蜕膜组织异常偏低,RSA患者绒毛膜组织中TSP-1的异常高表达可能是血管生成障碍、复发性流产的重要影响因素.

目的 探讨乙烯利对子代雄鼠睾丸组织病理及生精细胞凋亡的影响.方法 选取45日龄健康雌性SD大鼠24只,根据随机数字表法分为对照组和低、中、高剂量乙烯利组,再选取同龄健康雄性大鼠与之合笼交配.每日分别以不同浓度乙烯利水溶液或9g/L盐水对各组雌鼠灌胃,并在妊娠期和哺乳期继续灌胃.子代雄鼠7日龄及14日龄时分别从各组随机选取10只处死.取睾丸组织行HE染色,光镜下观察睾丸组织形态变化;采用末端转移酶标记技术(TUNEL法)标记凋亡细胞,利用荧光显微镜检测睾丸生精细胞凋亡指数(AI).结果 仔鼠7日龄时,对照组睾丸内部结构发育良好,生精小管排列整齐紧凑.低剂量乙烯利组睾丸生精小管管腔略小,生精细胞较对照组排列稍松散;中剂量乙烯利组显示睾丸生精小管排列稍紊乱,细胞间隙增大.高剂量乙烯利组睾丸发育差,生精小管管径明显减小,生殖细胞排列紊乱.低剂量乙烯利组生精细胞AI[(0.54±0.10)％]与对照组[(0.53±0.09)％]相比,差异无统计学意义(P＞0.05),中剂量乙烯利组生精细胞AI[(0.63±0.11)％]、高剂量乙烯利组生精细胞AI[(0.81±0.06)％]均高于对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).低剂量乙烯利组生精细胞AI[(0.54±0.10)％]低于中剂量乙烯利组生精细胞AI[(0.63±0.11)％],差异有统计学意义(P＜0.05);中剂量乙烯利组生精细胞AI低于高剂量乙烯利组生精细胞AI,差异有统计学意义(P＜0.01).14日龄时,各组生精细胞AI分别为(0.54±0.08)％、(0.65±0.11)％、(0.77±0.11)％和(0.88±0.10)％,对照组、低剂量乙烯利组、中剂量乙烯利组、高剂量乙烯利组仔鼠生精细胞AI逐渐升高,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 高剂量乙烯利可引起仔鼠睾丸生殖细胞排列紊乱、生精细胞凋亡增加,导致仔鼠生育能力降低.