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流感病毒对小鼠肺部趋化因子通路的影响及疏风宣肺解毒方药的干预作用
编辑人员丨2天前
目的:通过基因芯片技术筛选流感病毒感染小鼠肺部趋化因子通路的差异表达基因,并探讨疏风宣肺解毒方药的干预作用。方法:按照随机数字表法将雄性ICR小鼠分为对照组(N组)、流感病毒感染模型组(M组)、盐酸奥司他韦对照组(C组)及疏风宣肺解毒方药大、中、小剂量组(SH、SM、SL组),每组10只。应用流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1(0.05 mL)滴鼻制备小鼠流感病毒性肺炎模型;N组给予0.05 mL生理盐水滴鼻作为对照。SH、SM、SL组在滴鼻感染2 h后应用疏风宣肺解毒方药灌胃,分别为临床治疗剂量的2倍量、等量和1/2量(约为3.8、1.9、1.0 g·mL -1·d -1),连用4 d;C组灌胃盐酸奥司他韦2.5 g·mL -1·d -1;N组和M组灌胃蒸馏水(每日1次、每次0.2 mL)作为对照。于实验第5天取小鼠全肺,计算肺指数,并进行病理切片观察;提取肺组织总RNA,与小鼠全基因芯片杂交,对检测数据进行聚类分析,筛选出趋化因子通路的相关靶基因。扫描杂交芯片,计算芯片探针信号在各给药组与M组的表达强度比值,筛选出差异表达基因,其中 P<0.05且log 2比值>1为上调基因, P<0.05且log 2比值<-1为下调基因。 结果:与N组比较,M组小鼠肺指数明显升高,且肺组织出现病理学改变,提示流感病毒感染模型制备成功。与M组比较,C组、SH组、SM组、SL组肺指数均明显降低(0.96±0.14、1.45±0.22、1.14±0.18、1.22±0.21比1.72±0.15,均 P<0.05),且肺组织病理学改变范围及程度均减轻;但各给药组间无明显差异。基因芯片检测结果显示,N组与M组、SH组与M组、SM组与M组、SL组与M组各组间差异表达基因数量较多。代谢途径富集分析筛选出上述差异表达基因主要富集于趋化因子信号通路;与N组比较,M组上调的差异表达基因主要有趋化因子C-C亚族配体(CCL-3、CCL-5)和趋化因子C-X-C亚族配体(CXCL-9、CXCL-10),log 2(M组/N组)分别为6.64、3.51、5.40、6.64;与M组比较,盐酸奥司他韦和疏风宣肺解毒方药各组差异表达基因CCL-3、CCL-5、CXCL-9、CXCL-10均下调,log 2(C组/M组)分别为-3.96、-2.26、-3.12、-2.40,log 2(SH组/M组)分别为-5.57、-2.37、-1.57、-1.01,log 2(SM组/M组)分别为-4.35、-1.47、-1.26、-1.74,log 2(SL组/M组)分别为-2.86、-1.86、-1.23、-1.39。 结论:疏风宣肺解毒方药可通过下调趋化因子的表达水平缓解小鼠的肺部炎症损伤。
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编辑人员丨2天前
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疏风宣肺解毒方对流感病毒性肺炎小鼠炎性细胞因子的影响
编辑人员丨2天前
目的:通过基因芯片技术分析疏风宣肺解毒方对流感病毒性肺炎小鼠炎性细胞因子差异表达基因的影响。方法:按随机数字表法将雄性ICR小鼠分为正常组(N组)、流感病毒性肺炎模型组(M组)、奥司他韦对照组(C组)及疏风宣肺解毒方高、中、低剂量组(SH、SM、SL组),每组10只。通过流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1(0.05 mL)滴鼻建立小鼠流感病毒性肺炎模型;N组以0.05 mL生理盐水滴鼻。SH、SM、SL组于滴鼻感染后2 h灌胃疏风宣肺解毒方,含药浓度分别为临床用药的2倍量、等量、1/2量(约为3.8、1.9、1.0 kg/L),每日1次,每次0.2 mL,连用4 d;C组灌服奥司他韦2.5 kg/L;N组和M组灌服蒸馏水。第5天取小鼠全肺,提取肺组织总RNA,与小鼠全基因芯片杂交并检测,筛选参与炎症相关通路中的靶基因。扫描杂交芯片,计算芯片探针信号在各组与M组的强度表达比值,筛选差异表达基因,其中 P<0.05且log2比值>1为上调基因, P<0.05且log2比值<-1为下调基因。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测白细胞介素(IL-1、IL-8)、细胞间黏附分子- 1(ICAM-1)的mRNA表达。 结果:与N组相比,M组差异基因表达IL-1、IL-8、ICAM-1明显上调(log2N组/M组分别为2.62、2.07、1.41,均 P<0.05)。与M组相比,SH、SM、SL、C组差异基因表达IL-1、IL-8、ICAM-1均明显下调(log2SH组/M组分别为-1.91、-1.85、-0.88,log2SM组/M组分别为-3.10、-1.74、-1.84,log2SL组/M组分别为-1.89、-1.39、-0.53,log2C组/M组分别为-2.46、-1.52、-1.44,均 P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,M组IL-1、IL-8、ICAM-1的mRNA表达水平均较N组显著升高〔IL-1(2 -ΔΔCT):4.63±0.24比1.01±0.13,IL-8(2 -ΔΔCT):6.28±0.13比1.02±0.09,ICAM-1(2 -ΔΔCT):2.90±0.18比1.02±0.12,均 P<0.05〕。SH、SM、SL和C组IL-1、IL-8、ICAM-1的mRNA表达水平均较M组组显著降低〔IL-1(2 -ΔΔCT):2.12±0.32、1.71±0.07、2.05±0.16、1.66±0.13比4.63±0.24,IL-8(2 -ΔΔCT):3.89±0.13、2.08±0.19、2.98±0.20、2.02±0.12比6.28±0.13,ICAM-1(2 -ΔΔCT):1.72±0.93、1.34±0.14、1.53±0.25、1.17±0.12比2.90±0.18,均 P<0.05〕,但SH、SM、SL和C组间差异无统计学意义。 结论:疏风宣肺解毒方通过下调IL-1、IL-8、ICAM-1炎性细胞因子相关基因的表达,抑制流感病毒感染后小鼠的炎症损伤。
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编辑人员丨2天前
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疏风活络丸治疗类风湿性关节炎的网络药理学分析及实验研究
编辑人员丨1个月前
目的:探索疏风活络丸治疗类风湿性关节炎的可能机制.方法:通过TCMSP及相关文献收集疏风活络丸中的化合物,建立化学成分数据库.使用SwissTargetPrediction和PharmMapper数据库检索其作用靶点,并与DisGeNET和GeneCards数据库中的类风湿性关节炎相关靶点进行对比.基于获得的交集靶点构建PPI网络并进行拓扑分析.进行GO和KEGG功能富集分析,并构建"化合物-靶点-通路"网络.小鼠40只,采用随机数字表法分为对照组、阳性对照组(地塞米松1.289 6 mg·kg-1)、疏风活络丸低剂量组(422.5 mg·kg-1)及高剂量组(845 mg·kg-1).连续灌胃给药4 d后,采用醋酸扭体法观察其镇痛作用.1周后,再次连续灌胃给药4 d,采用二甲苯致耳廓肿胀法观察其抗炎作用.测量耳片厚度和质量评价小鼠耳廓肿胀度.HE染色评估耳廓的病理组织学改变.ELISA试剂盒检测血清IL-1β、IL-6及TNF-α水平.免疫组化染色检测耳组织中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达水平.免疫荧光染色检测耳组织中PI3K、AKT及MAPK的表达水平.结果:疏风活络丸中共检索出1 352个化学组分,经筛选确定活性组分为184个.疏风活络丸入血成分的作用靶点为1 514个,而类风湿性关节炎相关靶点为5 211个,共有靶点为858个.PPI网络分析显示,核心靶点为291个,最为核心的包括TNF、CTNNB1、EGFR等.GO和KEGG分析显示,核心靶点主要涉及PI3K-Akt、M APK、Ras等信号通路.与对照组相比,疏风活络丸低、高剂量对乙酸诱导的内脏疼痛感受均具有显著的抑制作用(P<0.01).疏风活络丸高剂量显著减轻耳廓肿胀小鼠的肿胀度(P<0.05).耳廓肿胀小鼠耳组织真皮层增厚紊乱,中性粒细胞聚集,疏风活络丸高剂量减少小鼠右耳中性粒细胞数量,真皮层细胞排列较整齐.耳廓肿胀小鼠血清IL-1β、IL-6及TNF-α水平未发生变化(P>0.05),疏风活络丸低、高剂量未影响小鼠血清IL-1β、IL-6及TNF-α水平(P>0.05).疏风活络丸低、高剂量显著降低小鼠耳组织中升高的IL-1β和IL-6的表达(P<0.05).疏风活络丸显著降低小鼠耳组织中升高的PI3K、AKT及MAPK的表达(P<0.05).结论:疏风活络丸可能通过影响PI3K-Akt、MAPK、Ras等信号通路,实现对类风湿性关节炎的治疗作用.体现中药复方通过"多成分-多靶点-多途径"治疗疾病的特点.
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编辑人员丨1个月前
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基于数据挖掘探析徐仙槎诊治小儿咳嗽用药规律
编辑人员丨2024/6/22
目的:通过数据挖掘技术研究越医名家徐仙槎治疗小儿咳嗽的用药规律和特点.方法:收集及整理徐仙槎治疗小儿咳嗽的处方进行研究.统计小儿咳嗽的发病季节、病因、治法、药物使用频数;统计高频药物的使用频数、频率以及药物的性、味、归经和功效分类,并进行关联规则分析和聚类分析;通过Cytoscape 3.9.1软件及镝数图表网页进行可视化分析.结果:绍兴地区小儿咳嗽的发病季节主要集中于秋、冬季,病因主要为温、湿、暑、食、痰、火、风邪,最为常用的治法为清化法与清解法.涉及中药142味,使用频数排在前5位的药物分别为橘红、前胡、佩兰、浙贝母、天花粉.高频药物中,药性以寒为主,药味以苦为主,主要入肺、胃经.关联程度排在前5位的高频药对为橘红-前胡,佩兰-前胡,佩兰-橘红,浙贝母-前胡,浙贝母-橘红.聚类分析可聚为3类.结论:处方用药规律体现了徐仙槎治疗小儿咳嗽善于化湿,重视肺脾二脏,辨证施治的学术思想.宣肺疏风、降气化痰、清热利湿是徐仙槎治疗小儿咳嗽的主要方法.
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编辑人员丨2024/6/22
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高树中运用调气法治疗咽喉病经验撷菁
编辑人员丨2024/3/30
高树中教授认为咽喉病多由气在咽喉部运行失常所致,风、火、痰是其重要致病因素.临床从气机角度展开,首辨外感与内伤:外感邪气阻遏咽喉气机,与肺卫有关;内伤多由情志致病,病机根于脏腑气机失衡,尤与肺、胃、肝、肾密切相关.治疗上,谨守病机,运用调气之法,外感以宣散为要,内伤以升降为主,配合疏风、清热化痰、滋阴降火等治法.提出了脏腑气机"三升三降"理论及"颈关"学说,主张针药并用,擅用阙上等经验穴,灵活运用经方,重视药物升降特性,尤重煎服法,综合刺营血、足心贴敷等多种疗法.附验案1则.
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编辑人员丨2024/3/30
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疏风降胃方对肺胃气逆型咳嗽变异性哮喘气道炎症因子及肺功能的影响
编辑人员丨2023/12/30
目的:探讨疏风降胃方对肺胃气逆型咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)气道炎症因子及肺功能的影响.方法:将86例CVA患者按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组各43例.对照组给予沙美特罗替卡松粉吸入剂,观察组给予疏风降胃方治疗.比较两组患者治疗前后中医证候积分、气道炎症因子[白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)、外周血嗜酸性粒细胞(eosinophils,EOS)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationic protein,ECP)、痰液黏蛋白 5 AC(mucin5 AC,MUC5AC))和肺功能[第一秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)、呼气流量峰值(forced expiratory peak,PEF)及FEV1/FVC]变化情况.结果:两组患者治疗后中医证候积分低于本组治疗前,且治疗后观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).两组患者治疗后IL-5、EOS、ECP、MUC5AC水平低于本组治疗前,且治疗后观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).两组患者治疗后FEV1、PEF、FEV1/FVC水平高于本组治疗前,且治疗后观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:疏风降胃方治疗肺胃气逆型CVA,可改善患者的临床症状及肺功能,也能有效缓解患者气道炎症因子水平.
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编辑人员丨2023/12/30
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基于网络药理学及分子对接探讨益气疏风降肺方治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制
编辑人员丨2023/9/30
目的 基于分子对接技术及网络药理学来分析益气疏风降肺方治疗咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)的主要成分、潜在靶点及作用通路.方法 通过中药系统药理学数据和分析平台(TCMSP)、HERB数据库(http://herb.ac.cn/Search/)筛选益气疏风降胃方的活性成分及潜在靶点,利用Genecards、Drugbank、MOIM、Disgenet数据库检索CVA的相关靶点,将二者的靶点取交集,运用Cytoscape 3.7.1及STRING平台构建活性成分-靶点、蛋白质互作(protein-protein interaction,PPI)网络.借助Metascape对共同靶点进行基因本体(gene ontology,GO)及京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,最后由Autodeck Vina 1.1.2实现主要活性成分及核心靶点的分子对接.结果 发现益气疏风降肺方活性成分200个、潜在作用靶点619个,CVA相关靶点2236个,筛选两者共同靶点331个.331个候选治疗靶点共富集到182条KEGG通路(P<0.01)和3316个GO细胞生物学过程,涉及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protien kinase,MAPK)信号通路等,与细胞的缺氧反应、炎症反应及凋亡等生物学过程有关.益气疏风降肺方中活性较强、利用度较高的关键分子包括槲皮素、鞣花酸等,分子对接显示主要活性成分与CVA潜在靶点具有较好的结合活性,表明本方可能通过作用于核转录因子κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)、信号转导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)3等关键蛋白分子,影响PI3K-AKT、TNF、MAPK等信号通路,从而减少炎症因子的释放、减轻气道炎性渗出、阻止气道重塑,对CVA起到治疗作用.结论 本研究初步揭示了益气疏风降肺方的活性成分与CVA发病的关键蛋白之间存在一定关系,通过多成分-多靶点-多通路的综合调控网络发挥治疗CVA的作用.
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编辑人员丨2023/9/30
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晁恩祥慢性阻塞性肺疾病辨治特色
编辑人员丨2023/8/6
晁恩祥教授在治疗慢性阻塞性肺疾病方面有着丰富的理论和临床经验.其临床辨治思路为四诊合参,八纲辨证,衷中参西;抓主证,标本缓急,分阶段治疗.常用治法有:宣肺止咳,降气化痰平喘法;疏风宣肺,止咳利咽法;益气养阴,降气化痰平喘法;清肺化痰,止咳平喘法;调理肺肾,纳气平喘法;健脾化痰,降气平喘,理气和胃法;降气化痰利水法;温阳散寒,止咳化痰平喘法.其治法灵活,效果显著.
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编辑人员丨2023/8/6
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葛根先煎时间对升麻葛根汤中的葛根素含量及药效学的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的:通过研究不同时间煎煮葛根对升麻葛根汤中的葛根素含量及药效学的影响,探讨葛根的最佳煎煮时间,为葛根的特殊煎煮方法的临床应用提供理论依据.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同时间煎煮葛根对升麻葛根汤中的葛根素含量影响.色谱条件:Agilent 5 TC-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(25∶75),流速为1mL·min-1,检测波长为250 nm,柱温30℃.采用氨水诱咳法和热板法观察不同时间煎煮葛根的升麻葛根汤对小鼠的镇咳作用和镇痛作用的影响.将ICR小鼠(雌性180只,雄性60只)随机分为12组,即空白对照组、感冒疏风胶囊组、阿司匹林肠溶片组、不同煎煮时间的升麻葛根汤9组(葛根先煎0,5,10,15,20,25,30,35,40 min),按照0.02 mL· g-1剂量分别灌胃给药,连续7d.镇咳实验各组小鼠(雌雄各半)末次给药1h后,将小鼠放入雾化器中,观察和记录各组小鼠的咳嗽潜伏期(首次开始咳嗽的时间)和2 min内咳嗽次数.镇痛实验各组小鼠(雌性)末次给药1h后,将小鼠放置于(55±0.5)℃的智能热板仪上,记录其足底接触热板到出现舔足或跳跃的时间(热板反应潜伏期).结果:在0.02~0.12 mg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6);葛根先煎15 min时葛根素含量为43.6 mg·g-1,含量最高.与空白对照组比较,葛根先煎10,15,20,25min组可使小鼠咳嗽潜伏期明显延长(P<0.01,P<0.05),葛根先煎15、20 min组可使小鼠咳嗽次数减少(P<0.05);葛根先煎10,15,20min时,小鼠痛阈时间明显延长(P<0.05).结论:葛根素含量测定结果表明,葛根在先煎15 min时,葛根素的含量最高,煎煮时间过短,葛根素不能充分溶出,煎煮时间过长,葛根素含量下降;药效学实验结果表明,葛根在先煎15min时,升麻葛根汤对风寒表证的镇咳、镇痛作用显著.提示,葛根入汤剂应先煎15min为宜.
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编辑人员丨2023/8/6
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中西医结合治疗急喉痹风热证临床观察
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨疏风解毒胶囊联合头孢克肟胶囊治疗急喉痹风热证的临床疗效和安全性.方法 选择急喉痹风热证患者100例,按就诊顺序分为观察组和对照组各50例.2组均予局部点刺放血疗法,对照组同时服用头孢克肟胶囊,观察组在对照组治疗基础上加服疏风解毒胶囊.疗程均为5天.观察治疗前后患者主要症状及继发症状的改善程度及积分变化.结果 观察组痊愈37例,总有效率96.0%,对照组痊愈29例,总有效率88.0%,2组差异有统计学意义(P<0.05).治疗后观察组咽痛评分下降(6.04±1.68)分,对照组下降(3.21±2.14)分,2组差异有统计学意义(P<0.05).观察组仅出现了1例胃痛患者,不良反应发生率为2%;对照组的不良反应发生率为4%.结论 在点刺放血的同时,联合使用疏风解毒胶囊及头孢克肟治疗急喉痹风热证疗效确切,能改善咽痛等临床症状,无明显不良反应.
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编辑人员丨2023/8/6
