目的:了解嘉兴市男男同性传播人群(men who have sex with men，MSM)HIV-1型感染的分子流行特征，为防控提供方法和思路。方法:回顾分析2020—2022年所有新报告MSM人群未经抗病毒治疗的病例血样，扩增HIV-1 pol基因，测序后使用MEGA v6.0软件分析核酸序列，构建系统进化树判断亚型，使用校正群体耐药分析程序(CPR)分析耐药突变，计算基因序列间遗传距离，使用Cytoscape v3.6.0软件绘制分子传播网络。 结果:共发现9种基因亚型，以CRF07_BC(43.3%)、CRF01_AE(36.9%)为主，未与参考亚型聚类的重组型病例占比5.0%。共检出耐药突变病例21例(7.0%)，CRF07_BC和CRF01_AE亚型的耐药突变比率分别为8.2%和7.8%。蛋白酶抑制剂、核苷类逆转录酶抑制剂和非核苷类逆转录酶抑制剂的耐药突变检出率分别为1.7%、0.7%和4.7%。最适分子网络的基因距离为0.018，入网率43.3%，共形成38个分子簇(簇内2～26个节点)。同性性行为人数≥6，度值≥4的病例易进入活跃分子簇。TNS>0.75的高危传播病例以外省(市)户籍和商业服务业者为主要特征。重组型分子簇病例与外省病例有较高相似度。结论:嘉兴地区MSM人群HIV-1亚型分布复杂，重组亚型检出率增高，传播耐药水平较高，活跃分子簇和高危传播病例人群多为商业服务类等外来人口，需加强监测和干预力度。

目的:了解2018年昆明市MSM的HIV-1基因型及耐药特征。方法:收集昆明市2018年1-12月新报告HIV-1感染的MSM的血浆样品193份，提取病毒RNA，采用巢式PCR扩增 gag、 pol和 env区基因片段，进行基因分型和耐药分析，通过Bayesian Markov Chain Monte Carlo（MCMC）方法分析昆明市MSM感染者中CRF55_01B和CRF68_01B的进化特征。 结果:193份样品中发现多个HIV-1基因型，包括CRF07_BC（39.4%，76/193）、CRF01_AE（34.2%，66/193）、独特型重组（20.2%，39/193）、CRF08_BC（3.1%，6/193）、CRF55_01B（1.6%，3/193）、B亚型（1.0%，2/193）和CRF68_01B（0.5%，1/193）。Bayesian进化分析结果显示CRF55_01B从外省进入昆明市后已开始在本地传播，而CRF68_01B可能来自于我国东部地区。2018年昆明市MSM抗病毒治疗前的HIV-1耐药株流行率为2.6%（5/190），对非核苷类反转录酶抑制剂的耐药突变发生率最高（2.1%，4/190）。结论:昆明市MSM的HIV-1基因型多样性逐年增加。MSM未接受抗病毒治疗HIV-1感染者耐药发生率虽然较低，但存在抗病毒治疗一线药物的多重耐药株。

2019年底，武汉出现了由新型冠状病毒（2019-nCoV）引发的新型冠状病毒肺炎（COVID-19）。该疫情在短时间内迅速蔓延，严重威胁着公共卫生安全。目前，COVID-19尚无有效的治疗手段。血管紧张素转化酶2（ACE2）作为受体介导2019-nCoV进入细胞，是目前最有可能防治COVID-19的靶点之一。中老年人是COVID-19的易感人群，多伴有基础疾病，且大部分为心血管疾病，因此这部分人更容易发展为重症和危重症，造成严重的临床后果。ACE2是肾素-血管紧张素系统重要的组成部分，以此系统为靶点的ACE抑制剂和血管紧张素受体阻断剂等药物，是目前临床治疗高血压、心肌重构和心力衰竭等心血管疾病的最主要的药物之一。本文系统地介绍了COVID-19以及肾素-血管紧张素系统相关药物及其临床应用，并且分析了肾素-血管紧张素系统相关药物在COVID-19防治中的价值，以及并发心血管疾病的COVID-19患者用药方面需要注意的问题。

不同于传统的手术、放化疗等治疗手段，免疫治疗是进展期胃癌一种新的治疗方法。随着胃癌的综合治疗进入分子时代，胃癌相关的临床研究中以PD-1/PD-L1单抗为代表的免疫治疗正在积极开展并有不错的结果。癌症基因组图谱（TCGA）分型中微卫星不稳定型胃癌和EB病毒阳性型胃癌患者均是免疫治疗的潜在获益人群。错配修复功能缺陷、高度微卫星不稳定性的肿瘤往往具有高突变表型，肿瘤浸润淋巴细胞较多。EB病毒阳性型胃癌肿瘤免疫微环境中存在大量淋巴细胞浸润，对免疫治疗反应佳，预后较好。胃癌免疫微环境中的免疫细胞、体液因子相互作用，构成复杂的肿瘤免疫微环境群落，影响肿瘤进展和生存。本文主要就胃癌免疫治疗相关生物标志物检测及应用现状展开综述，探讨其面临的问题、挑战及发展趋势，以期开发更多的联合评估模式精准指导免疫治疗。

中国是肝癌大国，全世界每年>50%的新发和死亡病例发生在中国。肝癌的化疗敏感性较低，以抗血管生成为主的靶向治疗是进展期肝癌的主要系统治疗手段，但能达到的有效率和生存延长作用十分有限。近年来，免疫检查点抑制剂在肝癌临床治疗中展现出较好疗效，正在改变肝癌治疗格局，但也面临诸多问题。如程序性死亡配体-1、肿瘤突变负荷、错配修复蛋白等临床常用生物标志物在肝癌的临床应用价值十分有限。与其他病因相关肝癌比较，中国乙型病毒性肝炎相关肝癌具有其独特的基因变异图谱，但基于分子分型的个体化治疗策略尚未建立。更加有效且多样化的系统治疗手段，可推动肝癌进入综合治疗新时代，相关诊断与治疗规范有待进一步探索和确立。笔者查阅相关文献，结合临床实践，探讨肝癌免疫治疗策略的进展与思考。

拉沙病毒(LASV)属于沙粒病毒科,哺乳动物病毒属.拉沙病毒可引起严重的急性出血热疾病,即拉沙热.拉沙热总病死率为1％,住院患者的病死率为15％.拉沙热主要在西非流行.目前,尚无FDA批准的针对LASV的特异性药物及疫苗,治疗策略仅限于在疾病早期给予利巴韦林,近年来报道的一些新型抗拉沙病毒药物已经进入临床研究阶段.根据美国疾病预防控制中心的报道,LASV被认为是A类病原体,它的高死亡率和治疗的局限性,世界卫生组织已经将拉沙热确定为研究和开发特效疫苗和药物的重中之重.本文将对拉沙病毒抑制剂的研究进展进行综述.

目的 探究3-(4-氯苯基)-1,4-二苯基-1,4,5,7-四氢-6H-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-酮(以下简称为J1)体外抑制新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的作用及潜在作用机制.方法 采用MTT法评价化合物J1 对Vero-E6、ACE2/293T和HRT18 细胞的毒性.利用感染性SARS-CoV-2 和人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)检测化合物J1 的抗冠状病毒活性.采用SARS-CoV-2 假病毒体外细胞感染模型和时间点加药实验检测J1 抑制SARS-CoV-2 病毒感染靶细胞的作用阶段.通过S蛋白介导的细胞融合抑制实验检测J1 是否通过阻止病毒膜融合而抑制SARS-CoV-2 的进入.采用SPR实验和分子对接技术阐明 J1 与 SARS-CoV-2 S 蛋白的作用.结果 J1 对 Vero-E6、ACE2/293T 和HRT18 细胞的毒性较小,半数细胞毒性浓度 CC50 均大于 100 μmol·L-1.J1 能显著抑制 SARS-CoV-2 原始株和 Delta 变异株的活性,半数有效浓度 EC50 分别为 6.07 μmol·L-1 和2.21 μmol·L-1.此外,J1 可抑制HCoV-OC43 病毒的感染,显著减少NP蛋白和mRNA的表达.分子对接结果显示,J1 通过氢键作用和疏水作用力与SARS-CoV-2 S蛋白活性位点稳定结合.机制研究结果表明,J1 可抑制SARS-CoV-2 病毒进入靶细胞,半数抑制浓度IC50 为 1.57 μmol·L-1.J1 浓度依赖性抑制SARS-CoV-2 S蛋白介导的细胞-细胞膜融合,SPR实验证实J1 与S蛋白具有较强结合能力.结论 吡唑并吡啶酮类衍生物J1 通过靶向S蛋白抑制SARS-CoV-2 进入靶细胞.

目的 观察艾博韦泰(ABT)联合蛋白酶抑制剂(PIs)或整合酶抑制剂(INSTIs)的抗逆转录病毒治疗(ART)方案在HIV/AIDS合并肾功能损伤患者的疗效和安全性.方法 2021年3月-2023年3月期间,从郑州市第六人民医院感染科住院患者中筛选伴有肾功能损伤的HIV/AIDS初治或经治患者进入12周开放治疗.观察和比较基线及各治疗时间点HIV病毒载量(HIV RNA)、CD4+T淋巴细胞(CD4+T细胞)计数、肾功能等生化指标变化.结果 入组30例患者,26例完成12周治疗.26例患者基线情况:男性为主(88.46％),平均年龄(51.77±14.49)岁,初治患者占50％,69.23％和46.15％患者分别合并机会性感染和慢性合并症.急性肾损伤5例,慢性肾损伤21例,平均肾小球滤过率(eGFR)为38.30(14.94,69.57)mL/(min·1.73 m2),18例慢性肾损伤伴尿蛋白或尿微量白蛋白(ALB)阳性.4 例 HIV RNA≥105 CPs/mL,HIV RNA 在最低检测线(40 CPs/mL)～105 CPs/mL者12例;CD4+T细胞计数＜100个/μL 16例;ART治疗12周:初治、平稳转换、治疗失败患者病毒抑制率分别为76.92％(10/13)、100％(10/10)、100％(3/3).CD4+T 细胞计数从基线 75(28.75,203.75)个/μL 升至 156(90.25,359.25)个/μL,CD4+/CD8+比值从0.16(0.06,0.68)升至0.21(0.14,0.68),差异均有统计学意义(P＜0.05).12周eGFR、血清肌酐(Scr)、血红蛋白(Hb)较基线有好转,差异有统计学意义(P＜0.05);12周后25例患者转换为口服ART方案,其中17例完成12个月随访.12个月时:15例HIV RNA低于最低检测线,平均CD4+T细胞计数上升至212.00(102.50,333.00)个/μL,较12周时CD4+T细胞计数130.00(95.00,229.00)个/μL相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 含有艾博韦泰ART方案治疗26例HIV/AIDS合并肾功能损伤患者取得良好的病毒抑制和免疫应答,同时具有良好的安全性,后续扩大样本值得进一步研究.

癌症免疫治疗具有巨大潜力,有望成为癌症治疗的主流手段.在目前的癌症免疫治疗应用中,免疫检查点抑制剂(Immune checkpoint inhibitors,ICIs)已取得显著成效.目前临床上广泛应用的ICIs包括靶向细胞毒性T淋巴细胞相关抗原 4(Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4)、程序性死亡受体 1(Programmed death-1,PD-1)及程序性死亡受体配体1(Programmed death-ligand 1,PD-L1)的抑制剂.此外,溶瘤病毒和嵌合抗原受体T细胞等新型免疫治疗也逐渐进入临床,ICIs相关的联合治疗更是显示出了独特的优势.本文将重点对ICIs、溶瘤病毒、嵌合抗原受体T细胞疗法的单独或组合形式在实体瘤中的应用现状进行综述.

目的 探索防己诺林碱在细胞水平抗H1N1病毒的作用,阐明防己诺林碱调控细胞自噬抑制H1N1病毒复制的分子机制.方法 CCK-8法检测 0.312 5、0.625 0、1.250 0、2.500 0、5.000 0、10.000 0、20.000 0、40.000 0、60.000 0 μmol·L-1的防己诺林碱对MDCK细胞活力的影响;MDCK细胞设置对照组、模型组和防己诺林碱(2.5、5.0、10.0 μmol·L-1)组,除对照组外,以感染复数(MOI)为0.1的H1N1病毒感染MDCK细胞,加入防己诺林碱共同孵育12 h,同时设置防己诺林碱(10.0 μmol·L-1)与病毒共同孵育4、8 h组,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR,检测HIN1 mRNA表达)和Western blotting[H1N1病毒核蛋白(NP)]检测防己诺林碱对病毒复制的抑制作用;PI/Hoechst33342染色检测防己诺林碱(10.0 μmol·L-1)对MDCK细胞死亡的影响;qRT-PCR法检测防己诺林碱检测防己诺林碱预处理、病毒感染早期药物处理、病毒感染晚期药物处理以及吸附和进入阶段给药对病毒复制的影响;MDCK细胞转染EGFP-LC3或EGFP-mCherry-LC3双荧光质粒,观察防己诺林碱对EGFP-LC3的荧光强度、EGFP-mCherry-LC3共定位的影响,设置自噬诱导剂雷帕霉素(0.5 μmol·L-1)、自噬晚期抑制剂氯喹(10 μmol·L-1)、巴佛洛霉素A1(100 nmol·L-1)对照.转染过EGFP-LC3质粒的MDCK细胞感染H1N1病毒,免疫荧光检测防己诺林碱对LC3与胞内的病毒NP蛋白共定位的影响;体外培养A549细胞,以MOI为0.1的H1N1病毒感染,Western blotting检测防己诺林碱对LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达的影响.结果 防己诺林碱对MDCK细胞的半数抑制浓度(IC50)为40.19 μmol·L-1;与模型组比较,防己诺林碱以浓度相关性的方式抑制HIN1 mRNA表达,以浓度和时间相关性的方式抑制NP蛋白表达(P＜0.01、0.001);显著减少H1N1诱导的细胞死亡(P＜0.001);抑制H1N1病毒进入过程.与对照组比较,防己诺林碱处理诱导LC3荧光聚集,诱导EGFP-LC3和mCherry-LC3双荧光共定位显著增加(P＜0.001).与模型组比较,防己诺林碱处理明显减少NP的荧光数量(P＜0.001),同时造成LC3荧光积累并与胞内的病毒NP蛋白共定位;引起LC3Ⅱ积累(P＜0.01、0.001).结论 防己诺林碱同氯喹和巴佛洛霉素A1一致,阻断自噬途径,使病毒粒子在自噬体内滞留,破坏病毒生命周期.