目的 探讨靶向表皮生长因子受体(EGFR)的百秋李醇(PA)纳米颗粒对非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤生长的抑制作用及其机制.方法 ①利用二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-EGFR靶向肽AA1(DSPE-PEG-AA1)脂质体负载PA,构建靶向EGFR的PA脂质体纳米颗粒(EGFR-PA-NP).②将人NSCLC A549细胞(2×106个/只)接种于裸鼠腋下,建立肺癌异种皮下移植瘤裸鼠模型.10只模型裸鼠随机分为PA脂质体纳米颗粒(PA-NP)组和EGFR-PA-NP组(n=5),分别尾静脉注射给予20 mg·kg-1相应药物,24 h后剥取肿瘤、癌旁、肝、肺、心、脑、肾、脾、胃、小肠等组织,液相色谱-质谱(LC-MS)法检测药物在体内的组织分布情况.③20只模型裸鼠随机分为模型组(100 μL)、PA组(15 mg·kg-1)、PA-NP组(15 mg·kg-1)和EGFR-PA-NP组(15 mg·kg-1)(n=5),分别尾静脉注射给予相应干预,隔日1次,共28 d.28 d后观察药物对裸鼠皮下移植瘤生长的影响.通过原位末端转移酶标记(TUNEL)检测法检测皮下移植瘤中肿瘤细胞凋亡情况,免疫荧光染色法检测皮下移植瘤中血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达情况,免疫组化染色法和Western blot法检测皮下移植瘤中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化(p)-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和p-mTOR表达水平.结果 ①制备的EGFR-PA-NP粒径为(122±6.90)nm、Zeta电位为(-24.28±3.76)mV、包封率为85.24%、载药量为8.09%,符合纳米颗粒特征.②LC-MS法检测药物组织分布结果显示,EGFR-PA-NP组药物在裸鼠瘤体内的富集量是PA-NP组的3倍,显著高于PA-NP组(P<0.05).③在裸鼠A549皮下移植瘤模型中,PA组、PA-NP组和EGFR-PA-NP组裸鼠瘤体体积明显小于模型组(P<0.05),而EGFR-PA-NP组瘤体体积明显小于PA-NP组(P<0.05).与PA-NP组相比,EGFR-PA-NP组肿瘤中凋亡细胞数量显著增加(P<0.05),CD31蛋白表达水平显著降低(P<0.05),并且p-Akt、p-mTOR表达水平显著降低(P<0.05).结论 EGFR-PA-NP能够通过促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管新生发挥抗肺癌作用,其机制与抑制Akt/mTOR通路激活相关.

目的 建立香砂养胃丸气相色谱指纹图谱及多成分含量测定的方法.方法 采用气相色谱法建立香砂养胃丸指纹图谱并进行峰归属,同时测定柠檬烯、桉油精、樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯、百秋李醇、广藿香酮、α-香附酮的含量.结果 56 批香砂养胃丸样品的指纹图谱相似度 0.33～0.99,共匹配出共有峰 28 个,指认出化合物 14 个.柠檬烯、桉油精、樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯、百秋李醇、广藿香酮、α-香附酮在测定范围内(14.30～286.08、24.52～490.44、16.14～322.88、9.40～187.95、15.39～307.83、25.78～515.60、19.95～398.90、24.87～497.30 μg·mL-1)呈良好呈线性关系;平均加样回收率分别为 101.20%、97.90%、93.97%、94.23%、102.94%、100.54%、99.16%、98.31%;RSD 分别为 2.41%、1.48%、1.65%、2.00%、1.93%、2.30%、2.07%、2.38%;8 种成分的浓度分别为 0.2～959.1、0.3～420.4、1.0～542.6、0.0～64.5、0.0～364.2、0.0～339.6、0.0～130.7、0.0～82.0 μg·g-1.结论 所建立的气相色谱指纹图谱及多成分含量测定方法可用于香砂养胃丸的质量控制和评价.

目的: 研究广藿香不同茬口土壤对其幼苗生长的农艺性状及其植株挥发油和百秋李醇含量的影响,为揭示广藿香连作障碍成因及其缓解连作障碍、提高药材品质提供科学依据.方法: 以正茬、迎茬、重茬土壤为培养基质,在田间移栽广藿香组培苗,测定不同茬口土壤酚酸含量与土壤有机质、全氮、pH 等理化性质,以及广藿香幼苗农艺性状及挥发油和百秋李醇含量.结果: 重茬和迎茬土壤酚酸含量较正茬土壤显著升高,土壤有机质、全氮含量较正茬土显著下降,且重、迎茬土壤之间的上述指标差异显著.与正茬相比,在重茬土壤中生长的广藿香幼苗的各农艺性状显著下降,丙二醛(MDA) 含量升高,挥发油、百秋李醇含量显著减少; 在迎茬土壤中生长的广藿香存活率下降明显,其他各农艺性状较正茬土差异较小,挥发油和百秋李醇的含量小幅度升高.结论: 酚酸类化感物质在土壤中的积累,土壤理化性质的恶化可能是引起广藿香连作障碍的重要原因之一.

目的 建立顶空气相色谱法测定香菊感冒颗粒中麝香草酚和百秋李醇的含量.方法 采用顶空进样,使用Agilent HP-5(30 m×0.32 mm,0.25μm)毛细管柱,程序升温(初始温度40℃,保持5 min,以5℃·min-1的速率升温至150℃,再以10℃·min-1的速率升温至200℃,保持3 min),应用氢火焰离子化(FID)检测,载气:N2.结果 麝香草酚和百秋李醇的质量浓度分别在11.908～595.404(r=0.9995)和6.283～314.147μg·mL-1(r=0.9996)范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为97.0％(RSD值为2.0％)和99.3％(RSD值为1.5％).结论 该方法简单、准确,可作为香菊感冒颗粒的质量控制方法.

目的 利用气相色谱-串联三重四级杆质谱(GC-MS/MS)结合自动解卷积技术对沉香化气片中挥发性成分进行分析筛查并采用多离子反应监测技术(MRM)建立沉香化气片中多种成分(樟脑、乙酸龙脑酯、百秋李醇)含量测定的方法.方法 采用HP-5MS色谱柱(30 m×0.32 mm,0.25 μm);升温程序:初始温度100℃,以15℃/min升温至300℃,保持2 min;进样口温度280℃;电离方式:EI离子源(70 eV),离子源温度230℃;四级杆温度150℃;接口温度280℃;进样量为1μL.结果 使用解卷积软件共筛选出13个成分,在设定的MRM条件下樟脑、乙酸龙脑酯、百秋李醇质量浓度分别在4.5～90 μg/mL (r=0.999 8)、3.3～66 μg/mL (r=0.999 8)、2.6～51.5μg/mL (r=0.999 9)与其峰面积的比值呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为101.15％、102.64％、100.10％;10批样品樟脑、乙酸龙脑酯、百秋李醇质量分数分别在0.278～0.311、0.381～0.438、0.229～0.381 mg/g.结论 该方法准确、简便,重复性好,可用于同时测定沉香化气片中樟脑、乙酸龙脑酯、百秋李醇的含量并为该品种质量的提高提供了参考依据.

目的 分析广藿香不同生长时期的基因组DNA甲基化与其主要化学成分质量分数之间的关系.方法 采用甲基化敏感扩增多态性技术检测幼苗期、生长期和采收期广藿香的DNA甲基化程度,GC法测定其秋李醇和广藿香酮的质量分数.结果 3个生长时期的总甲基化率分别为35.6％、33.2％、31.3％,全甲基化率为15.6％、18.7％、14.9％;3个生长时期的百秋李醇质量分数分别为33.39％、78.04％、42.40％,广藿香酮的分别为5.53％、10.98％、13.67％.结论 随着广藿香的生长,广藿香的总甲基化率逐渐降低,而广藿香酮的质量分数逐渐增高;广藿香的全甲基化比例与百秋李醇质量分数的变化呈现相似的特征.

目的 诱导和促进广藿香悬浮培养细胞中百秋李醇的含量.方法 将茉莉酸甲酯和水杨酸两种诱导子分别在同一时期以不同浓度或在不同时期以相同浓度添加至广藿香悬浮细胞系中,培养周期结束后测定细胞鲜重及干重,GC法测定细胞中百秋李醇含量.结果 较低浓度的茉莉酸甲酯和水杨酸均能促进广藿香悬浮细胞中百秋李醇的合成,但两者适用的浓度范围和最佳添加时间存在差异,二者均抑制细胞的生长;综合考虑细胞生长和百秋李醇含量,茉莉酸甲酯的最适浓度为5 mg·L-1,水杨酸的最适浓度为1mg·L-1;细胞生长的对数期前期加入茉莉酸甲酯对百秋李醇诱导及促进效果最佳.与对照相比,在对数期初期(培养第9天)添加5 mg·L-1的茉莉酸甲酯可使广藿香悬浮细胞干重减小为对照组的73.6％,但百秋李醇含量提高4.69倍.结论 茉莉酸甲酯和水杨酸均能诱导促进其中百秋李醇的合成和积累.

目的:建立同时测定九香止痛丸中6种有效成分含量的GC法.方法:色谱柱为HP-5毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm),采取程序升温,载气为氮气,流速为2.0 ml·min-1,进样量为1μl,分流比为5:1,进样口温度为280℃,检测器(FID)温度为300℃.结果:茴香醛、反式茴香脑、丁香酚、百秋李醇、木香烃内酯、去氢木香内酯分别在20.53～821.00μg·ml-1(r=0.9995)、20.58～823.20μg·ml-1(r=0.9997)、22.83～913.20μg·ml-1(r=0.9991)、18.93～757.20μg·ml-1(r=0.9993)、22.16～886.40μg·ml-1(r=0.9994)、21.16～846.40μg·ml-1(r=0.9995)范围内呈良好的线性关系;加样回收率分别为98.62％(RSD=1.07％)、99.31％(RSD=0.47％)、99.59％(RSD=1.18％)、98.68％(RSD=0.85％)、100.27％(RSD=0.96％)、99.81％(RSD=1.27％)(n=6).结论:该方法操作简便,灵敏度高,准确度好,可用于控制该制剂的质量.

目的:建立气相色谱法同时测定小儿感冒颗粒中α-蒎烯、β-蒎烯、薄荷脑、百秋李醇和广藿香酮5个挥发性成分的含量,考察不同剂量60Co-γ射线辐照前后挥发性成分的变化.方法:采用Agilent HP-5MS(30 m×0.32 mm×0.25 μm)色谱柱,柱温采用程序升温,进样口温度220℃,检测器温度250℃,分流比为30:1,检测器为氢火焰离子化检测器,载气为氮气,流速为1.5 mL·min-1,进样量为1 μL.分别选择2、5、8 kGy的辐照剂量对小儿感冒颗粒进行辐照,比较辐照前后小儿感冒颗粒中5个挥发性成分含量的变化,并进行成组t检验考察其显著情况.结果:百秋李醇、广藿香酮、α-蒎烯、β-蒎烯及薄荷脑进样量分别在0.011 38～0.568 8、0.018 84～0.941 9、0.010 97～0.548 5、0.017 58～0.879 0及0.020 86～1.043 1μg范围内有良好线性,平均加样回收率分别为101.8％、100.9％、99.7％、98.9％和100.5％,RSD分别为1.3％、1.1％、0.90％、1.0％和1.2％.经过2、5、8 kGy辐照后,小儿感冒颗粒所含的挥发性成分α-蒎烯、β-蒎烯、薄荷脑、百秋李醇和广藿香酮均有变化,经成组t检验,在超过5 kGy后,α-蒎烯辐照前后含量变化显著(P＜0.05).结论:所建立的小儿感冒颗粒挥发性成分测定方法回收率高,重复性好,灵敏度高,可作为小儿感冒颗粒质控方法.在辐照剂量不超过5 kGy时,各挥发性成分变化不显著,可为小儿感冒颗粒辐照灭菌手段提供参考.

目的:采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学技术,结合多元统计分析方法鉴定并标定不同产地广藿香差异性成分,分析产地间差异性成分对气候因子的响应情况.方法:应用GC-MS对广藿香进行检测,结合“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”软件,得到其特征性的离子流色谱图,标定、指认共有峰.将指认出的所有共有峰的相对峰面积、离子碎片等信息导入SIMCA-P 12.0软件进行主成分分析(PCA)、偏最小二乘分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘法分析(OPLS-DA),得出产地分组,同时标定差异性化合物.对各代表产地的气象数据(包括大气压、温度、湿度及降水)与差异性组分相对丰度进行相关性分析,分析气象因子对广藿香差异性成分的影响.结果:确定了5种差异性化合物(β-石竹烯、去甲藿香烯醇、蓝桉醇、百秋李醇、广藿香酮)及9个非差异性化合物,且相近种质间差异性化合物相对丰度与其产地气候条件相关性显著.结论:种质差异对广藿香的成分影响占主导地位,种质相近的前提下,5种差异化合物可用于同化学型的广藿香产地区分,且其相对丰度受其产地气候因子影响显著.