细胞分泌的硫酸酯酶2是一种内源性硫酸酯酶，可水解细胞外基质中或细胞膜外表面硫酸乙酰肝素链上的硫酸基团，可使结合在硫酸乙酰肝素蛋白聚糖上的生长因子解离，提高局部生长因子浓度，激活下游信号。硫酸酯酶2在多种肿瘤中高表达，在肝细胞癌中硫酸酯酶2表达升高与不良预后有关。硫酸酯酶2可通过激活肝癌细胞内多条信号通路促进肿瘤进展。抑制肝癌细胞硫酸酯酶2的活性，可抑制肝癌细胞的增殖、迁移及成瘤能力。本文就硫酸酯酶2与肝细胞癌关系的研究进展进行综述。

目的:观察微小RNA(miR)-5787在乳腺癌组织及多种乳腺癌细胞系中的表达，分析过表达miR-5787对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响并探讨其可能的作用机制。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-5787在47例乳腺癌组织及癌旁组织、4种乳腺癌细胞系及正常乳腺上皮细胞中的表达。选择miR-5787表达最低的乳腺癌细胞系，分别转染miR-5787模拟物(实验组)和对照NC模拟物(对照组)。qRT-PCR检测两组细胞中miR-5787的表达。Transwell侵袭实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)分别检测过表达miR-5787对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响。生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证miR-5787可配对结合的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测靶基因mRNA及蛋白的表达。结果:与癌旁组织(5.05±0.82)相比，乳腺癌组织miR-5787的表达(1.32±0.33)明显降低( P<0.01)。与正常乳腺上皮细胞相比，4种乳腺癌细胞系miR-5787的表达均降低( P<0.05)，HCC1937细胞中的表达最低( P<0.01)。转染miR-5787模拟物后，实验组HCC1937细胞中miR-5787的表达明显高于对照组( P<0.01)，表明转染成功。过表达miR-5787可抑制乳腺癌HCC1937细胞的侵袭( P<0.05)和增殖( P<0.05)。生物信息学软件预测miR-5787的靶基因可能是硫酸乙酰肝素糖蛋白2(HSPG2)，miR-5787可配对结合HSPG2 mRNA( P<0.01)。qRT-PCR和Western blot结果显示，过表达miR-5787可明显抑制HSPG2蛋白和mRNA的表达( P<0.01)，波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)表达明显降低( P<0.05)。 结论:乳腺癌组织和细胞系中miR-5787均呈低表达，过表达miR-5787通过靶向干扰HSPG2基因的表达，抑制乳腺癌HCC1937细胞的侵袭和增殖。

目的:探讨连续性血液净化（CBP）对脓毒症患者免疫及内皮细胞功能的影响。方法:采用前瞻性研究方法，选择2019年3月至2020年10月滨州医学院附属医院重症医学科收治的年龄≥18岁且符合脓毒症诊断标准的患者作为研究对象，按随机数字表法分为标准治疗组和CBP治疗组。两组患者均参照2016年脓毒症与脓毒性休克处理国际指南相关推荐给予初始液体复苏、控制感染源及应用抗菌药物等标准治疗；CBP治疗组在标准治疗的基础上给予连续性静脉-静脉血液滤过（CVVH），治疗剂量为25~30 mL·kg -1·h -1，血流速为150~200 mL/min，每天20 h以上，连续治疗3 d。分别于治疗前及治疗1 d、3 d记录患者的血乳酸（Lac）、降钙素原（PCT）、淋巴细胞计数（LYM）、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEⅡ）和序贯器官衰竭评分（SOFA）等临床资料；取静脉血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清免疫功能相关指标〔白细胞介素（IL-4、IL-7）、程序性死亡受体-1（PD-1）、程序性死亡配体-1（PD-L1）、γ-干扰素（IFN-γ）〕及内皮细胞损伤相关指标〔可溶性血栓调节蛋白（sTM）、血管生成素-2（Ang-2）、血管性血友病因子（vWF）、硫酸乙酰肝素（HS）、多配体蛋白聚糖-1（SDC-1）〕水平；同时记录两组患者重症监护病房（ICU）住院时间，并随访患者28 d转归。 结果:最终入选标准治疗组患者20例，入选CBP治疗组患者19例；两组患者性别、年龄、感染部位差异均无统计学意义。标准治疗组ICU住院时间为（10±5）d；28 d死亡5例，存活15例。CBP治疗组ICU住院时间为（9±4）d；28 d死亡8例，存活11例。两组ICU住院时间和28 d死亡患者数差异均无统计学意义（均 P>0.05）。两组患者治疗前及治疗1 d Lac、PCT、LYM、APACHEⅡ、SOFA评分及免疫功能和内皮细胞损伤相关指标差异均无统计学意义。治疗3 d时，CBP治疗组患者Lac、PCT及APACHEⅡ、SOFA评分均显著低于治疗前，同时IFN-γ和IL-4等促炎与抗炎因子、PD-1和IL-7等免疫细胞凋亡相关指标及sTM、SDC-1、HS等内皮细胞损伤相关因子亦较治疗前明显改善，且上述指标的改善程度均较标准治疗组更明显，其中LYM明显高于标准治疗组（×10 9/L：1.3±0.3比0.9±0.4， P<0.05），IL-4、IFN-γ、IFN-γ/IL-4比值、IL-7、PD-1、sTM、SDC-1、HS、Ang-2水平则均明显低于标准治疗组〔IL-4（ng/L）：2.8（1.5，3.2）比3.3（2.7，5.2），IFN-γ（ng/L）：6.3（5.4，106.5）比217.9（71.4，517.1），IFN-γ/IL-4比值：3.7（1.8，70.3）比59.1（18.3，124.9），IL-7（ng/L）：4.6（3.2，5.1）比6.3（5.2，8.0），PD-1（μg/L）：0.04（0.03，0.06）比0.08（0.05，0.12），sTM（μg/L）：4.9（4.3，7.4）比8.7（6.0，10.8），SDC-1（μg/L）：0.6（0.3，1.1）比0.9（0.8，2.5），HS（ng/L）：434.8（256.2，805.0）比887.9（620.1，957.3），Ang-2（ng/L）：934.0（673.3，1 502.1）比2 233.9（1 472.5，3 808.4）〕，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:CBP治疗可以纠正患者的免疫抑制状态，降低多种内皮细胞损伤标志物水平，减少多糖包被的降解，但不能明显降低患者28 d死亡风险和缩短ICU住院时间。

目的:探讨心脏骤停（CA）患者复苏后早期血清糖萼标志物水平和患者预后的关系。方法:本研究是一项回顾性队列研究。以徐州医科大学附属医院2021年9月至2022年10月发生CA后恢复自主循环（ROSC）超过24 h并且入住重症监护病房的患者为研究对象，收集CA后第24小时的血清用以检测血清糖萼标志物水平，包括硫酸乙酰肝素（HS）、透明质酸（HA）和黏结蛋白聚糖-1（Sdc-1）。按照CA后30 d的脑功能分级（CPC）将患者分为功能良好组（CPC=1~2）和功能不良组（CPC=3~5），以logistic回归分析血清糖萼标志物和神经功能预后的关系。以30 d生存结局重新将患者分组，即存活组和死亡组，以Cox回归分析血清糖萼标志物和患者30 d死亡率之间的关系。结果:共纳入71例患者，其中女31例（43.7%），男40例（56.3%）；年龄（59.0±17.0）岁。与功能良好组（ n=22）相比，功能不良组（ n=49）HS和HA水平均更高［HS：2 461.0（1 623.0，5 492.0）μg/L比1 492.0（914.0，2 550.0）μg/L， P=0.008；HA：124.0（97.0，365.0）μg/L比337.0（135.0，1 421.0）μg/L， P=0.033］；校正的logistic回归分析发现，高HS水平是CA患者30 d神经功能预后不良的危险因素（ OR=0.389，95% CI：0.182~0.828， P=0.014）。在30 d生存分析中，和生存组（ n=39）相比，死亡组（ n=32）的HS和HA水平要明显增高［HS：1 880.0（1 011.0，3 554.0）μg/L比2 500.0（1 726.0，6 276.0）μg/L， P=0.027；HA：162.0（99.0，537.0）μg/L比813.0（148.0，1 531.0）μg/L， P=0.025］；校正的Cox回归表明高HS和HA均是30 d死亡的危险因素（HS： HR=1.697，95% CI：1.126~2.557， P=0.011；HA： HR=1.336，95% CI：1.047~1.705， P=0.020）。 结论:CA后24 h血清HS可能用于预测30 d神经功能和死亡率；HA可能仅用于预测30 d死亡率；而Sdc-1对预后无预测作用。

目的 建立糖尿病(DM)合并新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染小鼠模型,研究DM合并SARS-CoV-2感染病程发展中的重要病理生理变化.方法 将野生型(WT)小鼠和由细胞角蛋白18基因启动子驱动的人血管紧张素转化酶2受体(K18-hACE2,简称hACE2)的转基因小鼠分别随机分为溶剂对照组、DM组、SARS-CoV-2病毒刺突蛋白感染(S)组以及DM合并S蛋白感染(DM+S)组,每组10～12只.除溶剂对照组及S组外,其余组通过10周高脂饮食后连续3dip给予链脲佐菌素(STZ)40 mg·kg-1诱导DM症状,溶剂对照组及S组给予等体积0.1 mol·L-1柠檬酸钠缓冲液.在此基础上,S组及DM+S组小鼠经鼻腔滴入15 μg SARS-CoV-2 S蛋白与1 g·L-1聚肌胞苷酸(Poly[I:C])的混合溶液50 μL,溶剂对照组滴鼻给予等体积无菌水.在高脂喂养第6周和ip给予STZ 1周后,以口服葡萄糖耐量实验评价小鼠糖耐量水平及胰岛β细胞功能.高脂喂养第6周至ip给予STZ 2周后,每周用血糖仪检测小鼠随机血糖及空腹血糖.DM小鼠S蛋白感染前及感染24,48和120 h后,每组取3只小鼠颌下静脉取血后处死并取肺组织,采用苏木精-伊红染色法观察合并S蛋白感染前后的肺组织病理改变.S组小鼠在感染S蛋白前及感染6,24,48,72和120 h后采血,Luminex液相芯片技术检测小鼠血浆细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平,ELISA检测血浆硫酸乙酰肝素(HS)水平;将细胞因子水平、HS水平与小鼠感染S蛋白后的肺部病理损伤程度进行Spearman相关性分析.结果 STZ合并高脂饮食可诱导小鼠DM样表现,hACE2-DM组随机血糖(P<0.01)和1周后的空腹血糖(P<0.05)均显著高于WT-DM组,且hACE2-DM小鼠胰岛功能损伤程度显著高于WT-DM小鼠(P<0.05).与DM组相比,DM+S组小鼠均表现出更严重的肺部病理变化,并伴有大量炎症浸润和肺间质增厚.与溶剂对照组相比,S蛋白感染6 h,WT-S组小鼠血浆中促炎细胞因子G-CSF,IL-6和IP-10均显著升高(P<0.01),S蛋白感染24 h,促炎细胞因子IL-17和抗炎细胞因子IL-10均显著升高(P<0.05);S蛋白感染6 h,hACE2-S组血浆中促炎细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-α,MCP-1,G-CSF和IP-10均显著升高(P<0.05,P<0.01);WT-DM+S组和hACE2-DM+S组IL-17分别在S蛋白感染24 和6h显著升高(P<0.01,P<0.05),hACE2-DM+S组IFN-γ和IL-1β延迟至48h显著升高(P<0.05,P<0.01),MCP-1延迟至72h显著升高(P<0.05).与溶剂对照组相比,S蛋白感染6和24h后,WT-S组血浆中HS水平显著升高(P<0.05,P<0.01),48 h开始降低;同时,与WT-S组相比,感染6h后,WT-DM+S组HS水平略升高,24 h出现降低;hACE2-S组HS水平于24h显著升高(P<0.01),且在S蛋白感染24,48和120 h后与WT-S组基本持平;S蛋白感染6,24 和48h后,hACE2-DM+S组血浆HS水平均显著升高(P<0.01,P<0.05),升高持续时间较其S组长.小鼠血浆中IL-1β,IL-10,MCP-1,IP-10,G-CSF以及HS水平与DM+S小鼠肺损伤程度呈正相关(P<0.05,P<0.01).结论 本研究建立的DM合并SARS-CoV-2 S蛋白感染小鼠模型能成功模拟临床患者的部分病理生理特征,主要表现为较单纯感染免疫反应钝化,HS水平升高且持续时间较长.IL-1β,IL-10,MCP-1,IP-10,G-CSF以及HS可能有助于及时了解DM合并SARS-CoV-2感染患者的病程.

目的 探讨基质金属蛋白酶7(MMP7)和硫酸乙酰肝素糖蛋白2(HSPG2)在胰腺癌患者中的表达及临床意义.方法 选取2018年1月—2020年12月广西医科大学附属肿瘤医院收治的胰腺癌患者30例,收集胰腺癌组织标本及其血清样本,同时收集癌旁正常组织以及30例健康志愿者血清样本作为对照.采用免疫组化方法检测胰腺癌组织及癌旁正常组织中MMP7和HSPG2蛋白表达;采用酶联免疫吸附法检测胰腺癌患者和健康对照者血清样本中MMP7和HSPG2的表达水平;收集患者临床资料并分析MMP7和HSPG2表达与临床病理特征、生存预后的关系.计量资料两组间比较采用成组t检验.计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法.MMP7与HSPG2表达的关系采用Spearman相关分析.采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存情况比较采用Log-rank检验.结果 免疫组化结果显示,胰腺癌组织中MMP7和HSPG2蛋白阳性表达均高于癌旁组织,差异均有统计学意义(χ2 值分别为31.093、35.623,P值<0.05).胰腺癌患者血清中MMP7、HSPG2水平均显著高于健康对照组(t值分别为20.174、32.600,P值<0.05).MMP7和HSPG2表达均与肿瘤直径、TNM分期有关(P值<0.05).Spearman相关性分析显示,HSPG2与MMP7之间的表达呈正相关(r=0.539,P=0.002).MMP7和HSPG2蛋白阳性表达患者总生存率明显低于阴性对照患者(χ2值分别为4.084、12.554,P值均<0.05).结论 MMP7和HSPG2在胰腺癌组织和血清中呈阳性表达,且与肿瘤的直径、TNM分期有关,两者可能在胰腺癌的发生发展中存在某种关联,有望成为胰腺癌诊断和判断预后的潜在标志物.

目的 探讨血必净注射液对脓毒症伴轻度急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者的治疗效果及对多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)和氧化应激相关指标的影响.方法 选取2021年1月-2022年9月河北医科大学哈励逊国际和平医院收治的84例脓毒症伴轻度ARDS患者,按照随机数字表法将患者分为对照组和试验组,每组各42例.对照组患者给予早期复苏、抗感染、营养支持及对症治疗.试验组在对照组基础上加用血必净注射液,每次取血必净注射液100mL加0.9％氯化钠注射液100mL,静脉滴注,每天2次,连续治疗3d.分别于治疗前后,检测两组患者外周血C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、透明质酸(HA)、SDC-1、硫酸乙酰肝素(HS)水平;比较两组治疗前后Murray肺损伤评分(MLIS)、全身性感染相关性器官功能衰竭(SOFA)评分、急性生理学及慢性健康状况Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分,随访两组患者出院1个月生存情况.结果 试验组治疗总有效率(85.71％)高于对照组(66.67％),两组差异有统计学意义(P＜0.05).治疗前,两组IL-8、IL-6、TNF-α、CRP、MDA、SOD、HA、SDC-1、HS 比较,差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后,两组 IL-8、IL-6、TNF-α、CRP、MDA、HA、SDC-1、HS水平均较本组治疗前显著降低(P＜0.05),SOD较治疗前显著升高(P＜0.05);且试验组IL-8、IL-6、TNF-α、CRP、MDA、HA、SDC-1、HS水平较对照组明显降低(P＜0.05),SOD较对照组明显升高(P＜0.05).治疗前,两组SOFA、APACHE Ⅱ、MLIS评分均无显著差异(P＞0.05).治疗后,两组SOFA、APACHE Ⅱ、MLIS评分均较本组治疗前显著降低(P＜0.05),且试验组SOFA、APACHE Ⅱ、MLIS评分较对照组明显降低(P＜0.05).出院后1个月,试验组死亡率(30.95％)明显低于对照组(52.38％),差异有统计学意义(P＜0.05).脓毒症伴轻度ARDS患者血管内皮糖萼(EG)降解物HA、SDC-1、HS水平与MLIS评分间呈正相关(r=0.733,P=0.036;r=0.831,P=0.011;r=0.826,P=0.013).受试者工作特征(ROC)曲线显示,SDC-1联合氧化应激指标检测对脓毒症伴轻度ARDS患者短期的预后预测价值更大.结论 血必净注射液通过减轻脓毒症伴轻度ARDS患者肺血管内皮EG的降解,明显缓解ARDS,有效改善患者短期预后.

目的 观察抗血管内皮生长因子(VEGF)药物治疗后视网膜血管内皮细胞基因表达谱的RNA-Seq分析结果.方法 体外培养视网膜血管内皮细胞,取对数生长期细胞用于实验.将细胞分为VEGF组、VEGF联合抗VEGF药物组.VEGF组细胞采用50 ng/ml VEGF持续作用72 h,以模拟糖尿病视网膜病变中血管内皮细胞的高VEGF生存环境.VEGF联合抗VEGF药物组细胞采用50 ng/ml VEGF+2.5 μg/ml抗VEGF药物持续作用72 h,以仿效抗VEGF药物治疗后细胞所处的微环境.应用RNA-Seq技术对两组细胞进行全转录组测序,获得生物学大数据,并在此基础上分析差异表达基因;通过GO功能、Pathway显著性富集分析对差异基因的功能及所在的信号通路进行解释说明.结果 分别获得两组细胞的基因表达谱信息.两组细胞之间共存在328个差异表达基因,包括194个上调基因和133个下调基因.差异基因功能涉及分子生物学过程调控以及细胞的能量代谢、蛋白合成等诸多方面,其中SI、PRX、HPGD与蛋白合成相关,BIRC7与细胞凋亡相关,而ABLIM1、CRB2与视网膜发育相关,ABCG1、ABCA9、ABCA12与巨噬细胞胆固醇和磷脂转运相关.GO功能显著性富集分析结果显示,差异基因的功能主要可以划分为生物学行为调控、细胞组分形成以及分子功能三大板块.Pathway显著性富集分析结果显示,Notch信号通路、细胞外基质受体通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、转化生长因子-β(TGF-β)信号通路、Wnt信号通路表达在两组细胞间存在差异,而其中又以与纤维化进程调控密切相关的TGF-β信号通路中钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱβ(CAMK2B)、胶原蛋白Ⅲ型α1链(COL3A1)、细胞球蛋白(CYGB)、前列腺素E受体2(PTGER2)、硫酸乙酰肝素6-O-磺基转移酶2等基因的差异表达最为引人关注.结论 抗VEGF药物治疗后可能导致CAMK2B、COL3A1、CYGB、PTGER2等TGF-β通路相关基因的表达上调进而加剧视网膜纤维化进程.

改善胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要治疗目标之一[1-2].噻唑烷二酮类药物因其心血管疾病潜在风险,在临床上的使用范围受限[3].因此,开发更多的胰岛素增敏药物靶位对于2型糖尿病的治疗具有积极意义.磷脂酰肌醇蛋白酶(GPC )家族是通过糖基磷脂酰肌醇锚连接到质膜外表面的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖家族[4].GPC4在小鼠中主要存在于附睾脂肪组织中,在人类主要存在于皮下脂肪组织中,且与肥胖相关指标密切相关.进一步研究发现,GPC4能够直接作用于胰岛素受体,在脂肪组织、肝脏和肌肉中均起到胰岛素增敏作用[5].在糖尿病前期和糖尿病患者中,其血清GPC4水平均高于正常人群,且与胰岛素敏感性相关[6].我们通过探讨GPC4与T2DM患者胰岛素敏感性、胰岛β细胞功能及体脂的相关性,为进一步研究提供依据.

肾纤维化是慢性肾病进展的一个共同途径,也是慢性肾病发生的必然结果.肾纤维化的特征在于大量成纤维细胞活化和细胞外基质(ECM)的过度沉积,导致肾功能的进行性丧失.临床上还没有阻止肾纤维化的有效治疗方法.类肝素酶(heparan sulfate proteogly cans,HPSE)是一种内-β(1-4)-d-葡糖醛酸糖苷酶,是已知的唯一能够降解硫酸乙酰肝素(Heparan sulfate,HS)侧链的人糖类内切酶,硫酸乙酰肝素是细胞外基质和肾小球内皮细胞糖萼的重要组成,在维持其完整性和肾小球滤过屏障中起关键作用,类肝素酶通过裂解硫酸乙酰肝素侧链影响某些病理生理过程,包括肿瘤进展、新生血管形成和炎症反应.研究发现,蛋白尿和慢性肾脏病的进展与类肝素酶对肾小球滤过屏障的损害有关[1].类肝素酶影响基因表达、蛋白多糖和细胞反应的多种信号传导,通过与跨膜蛋白相互作用调节细胞内信号传导(Src,Akt和p38 MAPK)[2].而类肝素酶与肾间质纤维化研究甚少,现将其与肾间质纤维化之间的研究作一综述.