目的 利用磷脂酶A2(PLA2)开放血脑屏障(BBB)的特性,促使抗毒药物酰胺磷定(HI-6)进入中枢起效,为治疗中枢神经系统中毒提供新的研究思路.方法 通过体外释放和体外稳定性实验等方法,对复合物(PLA2+HI-6)的组分进行物理性质表征.利用荧光素钠模拟水溶性药物进行荧光染色,通过评价脑组织荧光病理,定性考察复合物的中枢递送能力.通过激光共聚焦显微镜下碘化丙啶染色,定性观察PLA2对细胞膜通透性的影响.通过建立梭曼染毒小鼠模型,评价复合物对抗有机磷中枢中毒效果:(1)测定小鼠脑乙酰胆碱酯酶重活化率;(2)观察小鼠脑组织病理切片;(3)统计不同处理组小鼠生存时间.分别从细胞水平和动物水平评价PLA2的安全性.结果 体外释放和体外稳定性实验结果表明,加入PLA2并不影响HI-6的释放和降解.在动物水平,PLA2有助于荧光素钠进入脑组织被细胞摄取,表现出良好的中枢递送能力.PLA2与HI-6药物组合将染毒小鼠脑内乙酰胆碱酯酶的重活化率提升至50％,相比于单独给药HI-6,提高约12倍.小鼠脑组织病理结果显示,复合物能有效对抗神经毒剂中毒引起的中枢神经系统损伤,并在3倍染毒致死剂量下显著延长小鼠存活时间,同时明显缓解中枢中毒症状.递送机制研究发现,复合物通过增加细胞膜通透性,经跨细胞途径实现中枢递送.细胞水平和动物水平的安全性实验表明,PLA2在该研究中的使用剂量安全可靠,未造成不良反应.结论 该研究以PLA2为开放材料和小分子药物HI-6组合,成功构建一种能够有效穿透BBB的复合物PLA2-HI-6.该复合物具备一定中枢靶向性,能显著提高神经毒剂中毒后脑中乙酰胆碱酯酶重活化率,为解决有机磷中枢中毒救治难题提供了参考.

有机磷神经性毒剂中毒快、致死率高、致死剂量低,在化学武器中占据主要地位.对有机磷神经性毒剂中毒的长效预防、高效治疗以及残存毒剂的彻底清除一直是研究人员关注的焦点.生物清除剂包括具有生物活性的酶和抗体等,按作用机制主要分为与有机磷化合物按摩尔比1∶1定量结合的化学计量型、需与肟类化合物联合使用达到类似"催化作用"的假催化型和利用酶的催化特性快速水解有机磷化合物的催化型.生物清除剂作用高效、迅速,但用作有机磷抗毒剂时往往因其异源蛋白属性而显示出免疫原性,或因稳定性不佳而在体内被迅速清除,亟需通过递送技术予以解决,主要包括聚羧基甜菜碱、聚乙二醇、聚唾液酸修饰及红细胞膜递送和脂质体负载等.本文介绍了有机磷生物清除剂的种类和作用机制,并对有助于提高其成药性的递送技术进行综述,以期为有机磷化合物中毒的预防和治疗提供参考.

目的 评价氧化锌纳米颗粒(ZnO NP)水凝胶(ZnO NP-gel)高分子材料对梭曼染毒的洗消的效果.方法 化学沉淀法制备ZnO NP后,制备ZnO NP-戊烯酸,最后制备ZnO NP-gel.扫描电子显微镜(SEM)下观察形貌表征,透射电子显微镜(TEM)观察内部结构表征,粒度分布仪测定zeta电位,红外光谱(IR)分析其化学键结构,采用X射线衍射(XRD)分析其衍射图谱.通过梭曼的联苯胺显色反应测定体外梭曼的残余量.10 mL梭曼52.2 mg·L-1分别与ZnO NP 1 g·L-1和ZnO NP-gel 1 g·L-1混匀(V:V=3:1)静置30 min,过滤,小鼠sc给予滤出液40 μL·g-1,观察小鼠的中毒症状及死亡情况.结果 SEM和TEM下见ZnO NP-gel均为块状结构;ZnO NP-gel zeta电位为(-7.89±0.04)mV;IR分析显示,ZnO NP-gel的波数在754和618 cm-1处出现较强吸收峰;XRD图谱显示,合成的ZnO NP-gel在2θ=8.06738°可见明显尖峰.在相同浓度的ZnO NP-gel和ZnO NP,ZnO NP-gel体外洗消效率均显著高于ZnO NP组(n=3,P<0.05);洗消50%梭曼的时间缩短了4倍.皮下注射梭曼经ZnO NP-gel洗消后的过滤液的小鼠均未出现惊厥和死亡.结论 ZnO NP-gel对梭曼具有快速的吸附和催化双重功能的复合洗消效果,高分子修饰后能提高ZnO NP的洗消能力.

长期低剂量接触有机磷化合物会引起迟发性神经疾病,严重时可诱变致癌甚至死亡.预防和处理有机磷化合物引起的中毒、判断中毒程度及评估治疗效果,需要及时、准确地检测有机磷化合物.其中最有效的方式是对其体内生物标志物进行检测.本文简要介绍了有机磷化合物及其中毒机制,介绍了蛋白质加合物的研究现状,着重概括了有机磷化合物和白蛋白的加合位点和加合机制,尤其是近年来新发现的加合位点和靶向蛋白.并在此基础上指出了有机磷化合物蛋白质加合物作为生物标志物的发展方向.

目的 探讨翻转课堂在防化医学实验教学中的应用效果.方法 抽取陆军军医大学临床医学专业2013级五年制本科学员60名,在2017年5～7月的防化医学实验教学课程中,采用简单随机分组法分为实验组和对照组,每组各30名.对照组采用传统的实验教学方法,仅在实验课上进行相关实验原理的复习和实验步骤的讲解;实验组采用翻转课堂的教学模式进行实验教学.实验课结束后,统计两组学员实验操作时间和实验成绩,并调查学生对实验教学的满意度.结果 实验组学员的实验操作时间显著短于对照组,而实验成绩明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).问卷调查结果显示,与对照组比较,实验组所有学员均认为此次实验课激发了学习兴趣和主动性并希望继续接受该种教学方法,差异有高度统计学意义(P＜0.01);实验组认为该教学方法可以提高自学能力、促进理解记忆知识、增强运用理论知识和实验操作能力的学员人数均显著高于对照组,差异有高度统计学意义(P＜0.01).结论 实施翻转课堂能有效提高防化医学实验教学的质量,提升学员掌握知识及技术操作等能力,值得在其他相关实验教学中推广应用.

目的 评价不同剂量VX对小鼠脑和外周血乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性和含量随时间变化的影响.方法 小鼠sc给予VX 5,10和16μg·kg-1,分别于10 min,1 h,4 h,24 h,48 h和72 h记录体重和脑重,计算脑系数;Ellman法测定AChE活性;ELISA测定AChE含量;并计算被VX抑制的AChE含量和VX消耗量.结果 在染毒后72 h内,各组小鼠体重、脑重和脑系数均未见明显变化.与同剂量下染毒10 min相比,VX 5,10和16μg·kg-1组外周血AChE活性抑制率在各时间点均明显下降(P<0.05,P<0.01).与同剂量染毒10 min比较,VX 16μg·kg-1组脑AChE活性抑制率在4～72 h显著下降(P<0.01);10μg·kg-1组在48和72 h显著下降(P<0.01);5μg·kg-1组在24 h显著上升(P<0.01),而在其他时间点无明显变化.各剂量组脑和外周血中VX的消耗量均在48 h达到最低,在72 h略有回升.VX 16μg·kg-1组VX消耗量仅占染毒剂量的28％.结论 在染毒后48 h内大部分毒剂残留在体内,72 h后可能再次引起中枢AChE抑制.因此,对于神经性毒剂VX中毒的救治,建议急性中毒症状控制后,在染毒48 h内再次给予抗毒药物.

诺维乔克类(Novichoks)化合物是G类和V类神经性毒剂的衍生物,被称为第三代神经性毒剂,具有不易侦检和不易治疗的特点.根据目前已有的数据显示,该类化合物作为新一代的神经性毒剂,与G类和V类神经性毒剂在结构上有一定的相似性,均含有P=O双键,但其结构比G类和V类神经性毒剂的结构更为复杂.复杂的结构和效应关系决定了它们更易与乙酰胆碱酯酶发生作用,形成的中毒酶更易老化,因此其毒性更大.Novichoks化合物中毒后除表现出胆碱能神经系统功能紊乱的症状,还可能伴有难治性的迟发性神经毒性症状,目前尚无针对Novichoks化合物的特效抗毒药物.但这类化合物最近在英国的使用暗示了它们对人类的巨大危险性,关于Novichoks化合物的特效抗毒药物的研究势在必行.因此,本文对其结构、理化性质、中毒机制、临床表现和可能的防治方法等进行了综述,希望能增进人们对于Novichoks化合物的了解,促使开发针对这类化合物的新型抗毒特效药物以及侦检、防护和洗消的策略.

有机磷化合物(OP)是在磷(膦)骨架上形成的复杂多样的结构,部分具有剧毒和高毒性.如军用制式神经性毒剂(NA)和有机磷农药等,对人类健康和生命造成了严重威胁.OP的胆碱酯酶(ChE)动力学研究是其毒性机制和抗毒药物研究的重要基础.本文在文献计量聚类分析的基础上,主要针对NA和部分有机磷农药,论述了OP抑制ChE的反应机制和胆碱酯酶动力学研究方法,重点总结了不同结构OP和不同种属ChE的动力学特征,特别针对OP对人ChE的抑制、老化与自发重活化动力学特征与模型、肟类重活化剂的重活化动力学特征和新型重活化剂的研究等进行综述,以期为全面了解OP毒性及其毒性特征、有效评估解毒剂和开发更有效的治疗方案等提供有益参考.

近年来,国际局部冲突、各国内部矛盾突显、恐怖主义死灰复燃导致神经性毒剂造成人员伤亡情况时有发生,神经性毒剂无时无刻不在威胁着人类安全与健康.神经性毒剂的医疗应对策略研究始终是国内外防化医学研究领域的热点与难点.该文介绍了近年国内外神经性毒剂的医疗对策研究动向,综述了神经性毒剂的检测、中毒预防(外在防护及预防用药)、中毒后的救治药物、中毒后诱发的远后效应等研究进展.

目的 研究石杉碱甲(HupA)衍生物石杉碱甲-水杨醛(Hup A-SA)和石杉碱甲-反式肉桂醛(Hup A-TCA)对神经性毒剂梭曼(GD)的体外、体内预防效应及安全性.方法 采用改良Ellman法体外测定Hup A及其衍生物Hup A-SA和Hup A-TCA对乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制效应及对GD的体外预防效应.小鼠灌胃给予Hup A(2mg·kg-1)、Hup A-SA(2.86 mg·kg-1)和Hup A-TCA(2.94 mg·kg-1),分别于给药后12、24 h肌内注射1×LD95剂量的GD,观察并记录各组小鼠的中毒症状及死亡情况.小鼠灌胃给予Hup A(4～10 mg·kg-1)、Hup A-SA(15～55 mg·kg-1)和 Hup A-TCA(5～40 mg·kg-1),记录小鼠的中毒症状及 14 d内的死亡情况,使用Bliss法计算半数致死剂量(LD50).结果Hup A、Hup A-SA、Hup A-TCA均浓度依赖性地抑制AChE活性,其半数抑制浓度(IC50)分别为(0.36±0.05)、(1.36±0.03)和(0.62±0.03)μmol·L-1.3种药物与AChE预孵育,均可显著提高GD的IC50值;体内预防给药12h后以GD攻击,3种药物小鼠存活率均提高,分别为66.67％、75％和100％;预防给药24h后以GD攻击,2个衍生物组仍有部分动物存活,而Hup A组动物全部死亡,2种衍生物体内预防GD的时效性较Hup A更长.急性毒性研究显示,3种药物小鼠灌胃的LD50值分别为7.20、45.75和16.42 mg·kg-1,衍生物安全性提高.结论 Hup A-SA和Hup A-TCA均通过可逆地抑制AChE活性发挥GD中毒预防作用,预防时间较Hup A长,且安全性更高.