目的:探讨高压氧联合石杉碱甲在辅助精神分裂症患者无抽搐电休克治疗（MECT）中的应用效果。方法:前瞻性选取2019年3月至2022年4月河南省驻马店市第二人民医院诊治的120例行MECT的精神分裂症患者作为研究对象，采用随机数字表法分为观察组（高压氧联合石杉碱甲治疗）和对照组（石杉碱甲治疗）各60例（由于中途脱落，2组最终分别纳入48例和32例），比较2组患者治疗前后的症状改善情况、短时记忆能力和应激反应相关指标。结果:治疗后，观察组阳性症状得分低于对照组，视觉再认、图片回忆、联想学习、背诵数目得分高于对照组，谷胱甘肽过氧化物酶1（GPX1）、超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮（NO）水平低于对照组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:高压氧联合石杉碱甲对改善精神分裂症患者MECT后短时记忆有积极影响，同时有助于减轻应激反应和临床症状。

目的 研究藤石松Lycopodiastrum casuarinoides的生物碱类成分.方法 利用多种色谱方法对藤石松总生物碱部位进行分离纯化.通过多种波谱技术以及单晶X-射线衍射鉴定化合物的结构.结果 从藤石松全株植物中分离到11个化合物,分别鉴定为6-羟基-β-玉柏碱(1)、去-N-甲基-β-玉柏碱(2)、casuarine B(3)、石杉碱乙(4)、casuarinine B(5)、β-玉柏碱(6)、蛇足石杉碱(7)、N-demethylhuperzinine(8)、石杉碱丙(9)、8,15-dihydrohuperzinine(10)、casuarinine I(11).结论 化合物1为新的石松碱类化合物.

为了促进蛇足石杉中石杉碱甲增量富集,本文利用内生真菌与蛇足石杉的共生进化关系,以共培养体系(co-culture system,CCS)为基础,提出了增加石杉碱甲产率的新方法.以蛇足石杉植株存活率为指标,确定共培养体系最佳培养条件;以细胞存活率、愈伤组织诱导率和增殖率为指标,确定最佳培养基条件;以石杉碱甲和麦角甾醇为指标性成分,控制植物细胞和内生真菌比例关系,维持培养体系内植物细胞和内生真菌之间的生长平衡,获得最佳的继代时间.结果表明:CCS的最佳培养条件为光照强度100 Lux,湿度95％,MS液体培养基,蔗糖20.0 g/L,2,4-二氯苯氧基乙酸5.0mg/L和激动素1.0mg/L;4 d为最佳继代时间,其石杉碱甲的浓度最高,与1 d时相比增加了 49.34％,并且石杉碱甲与麦角甾醇的浓度比值控制在1.5～2.2之间时,内生真菌生长对石杉碱甲的富集有良性促进作用.该研究为高效、低成本增加石杉碱甲产量提供新的探索路径,亦可以有效解决药源不足问题,具有很好的应用前景.

目的 研究二苯乙烯苷(TSG)对阿尔茨海默病(AD)大鼠Tau蛋白丝氨酸199位点(Ser199位点)磷酸化的影响.方法 将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、阳性对照组和低、中、高剂量实验组,每组6只.除正常组和假手术组外,其余5组脑内注射Aβ25-35制备AD模型.低、中、高剂量实验组分别按3.30 × 10-2、0.10和0.30 g·kg-1的剂量灌胃给予TSG;阳性对照组按0.15 mg·kg-1的剂量灌胃给予石杉碱甲;正常组、假手术组和模型组均灌胃给予等体积0.9％NaCl.用免疫组化法和蛋白质印迹法检测脑组织Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白(Ser199位点)分布与表达水平.结果 中、高剂量实验组和阳性对照组、模型组、假手术组、正常组的海马区Tau蛋白平均光密度值分别为0.59±0.02、0.54±0.01、0.53±0.07、0.78±0.08、0.54±0.00 和 0.51±0.04,海马区磷酸化Tau蛋白(Ser199位点)平均光密度值分别为0.73±0.13、0.58±0.04、0.59±0.04、0.91±0.07、0.61±0.12 和 0.57±0.05,皮质区 Tau 蛋白平均光密度值分别为 0.67±0.03、0.58±0.01、0.57±0.03、0.83±0.02、0.54±0.05和0.54±0.06,皮质区磷酸化Tau蛋白(Ser199位点)平均光密度值分别为 0.67±0.02、0.59±0.02、0.56±0.01、0.89±0.10、0.55±0.01 和0.53±0.02,脑组织中磷酸化Tau蛋白(Ser199位点)相对表达水平分别为0.64±0.19、0.36±0.06、0.40±0.08、0.96±0.06、0.52±0.12 和 0.41±0.05.中、高剂量实验组和阳性对照组、正常组、假手术组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 TSG可以影响Tau蛋白过度磷酸化进程,可能是通过下调磷酸化Tau蛋白(Ser199位点)的表达.

为了获得高产石杉碱甲(Huperzine A,HupA)的蛇足石杉[Huperzia serrata(Thunb.)Trev.]叶状体,对H2O2诱变后的叶状体进行了研究.结果表明,诱变后叶状体株系的HupA含量显著提高,并获得高产株系SH42,其相对生长率和HupA含量分别达到4499.28%和261.17μg g–1 DW,比起始叶状体分别提高了2.35倍和2.43倍;且株系间可溶性蛋白质谱带和SOD同工酶谱均存在差异,经过连续9代培养,变异叶状体可以稳定遗传.因此,H2O2对叶状体细胞具有良好的诱变效应,可以用于筛选高产HupA株系.

目的:探讨石杉碱甲联合艾司西酞普兰对抑郁症的临床疗效及认知功能的影响.方法:选取60例抑郁症患者随机分为研究组和对照组,各30例,研究组采用石杉碱甲联合艾司西酞普兰,对照组单用艾司西酞普兰,均治疗8周,在治疗前后采用17项汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)为疗效指标,以威斯康星卡片分类测验(WCST)、韦氏记忆量表中国修订版(WMS-RC)评定认知功能,用不良反应量表(TESS)评定不良反应.结果:(1)治疗后研究组治疗总有效率(90.0％)、痊愈率(50.0％)与对照组的(86.7％、46.7％)比较差异无统计学意义(P＞0.05),两组内HAMD-17、HAMA评分均低于治疗前(P＜0.05),两组间HAMD-17、HAMA评分比较差异无统计学意义(P＞0.05).(2)治疗后研究组WCST中总测验次数、持续错误数、随机错误数均低于治疗前(P＜0.05),对照组总测验次数低于治疗前(P＜0.05),研究组和对照组WMS-RC中长时记忆、短时记忆、即刻记忆及记忆商数均高于治疗前(P＜0.05).两组间比较,治疗后研究组WCST中随机错误数低于对照组,WMS-RC中长时记忆、短时记忆、记忆商数均高于对照组(P＜0.05).(3)两组治疗后各种不良反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:石杉碱甲联合艾司西酞普兰治疗抑郁症安全有效,与单用艾司西酞普兰者相当,能显著改善患者认知功能,明显优于单药治疗.

目的 研究中药治疗AD相关机制,探究以益气活血法为组方原则的天芪益智颗粒对AD大鼠脑组织炎性反应的保护作用.方法 90只雄性SD大鼠随机分成6组,每组15只,模型组和治疗组予Aβ1-42在大鼠侧脑室注射建立AD动物模型,造模成功后,治疗组分别灌服浓度为高、中、低剂量的天芪益智颗粒每天一次,对照组灌服石杉碱甲每天一次,空白组和模型组予等量生理盐水每天一次,给药体积均为20 mL/kg体重,分别连续给药30天.喂养30天以后取大鼠脑组织进行蛋白提取,用western blot方法观察各组大鼠脑组织相关蛋白的表达.结果 (1)模型组较空白组GFAP和Iba-1的表达显著增高(P<0.05);(2)天芪益智颗粒和石杉碱甲可使大鼠脑组织GFAP和Iba-1的表达量显著降低(P<0.05);(3)天芪益智颗粒和石杉碱甲使phospho-p38/t-p38的表达量明显降低(P<0.05);(4)天芪益智颗粒使AD大鼠脑iNOS、COX-2表达量显著降低(P<0.05).结论(1)Aβ1-42侧脑室注射可以模拟AD炎性反应机制;(2)天芪益智颗粒通过抑制脑组织胶质细胞的激活、降低phospho-p38/t-p38表达及p38-NF-κB信号通路激活、抑制促炎因子COX-2、iNOS的表达对AD大鼠炎性反应具有保护作用.

目的:制备石杉碱甲前体液晶制剂并考察其注射性能、形态特征及体外释放度.方法:以二油酸甘油酯和大豆卵磷酯为液晶材料、无水乙醇为溶剂、石杉碱甲为主药制备石杉碱甲前体液晶制剂;用流变仪测量出黏度随剪切速率的变化曲线;用偏光显微镜表征其吸水后形态变化;采用高效液相色谱法测定体外释放度.结果:不同配比的石杉碱甲前体液晶制剂均可以注射;当充分吸水后,大豆卵磷酯∶二油酸甘油酯=70∶30和60∶ 40时石杉碱甲前体液晶制剂在偏光显微镜下呈现出偏光纹理,其余比例则未呈现出偏光性;大豆卵磷酯∶二油酸甘油酯=70∶ 30的石杉碱甲前体液晶制剂在pH 7.4磷酸盐缓冲液(PBS 7.4溶液)中持续释药达168 h,累积释放率可达90％以上.结论:前体液晶可以作为石杉碱甲中长效释药体系.

目的 采用中压制备色谱法从蛇足石杉浸膏中制备高纯度石杉碱甲.方法 分别使用聚合物反相填料和C18反相填料为分离介质,串联两步中压制备色谱,从蛇足石杉浸膏中分离石杉碱甲单体.结果 制备的石杉碱甲单体纯度为99.7％,总体回收率达到87.5％.结论 该法利用聚合物填料和C18填料的各自特点,通过合理的工艺衔接,为获得医药级石杉碱甲提供了一条高效、绿色和经济的途径.

目的 阐明石杉碱甲与乙酰胆碱酯酶结合的分子机制和关键氨基酸.方法 运用分子对接和分子动力学方法分析石杉碱甲与乙酰胆碱酯酶的结合位点;MM-PBSA方法计算两者的结合自由能和作用力的类型、大小;丙氨酸突变扫描方法评估关键残基对结合白由能的贡献.结果 复合物中石杉碱甲与Glu202形成1个氢键,与Trp86和Tyr337形成π-π堆积作用;结合自南能为-18.18 kcal·mol-1,范德华力和静电作用力为主要驱动力,非极性溶剂化能是主要抑制作用力;丙氨酸突变扫描结果显示残基Hid442的△△Gbind为3.17 kcal·mol-.结论 氢键和π-π堆积作用是石杉碱甲活性的分子基础,残基Hid442在石杉碱甲与乙酰胆碱酯酶的结合中起重要作用.