目的:探讨竹荪多糖对亚砷酸钠诱导大鼠神经毒性的保护作用。方法:选择60只SD大鼠（雌雄各半），适应性喂养1周后，采用随机数字表法将大鼠按体质量（80 ~ 100 g）分为对照组（ n = 20，普通饲料）和建模组[ n = 40，含砷饲料（50 mg/kg亚砷酸钠）]喂养12周后，检测大鼠脑砷与血砷含量（ n = 10），进行砷中毒模型鉴定；成功建模后，将建模组大鼠分为竹荪多糖组（含砷饲料+ 20 ml·kg -1·bw竹荪多糖溶液灌胃）、模型组（含砷饲料+等体积蒸馏水灌胃），同时保留对照组（普通饲料+等体积蒸馏水灌胃），每组10只，干预4周。采用Morris水迷宫实验评估大鼠空间学习和记忆能力，尼氏染色观察脑组织病理变化，并测定各组大鼠脑组织中氧化应激因子[超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）]及炎性细胞因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）]水平。 结果:建模组大鼠的脑砷[（92.02 ± 13.37）μg/g]和血砷含量[（51.37 ± 19.33）μg/L]均高于对照组[（7.42 ± 3.21）μg/g、（2.74 ± 1.29）μg/L， t = - 6.91、- 6.06，均 P < 0.001]，砷中毒大鼠模型建立成功。与对照组比较，模型组大鼠第1、3、4天逃逸潜伏期和第1次到达时间延长、穿越平台次数减少、目标象限停留时间占比降低（均 P < 0.05）；与模型组比较，竹荪多糖组大鼠第4天逃逸潜伏期和第1次到达时间缩短、目标象限停留时间占比升高（均 P < 0.05）。尼氏染色可见，与对照组比较，模型组大鼠脑组织尼氏小体数量减少，细胞间隙增大、排列杂乱无章；与模型组比较，竹荪多糖组大鼠脑组织尼氏小体数量增多，大部分神经元结构完整。与对照组比较，模型组大鼠脑组织SOD、GSH-Px水平均较低，MDA、TNF-α、IL-1β水平均较高（均 P < 0.05）；与模型组比较，竹荪多糖组大鼠脑组织SOD、GSH-Px水平均较高，MDA、TNF-α、IL-1β水平均较低（均 P < 0.05）；且竹荪多糖组大鼠脑组织SOD、GSH-Px、MDA、IL-1β水平与对照组比较，差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。 结论:竹荪多糖可能通过抗氧化和抗炎作用改善亚砷酸钠对大鼠的神经毒性损伤。

目的:观察竹荪多糖（DIP）对亚砷酸钠（NaAsO 2）诱导人肝细胞（L-02细胞）中PINK1/Parkin途径介导的线粒体自噬的干预作用。 方法:将处于对数生长期且状态良好的L-02细胞分为对照组、NaAsO 2组（10 μmol/L）、DIP组（80 μg/ml）、DIP + NaAsO 2组（80 μg/ml DIP + 10 μmol/L NaAsO 2）、活性氧（ROS）清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（5 mmol/L）、NAC + NaAsO 2组（5 mmol/L NAC + 10 μmol/L NaAsO 2）。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测线粒体自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白1轻链3（LC3）Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1、Parkin的表达水平，透射电子显微镜观察线粒体结构及自噬体，荧光探针法检测细胞内ROS水平。 结果:与对照组比较，NaAsO 2组p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1、Parkin蛋白表达量均较高（ P均< 0.05）；与NaAsO 2组比较，DIP、DIP + NaAsO 2、NAC、NAC + NaAsO 2组p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1、Parkin蛋白表达量均较低（ P均< 0.05）。透射电子显微镜下，与对照组比较，NaAsO 2组L-02细胞线粒体损伤明显，自噬小体数量增多；与NaAsO 2组比较，DIP + NaAsO 2组线粒体肿胀程度减小，空泡变性减少，自噬小体数量减少。与对照组（33 110.00 ± 2 191.28）比较，NaAsO 2组细胞内ROS水平较高（48 000.00 ± 2 395.31， P < 0.05）；DIP + NaAsO 2组细胞内ROS水平（38 670.00 ± 2 620.56）与NaAsO 2组比较明显降低（ P < 0.05），与对照组比较未见明显改变（ P > 0.05）。 结论:NaAsO 2可以诱导L-02细胞内PINK1/Parkin途径介导的线粒体自噬发生，DIP可以缓解NaAsO 2诱导的线粒体自噬。DIP可能通过对ROS的调控来影响NaAsO 2诱导的PINK1/Parkin途径介导的线粒体自噬。

探讨红托竹荪多糖(Dictyophora rubrovalvata polysaccharide,DRP)对砷中毒大鼠肺组织损伤的影响.将SD大鼠(sprague dawley,SD)分为对照组(喂饲普通饲料)、砷染毒组(喂饲50 mg/kg染砷饲料)和红托竹荪多糖组(喂饲 50 mg/kg染砷饲料,在第 4 个月同时给与 10 mg/mL红托竹荪多糖溶液灌胃),每组 10 只,雌雄各半.4 个月后,检测大鼠肺组织砷和血砷含量,对肺组织进行病理学观察,并测定大鼠肺组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的活性和含量.砷染毒组的肺组织砷和血砷含量显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);红托竹荪多糖组的肺组织砷和血砷含量低于砷染毒组,差异有统计学意义(P<0.05).病理学观察发现,砷染毒组大鼠肺组织肺泡间隔明显增宽,局部肺泡融合,大量炎性细胞浸润;红托竹荪多糖组大鼠肺组织肺泡壁厚度变薄,肺组织中浸润的炎症细胞减少.砷染毒组与对照组相比,肺组织中的 SOD、GSH 均显著降低,MDA 显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);红托竹荪多糖组与砷染毒组相比,肺组织中的 SOD、GSH 均升高,MDA 降低,差异有统计学意义(P<0.05).红托竹荪多糖对砷中毒大鼠所致的肺组织损伤有一定的保护作用.

背景:皮肤光老化除受年龄因素影响外,与日光照射亦有直接关系,由日光照射引起的皮肤老化称为光老化.近年来,越来越多的研究发现多糖类物质对皮肤光老化具有一定的抑制作用,主要作用机制可能与其具有抗氧化、保湿、抗辐射等作用相关.目的:明确复合多糖抑制皮肤细胞光老化的作用是否优于单一多糖.方法:利用紫外灯照射诱导人皮肤成纤维细胞(HSF)、人永生化角质形成细胞(HaCaT)(均购自中国科学院上海生科院细胞资源中心)出现老化损伤.在此基础上,采用MTT法和生化试剂盒分别检测相同浓度下4种单一多糖(铁皮石斛多糖、褐藻多糖、灵芝多糖、竹荪多糖)和4种多糖混合物(即复合多糖)对2种光老化表皮细胞存活率及超氧化物歧化酶、丙二醛和羟脯氨酸水平的影响.结果与结论:①与模型组相比,铁皮石斛多糖、褐藻多糖、灵芝多糖、竹荪多糖在50 mg/L的质量浓度下,对光老化人皮肤成纤维细胞模型及人永生化角质形成细胞模型的抑制效果均不显著,仅有个别生化指标改善程度显著(P ＜ 0.01或P ＜ 0.05);4种单一多糖对光老化细胞模型的保护作用相近;②与模型组比较,同样在多糖质量浓度为50 mg/L时,复合多糖能够显著提高2种光老化细胞模型的存活率(P ＜ 0.01)、超氧化物歧化酶及羟脯氨酸水平(P ＜ 0.01或P ＜ 0.05),降低丙二醛水平(P ＜ 0.01或P ＜ 0.05);③结果表明,在对抗皮肤成角质细胞和成纤维细胞光老化实验中,4 种单一多糖抗皮肤细胞光老化的效果不显著,而其混合物复合多糖(铁皮石斛多糖+褐藻多糖+灵芝多糖+竹荪多糖)抗皮肤细胞光老化的作用显著,提示复合多糖抑制皮肤细胞光老化的作用优于单一多糖.

目的 探讨竹荪多糖与多西紫杉醇(DOC)在肺癌治疗中的协同效应及机制.方法 40只C57小鼠构建路易斯肺癌(LLC)荷瘤C57小鼠模型,分别采用竹荪多糖组分ZSP1(ZSP1组)、DOC(DOC组)、ZSP1+DCC联用(联用组)及0.9％氯化钠注射液(对照组),每组10只,在建模当天开始腹腔注射治疗,第10、12、15天时检测肿瘤体积,并采用流式细胞术检测小鼠外周血及脾中髓源抑制性细胞(MDSC)的比例.另用Tol样受体素4(TLR4)基因敲除C57小鼠(TLR4KO组)和野生型C57小鼠(WT组)构建LLC荷瘤模型,采用实时荧光定量PCR检测MDSC中IFN-γ、IL-12、CXCL-9和CXCL-2mRNA表达水平,Western blot法检测IL-12蛋白表达水平.结果 与对照组相比,ZSP1组、DOC组和联用组小鼠的肿瘤体积在第10、12、15天均明显为小(均P<0.01);TLR4KO组较WT组小鼠的肿瘤体积在第10、12天均明显为小(均P<0.01);第12、15天联用组小鼠的MDSC比例均明显低于对照组、ZSP1组和DOC组,差异均有统计学意义(均P<0.01);与WT组相比,TLR4KO组IFN-γ、IL-12和CXCL-9mRNA表达水平均明显增加(均P<0.01),IL-12蛋白表达水平有所增加.结论 DOC与竹荪多糖联用抗肿瘤效果优于单用,其作用机制与下调荷瘤小鼠外周血中MDSC比例有关,其作用受体可能为TLR4.竹荪多糖与DOC联用可以上调IL-12的转录水平和表达水平.

目的 分析竹荪多糖对乳腺癌细胞MCF-7、肝癌细胞HepG2、宫颈癌细胞HeLa、胃癌细胞MGC803和结肠癌细胞LoVo增殖的抑制作用.方法 取乳腺癌细胞MCF-7、肝癌细胞HepG2、宫颈癌细胞HeLa、胃癌细胞MGC803和结肠癌细胞LoVo进行常规复苏、培养,取对数生长期的肿瘤细胞进行实验.使用不同浓度(10、20、40、60μg/mL)的竹荪多糖干预5种肿瘤细胞,干预24、48和72 h后采用四甲基偶氮唑盐法检测5种肿瘤细胞的增殖抑制率.结果 竹荪多糖对肝癌细胞HepG2增殖的抑制率可达50％以上,且细胞增殖抑制率随着竹荪多糖浓度的增加和干预时间的延长而增加(均P<0.05).竹荪多糖对胃癌细胞MGC803和结肠癌细胞LoVo的增殖抑制率未达到50％,但随着竹荪多糖干预时间的延长和干预浓度的增加,肿瘤细胞的增殖抑制率有所增加,可达20％以上.竹荪多糖对乳腺癌细胞MCF-7、宫颈癌细胞HeLa的增殖抑制率均低于15％,且随着竹荪多糖干预时间的延长和干预浓度的增加,肿瘤细胞的增殖抑制率并无增加趋势(均P>0.05).结论 竹荪多糖对肝癌细胞HepG2增殖具有较好的抑制作用,且具有一定的时间依赖性和浓度依赖性,其可能对胃癌细胞MGC803和结肠癌LoVo的增殖也有一定的抑制作用.

研究红托竹荪多糖(Dictyophora rubrovalvata polysaccharide,DRP)对酒精所致大鼠肝损伤的保护作用.采用苯酚-硫酸法测得DRP的含量为74.68％±1.32％,利用傅里叶红外光谱初步分析表明DRP是含有α-糖苷键和β-糖苷键的吡喃环多糖.当DRP浓度达到3.0 mg/mL时,DPPH自由基的清除率达到80.12％,其还原力为0.31,对羟基自由基的清除率达到88.07％.雄性SD大鼠被随机分为6组:空白对照组(NC)、模型对照组(MC)、阳性对照组(PC)、红托竹荪多糖低(LDRP)、中(MDRP)、高(HDRP)剂量干预组,连续灌胃28d后将其安乐死,测定血清中AST、ALT、TG水平以及肝脏SOD、GSH、MDA、TNF-α、IL-6水平,并根据病理切片分析红托竹荪多糖对大鼠酒精性肝损伤的保护程度.与MC组相比,DRP各剂量组血清AST、ALT、TG水平显著降低(P＜0.05),肝脏SOD和GSH水平显著上升(P＜0.05),MDA、TNF-α、IL-6含量显著下降(P＜0.05),肝脏细胞变性和坏死等病理现象明显改善.DRP具有一定的体外抗氧化能力,并且能缓解酒精所致的大鼠肝脏损伤,其缓解作用与抗氧化能力增强、炎症因子表达水平降低有关.

目的 探讨竹荪多糖对砷中毒大鼠肝脏IL-6和TNF-α水平的影响.方法 SPF级6周龄SD大鼠30只,雌雄各半,随机分为对照组(喂食正常饲料)、砷中毒组(喂食含砷50 mg/kg的饲料)及竹荪多糖组(喂食含砷50 mg/kg的饲料5个月后,以10 g/L竹荪多糖连续灌胃30 d);染毒终点记录大鼠体质量后麻醉处死、经心脏取血分离血清检测草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平,取大鼠肝脏计算脏器系数,取肝组织HE染色观察肝脏损伤情况,免疫组织化学法检测大鼠肝组织白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)表达.结果 与对照组相比,砷中毒组大鼠体质量明显下降,肝脏脏器系数升高,血清中ALT和AST的含量均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与砷中毒组比较,竹荪多糖组大鼠体质量升高、肝脏脏器系数下降,血清中ALT和AST表达均有所下降,除ALT外,差异均有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示,砷中毒组大鼠肝脏有损伤,竹荪多糖组大鼠肝脏损伤程度有一定缓解;砷中毒组大鼠肝组织IL-6和TNF-α蛋白含量升高,竹荪多糖组大鼠肝组织中两指标下降(P<0.05).结论 竹荪多糖可能通过抑制炎症因子IL-6和TNF-α的表达,减轻砷暴露大鼠肝组织损伤.

为利用红托竹荪菌托,采用酶解法提取菌托多糖,优化多糖提取工艺,并测定多糖分子量、单糖组成、抗氧化及降血糖活性.结果表明,最佳酶解法提取工艺为纤维素酶2.5％、果胶酶0.4％、木瓜蛋白酶1.5％,50℃酶解lh,料液比1:60、提取温度80℃、时间3h,该条件下多糖提取率达15.37％,比热水浸提法提高39.60％.酶解法多糖分子量为3 344 Da(Mn)、522 208 Da(Mw)、2 929 Da(Mp),主要由葡萄糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖和岩藻糖等组成,葡萄糖占最高,达48.82％.菌托多糖为2.0mg/mL时,DPPH·清除率为93.83％,Fe3+还原能力为0.140 7,a-葡萄糖苷酶活性抑制率为54.62％、a-淀粉酶活性抑制率为56.45％,与热水浸提法相比差异极显著或显著.酶解法提取红托竹荪菌托多糖,提取率较高,具有较高的抗氧化、降血糖活性,具有推广应用价值.

[目的]制备竹荪多糖纳米硒复合物(DIP-SeNPs)并研究其抗肿瘤活性.[方法]以竹荪多糖(DIP)为表面修饰剂,用抗坏血酸还原亚硒酸钠制备DIP-SeNPs,利用红外吸收光谱和粒径分布对产物进行验证.采用MTT法和显微镜直接观察法检测DIP-SeNPs对人肝癌细胞HepG2和人胃癌细胞MGC-803的增殖抑制作用;采用Hoechst 33258染色法和全基因组DNA电泳法观察DIP-SeNPs诱导肿瘤细胞凋亡情况.[结果]制备所得的DIP-SeNPs具有理想的纳米材料特性,对人肝癌细胞HepG2和人胃癌细胞MGC-803具有明显的增殖抑制作用,但不能够诱导肿瘤细胞凋亡.[结论]DIP-SeNPs可能是通过直接杀伤肿瘤细胞的方式发挥抗肿瘤效应.