目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNAs，lncRNA)Gm13568对A1型星形胶质细胞活化及实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠疾病进程的影响与分子机制。方法:构建特异性靶向星形胶质细胞的lncRNA Gm13568沉默与对照的重组慢病毒载体，分别命名为LV-Inhibit-Gm13568和LV-ctrl，并包装病毒。1×10 7 TU病毒悬液静脉注射入C57BL/6小鼠体内7 d后，髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55，MOG 35-55)多肽诱导EAE模型。实验分为PBS组、EAE组、LV-ctrl+EAE组和LV-Inhibit-Gm13568+EAE组，采用双盲法每日对小鼠进行神经功能评分。EAE小鼠诱导后23 d，取各组小鼠脊髓组织，利用real-time PCR测定A1型星形胶质细胞活化指标Serping 1、C3、Srgn和H2-T23的mRNA转录水平，同时测定IL-6、TNF-α、巨噬细胞趋化蛋白-1(macrophage chemotactic protein-1, MCP-1)和干扰素诱导蛋白-10(interferon-inducible protein-10, IP-10)的生成变化；Western blot检测脊髓组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)和Notch1的表达及信号转导与转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)的磷酸化水平(phosphorylated STAT3, p-STAT3)；免疫荧光法检测各组脊髓组织中Notch1活化后的胞内段蛋白(Notch1 intracellular domain，NICD)与GFAP的共表达；HE和劳克坚牢蓝染色(Luxol fast blue，LFB)分别观察脊髓组织内炎症细胞浸润及髓鞘脱失变化。 结果:与PBS组比较，EAE组和LV-ctrl+EAE组小鼠A1型星形胶质细胞活化增生，Notch1的表达显著上调。沉默内源性lncRNA Gm13568后，与LV-ctrl+EAE组比较，小鼠的神经功能评分在抗原诱导后23 d从平均3.5分下降至1分以下，临床症状缓解，A1型星形胶质细胞活化降低，同时炎性因子及趋化因子生成减少；Notch1、GFAP、NICD的蛋白质表达水平和STAT3的磷酸化水平显著降低；小鼠脊髓组织炎性细胞浸润与髓鞘脱失显著减轻。结论:LncRNA Gm13568可能通过调控Notch1/STAT3信号调控A1型星形胶质细胞的活化，从而调节炎性因子及趋化因子的产生，参与EAE的病变进程。

目的:探讨60岁以上受者行胰肾联合移植术疗效及安全性。方法:回顾性分析天津市第一中心医院2013年1月1日至2019年6月30日150例胰肾联合移植(SPK)受者资料，根据年龄分为≥60岁组(21例)、50～60岁组(44例)和<50岁组(85例)，通过比较三组受者一般资料术后排斥反应、围手术期移植物血栓、再手术比例、平均住院时间、再住院比例、术前、术后心脑血管并发症、术后1年内巨细胞病毒血症、术后1年空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽、糖化血红蛋白、术后1年肾小球滤过率(eGFR)、移植物及受者存活率，分析60岁以上受者行胰肾联合移植术疗效及安全性。结果:≥60岁组有21例，占总例数的14%，最大年龄为67岁。术前心血管事件比例分别为：≥60岁组14.3%(3/21)、50～60岁组34.1%(15/44)、<50岁组7.1%(6/85)，三组差异有统计学意义( P＝0.001)，两两比较发现50～60组受者术前心血管事件高于<50岁组受者( P＝0.000 6)。三组术后心血管事件分别为：4.8%、4.5%、2.4%，差异无统计学意义( P＝0.537)。三组移植物血栓发生率分别为9.5%、2.3%、8.2%，差异无统计学意义( P＝0.384)。三组再手术比例分别为14.3%、18.3%、18.8%( P＝0.889)。共有5例受者死亡，死亡原因分别是：脑出血2例，心肌梗死2例，肿瘤1例，≥60岁组1例(1/21，4.8%)，50～60岁组1例(1/44，2.3%)，<50岁组3例(3/85，3.5%)，三组差异无统计学意义( P＝0.842)。三组术后平均住院时间、再住院比例、术后排斥反应、术后脑血管事件、术后1年空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽、糖化血红蛋白、术后1年eGFR、受者、移植物存活率差异无统计学意义。 结论:经术前严格评估，60岁以上受者行SPK没有额外增加手术风险，能取得同样的疗效。

糖尿病黄斑水肿（DME）是糖尿病患者最常见的严重威胁视功能的视网膜病变，是工作年龄段人群致盲的主要原因。抗VEGF药物是治疗DME的一线药物，在改善视功能方面具有革命性意义。然而，仍有30%～50％的患者对抗VEGF药物治疗无应答，且频繁的注射给患者和社会带来了巨大的治疗负担。新的治疗策略包括改善抗VEGF药物的疗效和持续时间、靶向炎症、血浆激肽-激肽释放酶系统、血管生成素-Tie2系统和神经变性等新治疗途径以及使用阈值下微脉冲激光和靶向激光治疗。确定对抗VEGF药物治疗无应答的病例，建立从抗VEGF药物治疗到抗炎等替代治疗的标准化、个体化治疗方案目前仍具有挑战性，仍需继续研究开发新的治疗方法以及预防和筛查策略，以减少糖尿病视网膜病变和DME对公众健康的影响。

目的:探讨LL-37及其衍生肽LL-37R对糖尿病创面愈合的影响。方法:高糖条件下培养小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，采用活/死染色及细胞计数试剂盒(CCK-8)检测LL-37和LL-37R对细胞活性的影响，划痕实验和成管实验评价对HUVEC细胞增殖和迁移能力的影响。选用36只雄性SD大鼠制作糖尿病创面模型，随机分为对照组、LL-37组和LL-37R组，每组12只。在背部制作直径2 cm的圆形全层皮肤创面，伤后每2 d分别于皮下注射生理盐水、LL-37、LL-37R，伤后第0、3、7、14、21天拍照，第21天取材进行苏木精-伊红(HE)染色、Masson染色和免疫组织化学染色评估创面愈合情况。采用ANOVA分析和非配对 t检验进行数据分析。 结果:LL-37R能够缓解高糖环境下NIH/3T3细胞和HUVEC细胞的损伤，并且表现出促进HUVEC细胞迁移和成血管的能力。对于大鼠糖尿病创面，在造模后21 d，LL-37组和LL-37R组的平均创面面积占初始创面的比例分别为(31.46±5.51)%、(18.01±4.29)%，均显著小于对照组[(41.10±4.54)%， t＝3.01、2.83， P<0.05]；HE染色结果显示，LL-37组和LL-37R组的创面表皮厚度分别为(73.06±17.67)、(70.35±4.60) μm，大于对照组[(26.94±11.61) μm， t＝2.18、3.48， P<0.05]，且LL-37R组基本完成了上皮化过程；Masson染色结果显示，LL-37R处理过后的真皮中胶原纤维比例更高( F＝78.61， P<0.01)，且排列更加有序和紧密；免疫组织化学染色结果表明，LL-37R组的CD31阳性血管密度为(221.62±18.69)个/mm 2，与对照组[(100.38±11.94)个/mm 2]和LL-37组[(117.95±16.01)个/mm 2]比较，血管形成最为显著( F＝17.02， P<0.01)，且LL-37R组创面中被CD86标记的炎性巨噬细胞数量[(20.18±5.08)个/mm 2]明显少于LL-37组[(61.82±8.101)个/mm 2]和对照组[(236.00±17.89)个/mm 2， F＝95.59， P<0.01]。 结论:LL-37及其衍生肽能够通过促进血管再生、胶原沉积和调节炎症加速糖尿病创面的愈合。

目的:探讨肩关节组织和滑液生长素释放肽（Ghrelin）信使核糖核酸（mRNA）和蛋白表达与肩袖撕裂(RCT)和冻结肩(FS)严重程度的相关性。方法:收集2018年1月到2019年9月广东省惠州市第一人民医院骨科诊断为RCT和FS的患者各66例（分别设为RCT组和FS组），另外选取诊断为肩关节前向不稳的患者60例作为对照组。应用超声影像学对RCT严重程度进行判定，RCT组患者根据RCT严重程度分为3个亚组：巨大全层撕裂(MFTT)组23例，非巨大全层撕裂(NMFTT)组23例和部分厚度撕裂(PTT)组20例。FS组患者根据FS的经典分期方法可分为：急性期31例，粘连期35例。收集肩关节囊组织样本及肩关节滑液，采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织样本中生长素释放肽mRNA的表达量，酶联免疫吸附测定(ELISA)检测关节滑液生长素释放肽的表达。采用视觉模拟评分法(VAS)评分和Constant-Murley功能评分对患者疼痛和肩关节症状功能进行评定。结果:RCT组、FS组和对照组3组患者性别比、年龄等差异无统计学意义（ P>0.05），具有可比性。RCT组和FS组患者肩关节囊组织中的生长素释放肽mRNA表达和肩关节滑液相中生长素释放肽蛋白水平对于对照组患者均显著降低，差异均有统计学意义( P<0.05）。在RCT患者中，PTT亚组肩关节囊生长素释放肽mRNA表达和肩关节滑液生长素释放肽蛋白水平表达均最高，随后依次是NMFTT亚组与MFTT亚组，以上项目3组间比较差异均有统计学意义（ P<0.05）。急性期FS患者肩关节囊生长素释放肽mRNA表达和肩关节滑液生长素释放肽蛋白水平均显著低于黏连期患者，差异均有统计学意义（ P<0.05）。RCT患者和FS患者肩关节囊组织生长素释放肽mRNA相对表达量和肩关节滑液生长素释放肽蛋白表达水平与VAS评分和白细胞介素-6（IL-6）水平均呈负相关性（ P<0.05），与Constant-Murley评分均呈正相关性（ P<0.05）。 结论:肩关节组织和滑液生长素释放肽mRNA和蛋白表达与RCT患者和FS患者病情进展呈显著负相关性，局部补充生长素释放肽可能可以作为治疗RCT患者和FS患者的潜在方法。

目的:探究牙龈卟啉单胞菌（ Porphyromonas gingivalis，Pg）脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激巨噬细胞后，髓样细胞触发受体-1（triggering receptors expressed on myeloid cells-1，TREM-1）表达与M1、M2型极化的关系，进一步探讨巨噬细胞TREM-1在牙周炎发生发展中的作用机制。 方法:使用豆蔻酰佛波醇乙酯诱导人单核细胞系THP-1分化为巨噬细胞，予以0（空白对照组）和1 μg/ml 的 Pg-LPS（LPS组）刺激，同期加入终质量浓度为0.1 μg/ml的TREM-1抑制剂LP17（LPS+LP17组）或对照肽（LPS+对照肽组），培养24 h后用实时荧光定量PCR（real-time quantitative-PCR，RT-qPCR）检测TREM-1和巨噬细胞M1、M2型极化标志物（分别为CD86、CD206）及其极化相关细胞因子［分别为肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin，IL）-1β、IL-10］mRNA表达变化，蛋白质印迹法检测TREM-1、CD86、CD206蛋白含量，酶联免疫吸附测定法检测巨噬细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β及IL-10的表达。结果:细胞培养24 h后，LPS组巨噬细胞中TREM-1相对 mRNA表达量（1.40±0.14）及蛋白表达量（3.85±0.24）均较空白对照组（分别为1.01±0.18、1.00±0.05）显著升高（ P<0.05），同时M1型极化标志物CD86 mRNA及蛋白表达（分别为1.42±0.01、1.55±0.07）均较空白对照组（分别为1.00±0.09、1.00±0.10）显著上调（ P<0.01），且M1型极化相关细胞因子TNF-α、IL-1β mRNA及蛋白表达量均显著增加（ P<0.05）；加入TREM-1阻断剂LP17后，与LPS组相比，TREM-1 mRNA及蛋白表达水平差异均无统计学意义（ P>0.05），CD86 mRNA（0.96±0.00）和蛋白（1.36±0.02）表达水平均显著下降（ P<0.05），TNF-α、IL-1β mRNA及蛋白表达水平均显著降低（ P<0.05）。对于M2型极化标志物CD206及极化相关细胞因子IL-10，细胞培养24 h后，CD206 mRNA（0.56±0.05）及蛋白表达（0.25±0.04）均较空白对照组（分别为1.02±0.25、1.00±0.10）显著下调（ P<0.01），IL-10 mRNA较空白对照组表达显著上调（ P<0.05），其蛋白表达水平与空白对照组相比差异无统计学意义（ P>0.05）；LPS+LP17组CD206、IL-10 mRNA表达均较LPS组显著下调（ P<0.05），CD206、IL-10蛋白表达在两组间差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:TREM-1及其下游信号通路可能参与了Pg-LPS介导的巨噬细胞M1型极化，从而在牙周炎发生发展中发挥促炎作用；尚无证据表明TREM-1是否参与调控Pg-LPS介导的巨噬细胞M2型极化。

目的:通过小鼠动物模型探讨阳离子抗菌肽Cathelicidin-PY（PY）治疗急性肝衰竭的可行性。方法:内毒素鲎试验（LAL assay）检测不同浓度抗菌肽PY体外中和内毒素/脂多糖（LPS）能力；CCK-8法检测不同浓度抗菌肽PY对小鼠单核巨噬细胞（RAW264.7）的毒性作用；体外溶血实验评价抗菌肽PY对健康人红细胞的溶血活性；构建D-氨基半乳糖联合LPS诱导的小鼠急性肝衰竭模型，观察抗菌肽PY对模型小鼠存活率的影响；通过HE染色观察肝脏病理学变化，并通过免疫组织化学、蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase-3的表达。组间比较采用 t检验、方差分析，率的比较采用χ 2检验。 结果:体外实验显示极低剂量（0.01 μmol/L）可达到较高的内毒素中和率，中等剂量（10～40 μmol/L）中和率可超过70%，且不同浓度组间比较，差异有统计学意义（ F = 569.22， P < 0.05）。中等剂量抗菌肽PY有较强的中和内毒素作用，较低的细胞毒性及溶血活性。进一步体内实验显示中等剂量抗菌肽PY可改善模型小鼠的肝脏损伤程度并显著提高存活率，且免疫组织化学检测结果显示中等剂量抗菌肽组较肝衰竭组肝组织内Caspase-3表达明显减少，与蛋白质印迹法检测结果一致。 结论:抗菌肽PY具有较强中和内毒素的能力且毒副作用小，特定剂量抗菌肽PY可以减轻肝细胞凋亡，并显著提高模型动物存活率，为肝衰竭治疗的研究提供了新思路。

目的:报告2例X连锁肢端肥大性巨人症(X-linked acrogigantism, X-LAG)患者的临床特点和诊治情况。方法:回顾性报告2例患者临床资料并收集外周血进DNA行拷贝数变异检测。结果:2例患者均为2岁起病，共同临床特点为线性生长加速、轻度肢大面容、手足增大、食欲增加、打鼾等巨人症表现。2例患者治疗前身高Z值分别为+6.86和+6.53，葡萄糖生长激素(growth hormone, GH)抑制试验示GH谷值均大于1 ng/mL，胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ，IGF-Ⅰ)分别为586.0 ng/mL和1 042.0 ng/mL。患者1接受三程奥曲肽微球治疗后行手术，术后临床与生化均得到缓解。患者2接受兰瑞肽治疗5.5年，未达到生化缓解。通过拷贝数变异检测，2例患者胚系DNA均发现Xq26.3存在微重复，该区域含G蛋白偶联受体101(G-protein coupled receptor 101, GPR101)这一致病基因，诊为X-LAG。结论:2岁以下婴幼儿出现生长加速等症状时需警惕X-LAG，药物联合手术治疗有效。

由于ECM丢失、过度炎症反应、血管生成障碍和细菌感染造成的组织微环境恶化导致难愈性创面的治疗仍是一个巨大的临床挑战。受天然ECM的化学成分、纤维结构和生物学功能的启发，抗菌和组织环境响应性糖肽杂化水凝胶被开发出来用于促进慢性创面愈合。该水凝胶可促进细胞增殖和巨噬细胞向M2表型极化，对革兰阴性菌和革兰阳性菌均显示出较强的抗菌效果。值得一提的是，糖肽水凝胶通过协调以大量的M2型巨噬细胞、炎症反应减轻、血管生成增强为标志的促再生反应，加速了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的糖尿病和烫伤所致全层皮肤缺失的组织重建。总之，类ECM和免疫调节糖肽水凝胶是一种很有前途的多功能敷料，无须额外的药物、外源性细胞因子或细胞即可重塑受损的组织环境，为慢性创面的修复和再生提供了一种有效策略。

患者，男，15岁。主因"发现皮肤黄染、尿色深2个月"就诊。查体：全身皮肤及巩膜轻度黄染，无皮疹及出血点，浅表淋巴结无肿大。腹部平坦，肝脾肋缘下未触及。双下肢无水肿。血常规：WBC 5.6×10 9/L、RBC 4.0×10 12/L、HGB 119 g/L、PLT 261×10 9/L，平均红细胞体积（MCV）98.1 fl、平均血红蛋白量32.0 pg、平均血红蛋白浓度（MCHC）326 g/L、网织红细胞（Ret）比例5.2%；骨髓象：增生明显活跃，粒红比为0.98∶1，粒系比例减低，红系比例增高，以中、晚幼红细胞为主，淋巴细胞比例正常，全片巨核细胞78个。血小板易见。外周血涂片红细胞无形态异常。尿常规：尿胆原17 μmol/L。肝炎病毒及自身免疫性肝炎检测均阴性。丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶正常。溶血指标：总胆红素77.6 μmol/L，间接胆红素69.3 μmol/L，直接胆红素8.3 μmol/L；乳酸脱氢酶正常；Coombs试验阴性；Flaer、CD59正常；抗碱血红蛋白、血红蛋白A2、微量血红蛋白电泳、异丙醇、红细胞渗透脆性试验、H包涵体、变性珠蛋白小体、葡萄糖-6-磷酸酶活性均正常；高铁血红蛋白还原试验：58%（参考值>75%）。血浆游离血红蛋白：37.5 mg/L（参考值<40 mg/L）；铜蓝蛋白：正常。腹部超声：肝胆脾胰肾未见明显异常。采用二代测序（NGS）对患者血样进行全外显子基因组测序，检测内容覆盖Gilbert综合征UGT1A1基因，未发现相关致病性位点的变异，检出先证者ATP11C基因存在一处半合子变异：c.1003C>T（p.R335*），Sanger测序验证显示该变异其父母均未携带，为患者新生变异。经查询千人基因组数据库、Exac数据库，该变异在东亚人群中的携带率均为0；GERP++分数为5.63，预测为有害。诊断：X连锁先天性溶血性贫血。