近年来,食源性致病菌在全球范围内大面积传播,给人类的生存健康与发展带来了巨大的威胁.因此为了保证食品的安全,快速的、高特异性且高灵敏地检测食品致病菌方法已经成为科学研究的热点话题.在本研究中,我们构建了一种基于滚环扩增技术的纸基显色传感器用于可视化检测致病菌的检测平台.通过滚环扩增对单增李斯特菌的hlyA mRNA进行高效特异性扩增,扩增后的单链产物经过Hhal酶进行特异位点酶切后,形成与锁式探针长度相同的片段.将酶切后的单链产物不经过预变性杂交,可直接进行试纸条检测.在优化的实验条件下,可以检测到100 pg/μL总RNA.整个过程实验包括连接,扩增,酶切,检测等反应均可在恒温条件下进行,且可在几个小时内完成.这种方法适用于快速的现场检测,此外,这项研究强调了纸基显色诊断平台的潜在价值和应用前景.

该文分别从机械、硬件、软件等方面介绍了一种通过CMOS传感器采集图像,然后在Linux系统平台上运用图像处理算法分析免疫胶体金试纸显色反应的判读仪器.判读仪首先为每种测试项目单独设置并保存参数,然后测试项目样品时调用已保存的该项目参数进行测试,因此判读仪可以应用于多种领域多种项目.该文通过对临床中的CRP(C型反应性蛋白)标准样品进行定量实验测试,结果表明仪器拟合优度(R2=0.99),重复性大于93％.

近年来兴起的以金刚石氮-空位(NV)色心为量子传感器的微观磁共振技术得到快速发展,已经实现单个生物分子磁共振谱的探测,正在向单分子结构和功能的研究推进.这其中需要解决一个重要的技术问题,即单分子在金刚石表面的有序分散和固定.DNA的自组装为解决这一问题提供了可行途径,本文使用DNA折纸技术,制备了一种60 nm边长的正方形双层DNA折纸作为单分子载体,并与金刚石表面结合.首先采用双层结构提高了DNA折纸的稳定性,其次通过在DNA折纸边缘添加发卡结构减少了DNA折纸结构间的聚团,最终成功将DNA折纸装配到金刚石表面.通过原子力显微镜图像进行表征显示其结构完整、分散均匀.本工作为后续的单分子磁共振技术在单分子生物物理领域的应用推广奠定了样品制备的基础.

核酸适配体是可以识别并与靶标分子结合的单链DNA或RNA分子.由于适配体具有良好的特异性、稳定性、选择性、易于修饰和亲和力高等特点,在病原检测和其他小分子识别方面具有很大的潜力.综述了适配体的筛选技术以及适配体应用技术,包括比色法、可见光谱法、荧光法、电化学法、表面增强拉曼法和胶体金试纸条法等在食源性致病菌检测中的应用.目前适配体传感器在检测食品致病菌领域取得了显著进展.然而核酸适配体应用方面的挑战和缺陷仍需克服.

漆酶是一种天然的绿色催化剂,由于具有催化效率高、底物特异性广、对辅因子和特定环境条件要求少、无毒等优点,因而在制浆造纸、生物合成、改善纤维性能、食品加工、生物传感器制造、农林废弃物的生物转化和炼制,特别是环境污染物的生物降解和生物修复等领域具有巨大的应用潜力.但游离漆酶稳定性差且成本较高,固定化方法成为解决该问题的有效手段,其能够有效增强酶的热稳定性及对极端环境的耐受力、使酶易与产物分离以提高酶回收率.本研究基于前期筛选获得的一株高产漆酶白腐真菌菌株东方栓孔菌(Trametes orientalis)所分泌的漆酶(Tolacc-T),对其纯化酶蛋白以壳聚糖作为载体、戊二醛作为交联剂进行了固定化处理,命名为Tolacc-T@Chit@GA,并优化了固定化条件为戊二醛浓度0.7％(V/V)、交联时间4 h、给酶量6.0 mL、固定化时间6 h.与Tolacc-T相比,Tolacc-T@Chit@GA的pH适应性、耐热变性能力及贮存稳定性均显著增强.循环使用时的稳定性和耐久性也十分明显,循环使用7次后,Tolacc-T@Chit@GA的相对活性仍可保持在80％以上.此外,Tolacc-T@Chit@GA还可使不同类型的染料脱色,尤其对金属络合染料萘酚绿B的脱色效果最佳,气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectroscopy,GC-MS)检测确定该染料部分代谢产物为1-萘胺、2-萘酚、1-氨基-2-萘酚、1-亚硝基-2-萘酚、1-亚硝基-2-萘酚-6-磺酸.上述结果证明,东方栓孔菌固定化漆酶Tolacc-T@Chit@GA具有较好的稳定性和可重复利用性,存在广阔的应用前景.