目的:比较不同入路腔镜甲状腺手术对甲状腺癌患者临床效果的影响。方法:前瞻性纳入2020年1月至2023年1月山西省肿瘤医院头颈外科由同一经验丰富的手术团队实施完全腔镜甲状腺切除术（complete endoscopic thyroidectomy，CET）治疗甲状腺癌患者96例，随机数字表法分为经锁骨下组（经锁骨下入路CET）48例和经口组（经口腔前庭入路CET）48例。比较两组手术及术后康复情况、并发症、美容满意度评分，术前、术后1、3及7 d检测免疫指标[T淋巴细胞亚群（CD3 +、CD4 +）、CD4 +/CD8 +]、血清可溶性白细胞介素2受体（soluble interleukin 2 receptor，SIL-2R）、组织激肽释放酶11（kallikrein11，KLK11）、中期因子（midkine，MK）水平，术后1、3及7 d采用视觉模拟量表（visual analog scale，VAS）、颈部损伤指数、吞咽障碍指数评估颈部功能。 结果:经口组与经锁骨下组手术时间分别为（117.58±10.87）min和（101.84±11.35）min（ P<0.001），住院时间分别为（4.31±0.86）d和（5.12±0.91）d（ P<0.001），引流量分别为（65.13±12.49）mL和（78.65±15.32）mL（ P<0.001）。术后1、3及7 d，经口组和经锁骨下组CD3 +分别为（41.53±3.86）%和（38.29±3.51）%（ P<0.001），（46.21±4.35）%和（42.81±4.06）%（ P=0.001），（48.23±4.47）%和（45.10±4.23）%（ P<0.001）；CD4 +水平分别为（33.27±3.90）%和（30.18±3.45）%（ P<0.001），（36.28±4.15）%和（33.46±3.87）%（ P=0.001），（38.69±4.22）%和（35.17±4.10）%（ P<0.001）；CD4 +/CD8 +水平分别为（1.31±0.22）和（1.16±0.21）（ P=0.001），（1.40±0.23）和（1.20±0.22）（ P<0.001），（1.58±0.24）和（1.45±0.25）（ P=0.011）。术后1、3及7 d，经口组与经锁骨下组血清SIL-2R、KLK11、MK水平、VAS评分、颈部损伤指数、吞咽障碍指数相比，差异无统计学意义（ P>0.05）。经口组和经锁骨下组并发症发生率分别为8.33%（4/48）和22.92%（11/48）（ P=0.049），美容满意度分别为95.83%（46/48）和81.25%（39/48）（ P=0.025）。 结论:经口腔前庭入路与经锁骨下入路行CET治疗甲状腺癌均对颈部功能造成损伤，前者能减轻免疫功能损伤，有助于术后早期病情恢复，同时能提高安全性及患者美容满意度，但会延长手术时间。

目的:探讨分析血清组织激肽释放酶11（kallikrein-related peptidases 11，KLK11）、中期因子（midkine，MK）水平与分化型甲状腺癌（differentiated thyroid cancer，DTC）术后首次 131I清除术后残留甲状腺组织（简称"清甲"）效果的关系。 方法:回顾性分析2020年6月至2021年6月商丘市第一人民医院甲状腺乳腺外科108例DTC预行甲状腺全切除术，且术后进行放射性清甲治疗，男37例，女71例；年龄（48.32±4.25）岁，范围为28~79岁。根据治疗后是否清甲成功将患者分为清甲成功组64例和清甲未成功组44例，并选取同期本院体检无异常的60例健康者作为对照组。是否发生淋巴结转移，将患者分为转移阳性组20例和转移阴性组88例。清甲治疗后第二天取所有研究对象血清标本，采用酶联免疫吸附法检测其血清KLK11、MK水平，搜集患者性别、年龄、体重指数（body mass index，BMI）、TNM分期、促甲状腺素（thyroid stimulating hormone，TSH）、病灶最大径、清甲治疗时间，统计数据采用SPPS 21.0软件，采用单因素对一般资料进行分析，然后对有统计意义的因素进行Logistic回归多因素分析影响术后疗效的独立危险因素。结果:清甲成功组和清甲未成功组血清KLK11、MK水平高于对照组（KLK11： t= 5.129、7.832， P<0.05；MK: t=7.799、15.978， P<0.05），而清甲未成功组血清KLK11、MK水平高于清甲成功组（KLK11： t= 2.642， P<0.05；MK: t=11.906， P<0.05）。转移阳性组血清KLK11、MK水平高于转移阴性组（KLK11： t= 2.908， P<0.05；MK: t=14.907， P<0.05）。单因素分析结果显示，BMI（ χ2=6.780， P=0.009）、病灶最大径（ χ2=14.819， P=0.001）、TSH（ χ2=13.627， P=0.001）、血清KLK11（ t=2.642， P=0.01）、血清MK（ t=11.906， P<0.001）与DTC术后首次 131I清甲效果有关（ P<0.05）。以清甲成功为因变量，进行多因素Logistic回归分析，结果显示病灶最大径>2 cm（ OR=10.740，95% CI：7.033~16.401）、TSH水平升高（ OR=8.559，95% CI：2.812~26.057）、血清KLK11水平升高（ OR=16.710，95% CI：8.548~32.666）、血清MK水平升高（ OR=10.580，95% CI：6.294~17.786）是影响DTC术后首次 131I清甲效果的独立危险因素（ P<0.05）。 结论:血清KLK11、MK水平升高是影响DTC术后首次 131I清甲效果的独立危险因素，监测其水平变化可为清甲疗效评估提供一定参考。

目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)激动剂对肺缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法:30只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、再灌注组和Nrf2激动剂组，每组10只。再灌注组和Nrf2激动剂组大鼠采用在体左肺门夹闭法复制缺血再灌注损伤模型，对照组仅作切口，不夹闭。Nrf2激动剂组大鼠建模成功后每天口服富马酸二甲酯100 mg/kg，对照组和再灌注组大鼠每天给予等体积生理盐水。治疗7 d后，取左肺测定组织干湿比和总肺含水量；苏木精-伊红(HE)染色分析大鼠肺泡损伤状况；测定3组大鼠肺组织铁离子、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽氧化酶的水平；采用酶联免疫吸附实验分析3组大鼠肺组织炎性因子[肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β]的水平；蛋白质免疫印迹分析大鼠肺组织铁死亡相关蛋白[转铁蛋白受体1、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11]蛋白表达水平。组间计量数据比较采用单因素方差分析。结果:Nrf2激动剂组大鼠肺泡损伤百分比[(31.20±5.37)%]明显低于再灌注组[(65.34±5.60)%]，差异有统计学意义( t＝13.920， P<0.05)。Nrf2激动剂组大鼠肺干湿比(2.44±0.13)明显低于再灌注组(3.85±0.39)，差异有统计学意义( t＝10.950， P<0.05)。Nrf2激动剂组大鼠血清TNF、IL-6和IL-1β[(33.44±4.72)、(27.61±1.73)、(23.87±2.64) pg/ml]明显低于再灌注组[(78.85±9.63)、(43.12±10.46)、(39.79±8.78) pg/ml]，差异有统计学意义( t＝13.390、4.625、5.488， P<0.05)。Nrf2激动剂组大鼠肺组织铁离子浓度[(0.62±0.12) μmol/mg]明显低于再灌注组[(1.01±0.10) μmol/mg]，差异有统计学意义( t＝7.823， P<0.05)。Nrf2激动剂组大鼠肺组织MDA水平[(1.06±0.07) μmol/mg]明显低于再灌注组[(1.68±0.14) μmol/mg]，差异有统计学意义( t＝12.370， P<0.05)。Nrf2激动剂组大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性[(137.70±11.27) U/mg]明显低于再灌注组[(102.90±10.48) U/mg]，差异有统计学意义( t＝7.148， P<0.05)。Nrf2激动剂组大鼠肺组织转铁蛋白受体1表达水平(1.24±0.10)明显低于再灌注组(1.71±0.11)，差异有统计学意义( t＝10.090， P<0.05)。Nrf2激动剂组大鼠肺组织GPX4和溶质载体家族7成员11表达水平(0.95±0.12、0.79±0.06)明显高于再灌注组(0.76±0.06、0.53±0.06)，差异有统计学意义( t＝5.877、9.394， P<0.05)。 结论:Nrf2激动剂可抑制缺血再灌注损伤大鼠肺组织铁死亡相关蛋白表达水平，抑制肺组织炎性因子的释放，减轻肺组织缺血再灌注损伤。

目的:探讨獐牙菜苦苷对电离辐射所致肺损伤的防护作用和机制。方法:实验将人支气管上皮细胞(Beas-2B)和人胚肺成纤维细胞(HELF)分为对照组、10 Gy X射线照射组、照射＋獐牙菜苦苷组，检测獐牙菜苦苷对X射线照射后的影响。检测射线暴露后细胞的乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞的增殖情况、DNA损伤水平、活性氧(ROS)水平、脂质过氧化物水平、铁离子水平、铁死亡相关蛋白SLC7A11(xCT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)含量变化。为了验证獐牙菜苦苷在体内对放射性肺损伤是否具有防护作用，建立放射性肺损伤小鼠模型，将C57BL/6J雄性小鼠分为对照组、照射组、照射＋獐牙菜苦苷组，每组5只，对小鼠胸部进行15 Gy X射线照射，照射后30 d收集小鼠肺组织及血清。观察受照小鼠肺组织病理变化、肺组织氧化应激水平及肺组织中γ-H2AX、GPX4含量变化和炎性因子水平变化。结果:与照射组相比，照射＋獐牙菜苦苷组(130 μmol/l)细胞的增殖率及克隆形成率明显上升(Beas-2B： t＝5.50～5.92， P<0.05；HELF： t＝3.79～5.51， P<0.05)；LDH释放率、ROS含量、脂质过氧化物水平及铁离子含量显著降低(Beas-2B： t＝3.00～16.99， P<0.05；HELF： t＝4.10～10.97， P<0.05)。DNA损伤水平显著下降(Beas-2B： t＝5.69～8.27， P<0.05；HELF： t＝3.44～14.77， P<0.05)。xCT和GPX4蛋白表达发生上调(Beas-2B： t＝2.90～3.27， P<0.05；HELF： t＝3.01～7.07， P<0.05)。体内实验中，与照射组相比，獐牙菜苦苷预处理可有效提升小鼠肺组织中GSH和GPX4含量( t＝2.31～2.65， P<0.05)，降低MDA和γ-H2AX含量( t＝2.71～4.19， P<0.05)，同时降低小鼠血清中IL-6及IL-1β水平( t＝3.16～4.56， P<0.05)。 结论:獐牙菜苦苷可以通过降低电离辐射诱导的DNA损伤和氧化应激水平，从而对电离辐射引起的肺损伤发挥防护作用，为研发新型放射性肺损伤防护剂提供思路。

目的:通过在体实验研究组织型激肽释放酶(TK)对缺血性卒中的神经保护作用是否与诱导保护性自噬有关.方法:成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水(NS)组、TK组、3-MA组和3-MA+TK组,每组11只.假手术组和NS组分别于侧脑室注射NS,TK组和3-MA组分别于侧脑室注射TK和自噬抑制剂3-MA,3-MA+TK组先注射3-MA,30 min后再注射TK.各组完成侧脑室给药后,采用线栓法建立永久性大脑中动脉缺血模型(pMCAO).在缺血后12 h,采用Longa评分法评估各组大鼠的神经功能.完成神经损伤评分后,TTC染色检测各组大鼠脑梗死体积,免疫印迹实验检测各组自噬相关蛋白LC3和p62的表达水平.结果:NS组大鼠缺血侧脑皮质LC3-Ⅱ较假手术组表达升高,p62水平降低(均P＜0.01).与NS组相比,TK组缺血侧脑皮质LC3-Ⅱ表达增高,p62水平降低(均P＜0.01),大鼠神经功能损伤较轻、脑梗死体积明显缩小(均P＜0.01);与TK组比较,3-MA组缺血脑皮质LC3-Ⅱ的表达降低和p62的水平水平较高,大鼠神经功能损伤较重、脑梗死体积较大(均P＜0.01);与TK组相比,3-MA+TK组大鼠神经损伤评分增加、脑梗死体积明显增加(均P＜0.01).结论:TK对缺血性卒中大鼠具有神经保护作用,其机制与诱导自噬发生有关.

目的 应用相对和绝对定量同位素标记技术 (ITRAQ) 研究养心氏片对血管性抑郁小鼠 (VD) 海马组织蛋白质表达的影响, 以探讨养心氏片抗抑郁的作用机制, 并寻找可能的潜在生物标志物.方法60只ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、氟西汀组、养心氏片组, 每组15只.采用小鼠脑缺血再灌注诱导血管性抑郁模型, 造模完成后行为学实验检测小鼠抑郁行为的变化, 养心氏片组给予养心氏片1000mg/ (kg·d), 氟西汀组给予15 mg/ (kg·d) 灌胃给药, 假手术组、模型组给予等体积的0.9％Na Cl.给药21 d后以提取的小鼠海马组织蛋白分析, 获取的串联质谱数据通过Protein.pilot 4.5软件鉴定蛋白质, 之后进行生物信息学分析.用实时定量PCR (RT-q PCR) 验证部分差异蛋白的表达趋势.结果 利用ITRAQ技术蛋白质组学方法一共鉴别得到了4300个蛋白质, 通过对比模型组和假手术组, 模型组和养心氏片组, 共找到400个共同差异蛋白质.模型组和假手术组比较, 其中上调130个 (fold change＞1.2, P＜0.05), 下调270个 (fold change≤1.2, P＜0.05).模型组和养心氏片组比较, 其中上调147个 (fold change＞1.2, P＜0.05), 下调253个 (fold change≤1.2, P＜0.05).并最后筛查出涉及重要通路的Atp6v0a1、Stxbp1、Ap2a2、Slc6a11、Camk2b、Slc6a1、Camk2a、Npy、Gfap、Ntrk2、Grin2b、Gria2、Gria1、Dnm1、Atpif1、Ndufs7、Rab3a等25个相关蛋白, 并对养心氏片组和模型组神经肽Y (NPY) 、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 、人神经营养性酪氨酸激酶2型受体Trk B、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱa (CamkⅡa) 、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱb (CamkⅡb) 、钠和氯依赖性GABA转运蛋白3 (GAT3) 、钠和氯依赖性GABA转运蛋白1 (GAT1) 7个差异蛋白进行m RNA层面的RT-q PCR验证, 并对这些蛋白在m RNA水平的表达量和蛋白水平的表达量进行了相关性分析 (R2=0.857, P=0.014).结论 利用基于ITRAQ技术的蛋白组学研究假手术组、血管性抑郁症模型组、养心氏片治疗组之间的表达差异性蛋白, 最后发现养心氏片抗抑郁作用主要是影响了神经冲动的传导、神经递质的传递和释放、神经可塑性、氨基酸及能量代谢等过程.但这些蛋白在抑郁症的发生、发展过程中的作用尚未完全明确, 需进一步深入研究.

目的 研究胰腺癌组织(PCT)、癌旁正常胰腺组织(Non-PCT)中人类激肽释放酶11(KLK11)的表达及其临床意义.方法 免疫组织化学(IHC)法对75例胰腺癌患者相配对的PCT、Non-PCT中KLK11的表达加以检测,同时分析KLK11的表达和患者临床病理参数及预后的关系.再通过Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法各检测10例相配对的PCT、Non-PCT中KLK11的表达.结果 IHC法显示KLK11主要在PCT导管细胞的胞质当中表达,在PCT组中KLK11的阳性表达率达到了77.33％(58/75),而Non-PCT组为20％(15/75),差异有统计学意义(P＜0.001).KLK11的表达与淋巴结的转移(P ＜0.001)以及TNM分期(P ＜0.001)有显著相关性.Western blot及qRT-PCR表明PCT组中KLK11的表达量及其mRNA含量均明显高于Non-PCT组,差异有统计学意义(P ＜0.01,P＜0.001).Kaplan-Meier分析结果表明KLK11高表达的生存时间(平均无病生存期:7.217个月,平均总生存期:14.318个月)比KLK11低表达的生存时间(平均无病生存期:16.939个月,平均总生存期:22.776个月)显著缩短,差异有统计学意义(P＜0.01).COX回归模型分析显示KLK11的表达是胰腺癌预后的独立因素,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 KLK11的表达与胰腺癌的淋巴结转移以及TNM分期密切相关,可作为判断胰腺癌预后的独立因素.KLK11的检测对胰腺癌的发生发展及其预后评估具有一定的价值.

目的 探讨激肽释放酶相关肽酶11(KLK11)在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 选取2010年2月至2013年3月间宜宾市第二人民医院收治的行根治性胃癌切除术的48例胃癌患者的肿瘤标本和癌旁正常组织标本(距癌组织5cm以上).采用Western blot检测两种组织中KLK11蛋白的相对表达量,qRT-PCR检测组织中KLK11 mRNA水平,分析KLK11表达与患者临床资料及预后的关系.结果 胃癌组织中KLK11 mRNA的相对表达量为(0.65 ±0.23),高于癌旁正常组织的(0.39 ±0.16),差异有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织中KLK11蛋白的相对表达量为(0.73±1.74),高于癌旁正常组织的(0.51±0.21),差异有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织中KLK11的阳性率为70.8％(34例),高于癌旁组织中的37.5％(18例),差异有统计学意义(P＜0.05).KLK11的高表达与胃癌患者TNM分期、神经侵犯和淋巴结转移相关,差异均有统计学意义(P＜0.05);与患者年龄、性别、肿瘤直径和组织分化程度无关.结论 KLKK11的高表达与胃癌患者的TNM分期、神经侵犯、淋巴结转移及预后相关.

目的 探讨纳豆联合红曲对大鼠酒精性肝损伤(ALD)的改善作用及机制.方法 雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组(生理盐水);模型组(56°白酒6 mL/kg1周+8mL/kg1周+10 mL/kg 1周+11 mL/kg 7周);纳豆红曲组(595.59 FU/kg纳豆激酶+4.46 mg/kg洛伐他汀+酒精);甘利欣组(200 mg/kg甘利欣+酒精),纳豆红曲与甘利欣组酒精剂量同模型组,连续10周.苏木精-伊红染色(HE)和透射电镜观察肝脏和小肠组织结构;测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)活性;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清内毒素水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测肝组织白细胞分化抗原(CD14)、Toll样受体4(TLR4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-a)蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组大鼠肝和小肠组织均出现明显的病变损伤;与模型组比较,纳豆红曲和甘利欣组大鼠肝脏和小肠组织病理损伤明显改善.与对照组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、GGT、ALP水平[分别为(60.5±15.4)、(152±33.11)、(4.18±0.75)、(157.3±46.64)U/L]明显升高(P＜0.05);与模型组比较,纳豆红曲组大鼠血清AST、GGT、ALP水平[分别为(130.16±27.66)、(3±1.09)、(137±24.77)U/L]明显下降(P＜0.05).与对照组比较,模型组大鼠血清内毒素水平升高,肝脏组织中CD14、TLR4、TNF-α蛋白表达明显升高(P＜0.05);与模型组比较,纳豆红曲和甘利欣组大鼠内毒素水平明显下降(P＜0.05),肝组织中CD14、TLR4和TNF-α蛋白表达均明显下降(P＜0.05).结论 纳豆联合红曲对大鼠酒精性肝损伤具有一定的改善作用,其机制可能与纳豆红曲降低血清内毒素,下调肝组织CD14和TLR4蛋白表达,抑制下游TNF-α释放,减轻肝脏损伤有关.

非转移性黑色素瘤糖蛋白 B(glycoprotein non-metastatic melanoma protein B,GPNMB)是一种高度糖基化的 I 型跨膜糖蛋白,定位于细胞膜或贮存于内涵体及溶酶体中.膜结合型 GPNMB 可被金属蛋白酶如 ADAM 10 裂解,释放出可溶性形式.该蛋白最初被发现于非转移性黑色素细胞而得名,后来还被发现在其他多种正常组织和癌组织中均有表达[1-2].因此,GPNMB 又名造血生长因子诱导的神经激肽 1 型(HGFIN)、树突状细胞肝素整合蛋白配体(DC-HIL)以及骨激活素(osteoactivin,OA)[3-7].相比于正常组织, GPNMB 在癌组织中的表达量更高.其正常生理功能包括抗炎、神经保护、参与黑色素体合成等;而在肿瘤组织中, GPNMB 可促进多种癌细胞的生长增殖以及转移侵袭,并且还可以促进癌组织周边血管生成[4, 8-11].因此,GPNMB 已成为黑色素瘤、乳腺癌、骨肉瘤等多种癌症治疗的潜在靶点,但目前针对该靶点在研药物品种相对较少.本文拟对 GPNMB 的结构、生理及病理功能和相关药物的研发进展进行综述,为以其为靶点的药物研发提供参考和依据.