采用液质联用的方法对常用的胆汁类动物药的特征离子进行研究,以期解决该类药材及含有该类药材的复方制剂专属性检验的问题.通过UPLC-Q-TOF对样品进行测定,然后使用MarkerLynxTM v.4.1质谱数据处理软件以及胆汁酸类成分的选择离子色谱图对数据进行对比分析,结果方法对于猪胆粉、熊胆粉、体外培育牛黄和人工牛黄的专属性鉴别效果较好,在护肝片和人工牛黄甲硝唑胶囊的专属性鉴别中效果也较好.该方法适用于猪胆粉、熊胆粉、体外培育牛黄和人工牛黄以及一些含上述药材的复方制剂的专属性鉴别.

目的 探讨熊胆治疗血小板减少性出血的替代品.方法 将90只SD大鼠, 连续3 d腹腔注射环磷酰胺30 mg/kg, 复制血小板减少模型后随机分为9组:正常组、模型组、咖啡酸组、止血红花-8味组、熊胆组、牛胆组、羊胆组、猪胆组、鸡胆组, 治疗7 d后, 检测各血细胞计数、血小板生成素 (TPO) 、P-选择素 (GMP-140), 取脾脏观察病理形态.结果 与模型组比较, 止血红花-8、熊胆、牛胆、猪胆组血小板 (PLT) 有非常显著性差异 (P＜0.01), 牛胆组TPO、GMP-140的升高有非常显著性差异 (P＜0.01);与熊胆组比较, 牛胆组PLT差异不明显 (P＞0.05), 但TPO、GMP-140的升高有显著性差异 (P＜0.05).病理组织观察中止血红花-8味, 熊胆、牛胆、鸡胆组脾脏组织有明显改善现象.结论 熊胆及几种家畜胆均具有升高血小板和止血作用, 其中牛胆替代熊胆的可行性最高.

目的 建立羊胆水药材的质量标准.方法 采用薄层色谱法对羊胆水进行定性鉴别.采用高效液相色谱(HPLC)法对羊胆水中胆酸含量进行测定,色谱柱为Phenomenex Luna-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(45:55),流速为1.0 mL/min,检测波长为192 nm,进样量为5μL,柱温为35℃.结果 羊胆水药材的薄层色谱斑点清晰,与对照药材羊胆粉主斑点一致;总固体含量范围0.0461～0.0760 g/mL;胆酸在0.4225～6.7600 g/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9995);专属性、精密度、稳定性均良好;平均加样回收率为98.58％,RSD为1.43％(n=9);10批羊胆水药材中胆酸含量范围为7.537～19.660 g/L.结论 该方法操作简单、准确、稳定、可靠,可为羊胆水的质量控制提供参考.

《中国药典》收载了猪胆粉、牛胆粉、蛇胆汁、羊胆、鹅胆粉、熊胆粉等药材.胆粉(汁)类药材在我国药用历史悠久,疗效明确.但其形态相似、多种药材缺乏专属性显微鉴别特征和化学特征,存在混伪风险,尤其是对正品中掺杂伪品的情况检出困难.控制胆粉类中药质量,保证临床疗效,解决胆粉类药材的真伪优劣鉴别问题是关键.STR分型技术是通过PCR扩增长度差异分型,比较鉴定生物个体的一种方法.该研究基于STR分型原理建立了一种简单快捷,可用于胆粉类药材及其掺杂样品的通用DNA指纹图谱鉴别方法,并收集猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、蛇、熊、鱼等原动物或胆粉样本,使用筛选获得的鉴别引物12S-L1091/12S-H1478和16S-L3428/16S-H3667扩增并进行STR分型获得DNA指纹图谱.结果 各物种的STR指纹图谱不同,可进行物种鉴别,且DNA指纹图谱上能同时反映正品和伪品的信息,可鉴别正伪掺杂品.因此,通过2个引物的结合,完成了胆粉类药材及其正伪掺杂品的鉴别.此外,该研究建立的DNA指纹图谱鉴别方法也可用于其他动物药材的真伪鉴别和掺杂品检出.

对牛胆和羊胆的相关质量标准进行梳理和分析,并对标准中存在的相关问题进行探讨.发现牛胆和羊胆的相关药材物理形态较混乱,其质量标准所采用的技术方法普遍较为落后,此外主要还存在部分药材标准还存在缺少必要检验项目的问题,这些问题在羊胆相关药材标准中尤其明显.这些问题对牛胆和羊胆的相关药材质量评价和控制十分不利.建议从药材实际合理的使用情况出发,明确其物理形态及制备方法,完善质量标准应有的检验项目,并依托目前主流分析技术对质量标准的技术方法进行改进和提高.

目的:对羊胆中的胆汁酸类成分进行考察,并对其中的主要胆汁酸进行测定,最后对研究结果进行深入讨论.方法:首先对收集到的来源确切的羊胆样品进行冷冻干燥处理,以确保干燥粉末与新鲜胆汁成分的一致性.然后使用TLC法,分别采用异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(10∶5∶5∶3∶0.8)和异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(6∶5∶5∶3∶1)为展开剂,使用10％硫酸乙醇溶液显色,明确羊胆中的胆汁酸成分,根据斑点的深浅对胆汁酸含量进行初步的判断;再使用Agilent SB-C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),10 mmol·L-1乙酸铵水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测,对羊胆中2个含量最高的胆汁酸类成分牛磺胆酸和牛磺去氧胆酸进行了含量测定研究.结果:本研究明确了羊胆中含有胆酸、甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸、甘氨鹅去氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸和牛磺石胆酸,其中以牛磺胆酸和牛磺去氧胆酸含量为最高.测得10批羊胆样品的牛磺胆酸和牛磺去氧胆酸的平均含量分别为47.5％和8.8％,这2个成分的总含量平均为56.3％,牛磺胆酸含量与牛磺去氧胆酸含量的平均比值为5.4.结论:本研究所建立的TLC方法不仅可用于羊胆的研究,同样适合用作其他胆汁类药材的鉴别或胆汁酸类成分的确定研究,而定量的HPLC-ELSD法也可以简便、快速、准确且经济地用作羊胆的含量测定工作.

熊胆入药历史悠久,临床用途广泛,疗效卓著,在治疗肝胆系统疾病、心脑血管系统疾病等方面具有良好的药效活性.传统熊胆为"猎熊取胆",按产地分为东胆和南胆,按胆仁性状分为金胆、铁胆、菜花胆、油胆.随着引流熊胆技术的发展,引流熊胆粉进入市场,临床替代传统熊胆使用.现在采用化学复配、生物转化方式得到人工熊胆粉是医药研究的热点,不仅可解决熊胆资源紧缺的问题,也可为保护濒危动物做出贡献.熊胆质量问题较多,市场常有羊胆、牛胆、猪胆、鸡胆掺伪冒充.熊胆资源稀缺,相关研究文献较为分散,缺乏系统的分析与整理.该文围绕熊胆发展研究概况,在厘清传统熊胆的来源和分级的基础上,梳理传统熊胆的采收、炮制加工、鉴别及使用方法并进行总结,比较熊胆的质量标准,总结熊胆粉的技术发展历程,对熊胆粉的现代研究及临床应用进行展望.该文对熊胆资源整理、熊胆临床应用、熊胆类药物研制及人工熊胆粉相关研究具有一定的参考价值.

目的 旨在对牛胆和羊胆药材进行薄层色谱(thin-layer chromatography,TLC)特征性鉴别研究.方法 使用异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(6:5:5:3:1)为展开剂,10％ 硫酸乙醇溶液为显色剂,105℃加热至斑点清晰,366 nm下检识并拍照储存.对样品的TLC彩色图像RGB多通道数据进行提取,并应用层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)以及正交偏最小二乘判别分析(orthogonal projections to latent structures-discrimination analysis,OPLS-DA)对数据进行分析.结果 各通道数据以B通道数据最具有差异特征性,而甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸以及第4个斑点为最具特征性的色谱斑点.结论 相较于传统TLC鉴别方法,所建立的分析方法简便、灵敏准确,可以为其他TLC鉴别研究提供参考.

目的 采用UPLC-MS/MS技术对羊胆中胆汁酸成分进行快速鉴定.方法 采用Thermo HYPERSIL GOLD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9 μm),以含 0.1％甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为 0.2 ml/min,柱温为40℃;采用电喷雾离子源,在负离子模式下对样品进行全扫描及二级质谱扫描.结果 共鉴定出 15 种胆汁酸成分,四种游离型胆汁酸均为首次在羊胆中检出.结论 本研究所建方法具有高效、灵敏的特点,能够快速实现对羊胆中胆汁酸成分的鉴定,可为深入阐明其药效物质提供理论依据.