目的 研究大黄橐吾化学成分及其抗炎活性.方法 大黄橐吾乙醇提取物采用高效液相色谱、凝胶柱色谱、硅胶柱色谱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.利用CCK-8法、Griess法测定化合物的体外抗炎活性.结果 从中分离得到18个化合物,分别鉴定为14-acetoxy-7β-senecioyloxy-1-(2-methylbutyryloxy)-notonipetranone(1)、rel-(1R,3 αS,5R,6S,7R,7αS)-1-[(1S)-1-(acetyloxy)ethyl]octahydro-6-[(2-methylbutanoyl)oxy]-4-methylidene-2-oxo-7-(propan-2-yl)-1H-inden-5-yl(2E)-3-methylpent-2-enoate(2)、款冬酮(3)、petasipaline B(4)、8α-hydroxy-4(15),11-eudesmadiene(5)、羽扇烯酮(6)、羽扇豆醇(7)、(3β)-lup-20(29)-en-3-yl stearate(8)、松脂醇单葡萄糖苷(9)、isoeucommin A(10)、isoline(11)、尿苷(12)、三十四烷醇(13)、棕榈酸(14)、tridec-1-ene(15)、cis-octadec-9-enoic acid(16)、甲基-α-D-呋喃果糖苷(17)、β-谷甾醇(18).化合物1～6、9～11、14对脂多糖诱导的RAW264.7细胞生成NO有抑制活性.结论 化合物3～6、8～10、12～17为首次从该植物中分离得到.化合物1～6、9～11、14具有抗炎活性.

目的 探究羽扇豆醇-3β-琥珀酸酯对HepG2 细胞凋亡的作用及机制.方法 采用0、2.5、5、10、20、40、80 μmol/L的羽扇豆醇-3β-琥珀酸酯作用于HepG2 细胞 24、48、72 h,采用CCK-8 法检测各组细胞的增殖活性.采用 0、4、8、16 μmol/L的羽扇豆醇-3β-琥珀酸酯作用于HepG2 细胞 48 h后,AO/EB染色法和Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞的凋亡率;JC-1 染色法观察HepG2 细胞的线粒体膜电位变化;DCFH-DA染色法观察细胞的活性氧(ROS)水平.Western blotting法检测各组细胞线粒体凋亡途径相关蛋白表达变化.结果 羽扇豆醇-3β-琥珀酸酯呈时间和浓度相关性地抑制 HepG2 细胞增殖(P＜0.01).与对照组相比,羽扇豆醇-3β-琥珀酸酯组细胞的ROS水平、总凋亡率、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、细胞色素C、裂解半胱氨酸蛋白酶 9(cleaved-Caspase-9)、cleaved Caspase-3 蛋白水平呈浓度相关性升高(P＜0.01、0.001);线粒体的膜电位、Bcl-2 蛋白表达则显著降低(P＜0.01).结论 羽扇豆醇-3β-琥珀酸酯可能通过调控线粒体凋亡途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,进而发挥抗肝癌作用.

为解析兔儿伞羽扇豆醇生物合成途径,探究其关键酶基因,研究运用DNBSEQ测序平台对兔儿伞的叶、茎、根及根茎进行转录组测序,从头组装后获得了 191541条Unigenes.KEGG代谢通路分析表明有961条Unigenes涉及兔儿伞羽扇豆醇生物合成途径,其中,395条Unigenes编码羽扇豆醇生物合成途径的17个关键酶.根与其他各组织比较,24条共有差异表达基因涉及羽扇豆醇生物合成途径,编码了法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPPS)、角鲨烯合成酶(squalene synthase,SS)、角鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)等关键酶.对关键酶FPPS、SS和SE进行结构分析,发现它们均具有保守的催化结构域和底物结合结构域.研究丰富了兔儿伞植物的功能基因数据库,为进一步研究羽扇豆醇生物合成途径及其关键酶基因的功能和调控机制奠定了基础.

目的:研究鹅不食草化学的成分及其抗炎活性.方法:采用柱色谱和制备液相色谱等方法对鹅不食草的80%乙醇提取物进行分离纯化,结合NMR、MS等现代波谱技术对化合物进行结构鉴定;通过检测化合物对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)释放炎症介质NO评价其抗炎活性.结果:从鹅不食草中共分离鉴定了22 个化合物,分别为:蒲公英甾醇醋酸酯(1)、角鲨烯(2)、羽扇烯酮(3)、蒲公英甾醇(4)、无羁萜(5)、蒲公英甾酮(6)、伪蒲公英甾醇醋酸酯(7)、lupeol acetate(8)、β-谷甾醇(9)、9-羟基百里酚(10)、8-hydroxy-9-isobutyryloxy-10(2)-methylbutyryloxythymol(11)、8,10-dihydroxy-9-isobutyryloxythymol(12)、E-pcoumaryl-alcohol ethyl ether(13)、2-hydroxy-4-methy-lbenzoic acid(14)、3-deuteriomethyl-5-methyl-2,3-dihydrobenzofyran(15)、间苯二甲醚(16)、香草酸(17)、eth-yl-2-(3,4-dihydroxyphenyl)acetate(18)、5-羟基-6,8-二甲氧基香豆素(19)、吲唑(20)、糙叶败酱碱(21)、5-(hydroxy-methyl)-2,4,4-trimethyl-2-cyclohexen-1-one(22).结论:其中,化合物 2、3、5、6、13～22 为首次从石胡荽属植物中分离得到,化合物 10～15、17、19～22 表现出较强的抗炎活性.

目的:研究圆果算盘子Glochidion sphaerogynum(Muell.Arg.)Kurz的化学成分及细胞增殖活性.方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶、制备液相等多种色谱技术进行化合物的分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.采用 CCK-8 试剂盒检测 11 个化合物对巨噬细胞RAW264.7 的增殖作用.结果:从圆果算盘子 95%乙醇提取物中分离得到 17 个化合物,分别鉴定为:羽扇豆酮(1)、羽扇豆醇(2)、算盘子酮(3)、β-谷甾醇(4)、5,7-二羟基色原酮(5)、羽扇豆-1β,3β-二醇(6)、柚皮素(7)、二氢山柰酚(8)、圣草酚(9)、山柰酚(10)、槲皮素(11)、木犀草素(12)、儿茶素(13)、evofolin B(14)、丁香脂素(15)、正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷(16)、花旗松素(17).其中,11 个化合物均可明显促进巨噬细胞RAW264.7 的增殖(P<0.05 或P<0.01).结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到.化合物 2、7、10 促进巨噬细胞RAW264.7 的增殖效果最明显.

利用酵母提取物(yeast extract,YE)作为模拟生物胁迫的诱导子,诱导花楸悬浮细胞(Sorbus pohuashanensis suspension cell,SPSC)产生生物胁迫作用,对胁迫下产生的三萜类次生代谢产物进行分离鉴定.采用正相硅胶、葡聚糖凝胶、中压制备液相等色谱技术对SPSC甲醇提取物进行分离纯化,并运用波谱分析技术鉴定出 26 个三萜类化合物,包括 15 个乌苏烷三萜(1～15),2 个 18,19-裂环乌苏烷三萜(16～17),4 个羽扇豆烷三萜(18～21),2 个环阿屯烷三萜(22～23),以及 3 个鲨烯型三萜(24～26).所有三萜均为首次从YE诱导SPSC中分离得到,其中化合物 22-O-acetyltripterygic acid A(1)为新化合物.对分离得到的化合物进行抗真菌、抗肿瘤和抗炎活性评估,结果表明化合物 1 对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7 释放一氧化氮(NO)具有一定的抑制作用.

目的 研究金缕半枫荷茎枝乙酸乙酯提取部位的化学成分.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱、高效液相色谱(HPLC)、高效液相制备色谱等将乙酸乙酯部位进行分离和纯化,波谱法鉴定化合物结构.对半枫荷总提、各提取部位和分离得到的14个化合物进行抗氧化活性测试.结果 鉴定出14个化合物,分别为:肉豆蔻酸(1)、硬脂酸(2)、芝麻素(3)、9-十八碳烯酸(4)、亚油酸(5)、邻苯二甲酸二丁酯(6)、豆甾醇(7)、β-谷甾醇(8)、羽扇豆醇(9)、齐墩果酸(10)、lup-20(29)-ene-3-[3-keto-hexadecanoate](11)、防葵素(12)、C-藜芦酰乙二醇(13)、2,3-二羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮(14).结论 首次通过分离手段从该植物的茎枝中得到11个化合物,分别为1、3-7、9、11-14,并且体外抗氧化实验表明半枫荷乙酸乙酯部位、分离纯化得到的化合物13和14抗氧化活性较强.

目的 研究刺槐Robinia pseudoacacia L.根的化学成分.方法 刺槐根95％乙醇提取物采用凝胶、硅胶、聚酰胺进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离到15个化合物,分别鉴定为齐墩果烷-12-烯-3β-醇硬脂酸酯(1)、羽扇豆烷-20(29)-烯-3β-醇硬脂酸酯(2)、羽扇豆醇乙酸酯(3)、β-香树脂酮(4)、羽扇豆酮(5)、β-谷甾醇(6)、豆甾醇(7)、3-羟基-9-甲氧基紫檀烷(8)、异甘草素(9)、甘草素(10)、1H-吲哚-3-甲醛(11)、吲哚唑(12)、D-天冬氨酸(13)、蔗糖(14)、conicamin(15).结论 化合物1～5、8～9、11～12、15为首次从该植物中分离得到.

目的 观察羽扇豆醇(Lupeol)对人胰腺癌细胞化疗敏感性的影响.方法 胰腺癌增殖细胞核抗原(PCNA)-1细胞以15 μmol/L Lupeol处理24h后,噻唑蓝(MTT)比色法测其对5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理24 h后的敏感性变化;经Lupeol联合5-Fu(12.5 mg/L)处理后的形态学观察进一步验证MTT结果;流式细胞术测Lupeol联合5-Fu对细胞凋亡的影响;Transwell法测Lupeol联合5-Fu对细胞侵袭的影响,Western blot及聚合酶链反应(PCR)法测经15 μmol/L Lupeol处理24 h后相关蛋白及mRNA的变化.结果 Lupeol预处理可明显增强5-Fu对PCNA-1细胞的增殖抑制作用,其半数抑制浓度(IC5o)由(14.05±2.03) mg/L降至(8.58±1.37) mg/L(t =14.355,P=0.005);且可增强5-Fu对PCNA-1细胞的凋亡诱导[凋亡率由(39.82 ±4.04)％升至(60.43±4.71)％;P=0.000]及侵袭抑制作用;Lupeol可明显降低P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达及蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平.结论 Lupeol可通过下调P-gp、MRP及p-Akt的活性,增强PCNA-1细胞对5-Fu的敏感性,其与化疗药物联用可能有助于提高抗肿瘤的治疗效果.

目的 建立HPLC法测定3～7月采收的香蕉、野蕉、皇帝蕉果皮中羽扇豆酮的含有量.方法 样品甲醇提取液的分析采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-甲醇(1∶1);检测波长206 nm;体积流量1 mL/min;柱温25℃.结果 羽扇豆酮在67.0～ 599.6 μg/mL范围具有良好的线性关系(r=0.999 0),平均加样回收率98.57％,RSD 1.12％.3种果皮中该成分含有量有显著差异,依次为野蕉果皮＞香蕉果皮＞皇帝蕉果皮.不同采收期对香蕉果皮中其含有量也有明显影响,以4～7月较高,3月最低.结论 建议以野蕉果皮或采收期在4～7月的香蕉果皮为羽扇豆酮主要来源.