目的 优化包载丁香苦苷和羟基酪醇的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-乙醇酸(mPEG-PLGA)纳米粒处方与制备工艺.方法 沉淀法制备纳米粒后,以水相与有机相比例、药物用量、表面活性剂(Pluronic F-68)浓度为影响因素,总包封率和总载药量为评价指标,星点设计-效应面法优化处方与制备工艺.结果 所得纳米粒溶液呈淡蓝色乳光,最佳条件为水相与有机相比例2.1∶1,药物用量14.1 mg,Pluronic F-68浓度0.1％,平均总包封率(32.38±1.21)％,总载药量(12.01 ±0.32)％,平均粒径(69.03±1.89) nm,Zeta电位(-25.2 ±+0.99)mV.结论 该方法稳定可靠,可用于优化包载丁香苦苷和羟基酪醇的mPEG-PLGA纳米粒处方与制备工艺.

目的:以聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-PLA)嵌段共聚物为载体材料制备塞来昔布载药胶束并评价其药剂学性质.方法:采用薄膜分散法制备塞来昔布载药胶束,采用单因素试验法初步筛选塞来昔布载药胶束的处方和制备工艺,并采用Box-Behnken效应面法进一步优化.评价了载药胶束的微观形态、粒径分布、Zeta电位等理化性质,并采用动态膜透析法考察载药胶束的体外释药情况.结果:透射电镜显示塞来昔布载药胶束粒径均一,成球状分布,平均粒径为(35.6±15.1)nm,多聚分散系数(PdI)为(0.152±0.05),Zeta电位为(-24.6±2.9)mV;塞来昔布载药胶束在0.5％十二烷基硫酸钠(SDS)磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中24 h累积释放81.5％.结论:采用Box-Behnken效应面法优化塞来昔布载药胶束处方与制备工艺是简单、可行的.

目的:制备共载双硫仑(DSF)与阿霉素(DOX)纳米胶束,评价其体外理化性质以及逆转乳腺癌细胞对DOX耐药的效果.方法:以聚乙二醇单甲醚-聚乳酸共聚羟基乙酸-聚谷氨酸(mPEG-PLGA-PGA)为材料,以透析法制备双载药纳米胶束(DSFDOX-NPs),以动态光散射激光粒度测定仪(DLS)、透射电镜(TEM)对其理化性质进行表征,HPLC测量载药量和包封率,动态透析法测定药物体外释放行为,MTT以及激光共聚焦显微镜评价其逆转人乳腺癌MCF-7/ADR细胞对DOX耐药的效果.结果:DLS测定DSFDOX-NPs平均粒径为(107.5± 0.2)nm,Zeta电位为(-13.7±0.1)mV;TEM显示为球形颗粒,粒径大小为95 nm;HPLC测定DSF载药量为1.91%,包封率为80.30%,DOX载药量为2.28%,包封率为96.2%;体外释放表明DSFDOX-NPs对2种药物均有明显的缓释作用,呈现DSF先快释放、DOX后慢释放的"级联式"释放模式;体外细胞实验表明DSFDOX-NPs能显著地增加DOX在耐药细胞中的浓度,相比DOX溶液剂具有更高的细胞毒性.结论:DSFDOX-NPs有效地装载了2种药物,其粒径小于100 nm,分布均匀,体外缓慢释放药物,并且逆转了DOX耐药肿瘤细胞的耐药效果.

目的 研究不同疏水结构的两亲性聚合物单甲醚聚己二醇-聚己内酯聚合物(mPEG-PCL)、单甲醚聚乙二醇-聚D,L-乳酸聚合物(mPEG-PDLLA)、单甲醚聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)聚合物(mPEG-PLGA)对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)外排功能的影响.方法 采用薄膜分散法制备聚合物胶束,动态光散射仪测定胶束粒径,芘荧光探针法测定临界胶束浓度(CMC);以P-gp特异性底物罗丹明123(Rhodamine 123,R123)为荧光探针,采用摄取和外排实验评价聚合物及其形成的胶束对MDCK-MDR1细胞P-gp功能的影响.结果 mPEG-PCL、mPEG-PDLLA、mPEG-PLGA的粒径分别为(55.9±0.2)、(53.7±1.1)和(61.6±0.6) nm;CMC值分别为2.08、5.42和26.4 μg·mL-1;摄取实验结果显示,当mPEG-PCL质量浓度在250μg·mL-1、mPEG-PDLLA在1～ 25μg·mL-1、mPEG-PLGA在1～25 μg· mL-1时,可显著增加细胞内R123累积量,表明三者对P-gp外排功能均有抑制作用;外排实验中mPEG-PCL、mPEG-PDLLA、mPEG-PLGA分别在CMC以上、CMC附近及以下、CMC以下时会显著降低R123外排率,与摄取实验结果相对应.结论 mPEG-PCL、mPEG-PDLLA、mPEG-PLGA聚合物对P-gp外排活性均有一定的抑制作用,其作用程度与疏水段结构、聚合物浓度及存在状态有关.

目的 以聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-PLA)嵌段共聚物为载体材料制备塞来昔布载药胶束,并考察其在大鼠体内药动学情况.方法 采用薄膜分散法制备塞来昔布载药胶束,评价载药胶束的微观形态、粒径分布、Zeta电位等理化性质;采用动态膜透析法考察塞来昔布乙醇溶液和载药胶束的体外释药情况;考察塞来昔布乙醇溶液和塞来昔布载药胶束经尾静脉注射后在大鼠体内药动学情况.结果 透射电镜显示塞来昔布载药胶束粒径均一,成球状或类球状分布,平均粒径为(35.6±15.1) nm,PdI为0.152±0.05,Zeta电位为(-24.6±2.9)mV;塞来昔布载药胶束在0.5％ SDS磷酸盐缓冲液中24 h累积释放81.5％;塞来昔布乙醇溶液和塞来昔布载药胶束在大鼠体内的t1/2分别为(4.41±0.41)h和(6.38±0.81)h,AUC分别为(86.17±4.08)和(142.21±7.82) mg·(L·h)-1.结论 塞来昔布载药胶束与塞来昔布乙醇溶液相比,延长了药物在大鼠体内的滞留时间,有望提高药物治疗效果.

为提高多西紫杉醇(DTX)的水溶性及靶向性,降低不良反应,采用pH敏感聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-聚-β-氨基酯(polyethyleneglycol methoxy-polylactide-poly-β-aminoester,PBAE)和非pH敏感聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(polyethyleneglycol methoxy-polylactide,PELA)2种聚合物材料,分别包载多西紫杉醇制成纳米胶束(PBAE-DTX,PELA-DTX),对胶束进行理化性质表征并研究其对小鼠Lewis肺癌细胞的活性作用.粒度测定结果显示空白及载药胶束粒径相近,均在10～ 100 nm;PBAE胶束在弱酸性条件下粒径发生变化,pH响应性较好;制备的2种载药胶束中DTX的包封率分别为(93.8±1.70)％,(87.2±4.10)％,载药量分别为(5.3±0.10)％,(4.9±0.05)％;MTT检测载药胶束对Lewis肺癌细胞的增殖均有明显的抑制作用,pH敏感的PBAE-DTX表现出更好的细胞毒性活性;流式细胞仪检测结果显示,给药48 h后DTX,PELA-DTX,PBAE-DTX3组的凋亡细胞率分别为(20.72±1.47)％,(29.71±2.38)％,(40.91±1.90)％ (P＜0.05),表明不同多西紫杉醇制剂均能促进Lewis细胞的凋亡,PBAE-DTX的促凋亡作用更强.pH敏感性的PBAE-DTX载药胶束制备简单,稳定性好,能显著抑制Lewis肺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.

目的 合成聚乙二醇-聚乳酸-聚组氨酸-聚乙烯亚胺(methoxy-poly(ethylene glycol)-polylactide-polyhistidine-ss-polyethylenimine,mPEG-PLA-PHis-ss-PEI)阳离子聚合物并制备siRNA胶束复合物,考察其体外制剂学性质.方法 以聚乙二醇单甲醚、D,L-丙交酯、聚组氨酸和聚乙烯亚胺为起始原料,合成聚乙二醇-聚乳酸-聚组氨酸-聚乙烯亚胺,并应用核磁共振氢谱和凝胶渗透色谱进行表征;采用薄膜分散法制备mPEG-PLA-PHis-ss-PEI/siRNA胶束复合物(micelleplexes);动态激光散射法测定胶束复合物的粒径和Zeta电位值;透射电镜观察胶束复合物的形态;超速离心法测定胶束复合物中,小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)的包封率;琼脂糖凝胶电泳阻滞法分别考察阳离子聚合物抵御阴离子置换能力、血清稳定性和胶束复合物在弱酸性和还原性条件下siRNA的触发释放行为.结果 所制备的胶束复合物呈类球形,大小均一,分布均匀;当氮磷比(nitrogen/phosphoruse molar ratio,N/P)为20时,胶束复合物平均粒径为104.0 nm,Zeta电位值为30.1 mV,siRNA的包封率为(92.9±2.4)％;凝胶电泳阻滞实验结果显示,当N/P大于7时,胶束复合物具有良好的阴离子抵御能力及较强的血清稳定性;胶束复合物在较低N/P条件下具有pH敏感和还原敏感性.结论 所制备的胶束复合物稳定性较好,可用于递送siRNA.

抗肿瘤药物的非特异性释药是化疗药物对正常组织产生毒副作用的主要原因.利用纳米技术实现抗肿瘤药物的特异性与响应性递药是提高药物治疗效果、减少毒副反应的重要途径之一.本研究合成了pH敏感聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-聚-β-氨基酯[poly(methoxy-ethylene glycol)-poly(lactic acid)-poly-(β-amino ester),PBAE]三嵌段共聚物,并制备胶束负载多西紫杉醇(DTX),以提高DTX抗肿瘤活性.通过开环聚合及Michael加成合成共聚物,核磁共振波谱法表征其结构和分子量,酸碱滴定法测定碱解离常数(pKb),荧光法测定临界胶束浓度(CMC).采用薄膜水化法制备载DTX纳米胶束,激光粒度仪测定粒径和分布及稳定性,HPLC测定载药量、包封率及累积药物释放量.载药胶束粒径为10～100 nm,粒径分布较窄;制备的2种载药胶束PBAE1-DTX和PBAE2-DTX中DTX的载药量分别为(5.3±0.10)％和(4.9±0.05)％,包封率分别为(93.8±1.70)％和(87.2±4.10)％.建立小鼠Lewis肺癌模型,利用尾静脉注射给药方式分别考察游离药物(DTX)、非pH敏感载药胶束聚乙二醇-聚乳酸-DTX (PELA-DTX)和pH敏感载药胶束(PBAE1-DTX)的抑瘤效果.所有动物实验均符合动物伦理学标准,并获得中国中医科学院中药研究所动物伦理委员会批准(批准号2017090110).体内抑瘤实验表明,在给药剂量为10和20 mg·kg-时,纳米药物对小鼠肺腺癌移植瘤均显示出较好的抗肿瘤活性.比较各组小鼠肿瘤体积增长速率:PBAE1-DTX 20 mg·kg-1＜PBAE 1-DTX10 mg·kg-1＜ PELA-DTX 10 mg·kg-1＜DTX 10 mg·kg-1＜生理盐水,其中PBAE1-DTX组的疗效更为显著.本研究制备的pH敏感DTX纳米胶束值得进一步研究,以促进DTX在抗肿瘤领域的应用.

目的 以pH敏感聚组氨酸-聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸-聚组氨酸嵌段共聚物(polyhistidine-b-poly(dl-lactide-co-glycolide-b-ethylene glycol-b-dl-lactide-co-glycolide)-b-polyhistidine,HPPPH)和单甲醚聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸嵌段共聚物(methoxy-poly(ethylene glycol)-poly (dl-lactide),MPP)为载体,制备pH敏感复合胶束,研究其理化性质和大鼠体内药物动力学.方法 采用酸碱滴定法、芘荧光探针法、透析法、LC-MS/MS等方法研究复合胶束的体内外性质.结果 HPPPH与MPP质量比为8∶2时制备的复合胶束稳定性较好,载阿霉素pH敏感复合胶束为壳核结构,平均粒径为89.0 nm,体外释放具有明显的pH敏感性和缓释效果;大鼠药物动力学结果表明,复合胶束可显著延长其在血液中的循环时间.结论 与单一HPPPH胶束相比,复合胶束显著提高胶束稳定性,pH敏感复合胶束作为抗肿瘤药物递送系统具有广阔的应用前景.

目的 制备柚皮素-[聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-PLA)]聚合物胶束,并考察其体内药动学.方法 采用溶剂挥发法制备聚合物胶束,测定其包封率、载药量、粒径、PDI、Zeta电位、体外释药.大鼠分别灌胃给予柚皮素及其聚合物胶束的0.5％CMC-Na 溶液(20 mg/kg),于0、0.25、0.5、1、2、2.5、3、4、5、6、8、10、12h 采血,HPLC法测定柚皮素血药浓度,计算主要药动学参数.结果 最佳条件为柚皮素用量25 mg,mPEG-PLA用量150 mg,有机溶剂体积3 mL,水相体积20 mL,旋蒸温度30℃,旋蒸时间3.5 h,所得聚合物胶束平均包封率为86.76％,载药量为12.71％,粒径为68.27 nm,PDI为0.181,Zeta电位为-18.6 mV,48 h内累积溶出度为71.05％.与原料药比较,聚合物胶束tmax、t1/2延长(P＜0.01),Cmax、AUC0～t、AUC0～∞升高(P＜0.01),相对生物利用度提高至4.38倍.结论 mPEG-PLA聚合物胶束可有效促进柚皮素口服吸收.